人教版生物選修1《生物技術(shù)實(shí)踐》知識歸納圖解

1、選修1健網(wǎng)稚熱物胃識歸納圖解樸意：也要先清洗后除枝梗I ;（避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損，增加被;雜菌污染的機(jī)會，同 時(shí)，防止葡萄汁流失）;注意：榨汁機(jī)要清洗干凈，；并晾干（防雜菌污染）|避免將果核壓破（因；果核含有多種有害葡；萄酒風(fēng)味的物質(zhì)）I原理：主要菌種是酵母菌。 酵母菌是異養(yǎng)兼性;厭氧微生物；06H1206fC 2H5OH+CC2j溫度：20 c左右最適合酵 母菌繁殖，一般控制原理7 WWW兩粒桿菌"（異養(yǎng)需氧型T-當(dāng)氧氣糖源均充足時(shí)，糖-醋酸當(dāng)氧氣充足、缺少糖源時(shí)，乙醇-乙醛-醋酸 溫度：30 c35 C。菌種流失）挑選葡萄mi Ja川沿器的粗fm熊的酒忙煮:；中不能反復(fù)沖洗

2、（避免；選擇新鮮的葡萄4“ .果酒和果醋的制作25 o果酒在18 醋酸發(fā)酵*酒精發(fā)酵注意：；發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用體積分?jǐn)?shù)為70 %的酒精消毒；發(fā)酵瓶裝入葡萄汁后留有 1/3的空間（目的是先讓酵母菌進(jìn)；行有氧呼吸快速繁殖， 耗盡氧氣后再進(jìn)行酒精發(fā)酵；其次二防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生的 CO2造成發(fā)酵的溢出）；如用帶蓋的瓶子制葡萄酒，每隔12 h左右將瓶蓋擰松一次I注意：需適時(shí)通入空氣i.（一）培養(yǎng)基的基本知識1 .培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分那UI%（注意不是打開瓶蓋，防雜菌污染 ），之后再將瓶蓋擰緊 的:排出多余的氣體放炸裂）裝入葡萄汁封閉充氣口 （無氧環(huán)境和放雜菌污染）發(fā)酵過程中，隨著酒精度數(shù)的提高，葡萄酒

3、呈現(xiàn)深紅色紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液 ）酒精的鑒定：與酸性重銘酸鉀-呈灰綠色對照組- 實(shí)驗(yàn)組- 試管甲f 試管乙-2mL2mL2mL2mL白酒l_3mL/L的H2SO43滴混勻發(fā)酵液一發(fā)酵前液卜 3mL/L的H2SO3滴-混勻發(fā)酵后液,-（目|高考警示：:由于醋酸菌和乳酸菌屬于原；核生物，所以在利用者兩類 ；微生物時(shí)，其環(huán)境中一定不 ；能加入抗生素。:酵母菌在營養(yǎng)和氧氣充足時(shí)L進(jìn)行出芽生殖營養(yǎng)物質(zhì)定義作用主要來源及所涉及的微生物碳源凡是能提供微生物所需碳元 素的物質(zhì)構(gòu)成生物細(xì)胞、生物體及細(xì)胞代謝產(chǎn)物， 有些能為異養(yǎng)生物提供能源無機(jī)化合物：C02、NaHCO等（自養(yǎng)生物）有機(jī)化合物：糖類、脂質(zhì)、

4、花生粉餅、石油等（異養(yǎng)生物）氮源凡是能提供微生物所需氮元 素的物質(zhì)合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物，也 可為異養(yǎng)微生物提供能源無機(jī)化合物：N、NH、錢鹽、硝酸鹽，自養(yǎng)生物 有機(jī)化合物：尿素、牛肉膏、蛋白陳等，異養(yǎng)生物水分生物體內(nèi)含量最高的組成成 分，分為結(jié)合水和自由水良好的溶劑、細(xì)胞生活及生化反應(yīng)的介質(zhì)、 參與物質(zhì)運(yùn)輸及參與生化反應(yīng)的反應(yīng)物培養(yǎng)基、大氣、代謝產(chǎn)物無機(jī)鹽為微生物提供除C、H、0以外 的各種元素細(xì)胞組成成分，生命調(diào)節(jié)物質(zhì)，自養(yǎng)菌的 能源或其他營養(yǎng)來源，酶的激活劑培養(yǎng)基、大氣等環(huán)境生長因子微生物正常生長繁殖，必不可 少的微量有機(jī)物可作為酶與核酸等的組成成分維生素、氨基酸、堿基等高考警

