甘珀酸鈉對小鼠急性肝損傷保護(hù)作用的研究(一)

1、甘珀酸鈉對小鼠急性肝損傷保護(hù)作用的研究(一)作者：肖旭 姚青 王基云 李曉兵 陳虎 張焱 蘆曉紅 高嶺【摘要】 目的 探討甘珀酸鈉(carbenoxolone sodium，CS)對四氯化碳(CCl4)所致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用。方法 昆明種小鼠60只隨機(jī)分為6組，各組分別每天給予不同劑量(160、80、40 mgkg-1)的CS和聯(lián)苯雙酯滴丸(200 mgkg-1)灌胃，對照組和模型組給予生理鹽水。7d后，除空白對照組外各組小鼠皮下注射0.1%CCl4制備急性肝損傷模型，16h后取血檢測血清ALT、AST活性;測定肝組織勻漿中MDA含量和SOD、GSH的活性及觀察肝臟病理學(xué)變化。結(jié)果 CS

2、(160、80 mgkg-1)能降低CCl4所致急性肝損傷小鼠血清ALT、AST活性(P0.01)，降低肝臟MDA的含量(P0.01)，增強(qiáng)GSH和SOD活力(P0.01，P0.05)，并能明顯改善肝組織的病理學(xué)損傷。結(jié)論 CS對CCl4所致小鼠急性肝損傷具有保護(hù)作用。 【關(guān)鍵詞】 甘珀酸鈉;急性肝損傷;四氯化碳甘草是一味重要的傳統(tǒng)中藥，其主要成份甘草次酸及其衍生物具有廣泛抗炎、抗?jié)儭⒖鼓[瘤、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力等藥理作用1-4。甘珀酸鈉(carbenoxolone sodium，CS)是甘草次酸的半琥珀酸酯二鈉鹽，其抗?jié)兊男Ч^好5，國內(nèi)外對其肝保護(hù)作用的研究報(bào)道較少。本實(shí)驗(yàn)旨在觀察甘珀酸鈉對

3、小鼠急性化學(xué)性肝損傷的保護(hù)作用，初步探討其可能機(jī)制。1 材料與方法1.1 材料1.2 方法1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)均以(s)表示，用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，樣本均數(shù)間比較采用t檢驗(yàn)，P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2 結(jié)果2.1 血清生化指標(biāo)檢測CS各劑量組均可使CCl4所致小鼠血清中升高的ALT、AST活性降低(P0.05)，呈劑量依賴性。結(jié)果見表1。表1 CS對CCl4致急性肝損傷小鼠血清ALT、AST的影響2.2 肝組織勻漿生化指標(biāo)檢測與正常對照組比較模型組小鼠肝組織中MDA含量明顯升高(P0.01)，SOD與GSH活性顯著下降(P0.01)，提示肝臟出現(xiàn)脂質(zhì)過氧化。而CS 160、80

4、mgkg-1組可顯著抑制肝組織中MDA的升高(P0.01)，并使SOD、GSH活性明顯升高(P0.05)，提示CS有較強(qiáng)的抗氧化及清除氧自由基的作用，結(jié)果見表2。2.3 肝臟組織病理學(xué)觀察正常對照組小鼠肝臟外觀呈紅褐色，質(zhì)地軟而有彈性;光鏡下可觀察到肝小葉結(jié)構(gòu)完整，細(xì)胞排列整齊，大小均勻，分界清楚，無炎細(xì)胞浸潤。模型組小鼠肝臟體積增大，質(zhì)脆，邊緣鈍而厚，表面呈黃褐色;鏡下見肝小葉結(jié)構(gòu)破壞，肝細(xì)胞核消失，出現(xiàn)以中央靜脈為中心的局灶性肝細(xì)胞變性、壞死和大量炎細(xì)胞浸潤。聯(lián)苯雙酯組和甘珀酸鈉高劑量組肝臟略有水腫，質(zhì)地柔軟;鏡下見肝小葉結(jié)構(gòu)基本完整，細(xì)胞排列較整齊，只有少量的炎細(xì)胞浸潤，較模型組有明顯改

5、善;甘珀酸鈉中劑量組與模型組相比有所改善，甘珀酸鈉低劑量組與模型組相比無明顯變化(圖1，見插頁3)。表2 CS對CCl4致急性肝損傷小鼠肝組織SOD、MDA和GSH的影響3 討論在肝細(xì)胞病變過程中，自由基、酶及脂質(zhì)過氧化等均發(fā)揮重要作用7。CCl4是誘導(dǎo)化學(xué)性肝損傷的常用藥物，在體內(nèi)經(jīng)肝臟細(xì)胞色素P450激活生成三氯甲基自由基(CCl3)、二氯甲烷自由基(CCl2)等，引起細(xì)胞膜的脂質(zhì)過氧化，使肝細(xì)胞膜通透性增加，引起肝細(xì)胞嚴(yán)重受損，細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)氨酶易穿過細(xì)胞膜而釋放入血液8。因此，血清轉(zhuǎn)氨酶活性升高是肝細(xì)胞受損的敏感指標(biāo)。SOD和GSH是細(xì)胞內(nèi)主要的抗氧化酶，可清除自由基，激活或調(diào)動(dòng)機(jī)體中的內(nèi)源

6、性抗氧化系統(tǒng)，預(yù)防或減輕自由基損傷。自由基是啟動(dòng)脂質(zhì)過氧化的關(guān)鍵因素，其含量越高則肝損傷程度就越嚴(yán)重，SOD是超氧陰離子自由基的清除劑，可抑制自由基啟動(dòng)的脂質(zhì)過氧化，MDA是脂質(zhì)過氧化降解的主要產(chǎn)物，MDA能使膜蛋白、酶發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)，使膜通透性增加，導(dǎo)致細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)、功能和代謝發(fā)生改變，對機(jī)體造成損害，其含量反映了組織脂質(zhì)過氧化損傷程度。MDA的測定常常與SOD的測定相互配合，SOD活力的高低間接反映了機(jī)體清除氧自由基的能力，而MDA的高低又間接反映了機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度9-10，因此SOD及MDA可反映肝細(xì)胞損傷的程度和藥物對肝細(xì)胞的拮抗作用。GSH廣泛存在于人體的各種組織中，GSH

7、水平降低意味著機(jī)體抗氧化能力下降并引發(fā)機(jī)體的氧化應(yīng)激反應(yīng)，產(chǎn)生大量的自由基。在肝臟化學(xué)性損傷時(shí)，氧化應(yīng)激消耗GSH引起肝臟GSH含量下降，機(jī)體抗氧化能力下降并引發(fā)機(jī)體的氧化應(yīng)激反應(yīng)11。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示甘珀酸鈉可降低肝組織MDA的含量，并提高了SOD和GSH的活力。甘珀酸鈉能夠維持細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的完整性，阻止肝細(xì)胞的損傷破壞，抑制相關(guān)酶的升高;并抑制自由基誘導(dǎo)的肝臟脂質(zhì)過氧化損傷作用，提高機(jī)體清除氧自由基能力，從而對CCl4引起的化學(xué)性肝損傷起到一定的保護(hù)作用，對甘珀酸鈉作用機(jī)制還有待進(jìn)一步深入研究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1 田慶來，官月平，張波，等.甘草有效成分的藥理作用研究進(jìn)展J.天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，

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