高中生物專題微生物的培養(yǎng)與應用單元綜合練習含選修講義

1、微生物的培養(yǎng)與應用一、選擇題1在做分離分解尿素的細菌實驗時，A同學從對應106培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學只選擇出大約50個菌落產生A同學結果的原因可能有（ ）土樣不同 培養(yǎng)基污染 操作失誤 沒有設置對照A B C D2在農田土壤的表層自生固氮菌較多用表層土制成的稀泥漿接種到特制的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可將自生固氮菌與其他細菌分開，對培養(yǎng)基的要求是（ ）加抗生素 不加抗生素 加氮素 不加氮素 加葡萄糖 不加葡萄糖 37恒溫箱中培養(yǎng) 2830恒溫箱中培養(yǎng)A B C D3稀釋涂布平板法是微生物培養(yǎng)中的一種常用的接種方法下列相關敘述錯誤的是（ ）A操作中需要將菌液進行一系列的濃度梯度稀釋B需將

2、不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基表面C不同濃度的菌液均可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落D操作過程中對培養(yǎng)基和涂布器等均需進行嚴格滅菌處理4有關倒平板的操作錯誤的是（ ）A將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上B使打開的錐形瓶瓶口迅速通過火焰C將培養(yǎng)皿打開，培養(yǎng)皿蓋倒放在桌子上D等待平板冷卻凝固后需要倒過來放置5在纖維素分解菌的鑒定實驗中，纖維素酶的測定方法一般是A對纖維素進行定量測定B對纖維素酶分解纖維素后所產生的葡萄糖進行定量測定C對纖維素酶分解纖維素后所產生的纖維二糖進行定量測定D對纖維素分解菌進行定量測定6剛果紅染色時，加入剛果紅應在制備培養(yǎng)基時 梯度稀釋時 倒平板時 涂布時 長出菌落時A

3、B C D7通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌；在培養(yǎng)基中加入10%的酚可以抑制細菌和霉菌。利用上述方法能從混雜的微生物群體中分別分離出大腸桿菌 霉菌 放線菌 固氮細菌A B C D8從混雜的微生物群體中選擇優(yōu)良的單一純種的方法不包括A根據(jù)微生物對碳源需要的差別，使用含不同碳源的培養(yǎng)基B根據(jù)微生物對特殊營養(yǎng)物的需求，在培養(yǎng)基中增減不同的特殊營養(yǎng)物C根據(jù)微生物對抗生素敏感性的差異，在培養(yǎng)基中加入不同的抗生素D根據(jù)微生物耐熱性的不同，利用高溫、高壓消滅不需要的雜菌9用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中

4、尿素分解菌的數(shù)目，為了提高實驗結果的可信度，往往要設置對照，對于對照組的要求不包括哪項A對照組培養(yǎng)基也嚴格滅菌，且不接觸任何生物B對照組和實驗組培養(yǎng)基放在相同的條件下培養(yǎng)C所用培養(yǎng)基成分及PH大小完全與實驗組一致D培養(yǎng)基的量的大小與實驗組必須絕對相同10稀釋涂布平板法是微生物培養(yǎng)中的一種常用的接種方法，下列相關敘述中錯誤的是A操作中需要將菌液進行一系列的濃度梯度稀釋B需將不同稀釋濃度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基表面C不同濃度的菌液均可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落D操作過程中對培養(yǎng)基和涂布器等均需進行嚴格滅菌處理11下列有關微生物培養(yǎng)與應用的說法正確的是（ ）。A天然培養(yǎng)基是指直接取自自然界不需加工

5、的培養(yǎng)基B接種前需對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手等進行嚴格的滅菌處理C大腸桿菌的純化培養(yǎng)過程包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個階段D分離分解尿素的細菌時，尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源和碳源12牛肉膏可以為微生物提供 （ ）A碳源、氮源和維生素 B氫元素和氧元素C碳源、氮源、磷酸鹽和維生素 D碳源、氮源和無機鹽13選擇培養(yǎng)時應將錐形瓶固定在（ ）A桌子上 B溫箱里 C窗臺上 D搖床14下列材料中纖維素含量最高的是（ ）A楊樹 B小麥 C玉米D棉花15實驗測定鏈霉素對3種細菌的抗生素效應，用3種細菌在事先準備好的瓊脂塊平板上畫3條等長的平行線（3條線均與下圖中的鏈霉素帶接觸），將平板置于3

6、7條件下恒溫培養(yǎng)3天，結果如圖所示。從實驗結果分析以下敘述，不正確的是（ ）A鏈霉素能阻止結核菌的生長B鏈霉素對結核菌比對霍亂菌更有效C鏈霉素對結核菌比對傷寒菌更有效D鏈霉素可以用于治療傷寒病人16稀釋涂布平板法分離分解尿素的細菌時使用的涂布器應保存在體積分數(shù)為70%的酒精中,取出后又要放在酒精燈火焰上引燃,這兩步分別屬于什么技術?（ ）A滅菌、滅菌 B消毒、消毒C滅菌、消毒 D消毒、滅菌17下列有關平板劃線法的操作錯誤的是（ ）。A將接種環(huán)放在火焰上灼燒B將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中沾取一環(huán)菌液C沾取菌液和劃線要在火焰旁進行D接種環(huán)劃線要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連18分離土壤中分解尿素