5、示鐘自養(yǎng)微生物與異養(yǎng)微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì)不同（1）自養(yǎng)微生物所需的碳源、氮源來自含碳、含氮的無機(jī)物，而異養(yǎng)微生物需要的碳源、氮源來自含碳、含氮的有機(jī)物，因此可根據(jù)培 養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)判斷微生物的代謝類型。（2）含氮無機(jī)物不但能給自養(yǎng)微生物提供氮源，也能作為能源物質(zhì)，提供能量，如NH既作為硝化細(xì)菌的氮源也作為能源。2 .培養(yǎng)基的配制原則（1）目的明確。要根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等選擇原料、配制培養(yǎng)基。（2）營養(yǎng)要協(xié)調(diào)。各種營養(yǎng)物質(zhì)要保證適當(dāng)?shù)臐舛群捅壤?。營養(yǎng)物質(zhì)比例過低，不能滿足微生物生長；濃度過高則會抑制微生物的正常生長。營養(yǎng)物質(zhì)的濃度比（如C/N）還會直接影響某些微生物的代謝產(chǎn)物，如谷氨酸生

6、產(chǎn)，C/N=4 ： 1時(shí)，菌體大量繁殖，谷氨酸產(chǎn)量少；而 C/N=3 ： 1時(shí)，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸合成量大。（3）pH 要適當(dāng)。不同微生物生長所需pH不同。如細(xì)菌 pH保持在6.57.5之間；放線菌保持在 7.58.5之間；真菌應(yīng)保持在 5.06.0之間。3 .培養(yǎng)基的分類及作用：培養(yǎng)基種類很多，作用也不同。根據(jù)不同的分類標(biāo)準(zhǔn)，可將培養(yǎng)基分為不同種類。劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類特點(diǎn)用途及實(shí)例物理性質(zhì)液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基加凝固劑，如：瓊脂觀察微生物的運(yùn)動、分類鑒定、保藏菌種固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、化學(xué)成分天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基

7、成分明確（用化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)配成）分類、鑒定用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物 的生長，促進(jìn)所需要的微生物的生長培養(yǎng)、分離出特定微生物（如：培養(yǎng)酵母菌或霉菌， 可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌， 可在培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽 ）鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)， 在培養(yǎng)基中加入某種指示劑 或化學(xué)藥品鑒別不同種類的微生物，如可用伊紅一美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌 （若有，茵落呈深紫色，并帶有金屬光澤）說明：病毒為非細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物體，專營活細(xì)胞寄生，目前不能利用人工培養(yǎng)基來培養(yǎng)，需接種在動植物組織中才能增殖。常用于培養(yǎng)病毒的是活雞胚加入培養(yǎng)基中

8、的凝固劑 （如瓊脂），一般不能被微生物利用，只起到凝固作用選擇培養(yǎng)基一般只生長具有特定的微生物，鑒別培養(yǎng)基可以存在其他微生物，而且能鑒別特定的微生物 注意：選擇培養(yǎng)基的選擇方法在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)。例如，加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌；加入高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌。這里的加入是在主要營養(yǎng)成分完整的基礎(chǔ)上加入。改變培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分。例如缺乏氮源時(shí)可以分離出固氮微生物；石油作為惟一碳源時(shí)，可以分離出消除石油污染的微生物（3）改變微生物的培養(yǎng)條件。例如，將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境下培養(yǎng)，可以得到耐高溫的微生物。（二）滅菌技術(shù)1 .無菌技術(shù)的概念在微生物培養(yǎng)中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止

9、外來雜菌入侵，其主要技術(shù)是無菌操作。無菌技術(shù)是指通過一定物理、化學(xué)的手段，防止實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 物被外來微生物污染。無菌技術(shù)主要圍繞如何避免雜菌污染展開的。2 .消毒、滅菌的方法項(xiàng)目概念常用方法應(yīng)用范圍消毒使用較為溫和的物理或化學(xué)方法，僅殺死 物體表面或內(nèi)部一部分對人體等有害的微 生物（不包括抱子和芽抱）巴氏消毒法：7075c水中煮30min或在80c水中煮15min一些不耐高溫的物體如牛奶煮沸消毒法：在100c水浴中煮沸56 min一般物品化學(xué)藥劑消毒法：用乙醇、氯氣、漂白粉、KMnO?藥劑來殺死或抑制細(xì)菌生長或繁殖可用來對環(huán)境、雙手和衣物等消毒紫外線消毒法：30W紫外燈照射30min接種室滅菌使

