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1、分子生物學期末考試試題一、名詞解釋 1、反式作用因子:能直接或間接地識別或結(jié)合各類順式作用元件核心序列,參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的蛋白質(zhì)。2、基因家族:在基因進化過程中一個基因通過基因重復產(chǎn)生兩個或更多的拷貝,這些基因構(gòu)成一個基因家族,是具有顯著性的一組基因,編碼相似的蛋白質(zhì)的產(chǎn)物。 3、C值矛盾:C值是指真核生物單倍體的DNA含量,一般的,真核生物的進化程度越高,C值越大,但在一些兩棲類生物中,其C值卻比哺乳動物大的現(xiàn)象。原因是它含有大量的重復序列,而且功能DNA序列大多被不編碼蛋白質(zhì)的非功能DNA所隔開。4、反式作用因子:是能直接或間接的識別或結(jié)合在各類順式作用元件核心序列上,參與調(diào)控靶基因
2、轉(zhuǎn)錄效率的蛋白質(zhì)5、核型: 指一個物種所特有的染色體數(shù)目和每一條染色體所特有的形態(tài)特征。6、RNA editing:轉(zhuǎn)錄后的RNA在編碼區(qū)發(fā)生堿基的突變、加入或丟失等現(xiàn)象。7、分子伴侶(molecular chaperone)是一類序列上沒有相關(guān)性擔憂共同功能的保守性蛋白質(zhì),它們在細胞內(nèi)能幫助其他多肽進行正確的折疊、組裝、運轉(zhuǎn)和降解7、8、增強子:是指能使與它連鎖的基因轉(zhuǎn)錄頻率明顯增加的DNA序列。二、判斷: 1、真核生物所有的mRNA都有polyA結(jié)構(gòu)。 ( X )組蛋白的mRNA沒有2、由于密碼子存在搖擺性,使得一種tRNA分子常常能夠識別一種以上同一種氨基酸的密碼子。 ( )3、大腸桿菌
3、的連接酶以ATP作為能量來源。( X )以NAD作為能量來源4、tRNA只在蛋白質(zhì)合成中起作用。( X )tRNA還有其它的生物學功能,如可作為逆轉(zhuǎn)錄酶的引物5、DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反應(yīng)都需要引物。( X )RNA聚合酶的催化反應(yīng)不需要引物6、真核生物蛋白質(zhì)合成的起始氨基酸是甲酰甲硫氨酸 ( X )真核生物蛋白質(zhì)合成的起始氨基酸是甲硫氨酸7、質(zhì)粒不能在宿主細胞中獨立自主地進行復制 ( X )質(zhì)粒具有復制起始原點,能在宿主細胞中獨立自主地進行復制8、RNA因為不含有DNA基因組,所以根據(jù)分子遺傳的中心法則,它必須先進行反轉(zhuǎn)錄,才能復制和增殖。( X )不一定,有的RNA病毒可直接進行
4、RNA復制和翻譯9、細菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和因子組成。( X )細菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和因子組成10、核小體在復制時組蛋白八聚體以全保留的方式傳遞給子代。( )11、色氨酸操縱子中含有衰減子序列( )12、SOS框是所有din基因(SOS基因)的操縱子都含有的20bp的lexA結(jié)合位點。( )三、填空: 1、原核生物的啟動子的四個保守區(qū)域為 轉(zhuǎn)錄起始點 、 -10區(qū) 、 -35區(qū) 、 -10區(qū)與-35區(qū)的距離 。2、根據(jù)對DNA序列和蛋白質(zhì)因子的要求,可以把重組分為 同源重組 、 位點專一性重組/特異位點重組 、 轉(zhuǎn)座重組 、異常重組 四類。3、研究啟動子功能的主要方法是 啟動
