陳民輝(江蘇CFDA)—仿制藥質(zhì)量一致性評價——固體口服制劑的溶出曲線方法學(xué)研究

1、LOGO仿制藥質(zhì)量一致性評價仿制藥質(zhì)量一致性評價固體口服制固體口服制劑的溶出曲線方法學(xué)研究劑的溶出曲線方法學(xué)研究 2014年年12月月江蘇省食品藥品監(jiān)督檢驗研究院江蘇省食品藥品監(jiān)督檢驗研究院 陳民輝陳民輝背景背景溶出曲線研究的溶出曲線研究的作用作用 為仿制產(chǎn)品體內(nèi)生物等效性試驗提供研究指導(dǎo)為仿制產(chǎn)品體內(nèi)生物等效性試驗提供研究指導(dǎo)1234用于用于剖析剖析參比制劑參比制劑的內(nèi)在技術(shù)特點的內(nèi)在技術(shù)特點用于用于仿制藥與被仿制仿制藥與被仿制藥質(zhì)量的一致性藥質(zhì)量的一致性評價評價建立用于質(zhì)量控制的溶出度試驗方法建立用于質(zhì)量控制的溶出度試驗方法仿制藥質(zhì)量一致性評價的技術(shù)指導(dǎo)原則仿制藥質(zhì)量一致性評價的技術(shù)指導(dǎo)原

2、則 12口服固體制劑的參比制劑確立指導(dǎo)原則口服固體制劑的參比制劑確立指導(dǎo)原則普通口服固體制劑溶出曲線測定與比較指導(dǎo)原則普通口服固體制劑溶出曲線測定與比較指導(dǎo)原則參比制劑的選擇參比制劑的選擇原研產(chǎn)品原研產(chǎn)品.遴選遴選仿制產(chǎn)品仿制產(chǎn)品.溶出曲線評價方法的建立溶出曲線評價方法的建立選定參比選定參比參比考察參比考察確立方法確立方法予試驗予試驗查閱文獻(xiàn)查閱文獻(xiàn)總體評估總體評估適度的區(qū)分力適度的區(qū)分力產(chǎn)品背景：酒石酸產(chǎn)品背景：酒石酸美托洛爾是世界十大暢銷藥品之一，全球銷量美托洛爾是世界十大暢銷藥品之一，全球銷量最大的最大的受體阻滯劑，為治療高血壓、心絞痛的首選藥物。受體阻滯劑，為治療高血壓、心絞痛的首選藥

3、物。于于19751975年由年由ASTRAASTRA公司研制開發(fā)，商品名公司研制開發(fā)，商品名“倍他樂克倍他樂克”。參比制劑：參比制劑：為阿斯利康制藥有限公司無錫工廠生產(chǎn)提供的酒石酸為阿斯利康制藥有限公司無錫工廠生產(chǎn)提供的酒石酸美托洛爾普通片，包括美托洛爾普通片，包括25mg 25mg 、50mg50mg和和100mg100mg三個規(guī)格，每規(guī)三個規(guī)格，每規(guī)格格3 3個批次個批次。案例案例酒石酸酒石酸美托洛爾片溶出曲線方法的建立美托洛爾片溶出曲線方法的建立酒石酸美托洛爾片樣品信息酒石酸美托洛爾片樣品信息唯一號批號規(guī)格片/盒含量（）JS2012YT0408121005125mg20100.2 JS2

4、012YT0409121005225mg20100.0 JS2012YT0450121005325mg2099.7JS2012YT0410121001650mg2099.8JS2012YT0411121001850mg2099.7JS2012YT0412121001950mg2098.8JS2012YT076660001223100mg220100JS2012YT076760001345100mg30099JS2012YT076860001346100mg3001001 1、原研產(chǎn)品的溶出度測定方法原研產(chǎn)品的溶出度測定方法2 2、美國美國FDAFDA溶出曲線數(shù)據(jù)庫、日本橙皮書溶出曲線數(shù)據(jù)庫、日

