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1、試述乳糖操縱子的阻遏作用、誘導(dǎo)作用及正調(diào)控。阻遏作用:阻遏基因lacl轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生阻遏物單體,結(jié)合形成同源四體,即阻遏物。它是一個抗解鏈蛋白,當(dāng)阻遏物與操縱基因0結(jié)合時,阻止DNA形成開放結(jié)構(gòu),從而抑制RNA聚合酶的功能。lacmRNA的轉(zhuǎn)錄起始受到抑制。誘導(dǎo)作用:按照lac操縱子本底水平的表達,每個細胞內(nèi)有幾個分子的3-半乳糖苷酶和3-半乳糖苷透過酶。當(dāng)參加乳糖, 在單個透過酶分子的作用下, 少量乳糖分子進入細胞,又在 單個3半乳糖苷酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)檎T導(dǎo)物異構(gòu)乳糖,誘導(dǎo)物通過與阻遏物結(jié)合,改變它的三維構(gòu)象,使之因不能與操縱基因結(jié)合而失活,0區(qū)沒有被阻遏物占據(jù)從而激發(fā)lacmRNA的合成。調(diào)控作用
2、:葡糖糖對lac操縱子的表達的抑制是間接的,不是葡萄糖本身而是其降解產(chǎn)物抑制cAMP的合成。cAMP-CAP復(fù)合物與啟動子區(qū)的結(jié)合是lacmRNA轉(zhuǎn)錄起始所必須的, 因為該復(fù)合物結(jié)合于啟動子上游,能使DNA雙螺旋發(fā)生彎曲。有利于形成穩(wěn)定開放型啟動子-RNA聚合酶結(jié)構(gòu)。如果將葡萄糖和乳糖同時參加培養(yǎng)基中,lac操縱子處于阻遏狀態(tài),不能被誘導(dǎo)試述 E.coli的RNA聚合酶的結(jié)構(gòu)和功能。2個a亞基、一個3亞基、一個3並基和一個 亞基組成的核心酶, 加上一個 亞基后那么 成為聚合酶全酶a亞基:核心酶組裝、啟動子識別3和3亞基:3和3共同形成RNA合成的催化中心因子:存在多種因子,用于識別不同的啟動子
3、試述原核生物 DNA復(fù)制的特點。1原核只有一個起始位點。2原核復(fù)制起始位點可以連續(xù)開始新的復(fù)制,特別是快速繁殖的細胞。3原核的DNA聚合酶III復(fù)制時形成 二聚體復(fù)合物。4原核的DNA聚合酶I具有5'-3'外切酶活性DNA解旋酶通過水解ATP產(chǎn)生能量來解開雙鏈 DNA單鏈結(jié)合蛋白 保證被解鏈酶解開的單鏈在復(fù)制完成前保持單鏈結(jié)構(gòu)DNA拓撲異構(gòu)酶消除解鏈造成的正超螺旋的堆積,消除阻礙解鏈繼續(xù)進行的這種壓力,使復(fù)制得以延伸真核生物hnRNA必須經(jīng)過哪些加工才能成為成熟的mRNA,以用作蛋白質(zhì)合成的模板?1、在5'端加帽,5'端的一個核苷酸總是 7-甲基鳥核苷三磷酸m7
4、Gppp丨。2、3'端加尾,多聚腺苷酸尾巴。準確切割,力口 poly A 3、RNA的剪接,參與RNA剪接的物質(zhì):snRNA、snRNP 4丨、RNA的編輯,編輯editing是指轉(zhuǎn)錄后的 RNA 在編碼區(qū)發(fā)生堿基的突變、參加或喪失等現(xiàn)象。5.、RNA的再編碼,mRNA有時可以改變原來的編碼信息,以不同的方式進行翻譯6.、RNA的化學(xué)修飾,人細胞內(nèi)rRNA分子上就存在106種甲基化和95種假尿嘧啶產(chǎn) 物。真核生物的 RNA 聚合酶有哪幾種?分布在細胞的什么位置?各有什么功能?RNA聚合酶:核仁負責(zé)三種主要的 rRNAs的轉(zhuǎn)錄:28S、18S、5.8SRNA聚合酶:核質(zhì)負責(zé)轉(zhuǎn)錄生成mRN
