分子生物學(xué)重點(diǎn)

1、基因作圖：指將基因定位于某一特定的染色體上，以及測(cè)定基因在染色體上線(xiàn)性排列的順序與距離。單核苷酸多態(tài)性（SNP）：指發(fā)生在基因組序列中有單個(gè)堿基的變化引起的一種DNA序列變化。DNA芯片：融合分子生物學(xué)與微電子學(xué)等多學(xué)科的高新技術(shù)。在固相支持物表面合成寡核苷酸或DNA片段，與熒光、生物素或放射性核素標(biāo)記的核酸樣品雜交，對(duì)雜交信號(hào)的檢測(cè)分析，得到樣品的遺傳信息。試述人類(lèi)基因組計(jì)劃的4張圖譜人類(lèi)基因組計(jì)劃的4張圖譜包括：遺傳圖譜、物理圖譜、轉(zhuǎn)錄圖譜和序列圖譜遺傳圖譜：是反應(yīng)基因或DNA標(biāo)記在染色體上的相對(duì)位置與遺傳距離的圖譜，它通過(guò)計(jì)算連鎖的遺傳標(biāo)志之間的重組頻率來(lái)確定它們之間的相對(duì)距離。物理圖譜

2、：是以定位的序列標(biāo)記位堤岸STS作為路標(biāo)，以DNA實(shí)際長(zhǎng)度即bp kb Mb（百萬(wàn)堿基對(duì)）為圖距的基因組圖譜。首先利用限制性?xún)?nèi)切酶將染色體切成片段，再根據(jù)重疊序列把片段連接成染色體，確定遺傳標(biāo)志之間的物理距離。轉(zhuǎn)錄圖譜：又稱(chēng)cDNA圖譜或表達(dá)序列標(biāo)記圖譜，一個(gè)成熟mRNA被全被反轉(zhuǎn)錄成的雙鏈DNA叫全長(zhǎng)cDNA，它包含了mRNA的編碼區(qū)及其上游的非編碼區(qū)（5'-UTR）和下游的非編碼區(qū)（3'-UTR），要獲得全長(zhǎng)cDNA難度較大，經(jīng)常只能獲得一個(gè)片段。長(zhǎng)度為300-500bp的部分cDNA通常稱(chēng)為EST，EST可作為某一特定mRNA或基因的代表。將3'-UTR的EST序

3、列進(jìn)行RH定位，即可構(gòu)成由基因組成的EST圖。序列圖譜：是人類(lèi)基因組計(jì)劃的終極目標(biāo)，序列分析是采用一個(gè)區(qū)域的DNA的片段重疊群使測(cè)序工作不斷延伸，其間的STS則被用作任何兩個(gè)片段間的重疊區(qū)域，使分別被測(cè)的短序列進(jìn)行正確的拼接，最后獲得DNA全序列圖譜。試述DNA多態(tài)性分析的主要技術(shù)及原理 限制片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）技術(shù)：依據(jù)DNA堿基序列的改變導(dǎo)致限制性?xún)?nèi)切酶位點(diǎn)的改變，從而引起基因組DNA酶切片段大小的差異。 PCR：能特異性擴(kuò)增DNA鏈上的有兩端引物所界定的某一片斷，用同一引物去擴(kuò)增不同人的基因組DNA，可以得到在染色體上特定位置的DNA片段，分析這些片段，了解基因組的個(gè)體特征。試述原

4、位PCR的基本步驟有哪些 固定細(xì)胞，盡量保存細(xì)胞固有的形態(tài)與結(jié)構(gòu) 蛋白酶消化：用胃蛋白酶、蛋白酶K等消化固定后的蛋白質(zhì)交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)屏障，使PCR反應(yīng)試劑與靶DNA充分接觸 原位PCR擴(kuò)增 產(chǎn)物檢測(cè)：直接法可用放射自顯影、免疫組織化學(xué)或熒光檢測(cè)等，間接法需用特異性標(biāo)記探針進(jìn)行引物雜交半保留復(fù)制：DNA復(fù)制時(shí)，解開(kāi)的雙鏈各自作為模板，用以合成新的互補(bǔ)鏈。在子代DNA雙鏈中，一股鏈來(lái)自親代，另一股是新合成的。這種復(fù)制方式叫半保留復(fù)制。岡崎片段：在復(fù)制過(guò)程中，隨從鏈的合成是分段復(fù)制的，這些在復(fù)制過(guò)程中出現(xiàn)的不連續(xù)片段稱(chēng)為岡崎片段。領(lǐng)頭鏈：指連續(xù)合成的子鏈，其延伸方向與解鏈方向是相同的。半不連續(xù)復(fù)制：復(fù)制時(shí)