10、用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的 微生物，包括芽抱和抱子灼燒滅菌法：酒精燈火焰接種工具如接種環(huán)、接種針等干熱滅菌法：在 160170c加熱12h如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具高壓蒸汽滅菌：壓力為100 kPa,溫度為121c的條件下，維持1530 min培養(yǎng)基及容器的滅菌注意:70%的酒精效果最好，因濃度過高，會使菌體表面蛋白凝固成一層保無菌操作是微生物培養(yǎng)過程中，防止雜茵污染的關(guān)鍵步驟。消毒只能消滅或抑制營養(yǎng)體的活動，而不能達(dá)到徹底滅菌。酒精消毒用體積分?jǐn)?shù)為護(hù)膜，乙醇分子不能進(jìn)入其中；濃度過低，殺菌力減弱。而滅菌除殺死營養(yǎng)體外，還必須殺死芽抱和抱子 滅菌消毒的原理，就是通過一定理化手

11、段，使病原菌蛋白質(zhì)變性，失去生命活性。(三)微生物的純化培養(yǎng)技術(shù)1常用細(xì)菌培養(yǎng)基一一蛋白豚培養(yǎng)基配制流程:2.純化大腸桿菌I .4建餐®ft朋褥®煮:，溶化瓊脂時(shí)要控制火力的大小并不1斷攪拌，以免培養(yǎng)基溢出或燒焦；(1(2|注意：I可用高壓蒸汽滅菌法；:用干熱滅菌法時(shí)溫度160170 c,否則易引起報(bào)紙等燃燒)；滅菌再僦平板也可先倒；ImL Iml IrfttlimlImtL IniL:注意:-芬衰至冠管時(shí)1O一.n*劃州方法示童8?,?:注意：頗養(yǎng)基：!完全溶化后應(yīng)補(bǔ)加蒸儲水，以保持題生3勺用量一，八尸、節(jié)板劃線¥:一平氤底士府福椅棉和稀釋過 y -計(jì)算程發(fā)生在

12、w鏟五甲體平板表典寶化 的劃線和浙強(qiáng)禮。在劃線殺高度的1/5I _J910nr稀釋涂勺年牛肉質(zhì)則述血m曲糠逐概減少，展后司 1揖紙上稱量管蛋白10 JW?速劃線操作時(shí)注意:注意:緝 的pH不同，因此在熔| 化房，必須用 NaOH，巴吧一任LpH倒礪即)燒杯口要通過酒精燈火焰滅菌。平最冷凝詰要將平板倒置，以確保拿放方便，同時(shí)避免水分蒸發(fā), 以利微生物生長，也可防止皿蓋上凝結(jié)的水滴滴入培養(yǎng)基，影響 pH ;其次防止細(xì)菌透過皿底、皿蓋的縫隙，落在培養(yǎng)基上。倒平板時(shí)，不能將培養(yǎng)基濺在皿底與皿蓋之間，以防止雜菌滋生,污染培養(yǎng)荃 (1)用接種環(huán)取菌種之前、每次劃線之前和劃線結(jié)束都要進(jìn)行灼燒滅菌，灼燒后要在

13、酒精燈附近冷卻后再操作;(第一次操作：殺死接種環(huán)上原有的微生物。每次劃線之前：殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端。劃線結(jié)束后：殺死接種環(huán)上殘存的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者 )(2)劃線時(shí)不要劃破培養(yǎng)基，如果采用分段劃線法操作從第二次操作應(yīng)總在上一次劃線末端開始，首尾區(qū)不能相連;(3)操作必須始終在酒精燈火焰旁進(jìn)行。涂布操作時(shí)注意:（1）配制系列梯度稀釋液時(shí)，所用的試管和移液管均需滅菌，必須用無菌水配制；（2）涂布器用 70%的酒精消毒，多余酒精在燒杯中滴盡，沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰引燃。不要將過熱的涂布器放入盛有酒精的燒杯中，以免引燃其中

