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文檔簡介
1、專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題1果酒和果醋的制作1.果酒制作的原理(1)人類利用微生物發(fā)酵制作果酒,該過程用到的微生物是,它的代謝類型是,與異化作用有關(guān)的方程式有.生活狀態(tài):進行發(fā)酵,產(chǎn)生大量,O(2)果酒制作條件傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所使用的酵母菌的來源是。酵母菌生長的最適溫度是;PH呈;.;(3)紅色葡萄酒呈現(xiàn)顏色的原因是:酒精發(fā)酵過程中,隨著的提高,紅色葡萄皮的進入發(fā)酵液,使葡萄酒呈.色。(4)在、的發(fā)酵液中,酵母菌可以生長繁殖,而絕大多數(shù)其它微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。2 .果醋的制作原理(1)果醋發(fā)酵菌種是,新陳代謝類型.(2)當(dāng)氧氣和糖源充足時醋酸菌將糖分解成.,.當(dāng)糖源不足時醋酸菌
2、將變?yōu)樵僮兂纱姿?,其反?yīng)式o3 .操作過程應(yīng)注意的問題(1)為防止發(fā)酵液被污染,發(fā)酵瓶要用一消毒。(2)葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時,要留出大約的空間。(3)制作葡萄酒時將溫度嚴(yán)格控制在,時間控制在d左右,可通過對發(fā)酵的情況進行及時的監(jiān)測。(4)制葡萄醋的過程中,將溫度嚴(yán)格控制在,時間控制在d,并注意適時在.充氣。4 .酒精的檢驗(1)檢驗試劑:o(2)反應(yīng)條件及現(xiàn)象:在條件下,反應(yīng)呈現(xiàn)。5 .制作果酒、果醋的實驗流程挑選葡萄_!果酒果醋P4旁欄思考題1 .你認(rèn)為應(yīng)該先洗葡萄還是先除去枝梗,為什么?應(yīng)該先沖洗葡萄,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗時引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機會。2 .你認(rèn)為應(yīng)該從哪些
3、方面防止發(fā)酵液被污染?需要從發(fā)酵制作的過程進行全面的考慮,因為操作的每一步都可能混入雜菌。例如:榨汁機、發(fā)酵裝置要清洗干凈;每次排氣時只需擰松瓶蓋、不要完全揭開瓶蓋等。3 .制作葡萄酒時,為什么要將溫度控制在1825氣?制作葡萄醋時,為什么要將溫度控制在30-35?溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。20左右最適合酵母菌繁殖,因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌,最適生長溫度為3035。,因此要將溫度控制在30-35o4 .制葡萄醋時,為什么要適時通過充氣口充氣?醋酸菌是好氧菌,再將酒精變成醋酸時需要養(yǎng)的參與,因此要適時向發(fā)酵液中充氣。P4:A同學(xué):每次排氣時只需擰松瓶蓋,不要
4、完全揭開瓶蓋;制醋時,再將瓶蓋打開,蓋上一層紗布,進行葡萄醋的發(fā)酵。來防止發(fā)酵液被污染,因為操作的每一步都可能混入雜菌B同學(xué):分析果酒和果醋的發(fā)酵裝置中充氣口、排氣口和出料口分別有哪些作用。為什么排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接?充氣口:是在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進行充氣用的;排氣口:是在酒精發(fā)酵時用來排出二氧化碳的;出料口:是用來取樣的。排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接,其目的是防止空氣中微生物的污染。使用該裝置制酒時,應(yīng)該關(guān)閉充氣口;制醋時,應(yīng)將充氣口連接氣泵,輸入氧氣。課題2腐乳的制作1 .制作原理(1) .經(jīng)過微生物的發(fā)酵,豆腐中的蛋白質(zhì)被分解成小分子的和,脂肪被分解成和
5、因而更利于消化吸收。(2) .腐乳的發(fā)酵有多種微生物參與,如、等,其中起主要作用的是o它是一種絲狀,常見、上。(3) .現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的條件下,將優(yōu)良菌種直接接種在豆腐上,這樣可以避免其他菌種的,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。2 .腐乳制作的實驗流程:讓豆腐長出-密封腌制。、Jf、3 .實驗注意事項(1)在豆腐上長出毛霉時,溫度控制在,自然條件下毛霉的菌種來自空氣中的;O(2)將長滿毛霉的豆腐塊分層加鹽,加鹽量要隨著擺放層數(shù)的加高而,近瓶口的表層要o加鹽的目的是使豆腐塊失水,利于,同時也能的生長。鹽的濃度過低,;鹽的濃度過fWj,,0(3)鹵湯中酒精的含量應(yīng)控制在左右,它能微生物的生長,同時也與豆腐