5、本橙皮書、各國藥典及其他各國藥典及其他法定標(biāo)準(zhǔn)方法法定標(biāo)準(zhǔn)方法3 3、原研產(chǎn)品的技術(shù)特點及仿制產(chǎn)品的臨床療效差異性原研產(chǎn)品的技術(shù)特點及仿制產(chǎn)品的臨床療效差異性4 4、安全性相關(guān)的技術(shù)指標(biāo)、安全性相關(guān)的技術(shù)指標(biāo)查閱產(chǎn)品相關(guān)文獻(xiàn)查閱產(chǎn)品相關(guān)文獻(xiàn)酒石酸美托洛爾片國內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)對比表酒石酸美托洛爾片國內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)對比表項目項目ChP 2010BP 2010USP 35JP XVI性狀性狀白色片/鑒別鑒別(1) 化學(xué)鑒別(1) IR鑒別(1) IR鑒別UV-Vis鑒別(2) HPLC鑒別(2) TLC鑒別(2) UV-Vis鑒別(3) UV-Vis鑒別(3) HPLC鑒別檢查檢查有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)HPLC法。限度

6、：單個最大雜質(zhì)0.3%，雜質(zhì)總量0.5%HPLC法。限度：單個最大雜質(zhì)0.3%，雜質(zhì)總量0.5%/含量均勻度含量均勻度25mg規(guī)格有此要求/符合規(guī)定符合規(guī)定溶出度溶出度轉(zhuǎn)籃法，100轉(zhuǎn)/分，氯化鈉的鹽酸溶液（取氯化鈉，加鹽酸7ml，加水至1000ml）900ml或500ml為溶出介質(zhì)，30分鐘取樣，274nm測定。限度：75%/轉(zhuǎn)籃法，100轉(zhuǎn)/分，不加酶的人工胃液900ml為溶出介質(zhì)，30分鐘取樣，275nm測定。限度：75%槳板法，50轉(zhuǎn)/分，水900ml為溶出介質(zhì)，30分鐘取樣，HPLC法測定。限度：80%其他其他符合片劑通則符合片劑通則符合片劑通則符合片劑通則含量測定含量測定HPLC法

7、。限度：95.0-105.0%UV法，無水乙醇為溶劑，274nm測定，對照品法。限度：95.0-105.0%HPLC法。限度：90.0-110.0%HPLC法。限度：93.0-107.0%結(jié)構(gòu)式：結(jié)構(gòu)式：解離常數(shù)（解離常數(shù)（2525）：）： pKa pKa 9.79.73737在各溶出介質(zhì)中的溶解度：在各溶出介質(zhì)中的溶解度：pH1.2pH1.2：1.0g/ml1.0g/ml以上以上pH4.0pH4.0：1.0g/ml1.0g/ml以上以上pH6.8pH6.8：1.0g/ml1.0g/ml以上以上水：水：1.0g/ml1.0g/ml以上以上酒石酸美托洛爾理化性質(zhì)酒石酸美托洛爾理化性質(zhì)日本橙皮書收

8、載情況：日本橙皮書收載情況：溶出度試驗條件：槳法溶出度試驗條件：槳法/50/50轉(zhuǎn)轉(zhuǎn) 20mg A A型（阿司利康）型（阿司利康） 20mg B B型（諾華）型（諾華） 40mg A A型（阿司利康）型（阿司利康） 40mg B B型（諾華）型（諾華）1 1、解離常數(shù)（解離常數(shù)（pKapKa）的測定）的測定2 2、pH-pH-溶解溶解度度曲線圖的測定曲線圖的測定3 3、溶液穩(wěn)定性測定溶液穩(wěn)定性測定原料藥原料藥理化性質(zhì)的測定理化性質(zhì)的測定采用電位采用電位pHpH滴定法，通過滴定過程中電位的變化，由儀器判斷終滴定法，通過滴定過程中電位的變化，由儀器判斷終點。根據(jù)水溶液中共軛酸堿對應(yīng)活度點。根據(jù)水溶

9、液中共軛酸堿對應(yīng)活度pH=pKa+log(pH=pKa+log(A A/ /B B),),當(dāng)當(dāng)A A= =B B，pH=pKapH=pKa，該值對應(yīng)于半中和電位點的，該值對應(yīng)于半中和電位點的pHpH，電位滴定，電位滴定儀工作站可從滴定曲線上自動評估得到強(qiáng)電離藥物的電離常儀工作站可從滴定曲線上自動評估得到強(qiáng)電離藥物的電離常數(shù)。數(shù)。結(jié)果測得酒石酸美托洛爾電解常數(shù)結(jié)果測得酒石酸美托洛爾電解常數(shù)pKapKa為為9.79.7，與日本橙皮書收載，與日本橙皮書收載結(jié)果一致。結(jié)果一致。酒石酸美托洛爾酒石酸美托洛爾pKapKa的測定的測定酒石酸美托洛爾溶解度測定結(jié)果酒石酸美托洛爾溶解度測定結(jié)果批號批號溶劑溶劑稱