14、的酒精；（3）配制系列梯度稀釋液和轉(zhuǎn)移菌液以及涂布過程等必須都在酒精燈火焰旁進(jìn)行，移液管頭不能接觸任何物體3 .菌種的保存對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法。注意：菌種保藏的原理是：低溫、干燥和隔絕空氣，使微生物代謝能力和繁殖能力降低。生微生物溫度：1822 c不同菌種的保藏方法因不同菌種而異。需氧型，必須俅他有方在初軀藏腳輟儲羯需氟牝阿明幽琳侏需劇麻蛋白蜥情看蕤傷頓溶,形成），二者后期均需要光照（有利葉綠素形成和光合作用）需提供活體組織等非人工培養(yǎng)基，如病毒需提供活雞月K意：分用;使用順序不同-結(jié)果不同口出&以:土壤兄納例賽嘿M(fèi)

15、迅細(xì)巧If器弁但不分化植物的種類、年齡、保存時(shí)間1 1海照II®雄聶素，后生長索，1出胞既刀衣也刀化1,同呼他七:：.分化頻率提高）畫幣H幅唾雨福 君污染） （高.利用此后化，帚樨的形成消毒原因：大部分來息田間原則：人為提供有卻南目的彘攤增 同時(shí)抑制出 果膠酶糊娜磁"審目Mg*菌種的鑒定- 潘液;密癖卻隨速或同副）si低：利用芽的分化，抑制根的形成；注荼-培養(yǎng)一株髡墓酶細(xì)觸脆酣酶等£最掰螂髓黛解噩魁爨瞬趣!轆野及胞間層;。翼郎誕藕贛發(fā)。缺點(diǎn)：不能反分而菌后沾菌。:；聿 加里臨至植物、霉菌、酵母菌嚼葡胞均能產(chǎn)生果膠酶，但通常劭泌峭峰星觸謔酶二，精毒需雛長的一個(gè)菌落，

16、來得于如品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過一:! 1惜田棒制市夫約含有多少活菌:htJLM方法：檢測培養(yǎng)基 pH 一下溝鐫巡蟀廠 rihOltif*!養(yǎng)，如果順序顛倒，曲好琛、目匕測出樣品中大約含有多少活菌。口那聽醐煲 物：碗¥曾L-*統(tǒng)并平板上市幡虻i舌性大小成正用的mPt堿性增高，叩 能源和維持滲透壓）、維生素、氨基酸、 有機(jī)添加劑（生長因子）、激素pH: 5.8左右咨菌：高壓蒸汽滅菌注意：儲為降低工作量、減少誤差，可通過配制母；灼燒滅菌。 在意：將菊花莖段 ；插入培養(yǎng)基 ；時(shí)不要倒插既有分裂也有分化題曲脈曬能力低，對 不良環(huán)境耐受力差，一定要在 保溫、保濕一段時(shí)間以增強(qiáng)適 應(yīng)力方法：流

17、水清洗根部，移栽至消過毒的蛭石或珍珠巖環(huán)境培養(yǎng)I III 4II II I i即卻胭而至髭桂一（嵩皮芬花而藺旃施:石瓦看爰著百克兩萬 的潘籥 ）汪丹每個(gè)探究實(shí)躺的設(shè)計(jì)思路果隨酶濃圖增加，果汁如制備水果泥注意.蘋菜、-橙子和葡萄等水果都可以作為反應(yīng)物；了某不用去皮；如用蘋菜為原材料二股可按每下中等天才 的蘋果加水100200 mL的比例進(jìn)行攪拌，獲得稀的蘋果泥水果泥、果膠酶分別水浴保溫hi水果泥、果膠酶混合水浴保溫:每個(gè)保究實(shí)驗(yàn)的氈、記錄果汁重 目/喂差值過濾出果汁U7E7I圃工-將其泥和果膠酶分蓑在茅向的試管何 1溫處理：-向以保證底物甜醯花混苔時(shí)!勺溫度基相同的：避免了果泥和果膠酶混合時(shí)影響

18、混合物的溫度，從而影響果膠酶活性的問題-*;原因:-江果泥和果膠酶有克分的反應(yīng)時(shí)間一一融的體積大小來判斷果膠酶活性的高低原因：膠酶將果膠分露為小分子物質(zhì)，小分子物質(zhì)可以通過濾紙，因此蘋果汁的體積大小反應(yīng)了果找最適范圍，再小梯度裁讖蹦端翻牌膠的能力。在不MHMWffl量。pH下，果膠酶的活性越大，蘋果汁的體積就越大二白二的規(guī).，|契更破;（m公工重盛義：果泥量、果膠酶的濃度和用量、水浴時(shí)間和混合物的 平酶濃.郵足實(shí)悟硒出現(xiàn)色實(shí)塞原鋰;廠螯白質(zhì)由物化理性質(zhì):形狀、大小果胸懦聲口多少、聲解生咋附h質(zhì)、卡和力等千差萬加一他提取和分離各種日質(zhì)pH等所有其他條件（應(yīng)控制為相同）(1) 膠色譜觸鋁搠己色譜法