5、，新合成的兩條DNA單鏈中，一條是連續(xù)合成的，另一條是不連續(xù)進(jìn)行的，這種復(fù)制方式稱(chēng)為半不連續(xù)復(fù)制。逆轉(zhuǎn)錄：以RNA為模板合成DNA的過(guò)程。簡(jiǎn)述真核生物DNA聚合酶的種類(lèi)和功能真核生物的DNA聚合酶有等五種。-DNA聚合酶和-DNA聚合酶是復(fù)制時(shí)主要的酶；-DNA聚合酶的功能不清；-DNA聚合酶是線(xiàn)粒體DNA的復(fù)制酶；-DNA聚合酶的功能是校讀、修復(fù)和填補(bǔ)缺口。簡(jiǎn)述逆轉(zhuǎn)錄酶有哪些酶活性逆轉(zhuǎn)錄酶是多功能酶：有RNA知道的DNA聚合酶活性，可沿53方向合成DNA，并需要引物提供3-OH具有RNA酶H（RNase H）活性，能特異水解RAN-DNA雜交體上的RNA；具有DNA指導(dǎo)的DNA聚合酶活性，以

6、逆轉(zhuǎn)錄合成的單鏈DNA為模板合成互補(bǔ)DNA鏈?；镜模ńM成性）基因表達(dá)：對(duì)某些基因產(chǎn)物，在生命全過(guò)程都是必須的或必不可少的。例如管家基因，他們?cè)谝粋€(gè)生物個(gè)體的幾乎所有細(xì)胞中都持續(xù)表達(dá)或變化很小。組成性表達(dá)的基因較少受環(huán)境因素影響。操縱子：是原核生物絕大多數(shù)基因按功能相關(guān)性成簇地串聯(lián)、密集于染色體上，共同組成的轉(zhuǎn)錄單位。一個(gè)操縱子通常由一個(gè)啟動(dòng)序列、一個(gè)操縱序列和數(shù)個(gè)功能相關(guān)基因組成。順式作用元件：是指可影響自身基因表達(dá)活性的真核DNA序列。根據(jù)順式作用元件在基因中的位置、轉(zhuǎn)錄激活作用的性質(zhì)既發(fā)揮作用的方式，可將真核基因的順式作用元件分為啟動(dòng)子、增強(qiáng)子及沉默子等。舉例說(shuō)明什么事管家基因及其基因表

7、達(dá)特點(diǎn)管家基因是一類(lèi)組成性表達(dá)基因。他們的表達(dá)產(chǎn)物在生命全過(guò)程都是必須的，且在一個(gè)生物個(gè)體的各個(gè)生長(zhǎng)階段、幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)。管家基因的表達(dá)量較少受環(huán)境因素的影響或者影響很少。例如：3-磷酸甘油醛脫氫酶（3-PGDH）或-actin的編碼基因，都是屬于這一類(lèi)基因。簡(jiǎn)述真核生物在翻譯水平上的調(diào)控主要體現(xiàn)在如下三個(gè)環(huán)節(jié)：對(duì)翻譯起始的調(diào)控：包括阻遏蛋白的調(diào)控、翻譯起始因子的功能調(diào)控、起始密碼子上游非編碼區(qū)5AUG對(duì)翻譯的調(diào)控作用、mRNA5端非編碼區(qū)長(zhǎng)度對(duì)翻譯的影響等4個(gè)方面 mRNA穩(wěn)定性的調(diào)節(jié) 小分子RNA對(duì)翻譯水平的影響簡(jiǎn)述基因表達(dá)的時(shí)空性即基因表達(dá)的時(shí)間特異性和空間特異性。時(shí)間特異性：又

8、稱(chēng)階段特異性，是指單細(xì)胞或多細(xì)胞生物，某一特定基因的表達(dá)嚴(yán)格按特定的時(shí)間書(shū)序發(fā)生，或隨感染、生長(zhǎng)階段而變化，或與細(xì)胞分化、胚胎或個(gè)體發(fā)育階段相一致。空間特異性：對(duì)多細(xì)胞生物個(gè)體而言，在某一發(fā)育、生長(zhǎng)階段，同一基因產(chǎn)物在不同的組織器官表達(dá)多少是不一樣的；在同一生長(zhǎng)階段，不同的基因表達(dá)產(chǎn)物在不同的組織、器官分布也不完全相同。因此，基因表達(dá)的空間特異性就是指某種基因產(chǎn)物在個(gè)體中按不同組織空間順序出現(xiàn)的規(guī)律。由于這種空間分布的差異是由細(xì)胞在器官的分布決定的，故又稱(chēng)細(xì)胞特異性或組織特異性。載體：即基因載體，或稱(chēng)克隆載體，是在基因工程中為“攜帶”外源DNA、實(shí)現(xiàn)外源DNA的無(wú)性繁殖或表達(dá)有意義的蛋白質(zhì)所采

