分析方法驗(yàn)證方案

1、異煙腓含量測(cè)定分析方法驗(yàn)證方案驗(yàn)證原因：驗(yàn)證類型：新項(xiàng)目驗(yàn)證V預(yù)驗(yàn)證再驗(yàn)證回顧性驗(yàn)證V其它轉(zhuǎn)移驗(yàn)證方法描述：本分析方法為中國(guó)藥典2010版二部方法。為確保其檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確，對(duì)該分析方法的專屆性、精密度（系統(tǒng)精密度、方法精密度、中間精密度）、線性和范圍、準(zhǔn)確度、耐用性進(jìn)行評(píng)價(jià)。驗(yàn)證依據(jù)：中國(guó)藥典2010年版分析方法（295頁(yè)）驗(yàn)證時(shí)間：2010年07月09日2010年07月10日驗(yàn)證項(xiàng)目組成員及職責(zé)：部門成員職責(zé)QC儀器設(shè)備的確認(rèn)QC分析方法編寫QC分析測(cè)試QC數(shù)據(jù)評(píng)估質(zhì)量部審核批準(zhǔn)驗(yàn)證內(nèi)容:-序列號(hào)確認(rèn)測(cè)試項(xiàng)目可接受標(biāo)準(zhǔn)01儀器設(shè)備的確認(rèn)01.1高效液相色譜儀的確認(rèn)符合儀器設(shè)備的確認(rèn)要求01.2

2、天平的確認(rèn)符合儀器設(shè)備的確認(rèn)要求02具體測(cè)試內(nèi)容異煙月井峰面積RSCK2.0%,02.1系統(tǒng)精密度配置1份異煙月井工作標(biāo)準(zhǔn)溶液，連續(xù)進(jìn)針6次，記錄異煙脫峰面積、保留時(shí)間。保留時(shí)間RSDW2.0%。異煙朋1理論塔板數(shù)大丁4000,拖尾因子在0.91.4之間。02.2方法精密度平行配制同一批樣品的6份樣品溶液，每份溶液進(jìn)樣2針，計(jì)算樣品含量及其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。樣品含量的RSD<2.0%。02.3線性和范圍以異煙月井工作標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為100%,配制20%、60%、100%、140%、180%濃度的工作標(biāo)準(zhǔn)品溶液，每個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)樣1次，計(jì)算出回歸方程和相關(guān)系數(shù)R。R可.99902.4準(zhǔn)

3、確度以異煙月井工作標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為100%,取同一批樣品，配制濃度為80%、100%和120%的樣品溶液各3份，每份進(jìn)樣2針。計(jì)算其回收率。該定量方法的回收率應(yīng)為98.0%102.0%。02.5耐用性理論塔板數(shù)大丁4000,配制異煙酸和異煙月井混合溶液，按下列條件改變方拖尾因子在0.91.4之間，法，穩(wěn)定后按順序進(jìn)樣，計(jì)算異煙月井的理論塔板數(shù)，分離度R>1.5,相對(duì)保留混合溶液中異煙酸和異煙朋1的相對(duì)保留時(shí)間RRT。時(shí)間RRT偏差絕對(duì)值、大a.改變流速為0.9ml/min和1.1ml/min。丁20%。b.改變柱溫為23C和27C。c.改變流動(dòng)相緩沖液與甲醇配比為83:17和87:13

4、。d.同一填料、同色譜柱。03程序及文件03.1液相色譜儀校正規(guī)程符合要求03.2液相色譜儀操作規(guī)程符合要求03.3分析公平校正規(guī)程符合要求03.4分析天平操作規(guī)程符合要求驗(yàn)證前準(zhǔn)備：a）人員培訓(xùn)：培訓(xùn)人姓名培訓(xùn)時(shí)間培訓(xùn)內(nèi)容b）儀器設(shè)備、標(biāo)準(zhǔn)品和試劑：儀器設(shè)備儀器名稱型號(hào)編虧校驗(yàn)有效期局效液相色譜儀MODEL200標(biāo)準(zhǔn)品和試劑名稱級(jí)別廠家批號(hào)c）樣品名稱廠家批號(hào)驗(yàn)證過程：色譜條件色譜條件色譜柱：agilentODS-2長(zhǎng)度：250cm,內(nèi)徑：4.6mm,填料C18,填料粒度：5叩檢測(cè)波長(zhǎng)：262nm,帶寬30柱溫：25C進(jìn)樣量：20心流速：1.0ml/min流動(dòng)相A:0.02mol/l磷酸氫二

5、鈉溶液(用磷酸調(diào)pH至6.0),流動(dòng)相B:甲醇A:B=85:15停止時(shí)間：12min系統(tǒng)精密度溶液配制系統(tǒng)精密度溶液：取異煙朋110mg,置100ml容量瓶中，精密稱量，用水溶解并稀釋至刻度。1.2驗(yàn)證過程及結(jié)果系統(tǒng)精密度溶液連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄其異煙月井峰面積、保留時(shí)間?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：異煙月井峰面積RSDW2.0%,保留時(shí)間RSD<2.0%。保留時(shí)間(min)峰面積123456RSD%結(jié)論:1.1.1. 重現(xiàn)性試驗(yàn)(方法精密度)溶液配制對(duì)照溶液：取異煙月井工作標(biāo)準(zhǔn)品10mg,精密稱量，置100ml容量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度。1.1.2. 方法精密度溶液：取異煙脫樣品10mg置100ml