5、As及一些sn RNAsRNA聚合酶:核質(zhì)負責(zé)轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄生成tRNAs、5SrRNA、snRNAs增強子的特點及對 DNA轉(zhuǎn)錄的作用。增強或促進轉(zhuǎn)錄起始影響模板附近的 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu),導(dǎo)致 DNA雙螺旋彎折或在反式因子的參與下,以蛋白 質(zhì)之間的相互作用為媒介形成增強子與啟動子之間的成環(huán)連接,活化基因轉(zhuǎn)錄將模板固定在細胞核內(nèi)特定位置,有利于DNA拓撲異構(gòu)酶改變 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的張力,促進RNA聚合酶在DNA鏈上的結(jié)合和滑動增強子區(qū)可以作為反式作用因子或RNA聚合酶進入染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的入口試述原核生物轉(zhuǎn)錄終止的兩種機制。轉(zhuǎn)錄的終止有兩種機制。一是需要蛋白質(zhì)因子p Rho的參與,p因子能與轉(zhuǎn)錄中的 R
6、NA吉合,啟動個子ATP酶活性,并向RNA勺3 '端滑動,劃至RNA付近時,RN聚合酶暫停聚合活動,使 RNA:DNA 解鏈別離轉(zhuǎn)錄的RN/釋放種植轉(zhuǎn)錄。另一是在立體系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)的,純化的的RN/聚合酶不需要其他蛋白質(zhì)因子的參與,可使轉(zhuǎn)錄終止,即不依賴p因子的轉(zhuǎn)錄終止機制,模板DAf在轉(zhuǎn)錄終止點附近有特殊核苷酸序列可以形成頸環(huán)結(jié)構(gòu) 影響RNA聚合酶的構(gòu)象使轉(zhuǎn)錄暫停,DAf與RNA雙鏈不穩(wěn)定別離,轉(zhuǎn)錄終止。指出擺動假說中密碼子與反密碼的變偶堿基對是什么?怎樣進行變偶配對?密碼子與反密碼子的配對中,第一對和第二對堿基嚴格遵守堿基互補配對原那么,第三位堿基有一定自由度,可以 擺動",
7、因而使某些tRNA可以識別一個以上的密碼子。一個tRNA究竟能識別多少個密碼子是由反密碼子的第一位堿基的性質(zhì)決定的,反密碼子第一位為A或 C時只能識別1種密碼子,為G或 U時可以識別2種密碼子,為I時可識別三種密碼子。如果有幾個密碼子同時編碼 一個氨基酸,但凡第一和第二位堿基不同的密碼子都對應(yīng)于各自獨立的tRNA。什么是RNA編輯,其生物學(xué)意義是什么?RNA編輯是某些RNA,特別是mRNA的一種加工方式,它導(dǎo)致DNA所編碼的遺傳信息 的改變,因為經(jīng)過編輯的 mRNA序列發(fā)生了不同于模板 DNA生物學(xué)意義:校正作用、調(diào)控翻譯、擴充遺傳信息試述tRNA分子的結(jié)構(gòu)特點。tRNA的二級結(jié)構(gòu)是三葉草形,
8、其主要結(jié)構(gòu)特點和相關(guān)結(jié)合部位如下:受體臂:其3'端最后3個堿基序列永遠是 CCA,此臂負責(zé)攜帶特異的氨基酸,稱氨基酸接 受位點T C臂:是根據(jù)三個核苷酸命名的。此臂負責(zé)核糖體上的rRNA識別結(jié)合,即核糖體識別位點反密碼臂:常有5bp的徑區(qū)和7Nt的環(huán)區(qū)組成,負責(zé)對密碼子的識別與配對,即密碼子識別位點D臂:根據(jù)它含有尿氫二嘧啶命名的,負責(zé)和氨基酰tRNA聚合酶的結(jié)合,形成氨基酰-tRNA合成酶識別位點額外環(huán):可變性大,從4Nt到2Nt不等其功能是在tRNA的L型三維結(jié)構(gòu)中負責(zé)連接兩個區(qū) 域細胞通過哪幾種修復(fù)系統(tǒng)對 DNA損傷進行修復(fù)?1. DNA聚合酶的 校正'修復(fù)2. 光復(fù)活修