7、的細菌,對培養(yǎng)基的要求是（ ）。加尿素 不加尿素 加瓊脂 不加瓊脂 加葡萄糖 不加葡萄糖 加硝酸鹽 不加硝酸鹽A BC D19將接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基都放入37恒溫箱的目的是A對比觀察培養(yǎng)基有沒有被微生物利用B對比分析培養(yǎng)基是否被雜菌污染C沒必要放人未接種的培養(yǎng)基D為了下次接種時再使用20在光亮處用同一種培養(yǎng)液分別培養(yǎng)單細胞綠藻和單細胞的酵母菌，其結果如下圖所示（甲為綠藻，乙為酵母菌），造成這種結果的原因是培養(yǎng)液中A缺少無機鹽 B氧氣含量太高C缺少有機養(yǎng)分 D不含二氧化碳二、綜合題21為了調查贛江的水質狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌的分離等工作?；卮鹣铝?/p>

8、問題：制備實驗所需的培養(yǎng)基時，在各成分都溶化后和分裝前，要進行的是 和滅菌，對培養(yǎng)基進行滅菌的常用方法是 。倒平板時要待平板冷凝后，將平板倒置，其主要原因是（2）該小組可采用上圖所示的 （方法）檢測水樣中的細菌含量。在接種前，隨機取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是_；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入01mL稀釋液；經適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_。（3）該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時，接種環(huán)通過灼燒滅菌，在第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線。這樣做的目的是_。（4）

9、在純化過程中，在固體培養(yǎng)基上劃線分離過程中，正確的操作是_A每次劃線時，接種環(huán)都需要蘸菌液一次B劃線分離時，需要把接種環(huán)深入到培養(yǎng)基中進行接種C劃線時要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連D在超凈平臺中進行接種時，不能關閉過濾風22我國規(guī)定每升飲用水中大腸桿菌不能超過3個。某興趣小組嘗試對某品牌飲用水的大腸桿菌含量進行檢測，操作簡圖如圖甲，伊紅美藍培養(yǎng)基配方如圖乙?；卮鹣铝邢嚓P問題：（1）圖甲中濾膜的孔徑應_（“大于”或“小于”）大腸桿菌。受此啟發(fā)，對某些不耐高溫的試劑可以怎樣除菌? _。（2）配制圖乙中的基礎培養(yǎng)基時，除了水分、無機鹽以外，還應加入_（一種營養(yǎng)成分），以及_。伊紅美藍培養(yǎng)基上生

10、長的大腸桿菌菌落呈現(xiàn)黑色，從功能上劃分，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。（3）該小組通過統(tǒng)計_的數(shù)目，計算出單位體積樣品中大腸桿菌數(shù)目。理論上他們的統(tǒng)計值要比實際_（“偏高”或“偏低”），理由是_。23餐飲行業(yè)會產生大量的廢棄油脂，去除廢棄油脂能有效的降低環(huán)境污染。實驗小組通過培養(yǎng)基篩選出能夠分解廢棄油脂的微生物。請回答下列問題：（1）實驗室用于篩選廢棄油脂分解菌的培養(yǎng)基應當以作為唯一碳源；培養(yǎng)基中除添加必需的營養(yǎng)物質外，還需要加入瓊脂，因此該培養(yǎng)基從物理性質上劃分屬于培養(yǎng)基。在微生物的培養(yǎng)過程中常常要采取無菌技術，其中接種室、接種箱和超凈工作臺在使用前應當用進行消毒。（2）脂肪的鑒定一般選用試劑，其原

11、理是該試劑能夠使脂肪顯。（3）實驗室發(fā)生不同溫度下油脂分解菌對廢棄油脂的分解率不同，該小組在不同溫度下測定油脂的去除率，得到下表所示的數(shù)據(jù)：據(jù)圖可知，酶的活性受溫度的影響，若要進一步探究油脂分解酶的最適溫度，需要在的溫度范圍內，設置一系列等溫度梯度的實驗組繼續(xù)進行實驗。油脂分解酶對廢棄油脂的分解具有高效性。與無機催化劑相比，酶具有高效性的原因是。24玉米是生產和科研的好材料，原因之一是玉米為雌雄同株異花的單子葉植物。現(xiàn)有兩個玉米品種，其基因型分別為yyRr和YyRr（兩對等位基因分別位于兩對同源染色體上），科學家將他們的花粉除去細胞膜后進行原生質體融合，再把這些融合細胞進行組織培養(yǎng)，培育出了玉

12、米新品種。（1）上述育種方法采用了_技術，其生物學原理是_。（2）除去花粉的細胞壁常用酶解法，這里的酶是指_。（3）在組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中除了必要的營養(yǎng)物質外，還必須添加_。同時在培養(yǎng)過程中，除必要的溫度、光照和氧氣等外界條件外，成功的另一個關鍵是操作過程中必須保證_。（4）兩個品種的花粉進行原生質體融合后，最多可產生_種基因型的融合細胞（僅考慮兩兩融合），這些融合細胞再經培養(yǎng)可以得到_種不同于親本表現(xiàn)型的玉米新品種。（5）已知該玉米花粉的細胞壁上含有少量的蛋白質，是由核基因控制合成的。若把細胞中提取的該基因直接導入大腸桿菌內，指導合成的蛋白質不具備正常的功能，可能的原因有： ； 。25下表是一