19、）:（1HK 埋：分子量大叫分子迎過多扎凝膠顆粒陽問隙，路程俎，流動快；分子量小刀分子穿過多扎凝膠顆粒內(nèi)部，路程長，流動慢。(2)(3)(4)凝膠材料：多孔性，多糖類化合物，如葡聚糖、瓊脂糖。分離過程：混合物上柱-洗脫-大分子流動快、小分子流動慢-收集大分子-收集小分子洗脫：從色譜柱上 端不斷注入緩沖液，促使蛋白質(zhì)分子的差速流動。作用：分離蛋白質(zhì)，測定生物大分子分子量，蛋白質(zhì)的脫鹽等。2 .緩沖溶液（1）原理：由弱酸和相應(yīng)的強(qiáng)堿弱酸鹽組成（如H2CO3NaHCO3, NaH2PO”Na2HPO4等），調(diào)節(jié)酸和鹽的用量，可配制不同pH的緩沖液。（2）緩沖液作用：抵制外界酸、堿對溶液 pH的干擾而

20、保持 pH穩(wěn)定。3 .凝膠電泳法：（1）原 理：不同蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì)、電量、形狀和大小不同，在電場中受到的作用力大小、方向、阻力不同，導(dǎo)致不同蛋白質(zhì)在電場中的運(yùn)動方向和 運(yùn)動速度不同。（2）分離方法：瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。 （3）分離過程：在一定 pH下，使蛋白質(zhì)基團(tuán)帶上正電或負(fù)需斕鋪踹緇意事項(xiàng)SDS,1成“蛋白質(zhì)SDS復(fù)合物”，使蛋白質(zhì)遷移速率僅取決于分子1 .2.，胡蘿卜素基礎(chǔ)知葉紅細(xì)胞;細(xì)胞破裂）Q （Al，有機(jī)落荊的特森留薪砥取 ,焉品蒸發(fā)出耳除扁淵出原理：根據(jù)胡蘿萃取劑的選擇血紅蛋白胡蘿卜素的提取 過程：米集血樣（加檸檬最剛叨正皿淑凝命亍寺才提速奏展段心（防止白細(xì)胞沉

21、淀）-吸取血漿生理鹽水洗滌（防紅細(xì)胞破裂）-緩慢攪拌（防止紅細(xì)胞破裂釋）低速短時(shí)離心-重復(fù)洗滌三次-上清液中無黃色，表明紅細(xì)胞已有機(jī)溶劑萃取的方法來提取胡蘿卜素。即將粉碎、干燥的植物原料用有機(jī)溶劑浸泡，使胡蘿卜素溶而1 ；而商南永二而一 一40%坂枳的中羊二裱另援施I揄砰目的：紅細(xì)胞破裂，釋放出血紅蛋白1）有機(jī)涔劑的分類3回（咧啰啰西迦不螂液產(chǎn)蹩啊3色性®M蚪闞堡:第型理羋|型”離_分離血紅蛋白溶液疝較：離心（2000r/min ）目的：分離血紅蛋白和其他雜質(zhì)結(jié)果2.粗分離第1層（最上層）：甲苯層（無色透明）第2層（中上層）：脂溶性物質(zhì)的沉淀層（白色薄層固體）第3層（中下層）：血紅蛋白的水溶液層（紅色透明液體） 第4層（最下層）：雜質(zhì)的沉淀層（暗紅色）;原理：透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而將大分子保留在袋內(nèi)(2)選取萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑的原則具有較高的熔點(diǎn)，能夠充分溶解胡蘿卜素，并且不與水混溶；萃取效率高；對人無毒、不易燃、易與產(chǎn)品分離、不影響產(chǎn)品質(zhì)量萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑應(yīng)該具有較高的沸點(diǎn)，能夠充分溶解胡蘿卜素且不與水混溶。另外，還要考慮對人體是否有毒性等安全問題。因乙