9、復(fù) 3.切除修復(fù)4.重組修復(fù) 5. 錯配修復(fù) 6.S0S修復(fù)簡述原核生物與真核生物 mRNA 的區(qū)別。1,原核生物mRNA常以多順反子的形式存在。真核生物mRNA 般以單順反子的形式存在;2,原核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄與翻譯一般是偶聯(lián)的,真核生物轉(zhuǎn)錄的mRNA前體那么需經(jīng)轉(zhuǎn)錄后加工,加工為成熟的 mRNA與蛋白質(zhì)結(jié)合生成 信息體后才開始工作;3,原核生物mRNA半 壽期很短,一般為幾分鐘,最長只有數(shù)小時。真核生物mRNA的半壽期較長,如胚胎中的mRNA可達數(shù)日;4,原核與真核生物 mRNA的結(jié)構(gòu)特點也不同,原核生物的mRNA的5'端無帽 子結(jié)構(gòu),3'端沒有或只有較短的 poly A
10、結(jié)構(gòu)。試述真核生物 DNA水平上的基因表達調(diào)控。真核生物DNA水平上的基因表達調(diào)控主要有:基因喪失、基因擴增、基因重排、甲基化修飾、染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)狀態(tài)等。簡述蛋白質(zhì)的合成過程。1,氨基酸的活化與搬運 氨基酰 TRNA的合成,氨基酸的氨基和羧基反響性不強,需要活化,活化反響:氨基酸先與氨基酸TRNA合成酶形成中間產(chǎn)物再接到 TRNA勺氨基臂2,蛋白質(zhì)合成過程中,核蛋白體循環(huán),肽鏈合成的起始,在蛋白質(zhì)起始因子作用下形成起始復(fù)合物 70SMRNA FMETTRNAFMET3. 肽鏈的延伸,包括進位,轉(zhuǎn)肽,移位,需要延長因子,GTP等的參與。a對應(yīng)MRNA上第二CODON的AA-TRNASA位b在肽基轉(zhuǎn)
11、移酶的催化下, P位的fMET轉(zhuǎn)移到A位的TRNA上,與 A位的氨基酸殘基的氨基宿和, P位空TRNA掉下,CA位的二肽酰-TRNA移到P位,空出A位, 如此,第三四個N個氨基酸的AA-TRNA!續(xù)與肽鏈合成,4. 4肽鏈合成終止,終止因子識別終止密碼,促進P位上肽鏈水解釋放及 TRNA的釋放,離開RRNA終止因子再促進亞基解聚,30S.50S又用于新鏈合成核糖體有哪些活性中心?核糖體有7個功能部位:mRN結(jié)合位點:與轉(zhuǎn)錄來的信使 RN相結(jié)合。P位點:肽酰基tRNA位或者給位,是結(jié)合起始 tRNA就是起始密碼子對應(yīng)的轉(zhuǎn)運RNA通常是甲酰甲硫氨酸的位點。A位點:氨基酰-tRNA就是活化的氨基酸與
12、tRNA的結(jié)合物結(jié)合位點或受位,結(jié)合新進 入的氨基酸。肽基轉(zhuǎn)移酶活性位點:將肽鏈轉(zhuǎn)移到另一個氨基酸上面,就是將肽鏈延長。5S RN臉點:與核糖體小亞基5SRNA的結(jié)合位點。注意:核糖體其實是兩個亞基結(jié)合 起來的,小的叫小亞基, 大的叫大亞基。 通常兩個亞基是分開的, 只有當(dāng)開始翻譯的時候才 互相結(jié)合。EF-Tu位點:EF-Tu循環(huán)位點,可以理解為翻譯過程中能量的供給點。轉(zhuǎn)位因子EF-G結(jié)合位點:使得新合成的肽鏈轉(zhuǎn)移到P位點。試述 E.coli中trp 操縱子的調(diào)控機制。答:trp操縱子是一種阻遏型操縱子,當(dāng)無色氨酸時,輔阻遏蛋白不能結(jié)合0序列,操縱基因開放,開始轉(zhuǎn)錄;當(dāng)細胞內(nèi)有較大量的色氨酸時