9、用的一些DNA分子，具有自我復(fù)制和表達(dá)功能。因此，根據(jù)載體的功能和應(yīng)用目的，可將其分為克隆載體和表達(dá)載體。Northern印跡雜交：是指RNA樣品經(jīng)電泳分離后轉(zhuǎn)移到固相支持物上，然后與標(biāo)記的核酸探針進(jìn)行固液相雜交，檢測(cè)RNA（主要是mRNA）的方法。cDNA文庫(kù)：以mRNA為模板，利用逆轉(zhuǎn)錄酶合成與mRNA互補(bǔ)的DNA，即cDNA，再?gòu)?fù)制成雙鏈cDNA片段，與適當(dāng)載體連接后轉(zhuǎn)入受體菌。不同細(xì)菌包含了不同mRNA為模板的cDNA分子或片段，這樣生長(zhǎng)的全部細(xì)菌所攜帶的各種cDNA分子或片段就代表了整個(gè)組織或細(xì)胞表達(dá)的各種mRNA信息，即cDNA文庫(kù)?；蛟\斷：在基因水平上對(duì)疾病或人體狀態(tài)進(jìn)行診斷的

10、一種新的診斷疾病的方法，它包括產(chǎn)前診斷。DNA指紋：1985年，英國(guó)學(xué)者發(fā)現(xiàn)人類(lèi)基因組中存在高度可變的小衛(wèi)星區(qū)域。在同一酶降解物的Southern印跡圖上，同一個(gè)體的不同組織來(lái)源的DNA的譜帶完全一致；而不同個(gè)體之間（除非同卵雙生）譜帶都不同，如同人的指紋一樣具有高度個(gè)體特異性。因此，這種Southern印跡圖稱(chēng)為DNA指紋或基因指紋。RFLP：是指基因突變可能導(dǎo)致基因上某一限制酶的丟失或其相對(duì)位置發(fā)生改變，以此限制酶消化突變的DNA時(shí)，酶切片段的長(zhǎng)度和數(shù)量將發(fā)生變異?；蛑委煟菏怯没蛑委熂膊?，即把外界的正常基因或治療基因，通過(guò)載體轉(zhuǎn)移到人體的靶細(xì)胞，進(jìn)行修飾或表達(dá)、治療或改善疾病的一種手段

11、?；蛑脫Q：或稱(chēng)基因矯正，是將特定的目的基因?qū)胩囟?xì)胞，通過(guò)定位重組，已導(dǎo)入的正?；蛑脫Q基因組內(nèi)原有的缺陷基因?；蚋深A(yù)：是指采用特定的方式抑制某個(gè)基因的表達(dá)，或通過(guò)破壞某個(gè)基因而使之不能表達(dá)，已達(dá)到治療疾病的目的。DNA芯片技術(shù)：把多種已知序列的DNA排列在一定面積的固體支持物上，可以同時(shí)對(duì)樣品中多種類(lèi)核算進(jìn)行檢測(cè)和分析，這種技術(shù)稱(chēng)為DNA點(diǎn)陣或者DNA芯片技術(shù)、DNA微點(diǎn)陣技術(shù)。通過(guò)計(jì)算機(jī)控制點(diǎn)樣和圖像掃描分析硬件和軟件的支持，可以在小面積的硅片或其他支持材料上固定多達(dá)幾萬(wàn)種探針，可以對(duì)樣品中海量的雜交信號(hào)進(jìn)行快速的同時(shí)分析。微衛(wèi)星：基因組DNA中存在一類(lèi)特殊的數(shù)目可變的串聯(lián)重復(fù)多態(tài)性

12、，其中有些串聯(lián)重復(fù)的核心單元僅由2個(gè)堿基組成，稱(chēng)為微衛(wèi)星?；蛟\斷的基本途徑：根據(jù)臨床診斷的初步結(jié)論進(jìn)行基因診斷，可以直接探測(cè)基因結(jié)構(gòu)是否存在突變基因檢測(cè)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA是否表達(dá)異常?；蛟\斷的基本技術(shù)和方法：DNA探針技術(shù)、PCR技術(shù)及DNA探針與PCR結(jié)合的技術(shù)。試論基因診斷方法與傳統(tǒng)疾病診斷方法的區(qū)別與聯(lián)系傳統(tǒng)疾病的診斷方法可以稱(chēng)為表型診斷?；蛟\斷與表型診斷的區(qū)別與聯(lián)系如下表基因診斷與傳統(tǒng)診斷方法差別的原因可能如下： 基因探針可以為任何來(lái)源、任何種類(lèi)；序列可以為未知或已知；目標(biāo)可為特定基因或特定基因組合，或者是內(nèi)源性基因或者是外援性基因。因此適應(yīng)性強(qiáng)，診斷范圍廣 被檢查的基因是否處于活