13、種細菌培養(yǎng)基配方，請回答下列問題：（1）該培養(yǎng)基的葡萄糖為微生物的生長繁殖主要提供 。（2）該培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基（多選）。A液體 B固體 C鑒定 D選擇 E天然（3）如果要對培養(yǎng)基的菌落進行純化，在培養(yǎng)基上劃線操作中，操作的第一步及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，目的是對接種環(huán)進行 。（4）制備培養(yǎng)基的操作步驟是 。（用下列字母排序）a倒平板 b計算 c溶化 d稱量 e滅菌Aabcde Bebdca Cbdcae Dbdcea（5）某同學用稀釋涂布平板法測定一個土壤樣品中的細菌數(shù)（取10克該土壤加90ml無菌水制成稀釋液）。在對應稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中統(tǒng)計3個平板上的菌落數(shù)分別為：121、21

14、2、256，則每克該土壤樣品中的菌落數(shù)為 。（6）分離土壤中分解尿素的微生物的實驗流程包括：土壤取樣、 、樣品涂布到 培養(yǎng)基上、挑選 。26有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染某同學欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株回答問題：（1）在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基土，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基（2）純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即 和 （3）為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力 （4）通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、 和 無菌技術要求

15、試驗操作應在酒精燈 附近進行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染272015年與我國女科學家屠呦呦平分諾貝爾生理學或醫(yī)學獎的是愛爾蘭科學家威廉一坎貝爾和日本藥物科學博士聰大村，他們二人的貢獻是發(fā)現(xiàn)了一種新的藥物，名為阿維菌素，其衍生產品降低了河盲癥和淋巴絲蟲病的發(fā)病率，同時還能有效對抗其他寄生蟲病，治療效果顯著聰大村從土壤樣品中分離鏈霉菌的新菌株，在實驗室內通過成千上萬鏈霉菌培養(yǎng)物篩選出一些較有發(fā)展前途的菌株，這就是阿維菌素的來源（1）制備鏈霉菌培養(yǎng)基時，在各成分都溶化后和分裝前，要進行的是 和滅菌，對培養(yǎng)基進行滅菌的常用方法是 倒平板時要待平板冷凝后，將平板倒置，其主要原因是 （2）圖是在純化過程

16、中通過 法分離培養(yǎng)的結果，在培養(yǎng)基上接種時接種環(huán)需通過灼燒滅菌，完成圖中劃線操作，共需要灼燒接種環(huán) 次圖表示的是用 法接種培養(yǎng)后得到的結果（3）在純化過程中，在固體培養(yǎng)基上劃線分離時，經培養(yǎng)，在劃線的末端出現(xiàn) ，表明菌已分離在此過程中，正確的操作是 A每次劃線時，接種環(huán)都需要蘸菌液一次B劃線分離時，需要把接種環(huán)深入到培養(yǎng)基中進行接種C在超凈平臺中進行接種時，不能關閉過濾風D劃線時要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連（4）該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)結果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液的 的含

17、量，同時可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高 的利用率28利用微生物分解淀粉生產糖漿具廣闊的應用前景。某同學為了從長期種植馬鈴薯的土壤中分離出能夠高效分解淀粉的細菌，進行了如下實驗。（1）實驗步驟：配制以_ 為碳源的固體培養(yǎng)基，為了使培養(yǎng)基凝固成固體，應該向培養(yǎng)基中加入的物質是 _ 。將土壤樣品接種到已滅菌的培養(yǎng)基上，在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時間后，培養(yǎng)基上出現(xiàn) _ 。將接種針用 _ 法滅菌后，從中的培養(yǎng)基上挑取一定量細菌，接種入_（固體、半固體、液體）培養(yǎng)基，在恒溫搖床上培養(yǎng)24h，使細菌大量繁殖。配制與相同的培養(yǎng)基，并加入少量碘液，使培養(yǎng)基呈藍紫色。用 _ 法將上一步大量繁殖后的細菌接種到已滅菌

18、的培養(yǎng)基上。培養(yǎng)一段時間后，觀察菌落周圍培養(yǎng)基的顏色變化和變化范圍的大小。周圍出現(xiàn)較大_ 現(xiàn)象的菌落即為初選菌落，經進一步分離、純化后即可達到實驗目的。（2）上述所有倒平板和接種操作，都應在超凈臺上酒精燈 _ 附近進行。（3）上述實驗步驟中，從用途看，所用培養(yǎng)基屬于 _培養(yǎng)基，所用培_ 培養(yǎng)基。29在生產研究上，常常需要進行微生物的培養(yǎng)和計數(shù)?；卮鹣铝信c微生物的培養(yǎng)與利用有關的問題（1）下圖是利用_法將微生物接種到固體培養(yǎng)基上，把混合的菌種逐步稀釋分散獲得_菌落。接種后培養(yǎng)基應_放在37恒溫培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。（3）分析下面培養(yǎng)基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO47H2

19、O、KCl、H2O。若此培養(yǎng)基用于篩選尿素分解菌，則應除去上述培養(yǎng)基成分中的_，并加入_和_物質，以補充其生活所需的_和_。培養(yǎng)基中加入酚紅作指示劑的原因是尿素分解菌能合成_將尿素分解為氨，使培養(yǎng)基pH發(fā)生改變，酚紅由黃變紅，使菌落周圍呈現(xiàn)紅色。（4）三位同學用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中細菌數(shù)量。在對應稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，取02ml稀釋液涂布，得到以下統(tǒng)計結果：甲同學涂布了1個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是260；乙同學涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是210、240和246，取平均值232；丙同學涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是21、212和256，取平均值163；在三位同學的統(tǒng)計中，_同學的