13、,輔阻遏蛋白與色氨酸結(jié)合后,可結(jié)合0序列,阻遏基因轉(zhuǎn)錄。E.coli的trp操縱子的另一個調(diào)控方式是衰減調(diào)節(jié)機制。在色氨酸操縱子第一個結(jié)構(gòu)基因與啟動基因之間存在一弱化區(qū)域,當(dāng)細胞內(nèi)色氨酸濃度很高時,通過與轉(zhuǎn)錄相耦聯(lián)的翻譯過程,形成一個弱化子結(jié)構(gòu),使RNA聚合酶從DNA上脫落,導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄終止。試述反式作用因子的根本結(jié)構(gòu)特點。反式作用因子的分類:1、具有識別啟動子元件功能的根本轉(zhuǎn)錄因子2、能識別增強子或沉默子的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子3、不需要通過DNA-蛋白質(zhì)互相作用就參與轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)的共調(diào)節(jié)因子 反式作用因子的兩個功能結(jié)構(gòu)域:DNA識別或結(jié)合域螺旋一轉(zhuǎn)折一螺旋結(jié)構(gòu)、鋅指結(jié)構(gòu)、堿性亮氨酸拉鏈、堿性一螺旋一環(huán)一螺旋
14、結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄活化結(jié)構(gòu)域:反式作用因子結(jié)構(gòu)中用來同其它蛋白因子的結(jié)合,參與募集啟動子結(jié)合蛋白和轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合體,控制基因轉(zhuǎn)錄活化的結(jié)構(gòu)區(qū)域。帶負電荷的螺旋結(jié)構(gòu)、富含谷氨酰胺的結(jié)構(gòu)、富含脯氨酸的結(jié)構(gòu)何為表達序列標簽EST丨?EST是Expressed Sequenee Tag 的縮寫,意思是表達序列標簽,指從一個隨機選擇的cDNA克隆,進行5'端和3'端單一次測序挑選出來獲得的短的cDNA局部序列。試述真核生物基因的結(jié)構(gòu)特點并談?wù)勀銓蚋拍畹牧私?。一個完整的真核基因不但包括編碼區(qū)還包括5'和3端長度不等特異性序,對基因表達過程有著重要作用。1、啟動子2、轉(zhuǎn)錄模板3、RNA聚合酶
15、H 4、RNA聚合酶根底轉(zhuǎn)錄所需的蛋白質(zhì)因子 了解:答:基因是產(chǎn)生一條多肽鏈或功能RNA所需的全部核苷酸序列。試述DNA甲基化對基因表達的調(diào)控機制。DNA甲基化(DNA methylation) 是最早發(fā)現(xiàn)的修飾途徑之一,大量研究說明,DNA甲基化能引起染色質(zhì)結(jié)構(gòu)、DNA勾象、DNA穩(wěn)定性及DNA與蛋白質(zhì)相互作用方式的改變,從而控制基因表達。試述人類基因組方案HGP的科學(xué)意義。1為了解析人類基因組中攜帶的有關(guān)人類個體生長發(fā)育、生老病死的全部遺傳信息,揭開人 類生長發(fā)育的奧秘,追求健康,戰(zhàn)勝疾病,提出人類基因組方案2確定人類基因組中 2萬一2.5萬個編碼基因的序列及其在基因組中的物理位置,研究基
16、因 的產(chǎn)物及功能3 了解轉(zhuǎn)錄和剪切調(diào)控元件的結(jié)構(gòu)和位置,從整個基因組結(jié)構(gòu)的宏觀水平上理解基因轉(zhuǎn)錄與轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)4從整體上了解染色體結(jié)構(gòu)5研究空間結(jié)構(gòu)對基因調(diào)節(jié)的作用6發(fā)現(xiàn)與DNA復(fù)制、重組等有關(guān)序列7研究DNA突變、重排和染色體斷裂等,了解疾病的分子機制,為疾病診斷、預(yù)防和治療提供理論依據(jù)8確定人類基因組中轉(zhuǎn)座子、逆轉(zhuǎn)座子和病毒剩余序列,研究其周圍序列的性質(zhì),研究個體 間各遺傳元件的多態(tài)性試述乳糖操縱子的阻遏作用、誘導(dǎo)作用及正調(diào)控。阻遏作用:阻遏基因lacl轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生阻遏物單體,結(jié)合形成同源四體,即阻遏物。它是一個抗解鏈蛋白,當(dāng)阻遏物與操縱基因0結(jié)合時,阻止DNA形成開放結(jié)構(gòu),從而抑制RNA聚合酶