5、子的突變 ,研究酶與啟動子間識別與結(jié)合的方法有 足跡法 和 堿基修飾法 。4、真核生物中反式作用因子的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域有 螺旋轉(zhuǎn)角螺旋(HTH) 、堿性螺旋-環(huán)-螺旋(bHLH) 、鋅指(zinc finger) 、 堿性亮氨酸拉鏈(bZIP)。5、根據(jù) DNA復性動力學,DNA序列可以分成哪四種類型? 單一序列 、輕度重復序列、 中度重復序列、 高度重復序列 四、 選擇題(10分,每題1分)1、在真核基因表達調(diào)控中,( B )調(diào)控元件能促進轉(zhuǎn)錄的速率。 A、衰減子 B、增強子 C、repressor D、TATA Box2、核基因mRNA、 的內(nèi)元拼接點序列為( D )。 A、AGGU B、
6、GAUG C、UGGA D、GUAG3、下列何種因子不會誘變DNA( D )A、亞硝酸 B、 UV C、丫啶橙 D、飽和脂肪乳劑4、RNA聚合酶1的功能是( C )A 轉(zhuǎn)錄tRNA和5sRNA基因; B轉(zhuǎn)錄蛋白質(zhì)基因和部分snRNA基因;C 只轉(zhuǎn)錄rRNA基因; D轉(zhuǎn)錄多種基因5、如果一段DNA產(chǎn)生了1的譯碼突變,可以加以校正的是( D ) A 突變型氨酰tRNA合成酶 B 有突變型反密碼子的tRNA C 有切割一個核苷酸的酶 D 有四個堿基長的反密碼子的tRNA 6、參與重組修復的酶系統(tǒng)中,具有交換DNA鏈活性的是( D ) A DNA聚合酶I B RecB蛋白 C RecC蛋白 D Rec
7、A蛋白7、原核RNA pol 識別的啟動子位于:( A )A、 轉(zhuǎn)錄起始點的上游; B、 轉(zhuǎn)錄起始點的下游;C、 轉(zhuǎn)錄終點的下游; D、 無一定位置;8、在研究原核翻譯過程中,可用不同的抑制劑研究翻譯諸階段,其中鏈霉素可抑制:( C )A、 起始 B、 延長 C、 肽基有P位移至A位 D、 核糖體移位9、在什么情況下,乳糖操縱子的轉(zhuǎn)錄活性最高( A ) A 高乳糖,低葡萄糖 B 高乳糖,高葡萄糖 C 低乳糖,低葡萄糖 D低乳糖,高葡萄糖10、設(shè)密碼子為5XYZ 3,反密碼子為5ABC 3,則處于擺動位置上的堿基為( C ) A X-C B Y-B C Z-A 五、簡答:8 6,什么是 Prib
8、now box?它的保守序列是什么? 答:pribnow box 是原核生物中中央大約位于轉(zhuǎn)錄起始位點上游 10bp 處的 TATA 區(qū),所以又稱作-10 區(qū)。它的保守序 列是 TATAAT。,6,原核生物DNA與真核生物有哪些不同的特征? 答:(1)DNA雙螺旋是由兩條互相平行的脫氧核苷酸長鏈盤繞而成的,多核苷酸的方向由核苷酸間的磷酸二酯鍵的走向決定,一條是5-3,另一條是3-5。(2)DNA雙螺旋中脫氧核糖和磷酸交替連接,排在外側(cè),構(gòu)成基本骨架,堿基排列在內(nèi)側(cè)(3)其兩條鏈上的堿基通過氫鍵相結(jié)合,形成堿基對 意義:該模型揭示了DNA作為遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性特征,最有價值的是確認了堿基配對原則,