20、統(tǒng)計結果是相對準確可信的。按照該同學的結果，每毫升原液中的菌體數(shù)是_。用這種方法測得的菌體數(shù)比實際活菌數(shù)量_。（4）實驗結束后，使用過的培養(yǎng)基應該進行_處理后，才能倒掉。30塑料袋造成的“白色污染”早已成為地球公害，塑料袋的自然分解需要20-1000年不等2008年7月3日加拿大媒體報道：16歲的高中生丹尼爾-伯德從土壤中找到了一類假單胞桿菌，能將聚乙烯塑料的自然降解過程縮短至3個月，而且分解產物只有水和二氧化碳伯德也因此被譽為“塑料袋的克星”以下是伯德尋找到聚乙烯降解菌的大致過程請回答：（l）根據(jù)你的生活經驗推測，伯德這項研究的“土壤樣品”最可能取自于 。（2）圖中“”表示對土壤懸浮液進行一

21、系列的 ，目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞從而能在號培養(yǎng)基表面形成單個 。（3）I號培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基，其作用是使目的菌能“脫穎而出”如圖采用的接種方法為 。使用號培養(yǎng)基的目的是使目的菌數(shù)目增多，培養(yǎng)基中必須包含水、無機鹽、 等基本營養(yǎng)成分從物理性質來看，號培養(yǎng)基中不能添加 。（4）若要進行月季花藥的離體培養(yǎng)，最好選擇  期的花藥，從宏觀來判斷通常擇 ，采用的MS固體培養(yǎng)基中除含有多種大量元素和微量元素外，還需添加植物激素，其中主要是 。（5）為避免雜菌污染培養(yǎng)物和環(huán)境，植物組織培養(yǎng)和微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基在接種前和完成實驗后都要進行 。（6）接種時要在 操作。參考答案1A【解析

22、】試題分析：土樣不同可能導致計數(shù)偏差，正確；培養(yǎng)基污染，正確；操作失誤可能增加微生物的數(shù)量和種類，菌落會增多，正確；沒有設置對照不會增加菌落數(shù)目，錯誤A、正確故選：A2C【解析】試題分析：自生固氮菌是異養(yǎng)菌，生長繁殖需要有機碳源；自生固氮菌能利用空氣中的氮氣，培養(yǎng)基中不加氮源，固氮菌能生長繁殖，不能固氮的菌不能生長繁殖，；自生固氮菌的生長繁殖的最適宜溫度是2830；自生固氮菌對青霉素敏感，培養(yǎng)基中不能加青霉素所以如果從土壤浸出液中分離出自生固氮菌對培養(yǎng)基的要求是不加抗生素、不加氮素、加葡萄糖、2830恒溫箱中培養(yǎng)故選：C3C【解析】試題分析：A、稀釋涂布平板法，包括系列稀釋和涂布平板兩個過程，

23、涂布平板之前需要將菌液進行一系列的濃度梯度稀釋A正確B、涂布平板時，需要將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基表面B正確C、只有稀釋度足夠大的菌液才能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落C錯誤D、操作過程中對培養(yǎng)基和涂布器等均需進行嚴格滅菌處理，以防止雜菌污染D正確故應選C4C【解析】試題分析：A、將過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，防止培養(yǎng)皿被污染，A正確；B、使打開的錐形瓶瓶口迅速通過火焰，對錐形瓶的口徑處進行灼燒滅菌，防止空氣中的雜菌污染，B正確；C、倒平板時不能把培養(yǎng)皿蓋完全打開并放到桌面上，這樣會污染培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，C錯誤；D、倒平板后冷卻需要倒過來放置，防止皿蓋上的水珠滴落到培養(yǎng)基上，D正確

24、故選：C5B【解析】在纖維素分解菌的鑒定實驗中，纖維素酶的測定方法一般是對纖維素酶分解纖維素后所產生的葡萄糖進行定量測定，故選B。【考點定位】纖維素分解菌的鑒定實驗【名師點睛】通過鑒別培養(yǎng)基上是否形成透明圈來對分解纖維素的微生物進行初步篩選，為確定得到的是纖維素分解菌，需要進行發(fā)酵產生纖維素酶的實驗，并且進行纖維素酶的測定，測定方法一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產生的葡萄糖進行定量測定。6C【解析】常用的剛果紅染色法有兩種，一種先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進行顏色反應，另一種是在倒平板時就加入剛果紅，故選C?！究键c定位】微生物的分離和培養(yǎng)【名師點睛】剛果紅染色法有兩種：（1）先培養(yǎng)微生物再

25、加入剛果紅進行顏色反應優(yōu)點：顯示出的顏色反應基本上是纖維素分解菌的作用缺點：操作繁瑣,加入的剛果紅會使菌落之間發(fā)生混雜（2）在倒平板時就加入剛果紅優(yōu)點：不存在菌落的混雜問題缺點：1）在纖維素粉和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質,可以使能夠產生淀粉酶的微生物產生假陽性反應 2）有些微生物有降解色素的功能7A【解析】固氮細菌不需要專門添加氮源，在缺乏氮源的培養(yǎng)基上可從多種細菌中分離得到自生固氮細菌；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌的生長，從而可以分離出霉菌；10%酚可以抑制細菌和霉菌，但放線菌可生存，故選A?！究键c定位】培養(yǎng)基對微生物的選擇作用【名師點睛】選擇性分離培養(yǎng)基，支持特定微生物的生