17、的功能。lacmRNA的轉(zhuǎn)錄起始受到抑制。誘導(dǎo)作用:按照lac操縱子本底水平的表達,每個細胞內(nèi)有幾個分子的3-半乳糖苷酶和3-半乳糖苷透過酶。當(dāng)參加乳糖, 在單個透過酶分子的作用下, 少量乳糖分子進入細胞,又在 單個3半乳糖苷酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)檎T導(dǎo)物異構(gòu)乳糖,誘導(dǎo)物通過與阻遏物結(jié)合,改變它的三維構(gòu)象,使之因不能與操縱基因結(jié)合而失活,0區(qū)沒有被阻遏物占據(jù)從而激發(fā)lacmRNA的合成。調(diào)控作用:葡糖糖對lac操縱子的表達的抑制是間接的,不是葡萄糖本身而是其降解產(chǎn)物抑制cAMP的合成。cAMP-CAP復(fù)合物與啟動子區(qū)的結(jié)合是lacmRNA轉(zhuǎn)錄起始所必須的, 因為該復(fù)合物結(jié)合于啟動子上游,能使DNA雙螺
18、旋發(fā)生彎曲。有利于形成穩(wěn)定開放型啟動子-RNA聚合酶結(jié)構(gòu)。如果將葡萄糖和乳糖同時參加培養(yǎng)基中,lac操縱子處于阻遏狀態(tài),不能被誘導(dǎo)試述 E.coli的RNA聚合酶的結(jié)構(gòu)和功能。2個a亞基、一個3亞基、一個3並基和一個 亞基組成的核心酶, 加上一個 亞基后那么 成為聚合酶全酶a亞基:核心酶組裝、啟動子識別3和3亞基:3和3共同形成RNA合成的催化中心因子:存在多種因子,用于識別不同的啟動子試述原核生物 DNA復(fù)制的特點。1原核只有一個起始位點。2原核復(fù)制起始位點可以連續(xù)開始新的復(fù)制,特別是快速繁殖的細胞。3原核的DNA聚合酶III復(fù)制時形成 二聚體復(fù)合物。4原核的DNA聚合酶I具有5'-
19、3'外切酶活性DNA解旋酶通過水解ATP產(chǎn)生能量來解開雙鏈 DNA單鏈結(jié)合蛋白 保證被解鏈酶解開的單鏈在復(fù)制完成前保持單鏈結(jié)構(gòu)DNA拓撲異構(gòu)酶消除解鏈造成的正超螺旋的堆積,消除阻礙解鏈繼續(xù)進行的這種壓力,使復(fù)制得以延伸真核生物hnRNA必須經(jīng)過哪些加工才能成為成熟的mRNA,以用作蛋白質(zhì)合成的模板?1、在5'端加帽,5'端的一個核苷酸總是 7-甲基鳥核苷三磷酸m7Gppp丨。2、3'端加尾,多聚腺苷酸尾巴。準確切割,力口 poly A 3、RNA的剪接,參與RNA剪接的物質(zhì):snRNA、snRNP 4丨、RNA的編輯,編輯editing是指轉(zhuǎn)錄后的 RNA 在編
20、碼區(qū)發(fā)生堿基的突變、參加或喪失等現(xiàn)象。5.、RNA的再編碼,mRNA有時可以改變原來的編碼信息,以不同的方式進行翻譯6.、RNA的化學(xué)修飾,人細胞內(nèi)rRNA分子上就存在106種甲基化和95種假尿嘧啶產(chǎn) 物。真核生物的 RNA 聚合酶有哪幾種?分布在細胞的什么位置?各有什么功能?RNA聚合酶:核仁負責(zé)三種主要的 rRNAs的轉(zhuǎn)錄:28S、18S、5.8SRNA聚合酶:核質(zhì)負責(zé)轉(zhuǎn)錄生成mRNAs及一些sn RNAsRNA聚合酶:核質(zhì)負責(zé)轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄生成tRNAs、5SrRNA、snRNAs增強子的特點及對 DNA轉(zhuǎn)錄的作用。增強或促進轉(zhuǎn)錄起始影響模板附近的 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu),導(dǎo)致 DNA雙螺旋彎折或在