10、稱樣（樣（g）體積體積（ml）現(xiàn)象現(xiàn)象606147水水1.001.00完全完全溶解溶解pH 1.21.001.00完全溶解完全溶解pH 2.01.001.00完全溶解完全溶解pH 3.01.001.00完全溶解完全溶解pH 4.01.001.00完全溶解完全溶解pH 5.01.001.00完全溶解完全溶解pH 6.01.001.00完全溶解完全溶解pH 6.81.001.00完全溶解完全溶解pH 7.01.001.00完全溶解完全溶解pH 8.01.001.00完全溶解完全溶解1 1、按照原料藥理化性質(zhì)的測定給出酸性、中性、堿性和難溶按照原料藥理化性質(zhì)的測定給出酸性、中性、堿性和難溶性藥物等不

11、同類別進(jìn)行優(yōu)化選擇性藥物等不同類別進(jìn)行優(yōu)化選擇2 2、對于對于“pHpH值依賴型藥物值依賴型藥物”的溶出介質(zhì)選擇的溶出介質(zhì)選擇3 3、腸溶型藥物的的溶出介質(zhì)選擇腸溶型藥物的的溶出介質(zhì)選擇溶出條件的選擇溶出條件的選擇1 1、酸性藥物的普通制劑：酸性藥物的普通制劑：pHpH值分別為值分別為1.01.0或或1.21.2、5.5-6.55.5-6.5和和6.8-7.56.8-7.5、水。、水。2 2、中性或堿性藥物中性或堿性藥物/ /包衣普通制劑：包衣普通制劑：pHpH值分別為值分別為1.01.0或或1.21.2、3.0-3.0-5.05.0和和6.86.8、水。、水。3 3、難溶性藥物普通制劑：難溶

12、性藥物普通制劑：pHpH值分別為值分別為1.01.0或或1.21.2、4.0-4.54.0-4.5和和6.86.8、水、水4 4、腸溶制劑：腸溶制劑：1.01.0或或1.21.2、6.0 6.0 、6.86.8和水和水溶出溶出介質(zhì)介質(zhì)的選擇的選擇裝置的選擇裝置的選擇槳法法籃法籃法槳法槳法+沉降籃沉降籃溶出裝置溶出裝置方法條件方法條件介質(zhì)體積介質(zhì)體積轉(zhuǎn)速轉(zhuǎn)速取樣時間點取樣時間點500ml900ml1000ml 槳槳法法 50 507575轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)/ /分鐘分鐘籃法籃法7575100100轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)/ /分鐘分鐘5 5、1010、1515、3030、4545、6060、9090、120120、180180、

13、240240、360360、420420、480480、520520、600600分鐘分鐘方法學(xué)驗證：方法學(xué)驗證：專屬性、準(zhǔn)確度、精密度、線專屬性、準(zhǔn)確度、精密度、線性、定量限以及性、定量限以及溶液溶液的穩(wěn)定性等的穩(wěn)定性等。含量測定方法的選擇與驗證含量測定方法的選擇與驗證CP2010usp35JP16JP16擬定的測定方案擬定的測定方案PpH1.2溶出介質(zhì)溶出介質(zhì)900ml900ml 槳法槳法5050轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)/ /分鐘分鐘pH1.2pH1.2、4.04.0、6.86.8、水、水介質(zhì)體積介質(zhì)體積溶出裝置溶出裝置 取樣時間取樣時間5 5、1010、1515、3030、4545、6060、9090、12