9、這是DNA復制、轉(zhuǎn)錄和反轉(zhuǎn)錄的分子基礎(chǔ),亦是遺傳信息傳遞和表達的分子基礎(chǔ)。該模型的提出是20世紀生命科學的重大突破之一,它奠定了生物化學和分子生物學乃至整個生命科學飛速發(fā)展的基石,什么是SD序列?其功能是什么? 答:SD序列是指信使核糖核酸(mRNA)翻譯起點上游與原核16S 核糖體RNA或真核18S rRNA 3端富含嘧啶的7核苷酸序列互補的富含嘌呤的37個核苷酸序列(AGGAGG),是核糖體小亞基與mRNA結(jié)合并形成正確的前起始復合體的一段序列。功能:SD序列對mRNA的翻譯起重要作用。 1、 真核生物的原始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物需要經(jīng)過哪些加工才能成為成熟的mRNA?答:(1)、在5端加帽,5端的一個
10、核苷酸總是7-甲基鳥核苷三磷酸(m7Gppp)。(2)、3端加尾,多聚腺苷酸尾巴。準確切割 ,加poly(A)(3)、RNA的剪接,參與RNA剪接的物質(zhì):snRNA、snRNP(4)、RNA的編輯,編輯(editing)是指轉(zhuǎn)錄后的RNA在編碼區(qū)發(fā)生堿基的突變、加入或丟失等現(xiàn)象。(5.)、RNA的再編碼,mRNA有時可以改變原來的編碼信息,以不同的方式進行翻譯(6.)、RNA的化學修飾 ,人細胞內(nèi)rRNA分子上就存在106種甲基化和95種假尿嘧啶產(chǎn)物。簡述定量PCR的原理和過程。答:實時定量PCR反應(yīng)在帶透明蓋的塑料小管中進行,激發(fā)光可以直接頭孤傲管蓋,使其中的熒光探針被激發(fā)。一逛探針事先混合
11、在PCR反應(yīng)液中,只有與DNA 結(jié)合之后,才能被激發(fā)發(fā)出熒光。隨著新和成DNA片段的增加,結(jié)合到DNA上的熒光探針,即被激發(fā)產(chǎn)生的熒光增加。6反式作用因子的結(jié)構(gòu)特點及其對基因表達的調(diào)控答:反式作用因子是能直接或間接的識別或結(jié)合在各類順式作用元件核心序列上,參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的蛋白質(zhì)。這些因子有兩種獨立的活性: 特異地與DNA結(jié)合位點相結(jié)合,然后激活轉(zhuǎn)錄。兩種活性可以獨立分配給特定的蛋白結(jié)構(gòu)域,分別稱作DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域和激活結(jié)構(gòu)域,兩者是相分離的。它們在蛋白質(zhì)的不同區(qū)域。簡述原核生物和真核生物 mRNA 的區(qū)別。 答:1,原核生物 mRNA 常以多順反子的形式存在。真核生物 mRNA 一般以
12、單順反子的形式存在;2,原核生物 mRNA 的轉(zhuǎn)錄與翻譯一般是偶聯(lián)的,真核生物轉(zhuǎn)錄的 mRNA 前體則需經(jīng)轉(zhuǎn)錄后加工,加工為成熟的 mRNA 與蛋白質(zhì)結(jié)合生成 信息體后才開始工作;3,原核生物 mRNA 半壽期很短,一般為幾分鐘 ,最長只有數(shù)小時。真核生物 mRNA 的半壽期 較長, 如胚胎中的 mRNA 可達數(shù)日;4,原核與真核生物 mRNA 的結(jié)構(gòu)特點也不同,原核生物的 mRNA 的 5端無帽 子結(jié)構(gòu),3端沒有或只有較短的 poly A 結(jié)構(gòu)。 1.敘述由一段DNA序列形成多種蛋白產(chǎn)物的機制。答:由一段DNA形成多種蛋白產(chǎn)物的可能機制有:閱讀框不同、抗終止作用、可變剪切和RNA編輯。 重疊