21、反式因子的參與下,以蛋白 質(zhì)之間的相互作用為媒介形成增強子與啟動子之間的成環(huán)連接,活化基因轉(zhuǎn)錄將模板固定在細胞核內(nèi)特定位置,有利于DNA拓撲異構(gòu)酶改變 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的張力,促進RNA聚合酶在DNA鏈上的結(jié)合和滑動增強子區(qū)可以作為反式作用因子或RNA聚合酶進入染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的入口試述原核生物轉(zhuǎn)錄終止的兩種機制。轉(zhuǎn)錄的終止有兩種機制。一是需要蛋白質(zhì)因子p Rho的參與,p因子能與轉(zhuǎn)錄中的 RNA吉合,啟動個子ATP酶活性,并向RNA勺3 '端滑動,劃至RNA付近時,RN聚合酶暫停聚合活動,使 RNA:DNA 解鏈別離轉(zhuǎn)錄的RN/釋放種植轉(zhuǎn)錄。另一是在立體系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)的,純化的的RN/聚合酶不
22、需要其他蛋白質(zhì)因子的參與,可使轉(zhuǎn)錄終止,即不依賴p因子的轉(zhuǎn)錄終止機制,模板DAf在轉(zhuǎn)錄終止點附近有特殊核苷酸序列可以形成頸環(huán)結(jié)構(gòu) 影響RNA聚合酶的構(gòu)象使轉(zhuǎn)錄暫停,DAf與RNA雙鏈不穩(wěn)定別離,轉(zhuǎn)錄終止。指出擺動假說中密碼子與反密碼的變偶堿基對是什么?怎樣進行變偶配對?密碼子與反密碼子的配對中,第一對和第二對堿基嚴格遵守堿基互補配對原那么,第三位堿基有一定自由度,可以 擺動",因而使某些tRNA可以識別一個以上的密碼子。一個tRNA究竟能識別多少個密碼子是由反密碼子的第一位堿基的性質(zhì)決定的,反密碼子第一位為A或 C時只能識別1種密碼子,為G或 U時可以識別2種密碼子,為I時可識別三種
23、密碼子。如果有幾個密碼子同時編碼 一個氨基酸,但凡第一和第二位堿基不同的密碼子都對應(yīng)于各自獨立的tRNA。什么是RNA編輯,其生物學(xué)意義是什么?RNA編輯是某些RNA,特別是mRNA的一種加工方式,它導(dǎo)致DNA所編碼的遺傳信息 的改變,因為經(jīng)過編輯的 mRNA序列發(fā)生了不同于模板 DNA生物學(xué)意義:校正作用、調(diào)控翻譯、擴充遺傳信息試述tRNA分子的結(jié)構(gòu)特點。tRNA的二級結(jié)構(gòu)是三葉草形,其主要結(jié)構(gòu)特點和相關(guān)結(jié)合部位如下:受體臂:其3'端最后3個堿基序列永遠是 CCA,此臂負責(zé)攜帶特異的氨基酸,稱氨基酸接 受位點T C臂:是根據(jù)三個核苷酸命名的。此臂負責(zé)核糖體上的rRNA識別結(jié)合,即核糖
24、體識別位點反密碼臂:常有5bp的徑區(qū)和7Nt的環(huán)區(qū)組成,負責(zé)對密碼子的識別與配對,即密碼子識別位點D臂:根據(jù)它含有尿氫二嘧啶命名的,負責(zé)和氨基酰tRNA聚合酶的結(jié)合,形成氨基酰-tRNA合成酶識別位點額外環(huán):可變性大,從4Nt到2Nt不等其功能是在tRNA的L型三維結(jié)構(gòu)中負責(zé)連接兩個區(qū) 域細胞通過哪幾種修復(fù)系統(tǒng)對 DNA損傷進行修復(fù)?1. DNA聚合酶的 校正'修復(fù)2. 光復(fù)活修復(fù) 3.切除修復(fù)4. 重組修復(fù) 5. 錯配修復(fù) 6.S0S修復(fù)簡述原核生物與真核生物 mRNA 的區(qū)別。1,原核生物mRNA常以多順反子的形式存在。真核生物mRNA 般以單順反子的形式存在;2,原核生物mRNA