26、長而抑制其他微生物生長的分離培養(yǎng)基，利用這個原理可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。8D【解析】根據(jù)微生物對碳源需要的差別，使用含不同碳源的培養(yǎng)基，例如培養(yǎng)自養(yǎng)型的菌，在培養(yǎng)基中不需加入碳源，A正確；不同的微生物需要不同的生長因子，根據(jù)需要的菌可以在培養(yǎng)基中加入相應的生長因子進行分離，B正確；根據(jù)微生物對抗生素敏感性的差異，在培養(yǎng)基中加入不同的抗生素，C正確；高溫高壓會將所有細菌（包括需要的菌類）一起殺死，D錯誤?！究键c定位】微生物選擇培養(yǎng)【名師點睛】根據(jù)微生物生長所必需的營養(yǎng)：碳源、氮源、無機鹽、水和生長因子因微生物不同，對碳源、氮源、無機鹽、生長因子的需求也不相同，可以根據(jù)微生物的

27、生長需求制備特殊的選擇培養(yǎng)基，來獲得單一純種；也可以根據(jù)微生物對不同抗菌素的敏感性不同，加入不同的抗菌素來獲得目的菌種。9D【解析】對照組培養(yǎng)基也要嚴格滅菌，且不接種任何微生物，為空白對照，A正確；對照組和實驗組的培養(yǎng)基都要置于相同條件下培養(yǎng)，以保證單一變量，B正確；根據(jù)實驗設計的單一變量原則，對照組所用培養(yǎng)基的成分及pH應與實驗組完全一致，C正確；進行倒平板時對照組培養(yǎng)基用量的大小與實驗組不一定絕對相同，且對實驗結果無影響，D錯誤。【考點定位】稀釋涂布平板法【名師點睛】用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中尿素分解菌的數(shù)目，為了提高實驗結果的可信度，往往要設置對照 ，對于對照組的要求包括：對照組培養(yǎng)基

28、也嚴格滅菌，且不接觸任何生物；對照組和實驗組培養(yǎng)基放在相同的條件下培養(yǎng)；所用培養(yǎng)基成分及PH大小完全與實驗組一致。10C【解析】稀釋涂布平板法包括系列稀釋和涂布平板兩個過程，涂布平板之前需要將菌液進行一系列的濃度梯度稀釋，A正確；涂布平板時，需要將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基表面，B正確；只有稀釋度足夠大的菌液才可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落，C錯誤；操作過程中對培養(yǎng)基和涂布器等均需進行嚴格滅菌處理，D正確?！究键c定位】微生物的分離和培養(yǎng)【名師點睛】稀釋涂布平板法需多次稀釋，稀釋到一定程度才能在培養(yǎng)上形成單個菌落。該方法可用于菌種的分離和計數(shù)。11C【解析】天然培養(yǎng)基也稱復合培養(yǎng)基，是含

29、有化學成分還不清楚或化學成分不恒定的天然有機物，A錯誤；對于培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)來說,必須要進行嚴格的滅菌處理，因為它們是直接接觸菌種，直接參與培養(yǎng)微生物的。而實驗操作者雙手不是直接參與，只需要消毒處理即可，B錯誤；大腸桿菌的純化培養(yǎng)過程包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個階段，C正確；分離分解尿素的細菌時，尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源，尿素和葡萄糖是碳源，D錯誤?！究键c定位】微生物培養(yǎng)與應用12C【解析】牛肉膏富含碳源、氮源、無機鹽（磷酸鹽）等各種微生物成長必須的營養(yǎng)物質，還含有維生素，故選C?！究键c定位】微生物的營養(yǎng)物質【名師點睛】微生物生長繁殖所需的營養(yǎng)物質主要有水、碳源、氮源、無機鹽和生長

30、因子等。13D【解析】纖維素分解菌選擇培養(yǎng)時要將錐形瓶固定在搖床上，使培養(yǎng)液變渾濁，若變渾濁了，說明菌體生長了，故選D?！究键c定位】微生物的生長14D【解析】纖維素是自然界中分布最廣、含量最多的一種多糖，占植物界碳含量的50%以上，棉花的纖維素含量接近100%，為天然的最純纖維素來源，故選D。【考點定位】組成細胞的化合物【名師點睛】纖維素是由葡萄糖組成的大分子多糖，不溶于水及一般有機溶劑，是植物細胞壁的主要成分。15D【解析】圖中結核菌最短，說明鏈霉素能夠阻止結核菌的生長，且比對傷寒菌、霍亂菌更有效，ABC正確；圖中接種傷寒菌的瓊脂塊沒有變短，說明鏈霉素對傷寒菌沒有作用，所以鏈霉素不能用于治療