6、容量瓶中，精密稱定，用水溶解并稀釋至刻度。用此方法配置同一批號(hào)的樣品溶液6份。驗(yàn)證程序及結(jié)果工作標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)2針，樣品溶液各進(jìn)2針。記錄異煙月井峰面積，計(jì)算樣品含量?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：異煙月并含量的RSDW2.0%。樣品批號(hào)：稱樣里(mg)峰面積含量RSD%12平均值結(jié)論:1.1.3. 線性和范圍溶液配制a供試品溶液：取異煙脫50mg,置100ml容量瓶中，精密稱量，用水溶解并稀釋至刻度，混勻，即得。線性點(diǎn)溶液：精密移取a供試品溶液5ml、2ml、1ml、分別置10ml容量瓶中,用水稀釋至刻度,得到濃度約為50ug/ml（d供試品溶液）、100ug/ml（c供試品溶液）、250ug/ml（b供試品溶

7、液）、500ug/ml（a供試品溶液）的線性點(diǎn)溶液，再精密移取1mlb供試品溶液1ml置100ml容量瓶中,用水稀釋至刻度,得到濃度約為2.5ug/ml（e供試品溶液）。1.2. 驗(yàn)證程序及結(jié)果按色譜條件分別對(duì)線性點(diǎn)溶液進(jìn)行分析，每個(gè)溶液進(jìn)樣1次。以濃度為X軸，主峰峰面積平均值為Y軸，畫出線性圖，求出回歸方程，計(jì)算線性相關(guān)系數(shù)R?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：R可.999項(xiàng)目(X1)(X2)(X3)X4)(X5)線性點(diǎn)溶液濃度（ug/ml）異煙脫峰面積線性范圍（ug/ml）線性回歸方程相關(guān)系數(shù)R結(jié)論:1.2.1. 準(zhǔn)確度溶液配制對(duì)照溶液：取異煙脫10mg,置100ml容量瓶中，精密稱量，用水溶解并稀釋至刻度，混

8、勻，即得。1.2.2. 準(zhǔn)確度溶液：以對(duì)照溶液濃度為100%,配置80%、100%和120%濃度的準(zhǔn)確度溶液。即分別取同一批異煙朋1樣品8mg、10mg、12mg至100ml容量瓶中,精密稱量，用水溶解并稀釋至刻度。每個(gè)濃度的準(zhǔn)確度溶液配制3份。驗(yàn)證程序及結(jié)果按照色譜條件分別對(duì)對(duì)照溶液和準(zhǔn)確度溶液進(jìn)行分析，每個(gè)溶液各進(jìn)2針，按外標(biāo)法計(jì)算準(zhǔn)確度溶液中異煙朋1含量，計(jì)算其回收率?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：該定量方法的回收率應(yīng)為98.0%102.0%?；厥章蔙SD<2.0%。樣品批號(hào)相應(yīng)含量稱樣里(mg)峰面積實(shí)測(cè)量(mg)回收率12平均值80%100%120%結(jié)論:1.2.3. 耐用性溶液配制混合溶液：精

9、密稱取10mg異煙酸和10mg異煙月井樣品置100ml容量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，混勻，即得。驗(yàn)證過程及結(jié)果按下列條件改變方法，原條件溶液和改變色譜條件的順序進(jìn)樣，計(jì)算異煙脫的理論塔板數(shù)，拖尾因子。計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間RRT偏差絕對(duì)值。a. 改變柱溫為23C和27Cb. 改變流速為0.9ml/min和1.1ml/min。c. 改變0.02mol/l磷酸氫二鈉溶液（磷酸調(diào)pH至6.0）與甲醇配比為87:13和83:17。選用同一填料的兩個(gè)不同色譜柱比較可接受標(biāo)準(zhǔn)：理論塔板數(shù)大丁4000,拖尾因子在0.91.4之間。分離度R>1.5,相對(duì)保留時(shí)間RRT偏差絕對(duì)值不大丁20%。條件異煙脫理論塔板數(shù)異煙月并拖尾因子原條件a0.9ml/min1.1ml/minb23C27Cc87:1383:17d色譜柱1色譜柱2條件異煙酸RRT偏差絕對(duì)值原條件a23C27Cb0.9ml/min1.1ml/minc87:1383:17d色譜柱1色譜柱2結(jié)論:驗(yàn)證結(jié)論:驗(yàn)證結(jié)果見表驗(yàn)證項(xiàng)目可接受標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證結(jié)果判定系統(tǒng)精密度異煙脫的峰面積及保留時(shí)間的RSD%均不大丁2.0%。異煙脫理論塔板數(shù)大丁4000。方法精密度RSD%不大丁2.0%線性和范圍線性回歸系