第一節(jié)血清三碘甲狀腺原氨酸測定

1、 第一節(jié) 血清三碘甲狀腺原氨酸測定文件編號：版本號：頁碼：第 頁 共 頁 1 檢測方法和原理三碘甲狀腺原氨酸（3,5,3-L-triiodothyronine，T）是直接由甲狀腺合成和分泌（占大約20%）的，以及外圍T轉(zhuǎn)化為T（占大約80%）一種激素。T測定采用直接化學(xué)發(fā)光技術(shù)的競爭免疫測定法，檢測原理為：患者血樣中的T與一種T類似物競爭數(shù)量有限的、存在于標(biāo)記試劑中帶吖啶（acridinium）酯標(biāo)志的鼠單克隆抗T抗體，上述T類似物在固相試劑中與順磁離子共價結(jié)合。病人血樣中的T含量與系統(tǒng)所檢測的光亮指標(biāo)（RLUs）強度呈現(xiàn)一種反比關(guān)系。2 標(biāo)本采集及與干擾因素2.1 采血方法不抗凝靜脈血23m

2、l2.2標(biāo)本保存室溫保存，及時送檢和檢測。不得使用在室溫中保存8h以上的血樣。若分析試驗不能在8h之內(nèi)完成，應(yīng)使用無菌蓋蓋嚴(yán)標(biāo)本并將其置于28的環(huán)境保存。若血樣不能在48h之內(nèi)進行分析，應(yīng)將其置于20的環(huán)境中冷凍保存，可穩(wěn)定1個月。標(biāo)本只能冷凍一次，并且在解凍后應(yīng)允充分混勻。2.3注意事項推薦選用血清。人血清中的異嗜抗體可與免疫球蛋白試劑發(fā)生反應(yīng)，從而干擾實驗室中的免疫測定結(jié)果。經(jīng)常與動物或動物血清產(chǎn)品接觸的患者易于受到上述因素影響，因此其檢測結(jié)果可能會出現(xiàn)異常值，在進行診斷時應(yīng)獲取更多信息。膽色素>342mol/L（20mg/dl）、血紅蛋白>2.5g/L(250mg/dl)、三

3、酰甘油>26mmol/L(1000mg/dl)有明顯干擾。標(biāo)本應(yīng)避免乳糜、溶血、黃疸。3 試劑和設(shè)備3.1試劑SIEMENS原裝配套試劑。3.1.1試劑組成：T3Lite試劑和T固相試劑、T輔助試劑。T Lite試劑：吖啶酯標(biāo)記的單克隆鼠抗人T抗體（300ng/管），含疊氮鈉（0.1%）、ANS、巴比妥鈉緩沖液。T 固相試劑：與磁性顆粒共價結(jié)合的T類似物（200g/管），含疊氮鈉（0.1%）ANS、巴比妥鈉緩沖液。3.1.2試劑準(zhǔn)備：手工混合所有試劑包，肉眼檢查試劑包底部以確保所有顆粒分散均勻并處于懸浮狀態(tài)。然后將混合物載入系統(tǒng)直接使用。若使用新批號試劑，需在主界面選擇Calibrati

4、on，選擇Master Curve Definition。在Calibration-Master Curve窗口，選擇Scan Data， 第一節(jié) 血清三碘甲狀腺原氨酸測定文件編號：版本號：頁碼：第 頁 共 頁 用掃描器掃描主曲線，掃描后點擊Save（注意，用掃描器掃描時，不要?；蚧貟?，一直掃完條碼為止）。3.1.3 試劑儲存：28冷藏保存，并保持豎直向上。3.1.4 注意事項：疊氮鈉與銅、鉛形成易爆的金屬疊氮鈉化合物，處理廢液時應(yīng)用大量水沖洗稀釋以防疊氮鈉的產(chǎn)生。上述試劑不能口服，萬一沾至皮膚應(yīng)立即用清水及肥皂水沖洗。所有試劑應(yīng)按照潛在傳染性的物質(zhì)處理。3.2控制品SIEMENS原裝配套質(zhì)控