14、0120分鐘分鐘 水溶出介質(zhì)的配制：水溶出介質(zhì)的配制： 用水作為溶出介質(zhì)。用水作為溶出介質(zhì)。 pH 1.2pH 1.2溶出介質(zhì)的配制：溶出介質(zhì)的配制： 取取2.0g2.0g氯化鈉和氯化鈉和7.0ml7.0ml鹽酸，加水鹽酸，加水稀釋至稀釋至1000ml1000ml，即得。，即得。 pH 4.0pH 4.0溶出介質(zhì)的配制：溶出介質(zhì)的配制：取取0.05mol/L0.05mol/L醋酸溶液與醋酸溶液與0.05mol/L0.05mol/L醋酸鈉溶液按照醋酸鈉溶液按照16.416.4：3.63.6（V/VV/V）比例混合，即得。）比例混合，即得。 pH 6.8pH 6.8磷酸鹽緩沖液溶出介質(zhì)的配制磷酸鹽

15、緩沖液溶出介質(zhì)的配制: : 取磷酸二氫鉀取磷酸二氫鉀1.7g1.7g和和無水磷酸氫二鈉無水磷酸氫二鈉1.775g1.775g，加水適量使溶解后，再加水定容至，加水適量使溶解后，再加水定容至1000ml1000ml，即得。，即得。四種溶出介質(zhì)的配制方法四種溶出介質(zhì)的配制方法每種溶劑取每種溶劑取3 3片樣品進(jìn)行試驗。片樣品進(jìn)行試驗。1 1、如、如4 4種溶出介質(zhì)在種溶出介質(zhì)在1515分鐘內(nèi)均達(dá)到分鐘內(nèi)均達(dá)到8585時，不用改變?nèi)艹鰲l件時，不用改變?nèi)艹鰲l件，即，即采用該條件采用該條件用于用于溶出曲線測定比較溶出曲線測定比較2 2、如在規(guī)定的時間內(nèi)溶出率達(dá)到如在規(guī)定的時間內(nèi)溶出率達(dá)到8585，并且只要

16、有一種時間略，并且只要有一種時間略長于長于1515分鐘溶出介質(zhì)（以下稱適合的介質(zhì)），分鐘溶出介質(zhì)（以下稱適合的介質(zhì)），即可采用該條即可采用該條件件用于用于溶出曲線測定比較。溶出曲線測定比較。3 3、但當(dāng)參比制劑達(dá)到但當(dāng)參比制劑達(dá)到8585的時間過長時，則應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)追加試的時間過長時，則應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)追加試驗的探討（如介質(zhì)種類的追加、轉(zhuǎn)速的提高、加入表面活性驗的探討（如介質(zhì)種類的追加、轉(zhuǎn)速的提高、加入表面活性劑等），選擇適合的介質(zhì)進(jìn)行比較；劑等），選擇適合的介質(zhì)進(jìn)行比較；預(yù)試驗預(yù)試驗參比制劑中間狀態(tài)批號的選擇方法參比制劑中間狀態(tài)批號的選擇方法正式試驗采用正式試驗采用1212片片/ /批，按照予試驗擬

17、定的方案試驗。批，按照予試驗擬定的方案試驗。1 1、在參比制劑于規(guī)定的時間內(nèi)平均溶出率可達(dá)在參比制劑于規(guī)定的時間內(nèi)平均溶出率可達(dá)8585以上的溶出以上的溶出介質(zhì)中，選取溶出速率最慢的介質(zhì)。如果參比制劑在規(guī)定的介質(zhì)中，選取溶出速率最慢的介質(zhì)。如果參比制劑在規(guī)定的時間內(nèi)平均溶出率均未達(dá)時間內(nèi)平均溶出率均未達(dá)8585時，則選取溶出速率最快的介時，則選取溶出速率最快的介質(zhì)。質(zhì)。2 2、以所選、以所選介質(zhì)介質(zhì)中溶出量約為中溶出量約為70%70%左右時處于中間狀態(tài)的作為中間左右時處于中間狀態(tài)的作為中間狀態(tài)批號。狀態(tài)批號。儀器比對儀器比對機(jī)械校驗機(jī)械校驗系統(tǒng)驗證系統(tǒng)驗證實驗研究實驗研究（1 1） 試驗前將自