13、化狀態(tài)，故可對(duì)分化階段表達(dá)特異性基因及其異常進(jìn)行檢測(cè)和診斷，這對(duì)腫瘤療效及預(yù)后尤為重要 對(duì)感染性疾病的診斷，能檢查正在生長(zhǎng)或潛伏生長(zhǎng)的病原體，既能明確現(xiàn)行感染，又能明確既往感染。對(duì)不易診斷（如產(chǎn)毒性大腸桿菌）和不能安全培養(yǎng)（如立克次體）者等進(jìn)行基因診斷，擴(kuò)大了實(shí)驗(yàn)室診斷范圍。何為基因治療？試述基因治療的基本策略1 基因治療是指通過(guò)在特定靶細(xì)胞表達(dá)該細(xì)胞本來(lái)不表達(dá)的基因，或采用特定方式關(guān)閉、抑制異?；虮磉_(dá)，達(dá)到治療疾病目的的治療方法。2 基因治療可以通過(guò)兩個(gè)基本策略達(dá)到目的：1） 正常基因取代：可通過(guò)在基因組中轉(zhuǎn)入致病基因的正常等位基因，是之受基因組的正常調(diào)節(jié)和表達(dá)。2） 通過(guò)修飾致病基因中的

14、缺陷，使之恢復(fù)功能，具體方法如下：基因矯正：是指將致病基因的異常堿基進(jìn)行糾正，而保留正常部分基因置換：是指用正?；蛱鎿Q病變基因基因增補(bǔ)：是將目的基因?qū)塍w內(nèi)進(jìn)行表達(dá)，其產(chǎn)物補(bǔ)償缺陷基因的功能或使原有的功能得到加強(qiáng)基因失活：是指特異性封閉或者破壞某些有害基因的表達(dá)基因標(biāo)記：基因治療中，治療基因需要標(biāo)記?；驑?biāo)記實(shí)驗(yàn)是基因治療的前奏。標(biāo)記假定對(duì)患者有治療作用的細(xì)胞，用標(biāo)記試驗(yàn)驗(yàn)證兩個(gè)問(wèn)題：外源基因能否安全的轉(zhuǎn)移到患者體內(nèi)從患者體內(nèi)取出的細(xì)胞能否檢測(cè)到轉(zhuǎn)移基因的存在。排阻柱層析：又稱(chēng)凝膠過(guò)濾層析法或分子篩方法，主要是根據(jù)蛋白質(zhì)的大小和形狀，及蛋白質(zhì)的質(zhì)量進(jìn)行分離和純化。酵母雙雜交系統(tǒng)：酵母雙雜交技

15、術(shù)作為發(fā)現(xiàn)和研究在活細(xì)胞體內(nèi)的蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間的相互作用的技術(shù)平臺(tái)，在近幾年來(lái)得到了廣泛運(yùn)用。鑒定兩個(gè)蛋白質(zhì)分子之間是否發(fā)生特異相互作用的有效手段。酵母雙雜交系統(tǒng)是在真核模式生物酵母中進(jìn)行的，研究活細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)相互作用，對(duì)蛋白質(zhì)之間微弱的、瞬間的作用也能夠通過(guò)報(bào)告基因的表達(dá)產(chǎn)物敏感地檢測(cè)得到，它是一種具有很高靈敏度的研究蛋白質(zhì)之間關(guān)系的技術(shù)。 蛋白質(zhì)組學(xué)：是指對(duì)一種細(xì)胞或一種組織再某種正?；虍惓l件下存在的所有蛋白質(zhì)的定性和定量分析的研究思路。簡(jiǎn)述離子交換柱層析的基本原理離子交換層析是依據(jù)物質(zhì)的帶電性質(zhì)的不同來(lái)進(jìn)行分離純化的，是分離純化蛋白質(zhì)等生物大分子的一種重要手段。不同蛋白質(zhì)所帶電荷的凈