6、乳獨特的形成有關(guān)。酒精含量過高,;酒精含量過低,o香辛料可以調(diào)制腐乳的風(fēng)味,同時也有作用。(4)瓶口密封時,最好將瓶口,防止瓶口污染。P6旁欄思考題1 .你能利用所學(xué)的生物學(xué)知識,解釋豆腐長白毛是怎么一回事?豆腐上生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說是直立菌絲,在豆腐中還有匍匐菌絲。2 .王致和為什么要撒許多鹽,將長毛的豆腐腌起來?鹽能防止雜菌污染,避免豆腐腐敗。3 .你能總結(jié)出王致和做腐乳的方法嗎?讓豆腐長出毛霉一加鹽腌制一密封腌制。P7旁欄思考題1 .我們平常吃的豆腐,哪種適合用來做腐乳?含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量過高的豆腐制腐乳,不易成形。2 .吃腐乳時,你會發(fā)現(xiàn)腐乳外
7、部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢?它對人體有害嗎?它的作用是什么?“皮”是前期發(fā)酵時在豆腐表面上生長的菌絲(匍匐菌絲),它能形成腐乳的“體”,使腐乳成形?!捌ぁ睂θ梭w無害。P8練習(xí)1 .腌制腐乳時,為什么要隨豆腐層的加高而增加鹽的含量?為什么在接近瓶口的表面要將鹽厚鋪一些?越接近瓶口,雜菌污染的可能性越大,因此要隨著豆腐層的加高增加鹽的用量,在接近瓶口的表面,鹽要鋪厚一些,以有效防止雜菌污染。2 .怎樣用同樣的原料制作出不同風(fēng)味的腐乳?(可以不看)在酒和料上作變動紅腐乳:又稱紅方,指在后期發(fā)酵的湯料中,配以著色劑紅曲,釀制而成的腐乳。白腐乳:又稱白方,指在后期發(fā)酵過程中,不添加任
8、何著色劑,湯料以黃酒、白酒、香料為主釀制而成的腐乳,在釀制過程中因添加不同的調(diào)味輔料,使其呈現(xiàn)不同的風(fēng)味特色,目前大致包括糟方、油方、霉香、醉方、辣方等品種。青腐乳:又稱青方,俗稱“臭豆腐”,指在后期發(fā)酵過程中,以低度鹽水為湯料釀制而成的腐乳,具有特有的氣味,表面呈青色。醬腐乳:又稱醬方,指在后期發(fā)酵過程中,以醬曲(大豆醬曲、蠶豆醬曲、面醬曲等)為主要輔料釀制而成的腐乳。課題3制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量1 .乳酸菌代謝類型為,在情況狂下,將葡萄糖分解為乳酸。在自然界中分布廣泛,在、內(nèi)都有分布。常見的乳酸菌有一和兩種,其中.常用于生產(chǎn)酸奶。2 .亞硝酸鹽為,易溶于,在食品生產(chǎn)中用作o一般不會危害
9、人體健康,但當(dāng)人體攝入硝酸鹽總量達g時,會引起中毒;當(dāng)攝入總量達到g時,會引起死亡。在特定的條件下,如、和的作用下,會轉(zhuǎn)變成致癌物質(zhì)一一亞硝胺,亞硝胺對動物有致畸和致突變作用。3 .泡菜制作大致流程:原料處理一-裝壇一一成品(1)配制鹽水:清水和鹽的比例為,鹽水后備用。(2)裝壇:蔬菜裝至?xí)r加入香辛料,裝至?xí)r加鹽水,鹽水要蓋好壇蓋。壇蓋邊沿水槽中,保證壇內(nèi)環(huán)境。(3)腌制過程種要注意控制腌制的、和o溫度過高、食鹽用量不足10%、.過短,容易造成,4 .測亞硝酸鹽含量的原理是;o將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的,進行比較,可以大致出泡菜中亞硝酸鹽的含量。測定步驟:配定溶液一一制備樣品處理液_P9旁
10、欄思考題:為什么含有抗生素的牛奶不能發(fā)酹成酸奶?酸奶的制作依靠的是乳酸菌的發(fā)酵作用??股啬軌驓⑺阑蛞种迫樗峋纳L,因此含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶。P10旁欄思考題:1 .為什么日常生活中要多吃新鮮蔬菜,不宜多吃腌制蔬菜?有些蔬菜,入小白菜和蘿卜等,含有豐富的硝酸鹽。當(dāng)這些蔬菜放置過久發(fā)生變質(zhì)(發(fā)黃、腐爛)或者煮熟后存放太久時,蔬菜中的硝酸鹽會被微生物還原成亞硝酸鹽,危害人體健康。2 .為什么泡菜壇內(nèi)有時會長一層白膜?你認(rèn)為這層白膜是怎么形成的?形成白膜是由于產(chǎn)膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厭氧微生物,泡菜發(fā)酵液營養(yǎng)豐富,其表面氧氣含量也很豐富,適合酵母菌繁殖。P12練習(xí):2.你能總結(jié)果酒、
11、果醋、腐乳、泡菜這幾種發(fā)酵食品在利用微生物的種類和制作原理方面的不同嗎?你能總結(jié)出傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的共同特點嗎?果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精發(fā)酵,果醋的制作利用的是醋酸菌將酒精轉(zhuǎn)變成醋酸的代謝,腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶類,泡菜的制作利用的是乳酸菌的乳酸發(fā)酵。傳統(tǒng)的發(fā)酵技術(shù)都巧妙的利用了天然菌種,都為特定的菌種提供了良好的生存條件,最終的發(fā)酵產(chǎn)物不是單一的組分,而是成分復(fù)雜的混合物。2專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1微生物的實驗室培養(yǎng)1.根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)可將培養(yǎng)基可以分為和O2 .培養(yǎng)基一般都含有_、1、V四類營養(yǎng)物質(zhì),另外還需要滿足微生物生長對、以及的要求。3 .獲得純凈
