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1、LOGO實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二 徒手切片與臨時(shí)裝片的制作徒手切片與臨時(shí)裝片的制作授課教師:鄭授課教師:鄭 磊磊2008.12.04 實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求 v熟練掌握徒手切片技術(shù)熟練掌握徒手切片技術(shù),能夠切出只有一層細(xì)胞,能夠切出只有一層細(xì)胞的切片。的切片。實(shí)驗(yàn)器材與用具實(shí)驗(yàn)器材與用具v顯微鏡顯微鏡、培養(yǎng)皿、單面刀片、雙面刀片、載玻片、培養(yǎng)皿、單面刀片、雙面刀片、載玻片、蓋玻片、毛筆、蓋玻片、毛筆、 吸水紙。吸水紙。實(shí)驗(yàn)材料與試劑實(shí)驗(yàn)材料與試劑v實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料 新鮮的吊蘭莖新鮮的吊蘭莖和葉、芹菜葉柄、黃豆芽,胡蘿卜(支持和葉、芹菜葉柄、黃豆芽,胡蘿卜(支持物)。物)。v試劑試劑 1%番紅番紅水溶
2、液水溶液、 45%醋酸。醋酸。實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 徒手制片徒手制片一般指徒手用刀片把新鮮的或固定好的植物材料一般指徒手用刀片把新鮮的或固定好的植物材料切成薄片切成薄片,不經(jīng)染色或經(jīng)簡單染色后用水封片制成臨時(shí),不經(jīng)染色或經(jīng)簡單染色后用水封片制成臨時(shí)制制片的方法。片的方法。 此制片法主要此制片法主要優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)是:(是:(1 1)能及時(shí)觀察研究植物生活組)能及時(shí)觀察研究植物生活組織的結(jié)構(gòu)和天然色彩;(織的結(jié)構(gòu)和天然色彩;(2 2)方法及用具簡單,不需切片)方法及用具簡單,不需切片機(jī)等機(jī)械設(shè)備,短時(shí)間即可完成。機(jī)等機(jī)械設(shè)備,短時(shí)間即可完成。 主要主要缺點(diǎn)缺點(diǎn)是:(是:(1 1)對于微小、柔軟、水分過多以及
3、堅(jiān)硬)對于微小、柔軟、水分過多以及堅(jiān)硬的材料,難以用徒手切成薄片;(的材料,難以用徒手切成薄片;(2 2)不能制成連續(xù)的切不能制成連續(xù)的切片片;(;(3 3)對于操作不熟練者,往往難以切成厚薄均勻和對于操作不熟練者,往往難以切成厚薄均勻和完整的切片。完整的切片。實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)方法v材料的準(zhǔn)備和修整材料的準(zhǔn)備和修整 將植物莖切成將植物莖切成23cm長的小段,并將其切面削平;長的小段,并將其切面削平; 若為質(zhì)地較軟而薄的材料,如葉片,可沿主脈兩側(cè)切成寬若為質(zhì)地較軟而薄的材料,如葉片,可沿主脈兩側(cè)切成寬56mm、長、長11.5cm的小塊,夾在支持物中進(jìn)行切片。的小塊,夾在支持物中進(jìn)行切片。 支持物通常
4、為蘿卜、胡蘿卜、馬鈴薯、通心草等。先將支支持物通常為蘿卜、胡蘿卜、馬鈴薯、通心草等。先將支持物切成高持物切成高35cm、長、寬、長、寬0.5cm的立方體小塊,將其中的立方體小塊,將其中部縱切一縫,然后將修整好的材料夾在其中。部縱切一縫,然后將修整好的材料夾在其中。 v切片切片 切片前在培養(yǎng)皿內(nèi)盛放適量清水切片前在培養(yǎng)皿內(nèi)盛放適量清水。以左手拇指、食指、中指捏住材料,拇指應(yīng)低于食指,以免切傷以左手拇指、食指、中指捏住材料,拇指應(yīng)低于食指,以免切傷手指手指,材料高出食指材料高出食指23mm。切片前切片前,用水潤濕刀片,以減少切片阻力。,用水潤濕刀片,以減少切片阻力。右手執(zhí)刀,將刀片平放在左手食指上
5、,刀口朝內(nèi),刀面與材料斷右手執(zhí)刀,將刀片平放在左手食指上,刀口朝內(nèi),刀面與材料斷面平行,然后以均勻快捷的動作自左前方向右后方以臂力帶動刀面平行,然后以均勻快捷的動作自左前方向右后方以臂力帶動刀片水平切割,不要用腕力。同時(shí)還要注意,切時(shí)動作要迅速,材片水平切割,不要用腕力。同時(shí)還要注意,切時(shí)動作要迅速,材料一次切下,切忌停頓或拉鋸式切割。料一次切下,切忌停頓或拉鋸式切割。切下數(shù)片后切下數(shù)片后,用濕毛筆輕輕將薄片移入清水中,防止材料萎蔫。,用濕毛筆輕輕將薄片移入清水中,防止材料萎蔫。v染色與鏡檢染色與鏡檢 若要觀察植物組織的天然色彩:挑選薄而透明若要觀察植物組織的天然色彩:挑選薄而透明、平整的切、平整的切片,放在載玻片上,水封,制成臨時(shí)裝片。片,放在載玻片上,水封,制成臨時(shí)裝片。 若想染色以觀察更清楚的切片:采用單染色若想染色以觀察更清楚的切片:采用單染色,即用,即用1%番番紅水溶液染色紅水溶液染色35min,用蒸餾水洗去浮色,水封,鏡檢。,用蒸餾水洗去浮色,水封,鏡檢。觀察材料剃刀雙面刀片拿材料的手勢拿材料的手勢胡蘿卜木髓切取標(biāo)本切取的標(biāo)本擦拭載玻片滴水放置標(biāo)本加蓋蓋玻片葉的橫切玉米莖橫切玉米莖橫切南瓜莖橫切南瓜莖橫切南瓜莖縱切南瓜莖縱切任務(wù)與
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