13、基因在X174中最早發(fā)現(xiàn),兩個鄰近的基因以一種巧妙的方式發(fā)生重疊,轉(zhuǎn)錄出來的mRNA以不同的閱讀框閱讀并被表達,產(chǎn)生兩種以上的蛋白產(chǎn)物。在噬菌體中有不同時期表達的操縱子,如左向早期操縱子可以轉(zhuǎn)錄出兩種mRNA,這是由于依賴于因子的終止作用以及早期基因編碼的抗終止蛋白的抗終止作用造成的??菇K止蛋白與RNA聚合酶結(jié)合后修飾了酶的構(gòu)象,使其不再識別弱終止子,從而使一段DNA可以轉(zhuǎn)錄出多種mRNA,從而產(chǎn)生兩種以上的蛋白產(chǎn)物。 真核生物的hnRNA含有內(nèi)含子,通過剪接可將其出去形成Mrna,但有的高等真核細胞存在可變剪接,即來自一個基因的RNA,其某個內(nèi)含子的5供體在不同的條件下和不同內(nèi)含子的3受體進
14、行剪接,從而將來自一個基因的mRNA前體剪接產(chǎn)生多種mRNA,翻譯出不同的蛋白質(zhì)。另外,在真核生物中存在RNA編輯,將mRNA在轉(zhuǎn)錄后進行插入、缺失或核苷酸的替換,改變DNA 模板的遺傳信息,從而翻譯出氨基酸序列不同的多種蛋白質(zhì)。1、 各種二核苷酸對的排列順序不同,對雙螺旋結(jié)構(gòu)的影響不同。(1) 請問那種的Tm最低?答:的Tm值最低。(2) 含這種二核苷酸的序列有那些,為什么?(7分)答:含有A/T的主要有復制起始點、原核生物啟動子的-10區(qū)、真核生物啟動子的TATA框,此外,還有生物體選擇以UAA作為最有效的終止密碼子。 DNA在復制和轉(zhuǎn)錄時要在起始原點和啟動子區(qū)形成起始復合物,復制起始點、
15、原核生物啟動子的-10區(qū)、真核生物啟動子的TATA框富含AT對,二者之間有兩條氫鍵,在此處易于解開雙鏈,容易形成起始復合物,使復制和轉(zhuǎn)錄過程順利進行。生物體選擇以UAA作為最有效的終止密碼子,因為在64的密碼子中,假使UAA具有和它配對的反密碼子,所形成的產(chǎn)物在生理條件下也是不穩(wěn)定的,有利于肽鏈的釋放,而且UAA 很少發(fā)生無義抑制突變,有利于肽鏈的正常終止。真核生物和原核生物在翻譯的起始過程有哪些區(qū)別?原核生物真核生物起始氨基酸甲酰甲硫氨酸甲硫氨酸起始AA-tRNAfMet-tRNAi*fMetMet-tRNAi*Met起始復合物形成30S小亞基首先與mRNA模板相結(jié)合,再與fMet-tRNA
16、*fMet結(jié)合,最后與50S大亞基結(jié)合40s小亞基先與Met-tRNA*Met相結(jié)合,再與模板mRNA結(jié)合,最后與60S大亞基結(jié)合成80S。mRNA。Met-tRNA*Met起始復合物核糖體較小,70S較大80S起始因子較少較多mRNA無帽子結(jié)構(gòu)有帽子結(jié)構(gòu)和多聚A尾巴,都參與形成翻譯起始復合物21、 RNAi技術(shù)的基本原理。RNAi技術(shù)利用雙鏈小RNA高效、特異性降解細胞內(nèi)同源mRNA從而阻斷靶基因表達,使細胞出現(xiàn)靶基因缺失的表型。原理就是,短片段的雙鏈RNA在體內(nèi)能在酶(Dicer)及相關(guān)復合物(RISC)的作用下,變成單鏈分子,并與目標基因mRNA互補,在Dicer酶作用下,是mRNA發(fā)生剪切,轉(zhuǎn)錄受抑制或翻譯受到抑制,從而在轉(zhuǎn)錄水平或轉(zhuǎn)錄后水平干擾基因表達。22、操縱子:弱化子: 葡萄糖效應(yīng)(代謝物阻遏效應(yīng)、降解物抑制作用):安慰性誘導物:23、乳糖操縱子的調(diào)控模型。主要內(nèi)容: Z、
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