12、培養(yǎng)物的關(guān)鍵是o4 .消毒是指滅菌是指5 .日常生活中常用的消毒方法是.此外,人們也常使用化學(xué)藥劑進行消毒,如用_、等。常用的滅菌方法有、,此外,實驗室里還用或進行消毒。6 .制備牛肉膏蛋白陳固體培養(yǎng)基的方法步驟是-,(2),(3),(4),(5)o7 .微生物接種的方法中最常用的是和o平板劃線是指。稀釋涂布平板法指;。8 .菌種的保藏:(1)臨時保藏:將菌種接種到試管的,在合適的溫度下培養(yǎng),長成后,放入冰箱中保臧,以后每36個月,轉(zhuǎn)移一次新的培養(yǎng)基。缺點是:保存時間菌種容易被或產(chǎn)生變異。(2)長期保存方法:二法,放在冷凍箱中保存。P15旁欄思考題:無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來
13、微生物污染外,還有什么目的?無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。P16旁欄思考題:請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要,請選擇合適的方法。(1)培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿(2)玻棒、試管、燒瓶和吸管(3)實驗操作者的雙手(1)、(2)需要滅菌;(3)需要消毒。P17倒平板操作的討論1 .培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50c左右時,才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度?可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時,就可以進行倒平板To2 .為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰?通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3 .平板冷凝后,為什么要將平板倒
14、置?平板冷凝后,皿蓋上會凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。4 .在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么?空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。P18平板劃線操作的討論1 .為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時,仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)
15、上殘留的菌種,使下一次劃線時,接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。2 .在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進行劃線?以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。3 .在作第二次以及其后的劃線操作時,為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?劃線后,線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。P19涂布平板操作的討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進行。結(jié)合
16、平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求,想一想,第2步應(yīng)如何進行無菌操作?應(yīng)從操作的各個細節(jié)保證“無菌”。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍;等等。P20六、課題成果評價1 .培養(yǎng)基的制作是否合格如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫12d后無菌落生長,說明培養(yǎng)基的制備是成功的,否則需要重新制備。2 .接種操作是否符合無菌要求如果培養(yǎng)基上生長的菌落的顏色、形狀、大小基本一致,并符合大腸桿菌菌落的特點,則說明接種操作是符合要求的;如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落,則說明接種過程中,無菌操作還未達到要求,需要分析原因,再次練習(xí)。3 .是否進行了及時細致的觀察與記錄培