16、值是不同的，所以每一種蛋白質(zhì)結(jié)合在樹(shù)脂顆粒上的緊密程度也是有差異的。離子交換劑是通過(guò)化學(xué)鍵合的方法向惰性支持物上連接可解離的化學(xué)機(jī)團(tuán)后的產(chǎn)物。可認(rèn)為的選擇性地使其帶有正電荷或負(fù)電荷。帶正電荷的粒子交換劑稱(chēng)為陰離子交換劑，反之，稱(chēng)為陽(yáng)離子交換劑。通過(guò)改變離子強(qiáng)度或（和）PH，結(jié)合在樹(shù)脂上的蛋白質(zhì)分子將根據(jù)各自結(jié)合的緊密程度依次分批地從離子交換劑上先后被洗脫下來(lái)。簡(jiǎn)述二維聚丙烯酰胺凝膠電泳（2D-PAGE）的基本原理二維聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)結(jié)合了等電聚焦技術(shù)（根據(jù)蛋白質(zhì)等電點(diǎn)進(jìn)行分離）以及SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)（根據(jù)蛋白質(zhì)的大小進(jìn)行分離）。這兩項(xiàng)技術(shù)結(jié)合形成的二維電泳是分離分析蛋白質(zhì)最有

17、效的一種電泳手段。通常第一維電泳是等電聚焦，蛋白質(zhì)根據(jù)其等電點(diǎn)的不同進(jìn)行分離。第二位電泳是SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，等電聚焦電泳分離好的蛋白樣品進(jìn)入SDS-聚丙烯酰胺凝膠，依據(jù)其分子量大小被分離。這樣各個(gè)蛋白質(zhì)根據(jù)等電點(diǎn)和分子量的不同而被分離，分布在二維圖譜上。Molecular chaperone：細(xì)胞內(nèi)存在的能夠阻止未完全折疊好的其他蛋白之間形成的無(wú)活性不可逆聚集體而幫助多肽鏈有效折疊的一類(lèi)蛋白質(zhì)。信號(hào)肽：是未成熟的蛋白質(zhì)中可被細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)識(shí)別的特征性氨基酸序列。促進(jìn)蛋白質(zhì)的定位。核定位序列：（NLS）所有靶向輸送的胞核蛋白多肽鏈內(nèi)含有特異信號(hào)序列，稱(chēng)為核定位序列。NLS為4-8個(gè)氨基酸

18、殘基的短序列，富含帶正電的賴(lài)、精氨酸及脯氨酸，不同的NLS間未發(fā)現(xiàn)共有序列。簡(jiǎn)述分泌蛋白質(zhì)的定位過(guò)程分泌蛋白進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的過(guò)程：在胞液游離核糖體上以mRNA為模板，合成出N端包括信號(hào)肽約70個(gè)氨基酸殘基SRP與N端的信號(hào)肽、TP和核糖體結(jié)合成復(fù)合物，臺(tái)聯(lián)合成暫停，SRP識(shí)別ER膜上的SRP受體，通過(guò)水解GTP使SRP解離并再利用，使肽鏈開(kāi)始繼續(xù)延長(zhǎng)。核糖體大亞基與核糖體受體結(jié)合，錨定在膜上，水解GTP供能，誘導(dǎo)肽轉(zhuǎn)位復(fù)合物開(kāi)放跨ER膜通道，信號(hào)肽插入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜。信號(hào)肽啟動(dòng)肽鏈轉(zhuǎn)位，延長(zhǎng)的多肽鏈直接經(jīng)核糖體，及跨ER膜通道進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜腔。信號(hào)肽被信號(hào)肽酶切除并降解。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔HSP70消耗ATP促進(jìn)延

19、伸多肽鏈進(jìn)入ER腔并折疊成天然構(gòu)象。ER腔中的蛋白質(zhì)的去向：經(jīng)高爾基體修飾后形成分泌小泡，被調(diào)節(jié)性或非調(diào)節(jié)性地運(yùn)送到細(xì)胞外面去。通過(guò)分泌小泡被運(yùn)送到溶酶體中。通過(guò)分泌小泡被送回到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中。酶活性中心：酶分子上有一個(gè)必需基團(tuán)比較集中的區(qū)域，這個(gè)區(qū)域能夠結(jié)合底物并催化底物轉(zhuǎn)變成產(chǎn)物，這個(gè)區(qū)域就叫做酶的活性中心。誘導(dǎo)契合：底物與酶活性中心結(jié)合，二者之間相互誘導(dǎo)，相互變性，相互適應(yīng)，相互結(jié)合的過(guò)程稱(chēng)為誘導(dǎo)契合。Ribozyme：具有催化活性的RNA。別構(gòu)酶有何特性？變構(gòu)酶多為寡聚體，由調(diào)節(jié)亞基（部位）和催化亞基（部位）組成，二者分開(kāi)，變構(gòu)酶有協(xié)同效應(yīng)，結(jié)合底物對(duì)熱穩(wěn)定，室溫下穩(wěn)定，0不穩(wěn)定。具有同促

