細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)

1、細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是高等教育出版社于 2011 年出版的一本書(shū)。作者是王崇英和高慶祥。該教科書(shū)首先介紹了對(duì)常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的理解，解剖儀器的使用，細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的繪制方法和要求以及特殊顯微鏡的原理和應(yīng)用。在此基礎(chǔ)上，學(xué)生將學(xué)習(xí)動(dòng)物細(xì)胞的基本形態(tài)學(xué)觀(guān)察和顯微測(cè)量，細(xì)胞顯微攝影以及細(xì)胞核和線(xiàn)粒體的分類(lèi)和分離。然后開(kāi)始研究細(xì)胞化學(xué)：核酸細(xì)胞化學(xué)，酶細(xì)胞化學(xué)，a 啶橙熒光染色，免疫細(xì)胞化學(xué)；重新研究細(xì)胞的生理活性：細(xì)胞生理活性的實(shí)驗(yàn)觀(guān)察和細(xì)胞分裂的形態(tài)學(xué)觀(guān)察；最后是綜合能力和創(chuàng)新能力的培養(yǎng)：細(xì)胞的原代培養(yǎng)，細(xì)胞的亞培養(yǎng)，培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)特性和形態(tài)分類(lèi)，培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)觀(guān)察和計(jì)數(shù)，細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)的測(cè)定，細(xì)胞分裂指數(shù)，

2、細(xì)胞融合，早熟染色體凝集（PCC）的誘導(dǎo)，觀(guān)察和分析，正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的常規(guī)核型的檢測(cè)和分析。1.什么是細(xì)胞培養(yǎng)？它是指從活體動(dòng)物中取出組織，將它們分散到單個(gè)細(xì)胞中（機(jī)械或酶消化），在體外模擬生理環(huán)境，并使其在人工培養(yǎng)條件下生長(zhǎng)，分裂和繁殖，抑制細(xì)胞接觸并老化。 。通常有兩種細(xì)胞，一種是原代細(xì)胞，另一種是繼代培養(yǎng)細(xì)胞。原代細(xì)胞是指這樣的過(guò)程，其中動(dòng)物組織被諸如胰酶或膠原酶的酶消化并分散以獲得單個(gè)細(xì)胞，然后這些單個(gè)細(xì)胞在培養(yǎng)容器中生長(zhǎng)。大多數(shù)組織可以制備原代細(xì)胞，但制備方法略有不同，制備細(xì)胞的生長(zhǎng)速度和難度也不同。不同的原代細(xì)胞具有不同的形態(tài)。通常，十代之內(nèi)的細(xì)胞稱(chēng)為原代細(xì)胞。傳代細(xì)胞通常指無(wú)

3、限期繁殖的細(xì)胞系。從理論上講，這些細(xì)胞可以無(wú)限期傳代。實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常使用這種細(xì)胞，例如 Hela，293，Vero 等。2.細(xì)胞生長(zhǎng)周期空閑期：從細(xì)胞接種到新培養(yǎng)容器中到附著之前的時(shí)間。此時(shí)間的長(zhǎng)短取決于細(xì)胞類(lèi)型，范圍從幾分鐘到幾小時(shí)不等。粘附期：細(xì)胞從自由狀態(tài)變化到粘附在培養(yǎng)皿表面并顯示出一定細(xì)胞形態(tài)的時(shí)期。潛伏期：細(xì)胞附著在壁上后，不會(huì)立即增殖，但會(huì)儲(chǔ)存必要的物質(zhì)和能量進(jìn)行增殖。這個(gè)時(shí)間稱(chēng)為等待時(shí)間。對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期：完成材料和能量存儲(chǔ)后，細(xì)胞開(kāi)始大量增殖的時(shí)期。在此期間，細(xì)胞充滿(mǎn)活力且穩(wěn)定，我們的大部分實(shí)驗(yàn)都在此期間進(jìn)行。停藥期：隨著細(xì)胞的生長(zhǎng)，細(xì)胞密度在增加。由于營(yíng)養(yǎng)的消耗和細(xì)胞間接觸的抑制，細(xì)

4、胞的生長(zhǎng)緩慢甚至停止。這時(shí)，我們將使細(xì)胞通過(guò)，以便細(xì)胞可以繼續(xù)增殖并保持旺盛的生命力。3.細(xì)胞生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)條件細(xì)胞培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)通常來(lái)自基本培養(yǎng)基（例如 DMEM 培養(yǎng)基）和血清?；九囵B(yǎng)基：主要提供氨基酸（蛋白質(zhì)的基本單位），維生素（細(xì)胞代謝中的輔酶成分），無(wú)機(jī)離子（K +，N a +等），碳水化合物（碳源和能源）等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)激素。血清：主要提供基本培養(yǎng)基無(wú)法提供的某些生長(zhǎng)因子和低分子營(yíng)養(yǎng)素，此外還可以促進(jìn)細(xì)胞黏附并中和有害的重金屬離子。如果僅提供不含血清的基本培養(yǎng)基，則大多數(shù)細(xì)胞將無(wú)法生長(zhǎng)。血清對(duì)我們實(shí)驗(yàn)的重要性是不言而喻的，那么合格的血清是哪種血清？合格的血清需要通過(guò)各種測(cè)試，包括無(wú)細(xì)菌，無(wú)真菌，無(wú)支原體和無(wú)病毒污染。血清通常為淡黃色透明液體，由于含有大量蛋白質(zhì)和其他成分，因此略帶粘性。以全金公司的 Tra