17、養(yǎng)12h與24h后的大腸桿菌菌落的大小會有明顯不同,及時觀察記錄的同學(xué)會發(fā)現(xiàn)這一點,能觀察到其他一些細微的變化。這一步的要求主要是培養(yǎng)學(xué)生良好的科學(xué)態(tài)度與習(xí)慣。P20練習(xí)1 .提示:可以從微生物生長需要哪些條件的角度來思考。例如,微生物的生長需要水、空氣、適宜的溫度,食品保存可以通過保持干燥、真空的條件,以及冷藏等方法來阻止微生物的生長。2 .提示:可以從這三種培養(yǎng)技術(shù)的原理、操作步驟等方面分別進行總結(jié)歸納。例如,這三種培養(yǎng)技術(shù)都需要為培養(yǎng)物提供充足的營養(yǎng),但無土栽培技術(shù)的操作并不需要保證無菌的條件,而其他兩種技術(shù)都要求嚴(yán)格的無菌條件。3 .提示:這是一道開放性的問題,答案并不惟一,重點在于鼓
18、勵學(xué)生積極參與,從不同的角度思考問題。例如,正是由于證明了微生物不是自發(fā)產(chǎn)生的,微生物學(xué)才可能發(fā)展成為一門獨立的學(xué)科;巴斯德實驗中用到的加熱滅菌的方法導(dǎo)致了有效的滅菌方法的出現(xiàn),而這一滅菌原理也適用于食品的保存等。課題2土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)1 .尿素只有被_分解成,之后,才能被植物吸收利用。選擇分解尿素細菌的培養(yǎng)基特點:惟一氮源,按物理性質(zhì)歸類為培養(yǎng)基。2 .PCR()是一種在體外將o此項技術(shù)的自動化,要求使用耐高溫的DNA聚合酶。3實驗室中微生物的篩選應(yīng)用的原理是:人為提供有利于生長的條件(包括等),同時抑制或阻止其他微生物生長。4 .選擇培養(yǎng)基是指o5 .常用來統(tǒng)計樣品中活菌數(shù)
19、目的方法是o即當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的O通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)在的平板進行計數(shù),計數(shù)公式是P利用稀釋涂布平板法成功統(tǒng)計菌落數(shù)目的關(guān)鍵是.O另外,也是測定微生物數(shù)量的常用方法C6 .一般來說,統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目O這是因為o因此,統(tǒng)計結(jié)果一般用而不是活菌數(shù)來表示。7 .設(shè)置對照實驗的主要目的是提高實驗結(jié)果的可信度。對照實驗是O滿足該條件的稱為,未滿足該條件的稱為O8 .實驗設(shè)計包括的內(nèi)容有:、_和具體的實驗步驟以及時間安排等的綜合考慮和安排。9 .不同種類的微生物,往往需
20、要不同的培養(yǎng),和培養(yǎng)o在實驗過程中,一般每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果,這樣可以O(shè)10 .土壤有“”之稱,同其他生物環(huán)境相比,土壤中微生物二、.O11 .土壤中的微生物約是細菌,細菌適宜在酸堿度接近潮濕土壤中生長。土壤中微生物的數(shù)量不同,分離不同微生物采用的的稀釋度不同。12 .一般來說,在一定的培養(yǎng)條件下,同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。這些特征包括菌落的!:、和等方面。13 .在進行多組實驗過程中,應(yīng)注意做好標(biāo)記,其目的是14 .對所需的微生物進行初步篩選,只是分離純化菌種的第一步,要對分離的菌種進行一步的鑒定,還需要借助二的方法。15 .在細菌分解尿素的化
21、學(xué)反應(yīng)中,細菌合成的將尿素分解成了o氨會使培養(yǎng)基的堿性,PH.o因此,我們可以通過檢測培養(yǎng)基變化來判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。在以為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入指示劑。培養(yǎng)某種細菌后,如果PH升高,指示劑將變一說明該細菌能夠OP22旁欄思考題1 .想一想,如何從平板上的菌落數(shù)推測出每克樣品中的菌落數(shù)?答:統(tǒng)計某一稀釋度下平板上的菌落數(shù),最好能統(tǒng)計3個平板,計算出平板菌落數(shù)的平均值,然后按課本旁欄的公式進行計算。P22兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù),在對應(yīng)稀釋倍數(shù)106的培養(yǎng)集中,得到以下兩種統(tǒng)計結(jié)果:1.第一位同學(xué)在該濃度下涂布了一個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)為230;2.第二位同學(xué)在該濃度