31、傷寒病人，D錯誤?！究键c定位】實驗探究抗生素對不同細菌的作用【名師點睛】據(jù)圖分析，已知3條平行菌線均與鏈霉素菌帶接觸，鏈霉素對細菌抗生效應大小，可從圖中橫向的三條菌帶長度加以判別，菌帶越長，說明此菌生長良好，鏈霉素對該菌的殺滅作用越弱；菌帶越短，說明此菌生長不好，鏈霉素對該細菌殺滅作用越強。16D【解析】在稀釋涂布平板法中，將涂布器保存在體積分數(shù)為70%的酒精中的目的是為了消毒；涂布器滅菌時，將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃盡后，冷卻810s再用，目的是為了滅菌，故選D?！究键c定位】消毒與滅菌【名師點睛】常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，目的是讓聚集在一起的微生物分散成單個

32、細胞，然后得到由這個細胞繁殖而來的肉眼可見的單個群落。稀釋涂布法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在適宜條件下培養(yǎng)在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。17D【解析】每次接種的前后，將微生物的接種環(huán)直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌， A正確；高溫會將菌體殺死，所以灼燒后的接種環(huán)必須冷卻后，才可以伸入菌液中蘸取一環(huán)液，否則會燒傷或燒死微生物，B正確；酒精燈火焰旁的雜菌比較少，所以沾取菌液和劃線都要在火焰旁進行，以防止空氣中的雜菌，C正確；劃線時要避免最后一區(qū)的劃線與第一

33、區(qū)線連 因為最后一區(qū)是細菌最稀少的，而第一區(qū)是細菌最致密的，如果連在一起會影響單個菌落的分離效果，D錯誤?！究键c定位】平板劃線法【名師點睛】平板劃線法通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面；在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離由一個細菌繁殖而來的肉眼可見的子細胞群為菌落。轉換劃線角度后要對接種環(huán)進行灼燒滅菌再進行劃線；等待平板冷卻凝固后需要倒過來放置，目的是防止培養(yǎng)皿內壁上出現(xiàn)的冷凝水污染培養(yǎng)基。18C【解析】分解尿素的細菌是異養(yǎng)微生物，因此培養(yǎng)基中應該加入有機碳源，如葡萄糖；分離分解尿素的菌的培養(yǎng)基從功能上分屬于選擇培養(yǎng)基，應該以尿素為唯一氮源；從物理性質

34、上分屬于固體培養(yǎng)基，因此應加入凝固劑瓊脂糖，故選C?！究键c定位】微生物的培養(yǎng)基成分【名師點睛】分離土壤中分解尿素的細菌的原理是在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上，只有能分解尿素的細菌才能以尿素為氮源生長繁殖，不能分解尿素的細菌因缺乏氮源而無法生長繁殖。19B【解析】將接種后的培養(yǎng)基和未接種的培養(yǎng)基同時放入37恒溫箱，目的是作為空白對照，判斷培養(yǎng)基是否被污染。一段時間后若未接種的培養(yǎng)基有菌落說明培養(yǎng)基被污染，則培養(yǎng)基不能使用，若無菌落說明培養(yǎng)基沒有被污染，可以使用，故選B?！究键c定位】微生物的分離和培養(yǎng)【名師點睛】本題是通過實驗驗證培養(yǎng)基是否被污染，分析實驗設計的思路應是把不接著任何菌種的培養(yǎng)基放在恒

35、溫箱中培養(yǎng)，一段時間后若有菌落說明培養(yǎng)基被污染，若無菌落說明培養(yǎng)基沒有被污染，然后根據(jù)選項分析判斷。20C【解析】微生物的生活需要營養(yǎng)物質，酵母菌的細胞結構沒有葉綠體，不能自己利用無機物合成有機物，所以造成酵母菌數(shù)量下降的原因是培養(yǎng)液中缺少有機養(yǎng)分（或營養(yǎng)物質、有機物等），而綠藻的數(shù)量上升的原因是單細胞綠藻在光下能進行光合作用制造有機物，故選C?！究键c定位】酵母菌的營養(yǎng)方式、植物的光合作用21（1）調整pH 高壓蒸汽滅菌 防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染（2）稀釋涂布平板法 檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格 38×107（3）將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落不連續(xù)單個菌落 D【

36、解析】試題分析：（1）配置培養(yǎng)基在溶化后和分裝前需要先進行調pH和滅菌，故是調整pH。常用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基進行滅菌。倒平板后要倒置的主要原因是防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染。（2）圖中菌落分布均勻應是采用了稀釋涂布平板法。接種前對空平板進行培養(yǎng)是為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格。計數(shù)應取其平均值即38*10*100*103= 38×107個/L。（3）平板劃線法總是從上一區(qū)域的末端劃線是為了將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落不連續(xù)單個菌落。（4）平板劃線法中只需要第一次蘸取菌液，故A錯誤。劃線分離時要輕輕劃線不能把接種環(huán)深入到培養(yǎng)基中，故B錯誤。劃線時首尾不能相連，故

37、C錯誤。在超凈臺中接種接種時，為了防止其它雜菌的污染不能關閉過濾風，故D正確?？键c：本題考查微生物的培養(yǎng)和分離相關知識，意在考察考生對知識點的識記理解掌握程度。22（1）小于 用濾膜過濾除菌（2）氮源 瓊脂 鑒別（3）黑色菌落 偏低 兩個或多個大腸桿菌連在一起時，平板上只能觀察到1個菌落【解析】試題分析：（1）圖甲中濾膜的孔徑應小于大腸桿菌，濾膜過濾才能獲得大腸桿菌，對不耐高溫的試劑，可以用濾膜過濾除菌。（2）培養(yǎng)基應該滿足微生物生長需要，因此配制圖乙中的基礎培養(yǎng)基時除了水分、無機鹽以外，還應加入氮源，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，因此還需要加入凝固劑瓊脂。該培養(yǎng)基能鑒定大腸桿菌，因此屬于鑒別培養(yǎng)基