20、協(xié)同效應(yīng)的變構(gòu)酶具有多個(gè)活性中心?；钚灾行募仁谴呋课挥质钦{(diào)節(jié)部位。蛋白激酶：將ATP分子中心的-磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移至蛋白質(zhì)分子中的羥基的酶。包括PKA、PKG和PKC等。鈣調(diào)蛋白：是一個(gè)MW為17kDa的屬絲/算算蛋白激酶類(lèi)的單戀蛋白質(zhì)。CaM上有4個(gè)Ca²+結(jié)合位點(diǎn)，當(dāng)胞質(zhì)Ca²+濃度升高，Ca²與CaM結(jié)合，其構(gòu)象發(fā)生改變而激活Ca²+-CaM激酶。GTP結(jié)合蛋白：G蛋白是一類(lèi)和GTP或GDP相結(jié)合、位于細(xì)胞膜胞質(zhì)面的外周蛋白，由3個(gè)亞基組成，它們是亞基、亞基、亞基。G蛋白有兩種構(gòu)象，一種以三聚體存在并與GDP結(jié)合，為非活化性；另一種構(gòu)象是亞基與GTP結(jié)

21、合并導(dǎo)致二聚體的脫落，此型為活化型。G蛋白是一類(lèi)非常重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子，在多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中起到開(kāi)關(guān)作用。Ras：是最早發(fā)現(xiàn)的小G蛋白，原癌基因ras表達(dá)的產(chǎn)物，性質(zhì)類(lèi)似于G蛋白的亞基，具有結(jié)合GDP/GTP的能力，結(jié)合GTP時(shí)活化，結(jié)合GDP時(shí)失活，分子量21kDa，又稱(chēng)為p21蛋白。SH2結(jié)構(gòu)域：為Src同源序列2結(jié)構(gòu)域，與蛋白質(zhì)Src的同源性很高而得名。SH2結(jié)構(gòu)域?yàn)榧s100個(gè)氨基酸的序列，可識(shí)別蛋白質(zhì)分子中的磷酸絡(luò)氨酸及其周?chē)被釟埢M成的模體，并與磷酸絡(luò)氨酸的磷酸基團(tuán)結(jié)合。G蛋白的亞基分為哪幾類(lèi)？各有何功能？根據(jù)G蛋白下游酶的種類(lèi)或激活、抑制狀態(tài)，將亞基分為s i q t四類(lèi)。s

22、和i 可分別激活和抑制下游的腺苷酸環(huán)化酶；q可激活磷脂酶C；t則激活cGMP磷酸二酯酶的活性。簡(jiǎn)述受細(xì)胞內(nèi)第二信使調(diào)控的蛋白激酶有哪些？1）蛋白激酶A(cAMP)2) 蛋白激酶C（IP3和DAG）3)鈣調(diào)蛋白依賴(lài)性蛋白激酶(Ca2+)4）蛋白激酶G(cGMP)受體：是細(xì)胞膜上或細(xì)胞內(nèi)能識(shí)別生物活性分子并與之結(jié)合的生物大分子。他們具有下列相互關(guān)聯(lián)的功能：1識(shí)別并結(jié)合配體2轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)3引起生物學(xué)效應(yīng)。絕大多數(shù)是蛋白質(zhì)，個(gè)別是糖脂?！肮聝骸笔荏w：用許多方法所獲得的克隆已經(jīng)表明：大量的原先未知的基因與類(lèi)固醇受體家族有序列同源性，由于不知道這些基因產(chǎn)物的配體，因此這些基因產(chǎn)物又被稱(chēng)為“孤兒”受體。受體下調(diào)

23、：許多因素可以影響細(xì)胞的受體數(shù)目和（或）受體對(duì)配對(duì)的親和力，若受體數(shù)目減少（或）對(duì)誒體的親和力降低與脫敏，稱(chēng)之為受體下調(diào)。受體作用有哪些特點(diǎn)？受體與配體的結(jié)合有5個(gè)特點(diǎn)：高度專(zhuān)一性：受體選擇性地與特定配體結(jié)合，這種選擇性是由分子的幾何形狀決定的。受體與配體的結(jié)合通過(guò)反應(yīng)基團(tuán)的定位和分子構(gòu)象的相互契合來(lái)實(shí)現(xiàn)。高度親和力：無(wú)論膜受體還是胞內(nèi)受體，它們與配體之間的親和力都極強(qiáng)。體內(nèi)信息物質(zhì)的濃度非常低，但卻有顯著地生物學(xué)效應(yīng)?？娠柡托裕涸黾优潴w濃度，可使受體飽和?？赡嫘裕菏荏w與配體以非共價(jià)鍵結(jié)合，當(dāng)生物效應(yīng)產(chǎn)生后，配體與受體解離。受體可恢復(fù)到原來(lái)的狀態(tài)，并再次被利用，而配體則常被立即滅活。特定的作用