22、下涂布了三個平板第一位同學(xué)只涂布了一個平板,沒有設(shè)置重復(fù)組,因此結(jié)果不具有說服力。第二位同學(xué)考慮到設(shè)置重復(fù)組的問題,涂布了3個平板,但是,其中1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差太遠,說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤,因此,不能簡單地將3個平板的計數(shù)值用來求平均值。P22設(shè)置對照A同學(xué)的結(jié)果與其他同學(xué)不同,可能的解釋有兩種。一是由于土樣不同,二是由于培養(yǎng)基污染或操作失誤。究竟是哪個原因,可以通過實驗來證明。實驗方案有兩種。一種方案是可以由其他同學(xué)用與A同學(xué)一樣的土樣進行實驗,如果結(jié)果與A同學(xué)一致,則證明A無誤;如果結(jié)果不同,則證明A卮學(xué)存在操作失誤或培養(yǎng)基的配制有問題。另一種方案是將A同學(xué)配制的培養(yǎng)基
23、在不加土樣的情況下進行培養(yǎng),作為空白對照,以證明培養(yǎng)基是否受到污染。通過這個事例可以看出,實驗結(jié)果要有說服力,對照的設(shè)置是必不可少的。P24旁欄思考題為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度?測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數(shù)量,選用的稀釋范圍相同嗎?這是因為土壤中各類微生物的數(shù)量(單位:株水g)是不同的,例如在干旱土壤中的上層樣本中:好氧及兼性厭氧細菌數(shù)約為2185萬,放線菌數(shù)約為477萬,霉菌數(shù)約為23.1萬。因此,為獲得不同類型的微生物,就需要按不同的稀釋度進行分離,同時還應(yīng)當(dāng)有針對性地提供選擇培養(yǎng)的條件。P25結(jié)果分析與評價2 .培養(yǎng)物中是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是
24、否篩選出菌落對照的培養(yǎng)皿在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長,說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染。牛肉膏培養(yǎng)基的菌落數(shù)目明顯大于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目,說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些菌落。3 .樣品的稀釋操作是否成功如果得到了2個或2個以上菌落數(shù)目在30300的平板,則說明稀釋操作比較成功,并能夠進行菌落的計數(shù)。4 .重復(fù)組的結(jié)果是否一致如果學(xué)生選取的是同一種土樣,統(tǒng)計的結(jié)果應(yīng)該接近。如果結(jié)果相差太遠,教師需要引導(dǎo)學(xué)生一起分析產(chǎn)生差異的原因。P26練習(xí)2.提示:反芻動物的瘤胃中含有大量的微生物,其中也包括分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微生物多為厭氧菌,接觸空氣后會死亡,因此分離其中能分解尿素的微生物除了需要準(zhǔn)備選擇培養(yǎng)基外,
25、還應(yīng)參照厭氧菌的培養(yǎng)方法進行實驗設(shè)計。課題3分解纖維素的微生物的分離1 .纖維素是類物質(zhì),是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物,此外,木材、作物秸稈等也富含纖維素。2 .纖維素酶是一種酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即、和,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成o正是在這三種酶的協(xié)同作用下,纖維素最終被水解成葡萄糖,為微生物的生長提供營養(yǎng),同樣,也可以為人類所利用。3 .篩選纖維素分解菌可以用法,這種方法能夠通過直接對微生物進行篩選。.可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成,但并不和水解后的和發(fā)生這種反應(yīng)。纖維素分解菌能產(chǎn)生分解纖維素,從而使菌落周圍形成o4 .分離分解纖維素的微生物