38、。（3）大腸桿菌的代謝產物與伊紅-美藍結合，使菌落呈黑色，并有金屬光澤。計算出單位體積樣品中大腸桿菌數(shù)目。理論上他們的統(tǒng)計值要比實際偏低，原因是兩個或多個大腸桿菌連在一起時，平板上只能觀察到1個菌落?？键c：本題主要考查微生物的培養(yǎng)和分離相關知識，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯(lián)系的能力。23（1）廢棄油脂（2分） 固體（2分） 紫外線（2分）（2）蘇丹（或蘇丹）（2分） 橘黃色（紅色）（2分）（3）2535（3分）酶降低活化能的作用比無機催化劑更顯著（2分）【解析】（1）實驗室用于篩選廢棄油脂分解菌的培養(yǎng)基應當以廢棄油脂作為唯一碳源；培養(yǎng)基中除添加必需的營養(yǎng)物質外，還需要加

39、入瓊脂，因此該培養(yǎng)基從物理性質上劃分屬于固體培養(yǎng)基。在微生物的培養(yǎng)過程中常常要采取無菌技術，其中接種室、接種箱和超凈工作臺在使用前應當用紫外線進行消毒。（2）脂肪的鑒定一般選用蘇丹（或蘇丹）試劑，其原理是該試劑能夠使脂肪顯橘黃色（紅色）。（3）據(jù)圖可知，酶的活性受溫度的影響，若要進一步探究油脂分解酶的最適溫度，需要在2535的溫度范圍內，設置一系列等溫度梯度的實驗組繼續(xù)進行實驗。（4）與無機催化劑相比，酶具有高效性的原因是酶降低活化能的作用比無機催化劑更顯著?！究键c定位】 微生物的培養(yǎng)【名師點睛】配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的注意事項（1）倒平板的適宜溫度是50 左右，溫度過高會燙手，過低培養(yǎng)基

40、又會凝固。（2）平板需倒置，這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。24（1）植物體細胞雜交 生物膜的流動性和植物細胞的全能性（2分）（2）纖維素酶和果膠酶（2分）（3）植物激素 無菌（4）9（2分） 2（2分）（5）大腸桿菌無內質網(wǎng)、高爾基體，不能對分泌蛋白進行加工（2分） 該基因結構中有內含子，不應該直接導入原核細胞（2分）（或其他合理答案）【解析】（1）由題意“科學家將他們的花粉除去細胞膜后進行原生質體融合，再把這些融合細胞進行組織培養(yǎng)”可知：上述育種方法采用了植物體細胞雜交技術，其生物學原理是生物膜的流動性和植物細胞的全能性。（2）花粉細胞壁的主

41、要成分是纖維素和果膠，因此采用酶解法，可用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁。（3）在組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中除了必要的營養(yǎng)物質外，還必須添加植物激素。為了防止雜菌污，在操作過程中必須保證無菌。（4）基因型為yyRr的玉米品種產生的花粉的基因型為yR和yr；基因型為YyRr玉米品種產生的花粉的基因型為YR、Yr、yR和yr；兩個品種的花粉進行原生質體融合后，若僅考慮兩兩融合，則最多可產生9種基因型的融合細胞：YYRR、YYrr、yyRR、yyrr、YyRR、YYRr、YyRr、Yyrr和yyRr。這些融合細胞再經培養(yǎng)可以得到的玉米新品種中，YYRR、YyRR、YYRr和YyRr的表現(xiàn)型與親本YyRr的表現(xiàn)型

42、相同；yyRR和yyRr與親本yyRr的表現(xiàn)型相同；YYrr和Yyrr表現(xiàn)型均為Y_rr，但與親本不同，yyrr的表現(xiàn)型也與親本不同，即可以得到2種不同于親本表現(xiàn)型的玉米新品種。（5）若把細胞中提取的相應核基因直接導入大腸桿菌內，指導合成的蛋白質不具備正常的功能，可能的原因有：大腸桿菌為原核生物，其細胞無內質網(wǎng)、高爾基體，不能對分泌蛋白進行加工；玉米花粉細胞壁上含有少量的蛋白質，是由核基因控制合成的，核基因結構中有不能編碼蛋白質的內含子，不應該直接導入原核細胞?！究键c定位】植物細胞工程、基因的自由組合定律、基因工程?！久麕燑c睛】本題綜合考查學生對植物體細胞雜交、基因工程的知識的識記和理解能力。

43、解答本題需熟記并理解相關的基礎知識、形成清晰的知識網(wǎng)絡，并且盡可能與基因的自由組合定律、原核細胞與真核細胞的結構、分泌蛋白的合成與運輸?shù)闹R建立聯(lián)系。25（1）碳源和能源（2）BD（2分）（3）滅菌（2分）（4）D（2分）（5）196×109 （2分）（6）梯度稀釋 （2分） 選擇（2分） 菌落（2分）【解析】（1）葡萄糖為主要的能源物質，是一種含碳的有機物，因此該培養(yǎng)基的葡萄糖為微生物的生長繁殖主要提供碳源和能源。（2）該培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源，只有尿素分解菌才能在該培養(yǎng)基上生長繁殖，因此屬于選擇培養(yǎng)基；該培養(yǎng)基配方中加入了凝固劑瓊脂，又屬于固體培養(yǎng)基，即B、D項正確。（3）在培養(yǎng)