24、模式：受體在細(xì)胞內(nèi)的分布，從數(shù)量到種類(lèi)，均有組織特異性，并出現(xiàn)特定的作用模式，提示某受體與配體結(jié)合后能引起某種特定的生理效應(yīng)。簡(jiǎn)述腎上腺素作用于膜受體的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程略 教材P414417說(shuō)明促甲狀腺素釋放激素主要通過(guò)那條信號(hào)途徑傳遞信息略 教材P414417表皮生長(zhǎng)因子（EGF）通過(guò)何種信息傳遞途徑發(fā)揮生物學(xué)作用受體型PK-Ras-MAPK途徑：表皮生長(zhǎng)因子受體中含有SH2結(jié)構(gòu)域的接頭蛋白（如Grb2）、GDP釋放因子（如SOS）、Ras蛋白、Raft、MAPKKK、MAP-KK、MAPK、轉(zhuǎn)錄因子。最終使細(xì)胞發(fā)生分化或增殖。表皮生長(zhǎng)因子與酪氨酸蛋白激酶受體結(jié)合后，受體二聚體化和自身磷酸化。T

25、PK受體胞區(qū)內(nèi)，磷酸化中介分子如Grb2和SOS（含SH2結(jié)構(gòu)域，識(shí)別、結(jié)合受體胞內(nèi)區(qū)磷酸化的酪氨酸）使之活化。進(jìn)一步激活Ras：Ras是GTP結(jié)合蛋白，與GTP結(jié)合是活性形式，與GDP是非活性形式，Grb2和SOS使GDP脫落，Ras結(jié)合GTP活化。激活的Ras再激活Raf，Raf是絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，他通過(guò)磷酸化激活多種蛋白酶類(lèi)，特別是MAPKKK。MAPKKK通過(guò)磷酸化級(jí)聯(lián)反應(yīng)依次激活MAPKK和MAPK。最后MAPK進(jìn)入細(xì)胞核，通過(guò)磷酸化來(lái)調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子的活性，影響某些基因的轉(zhuǎn)錄。TPK受體活化后還可通過(guò)激活腺苷酸環(huán)化酶、磷脂酶來(lái)調(diào)控蛋白酶活性、基因轉(zhuǎn)錄。膜受體介導(dǎo)的信息傳遞途徑主要

26、有哪些？簡(jiǎn)要說(shuō)明各條途徑cAMP-蛋白激酶途徑；Ca2+-磷脂依賴(lài)性蛋白激酶途徑；Ca2+- CaM依賴(lài)性蛋白激酶途徑；cGMP-蛋白激酶途徑；Ras-Raf-MAPK途徑；JAKs-STAT途徑；核因子kB途徑。詳細(xì)內(nèi)容見(jiàn)教材細(xì)胞凋亡：機(jī)體細(xì)胞在正常生理或病理狀態(tài)下發(fā)生的一種自發(fā)的、程序化的死亡過(guò)程，它的發(fā)生受到機(jī)體的嚴(yán)密控制。 Caspase:天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶是一類(lèi)人源的ICE/Ced同源性半胱氨酸蛋白酶，活性位點(diǎn)含有QACXG(x:R Q C)保守氨基酸序列。死亡受體：在細(xì)胞表面，存在著一類(lèi)能結(jié)合胞間凋亡刺激分子，并將信號(hào)傳至胞內(nèi)引起細(xì)胞凋亡的受體，稱(chēng)為死亡受體。他們隸屬于腫

27、瘤壞死因子受體（TNFR）超家族，結(jié)構(gòu)上包括一個(gè)由1-6個(gè)富含Cys結(jié)構(gòu)域構(gòu)成的保守胞外區(qū)，和一個(gè)由60-80個(gè)氨基酸組成的稱(chēng)為“死亡結(jié)構(gòu)域”的胞內(nèi)區(qū)。細(xì)胞凋亡有哪些生化特征和形態(tài)學(xué)特征1凋亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)細(xì)胞凋亡往往表現(xiàn)為在正常細(xì)胞群體中單個(gè)細(xì)胞的死亡。單個(gè)凋亡細(xì)胞與周?chē)?xì)胞分離，以胞漿空泡開(kāi)始。隨后，空泡自細(xì)胞內(nèi)排出，引起水分喪失、細(xì)胞溶劑減少、細(xì)胞密度增加，細(xì)胞固縮呈圓形或橢圓。染色質(zhì)濃集征球狀，或重新分布于和摸下呈圓形或新月形。隨后線(xiàn)粒體等細(xì)胞器也發(fā)生超濃縮，并向核周“崩潰”形成一個(gè)或多個(gè)塊狀結(jié)構(gòu)、“致密球體”或向外發(fā)芽形成葡萄串樣小球體。細(xì)胞核解體，細(xì)胞膜下陷，包裹著和碎片和細(xì)胞器