18、動溶出儀的管路用水充分清洗，確認(rèn)自動取樣試驗前將自動溶出儀的管路用水充分清洗，確認(rèn)自動取樣器工作正常。器工作正常。（2 2） 將溶出杯按照校驗的編號順序放置，試驗開始前分別測定將溶出杯按照校驗的編號順序放置，試驗開始前分別測定每個溶出杯內(nèi)溶出介質(zhì)的溫度。溶出介質(zhì)的溫度應(yīng)為每個溶出杯內(nèi)溶出介質(zhì)的溫度。溶出介質(zhì)的溫度應(yīng)為37370.20.2范圍內(nèi)。范圍內(nèi)。（3 3） 每批參比樣品按每種溶劑取每批參比樣品按每種溶劑取1212片分兩臺溶出儀平行試驗，片分兩臺溶出儀平行試驗，試驗前稱取每片樣品的片重，依次投入溶出儀進(jìn)行試驗。試驗前稱取每片樣品的片重，依次投入溶出儀進(jìn)行試驗。（4 4） 試驗中注意觀察自動

19、取樣情況，如有異常，及時采用手動試驗中注意觀察自動取樣情況，如有異常，及時采用手動方式補(bǔ)充取樣。注意觀察溶出杯中是否有樣品粘壁、輔料堆方式補(bǔ)充取樣。注意觀察溶出杯中是否有樣品粘壁、輔料堆積現(xiàn)象等。積現(xiàn)象等。試驗操作方案試驗操作方案1、試驗前，對每片樣品稱重、記錄。、試驗前，對每片樣品稱重、記錄。 溶媒的脫氣以及溶出介質(zhì)的配制方法。溶媒的脫氣以及溶出介質(zhì)的配制方法。2、試驗中，對樣品溶出過程的觀察。、試驗中，對樣品溶出過程的觀察。3、實驗結(jié)果的計算評估。、實驗結(jié)果的計算評估。試驗操作試驗操作重復(fù)性試驗與精度評估重復(fù)性試驗與精度評估1 1、同品牌溶出儀間的重復(fù)性試驗、同品牌溶出儀間的重復(fù)性試驗2

20、2、不同品牌溶出儀間的重復(fù)性試驗、不同品牌溶出儀間的重復(fù)性試驗3 3、不同實驗室間的重現(xiàn)性、不同實驗室間的重現(xiàn)性異常結(jié)果的分析處理案例異常結(jié)果的分析處理案例 對濾膜過濾和濾頭取樣兩種方式進(jìn)行考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)濾膜過對濾膜過濾和濾頭取樣兩種方式進(jìn)行考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)濾膜過濾由于溶液循環(huán)和取樣影響極易造成樣品顆粒在濾膜處堆積濾由于溶液循環(huán)和取樣影響極易造成樣品顆粒在濾膜處堆積，導(dǎo)致溶出杯中樣品量減少從而使得樣品溶出降低。我們還，導(dǎo)致溶出杯中樣品量減少從而使得樣品溶出降低。我們還對最后取樣點同時進(jìn)行手動取樣，以考察自動取樣系統(tǒng)是否對最后取樣點同時進(jìn)行手動取樣，以考察自動取樣系統(tǒng)是否存在吸附現(xiàn)象，結(jié)果表明系統(tǒng)

21、無吸附。我們還對同一次溶出存在吸附現(xiàn)象，結(jié)果表明系統(tǒng)無吸附。我們還對同一次溶出過程采取全程手動和自動兩種取樣方式，結(jié)果表明兩種取樣過程采取全程手動和自動兩種取樣方式，結(jié)果表明兩種取樣方式溶出結(jié)果一致。方式溶出結(jié)果一致。不同品牌型號溶出儀的結(jié)果差異原因分析不同品牌型號溶出儀的結(jié)果差異原因分析SOTAX 1L VESSEL specificationSOTAX 1L VESSEL specificationRef No.Ref No.Usp specUsp specI n s p e c t i o n I n s p e c t i o n range range SOTAXSOTAX參數(shù)參數(shù)1 198-10698-10698-10698-106100 +/- 0.2100 +/- 0.22 2160-210160-210160-210160-210200 +/- 0.2200 +/- 0.23 349-5349-5349-5349-5350+/- 0.250+/- 0.2Agilent 1L VESSEL specificationAgilent 1L VESSEL specification溶出曲線測定結(jié)果溶出曲線測定結(jié)果參比制劑篩選結(jié)果參比制劑篩選結(jié)果 根據(jù)試驗結(jié)果，我們選取溶出曲線中間批號的樣品作為參比制根據(jù)試驗