25、的轉(zhuǎn)錄與翻譯一般是偶聯(lián)的,真核生物轉(zhuǎn)錄的mRNA前體那么需經(jīng)轉(zhuǎn)錄后加工,加工為成熟的 mRNA與蛋白質(zhì)結(jié)合生成 信息體后才開始工作;3,原核生物mRNA半 壽期很短,一般為幾分鐘,最長只有數(shù)小時。真核生物mRNA的半壽期較長,如胚胎中的mRNA可達數(shù)日;4,原核與真核生物 mRNA的結(jié)構(gòu)特點也不同,原核生物的mRNA的5'端無帽 子結(jié)構(gòu),3'端沒有或只有較短的 poly A結(jié)構(gòu)。試述真核生物 DNA水平上的基因表達調(diào)控。真核生物DNA水平上的基因表達調(diào)控主要有:基因喪失、基因擴增、基因重排、甲基化修飾、染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)狀態(tài)等。簡述蛋白質(zhì)的合成過程。1,氨基酸的活化與搬運 氨基酰 T
26、RNA的合成,氨基酸的氨基和羧基反響性不強,需要活化,活化反響:氨基酸先與氨基酸TRNA合成酶形成中間產(chǎn)物再接到 TRNA勺氨基臂2,蛋白質(zhì)合成過程中,核蛋白體循環(huán),肽鏈合成的起始,在蛋白質(zhì)起始因子作用下形成起始復(fù)合物 70SMRNA FMETTRNAFMET5. 肽鏈的延伸,包括進位,轉(zhuǎn)肽,移位,需要延長因子,GTP等的參與。a對應(yīng)MRNA上第二CODON的AA-TRNASA位b在肽基轉(zhuǎn)移酶的催化下, P位的fMET轉(zhuǎn)移到A位的TRNA上,與 A位的氨基酸殘基的氨基宿和, P位空TRNA掉下,CA位的二肽酰-TRNA移到P位,空出A位, 如此,第三四個N個氨基酸的AA-TRNA!續(xù)與肽鏈合成
27、,6. 4肽鏈合成終止,終止因子識別終止密碼,促進P位上肽鏈水解釋放及 TRNA的釋放,離開RRNA終止因子再促進亞基解聚,30S.50S又用于新鏈合成核糖體有哪些活性中心?核糖體有7個功能部位:mRN結(jié)合位點:與轉(zhuǎn)錄來的信使 RN相結(jié)合。P位點:肽酰基tRNA位或者給位,是結(jié)合起始 tRNA就是起始密碼子對應(yīng)的轉(zhuǎn)運RNA通常是甲酰甲硫氨酸的位點。A位點:氨基酰-tRNA就是活化的氨基酸與tRNA的結(jié)合物結(jié)合位點或受位,結(jié)合新進 入的氨基酸。肽基轉(zhuǎn)移酶活性位點:將肽鏈轉(zhuǎn)移到另一個氨基酸上面,就是將肽鏈延長。5S RN臉點:與核糖體小亞基5SRNA的結(jié)合位點。注意:核糖體其實是兩個亞基結(jié)合 起來
28、的,小的叫小亞基, 大的叫大亞基。 通常兩個亞基是分開的, 只有當(dāng)開始翻譯的時候才 互相結(jié)合。EF-Tu位點:EF-Tu循環(huán)位點,可以理解為翻譯過程中能量的供給點。轉(zhuǎn)位因子EF-G結(jié)合位點:使得新合成的肽鏈轉(zhuǎn)移到P位點。試述 E.coli中trp 操縱子的調(diào)控機制。答:trp操縱子是一種阻遏型操縱子,當(dāng)無色氨酸時,輔阻遏蛋白不能結(jié)合0序列,操縱基因開放,開始轉(zhuǎn)錄;當(dāng)細胞內(nèi)有較大量的色氨酸時,輔阻遏蛋白與色氨酸結(jié)合后,可結(jié)合0序列,阻遏基因轉(zhuǎn)錄。E.coli的trp操縱子的另一個調(diào)控方式是衰減調(diào)節(jié)機制。在色氨酸操縱子第一個結(jié)構(gòu)基因與啟動基因之間存在一弱化區(qū)域,當(dāng)細胞內(nèi)色氨酸濃度很高時,通過與轉(zhuǎn)錄相耦聯(lián)的翻譯過程,形成一個弱化子結(jié)構(gòu),使RNA聚合酶從DNA上脫落,導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄終止。試述反式作用因子的根
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