5、品Ligand Plus 1，2，3.3.3校準(zhǔn)品SIEMENS原裝配套校準(zhǔn)品A3.4儀器SIEMENS ADVIA CENTAUR全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀。4 操作程序4.1檢測流程簽收標(biāo)本離心上機檢測審核報告簽發(fā)報告標(biāo)本保存。4.2標(biāo)本簽收嚴(yán)格按標(biāo)本接收程序簽收標(biāo)本。4.3標(biāo)本處理標(biāo)本在離心機上以25003000r/min，離心610min，分離血清上機測定。若標(biāo)本不能及時檢測，將分離的血清冷藏于28的冰箱里。4.4標(biāo)本檢測4.4.1手工編排測試項目：適用于無條形碼標(biāo)本或標(biāo)本復(fù)查，在Worklist窗口，點擊Schedule點擊Schedule by Rack，輸入樣品架子號，后加AE點擊

6、Ente，輸入ID號，選擇項目組合或測試項目點擊Save保存。4.4.2雙向條形碼標(biāo)本分離血清后直接上機檢測。4.4.3運行：將已裝載樣品管的架子置于樣品錄入?yún)^(qū)，啟動錄入?yún)^(qū)。4.5檢驗后標(biāo)本保存標(biāo)本檢測后密封蓋好，保存在標(biāo)本冷藏庫內(nèi)，按日期放好，保存期為7d。5 校準(zhǔn)程序5.1校準(zhǔn)品準(zhǔn)備和存儲將校準(zhǔn)品A從冰箱中取出，加5.0ml蒸餾水復(fù)融，輕輕旋轉(zhuǎn)搖勻，室溫放置30min，待充分混勻后分裝，20冰凍保存至少20d，復(fù)融后28可穩(wěn)定24h。5.2校準(zhǔn)條件 第一節(jié) 血清三碘甲狀腺原氨酸測定文件編號：版本號：頁碼：第 頁 共 頁 在室內(nèi)質(zhì)控失控，使用新批號試劑、更換儀器主要配件或進行大保養(yǎng)后均需校準(zhǔn)

7、。無特殊情況時校準(zhǔn)周期為28d。5.3校準(zhǔn)程序使用新批號校準(zhǔn)液時，需在主界面，點擊Calibratior，選擇Calibrator Definition。在Calibration-Calibrator Definition窗口， 選擇Scan Data，用掃描器掃描校準(zhǔn)曲線，掃描后，核對數(shù)據(jù)正確后，保存數(shù)據(jù)。將復(fù)融后的高、低水平校準(zhǔn)品A置于樣品架上，并確認(rèn)低定標(biāo)液之前放置。在Worklist窗口，點擊Schedule點擊Calibration，選擇校準(zhǔn)項目、校準(zhǔn)品批號及試劑批號點擊Save保存。將已裝載校準(zhǔn)品的架子置于樣品錄入?yún)^(qū)，啟動錄入?yún)^(qū)運行T定標(biāo)程序。6 質(zhì)量控制程序 6.1質(zhì)控品準(zhǔn)備和儲

8、存將質(zhì)控品從冰箱中取出，加5.0ml蒸餾水復(fù)融，輕輕旋轉(zhuǎn)搖勻，室溫放置30min，待充分混勻后分裝，20冰凍可保存至少20d。復(fù)融后28可穩(wěn)定24h。6.2控制品水平和分析批長度每24h至少進行1批，每批至少2個濃度水平。6.3質(zhì)控操作程序?qū)?fù)融后的質(zhì)控品裝于樣品管中，放置于樣品架上，在Worklist窗口，點擊Schedule點擊Control點擊Schedule by Rack，選擇項目及質(zhì)控ID號，輸入架子號點擊Save保存。啟動錄入?yún)^(qū)開始運行T質(zhì)控程序。7性能參數(shù) 本方法線性范圍為0.1512.3nmol/L，不準(zhǔn)確度允許范圍？X±12.5,不精密度CV<8.33.對于

9、超過測定線性范圍的標(biāo)本，用配套稀釋液對標(biāo)本進行稀釋后再檢測，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。8生物參考區(qū)間 1.492.60nmol/L。9臨床意義T與T濃度增高主要見于甲狀腺功能亢進時，和FT、FT一起可用在甲亢及甲減的診斷、病情評估、療效監(jiān)測上。但在甲亢初期與復(fù)發(fā)早期T一般上升很快，約4倍于正常； T上升緩慢，僅為正常的2.5倍，故T是早期Graves病療效觀察及·停藥后復(fù)發(fā)的敏感指標(biāo)。T與T升高還可見于活動性肝炎、妊娠時。T、T減低可見于甲狀腺功能低下，甲減時T或FT降低早于T或FT。血T或FT降低僅見于疾病后期或病重者。 第一節(jié) 血清三碘甲狀腺原氨酸測定文件編號：版本號：頁碼：第 頁 共 頁10參考文獻1SIE