44、基上劃線操作中，操作的第一步及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，其目的是對接種環(huán)進行滅菌，以防止雜菌污染。（4）制備培養(yǎng)基的操作步驟是：b計算d稱量c溶化e滅菌a倒平板，A、B、C三項均錯誤，D項正確。（5）依題意可知：每克該土壤樣品中的菌落數(shù)為（121212256）÷3×106/（10/100）196×109。（6）分離土壤中分解尿素的微生物的實驗流程包括：土壤取樣、梯度稀釋、樣品涂布到選擇培養(yǎng)基上、挑選菌落?！究键c定位】微生物的培養(yǎng)與應用。26（1）原油 選擇（2）平板劃線法 稀釋涂布平板法（3）強（4）干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌 火焰【解析】試題分析：（1）欲篩選出能

45、降解原油的菌株，培養(yǎng)基中應只含有原油而無其它碳源，不能降解原油的細菌在此培養(yǎng)基上不能生存，這類培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基（2）分離純化菌種時，需采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，使聚集在一起的細菌細胞分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落，以便純化菌種（3）降解原油能力越強的菌株，在菌落周圍形成的分解圈越大（4）實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌（如接種環(huán)）、干熱滅菌（如培養(yǎng)皿）、高壓蒸汽滅菌（如培養(yǎng)基）等無菌操作要求在整個實驗過程中操作都在酒精燈火焰附近進行，以避免周圍微生物的污染故答案為：（1）原油 選擇（2）平板劃線法 稀釋涂布平板法（3）強（4）干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌 火焰2

46、7（1）調整pH 高壓蒸汽滅菌 防止培養(yǎng)皿蓋上的泠凝水落入培養(yǎng)基造成污染（2）平板劃線 4 稀釋涂布平板（3）不連續(xù)單個菌落 C（4）溶解氧 營養(yǎng)物質【解析】試題分析：（1）培養(yǎng)基的制作過程主要有計算、稱量、溶化、調節(jié)pH、滅菌、分裝培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌倒平板時要待平板冷凝后，為防止培養(yǎng)皿蓋上的泠凝水落入培養(yǎng)基造成污染，常常需要將平板倒置（2）據(jù)圖分析，圖是在純化過程中通過平板劃線法得到的，圖中經過了3次劃線操作，需要對接種環(huán)進行4次灼燒滅菌圖表示稀釋涂布平板法接種得到結果（3）平板劃線法接種時，經培養(yǎng)，在劃線的末端出現(xiàn)不連續(xù)單個菌落表明該菌已分離在此過程中，A、接種環(huán)只需要蘸菌液一次

47、，進行連續(xù)幾次劃線操作，A錯誤；B、劃線分離時，不能把接種環(huán)深入到培養(yǎng)基中進行接種，只能在培養(yǎng)基表面進行劃線操作，B錯誤；C、在超凈平臺中進行接種時，不能關閉過濾風，C正確；D、劃線時要將最后一區(qū)的劃線不能與第一區(qū)的劃線相連，D錯誤故選：C（4）該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)結果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快，原因振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液的溶解氧的含量，同時可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質的利用率故答案為：（1）調整pH 高壓蒸汽滅菌 防止培養(yǎng)皿蓋上的泠凝水落入培養(yǎng)基造成污染（2）平板劃線 4 稀釋涂布平板（3）不連續(xù)單

48、個菌落 C（4）溶解氧 營養(yǎng)物質28（1） 淀粉 瓊脂 菌落 灼燒滅菌 液體 稀釋涂布平板法 透明圈（2） 火焰（3）選擇 鑒別【解析】（1）實驗步驟：篩選分離出能夠高效分解淀粉的細菌需要使用以淀粉為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，瓊脂常常作為凝固劑制作固體培養(yǎng)基；將稀釋后的土壤樣品接種到已滅菌的培養(yǎng)基上，在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時間后，培養(yǎng)基上出現(xiàn)許多菌落；金屬的接種工具使用灼燒滅菌法滅菌淀粉分解菌屬于異養(yǎng)需氧型微生物，需要將其接種到液體培養(yǎng)基進行搖床震蕩培養(yǎng)；淀粉分解菌的鑒定需要將其用稀釋涂布平板法接種到已滅菌的培養(yǎng)基上；淀粉遇到碘液會變藍色，在固體平板培養(yǎng)基上，淀粉分解菌能夠將淀粉分解而使得以淀粉分解菌菌落為中心的非藍色的透明圈出現(xiàn)透明圈的就是淀粉分解菌，經進一步純化培養(yǎng)可達到實驗目的；（2）微生物培養(yǎng)的成功的關鍵是無菌操作，所以所有倒平板和接種操作，都應在超凈臺上酒精燈火焰附近進行。（3）從用途分析，所用培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，所用培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基?！究键c定位】微生物的分離和培養(yǎng)【名師點睛】固體培養(yǎng)基用于分離菌種，液體培養(yǎng)基用于微生物的大量繁殖鑒別培養(yǎng)基是指一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產物或反