28、形成凋亡小體。2凋亡細(xì)胞的生物化學(xué)特點(diǎn)非隨機(jī)性DNA降解 細(xì)胞凋亡過(guò)程中，核酸內(nèi)切酶活化，基因組DNA常常首先被降解為200-300kb的片段（“結(jié)構(gòu)域式”剪切）?；蚪MDNA的裂解產(chǎn)物在電泳圖譜上呈現(xiàn)連續(xù)階梯狀的條帶。壞死細(xì)胞的DNA不出現(xiàn)非隨機(jī)性降解。細(xì)胞膜磷脂酰絲氨酸外翻 正常細(xì)胞的膜脂分布呈現(xiàn)膽堿類(lèi)磷脂如磷脂酰膽堿、硝磷脂大多分布在膜外層，而氨基類(lèi)磷脂如磷脂酰絲氨酸（PS）和磷脂酰乙醇胺則多分布在膜內(nèi)層。在凋亡細(xì)胞，磷脂酰絲氨酸常常由細(xì)胞膜內(nèi)層轉(zhuǎn)向膜外層。這是細(xì)胞凋亡早期的重要生物化學(xué)特點(diǎn)。正常的能量代謝 細(xì)胞凋亡的發(fā)生要求ATP的參與。在ATP存在時(shí)，PKC抑制劑Stauropsri

29、ne誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。反之，在耗竭ATP的情況下，凋亡誘導(dǎo)劑Stauropsrine和Fas配體誘導(dǎo)的T細(xì)胞死亡形式也由凋亡轉(zhuǎn)向壞死。胞漿蛋白交聯(lián) 凋亡細(xì)胞的mRNA和蛋白質(zhì)合成減少，編碼組織谷氨酰胺酶的基因被誘導(dǎo)表達(dá)，該酶催化形成穩(wěn)定的廣泛的胞漿蛋白交聯(lián)，在胞膜下形成殼狀結(jié)構(gòu)，使凋亡小體穩(wěn)定，防止生物活性物質(zhì)釋放至細(xì)胞外而引起炎癥反應(yīng)。參與細(xì)胞凋亡反應(yīng)有哪些重要參與分子？其作用是什么？Bcl-2族分子：一類(lèi)具有抗凋亡作用?？沟蛲鲎饔玫臋C(jī)制主要是維護(hù)線(xiàn)粒體膜的跨膜壓，阻抑線(xiàn)粒體內(nèi)釋放出死亡因子。另一類(lèi)呈現(xiàn)促凋亡作用的，有Bax Bak Bok半胱氨酸蛋白酶類(lèi)（Caspases）：是一種裂解蛋白質(zhì)的

30、蛋白水解酶，具有促凋亡作用。細(xì)胞凋亡激活因子類(lèi)（Apafs）：人Apafs-1與Pro- Caspases-9、Cytc形成復(fù)合體，稱(chēng)為凋亡體。在ATP的參與下，凋亡體內(nèi)Pro- Caspases-9可自身激活形成活性的Caspases-9，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。細(xì)胞凋亡的生物學(xué)意義 細(xì)胞凋亡對(duì)于多細(xì)胞個(gè)體的生長(zhǎng)發(fā)育至關(guān)重要 細(xì)胞凋亡對(duì)于淋巴細(xì)胞的成熟和維持免疫系統(tǒng)的功能至關(guān)重要 細(xì)胞凋亡與DNA和組織損傷、修復(fù)有密切聯(lián)系 細(xì)胞凋亡和衰老密切相關(guān)另外，細(xì)胞凋亡異常與多種疾病的發(fā)生有著直接的聯(lián)系，參與包括腫瘤，病毒性疾病，動(dòng)脈硬化，以及多種退行性病變的病理進(jìn)程。癌基因：分為兩類(lèi)：病毒癌基因，存在于病毒基因組中的癌基因，它不編碼病毒的結(jié)構(gòu)成分，對(duì)病毒復(fù)制也沒(méi)有作用，但可以使細(xì)胞持續(xù)增值癌基因又稱(chēng)細(xì)胞基因存在于生物正常細(xì)胞基因組織中的癌基因，控制細(xì)胞生長(zhǎng)的基因，具有潛在的誘導(dǎo)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的特性?；蚍Q(chēng)原癌基因。抑癌基因：存在于正常細(xì)胞內(nèi)的一大類(lèi)可抑制細(xì)胞生長(zhǎng)并具有潛在抑癌作用的基因，當(dāng)這類(lèi)基因在發(fā)生突變、缺失或失活時(shí)可引起細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化而導(dǎo)致