26、的實驗流程圖如下:-梯度稀釋一5 .為確定得到的菌是否是纖維素分解菌,還學(xué)進行的實驗。纖維素酶的發(fā)酵方法有發(fā)酵和發(fā)酵。測定方法一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的進行定量測定。P28旁欄思考題1 .本實驗的流程與課題2中的實驗流程有哪些異同?本實驗流程與課題2的流程的區(qū)別如下。課題2是將土樣制成的菌懸液直接涂布在以尿素為惟一氮源的選擇性培養(yǎng)基上,直接分離得到菌落。本課題通過選擇培養(yǎng),使纖維素分解菌得到增殖后,再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。其他步驟基本一致。2 .為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌?由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中,纖維素分解菌的含量相對提高,因此
27、從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。3 .將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進土壤多深?將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對聚集,實際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約10cm左右腐殖土壤中。P29旁欄思考題1 .想一想,這兩種方法各有哪些優(yōu)點與不足?你打算選用哪一種方法?(兩種剛果紅染色法的比較)方法一是傳統(tǒng)的方法,缺點是操作繁瑣,加入剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜;其優(yōu)點是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。方法二的優(yōu)點是操作簡便,不存在菌落混雜問題,缺點是由于纖維素和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì),可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)
28、假陽性反應(yīng)。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透明圈較為模糊,因為培養(yǎng)基中纖維素占主要地位,因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相區(qū)分。方法二的另一缺點是:有些微生物具有降解色素的能力,它們在長時間培養(yǎng)過程中會降解剛果紅形成明顯的透明圈,與纖維素分解菌不易區(qū)分。2 .為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物?在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖,而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮”的作用。P29六、課題成果評價1 .培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落:對照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長則說明培養(yǎng)基制作合格。如果觀察到產(chǎn)生透明
29、圈的菌落,則說明可能獲得了分解纖維素的微生物。2 .分離的結(jié)果是否一致:由于在土壤中細菌的數(shù)量遠遠高于真菌和放線菌的數(shù)量,因此最容易分離得到的是細菌。但由于所取土樣的環(huán)境不同,學(xué)生也可能得到真菌和放線菌等不同的分離結(jié)果。P30練習(xí)3 .答:流程圖表示如下。土壤取樣一選擇培養(yǎng)(此步是否需要,應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定)一梯度稀釋一將菌懸液涂布到有特定選擇作用的培養(yǎng)基上一挑選單菌落一發(fā)酵培養(yǎng)5專題六植物有效成分的提取課題1植物芳香油的提取【導(dǎo)學(xué)誘思】1 .植物芳香油的來源天然香料的主要來源是和O動物香料主要來源于麝、靈貓、海貍和抹香鯨等,植物香料的來源更為廣泛。植物芳香油可以從大約50多
30、個科的植物中提取。例如,工業(yè)生產(chǎn)中,玫瑰花用于提取,樟樹樹干用于提取o提取出的植物芳香油具有很強的,其組成也,主要包括及其思考:你能說出一些用于提取某些植物芳香油的器官嗎?并分別可提取哪種芳香油?2 .植物芳香油的提取方法植物芳香油的提取方法有、和等。具體采用那種方法要根據(jù)植物原料的特點來決定。是植物芳香油提取的常用方法,它的原理是o根據(jù)蒸播過程中的位置,可以將水蒸氣蒸儲法劃分為、和o其中,水中蒸憎的方法對于有些原料不適用,如柑橘和檸檬。這是因為等問題。因此,柑橘、檸檬芳香油的制備通常使用法。植物芳香油不僅,而且易溶于,如石油酸、酒精、乙醛和戊烷等。不適于用水蒸氣蒸僧的原料,可以考慮使用法。萃
31、取法是將的方法。芳香油溶解于有機溶劑后,只需蒸發(fā)出有機溶劑,就可以獲得純凈的了。但是,用于萃取的有機溶劑必須,,否則會影響芳香油的質(zhì)量。3、玫瑰精油的提取玫瑰精油是制作的主要成分,能使人產(chǎn)生愉悅感。由于玫瑰精油化學(xué)性質(zhì),難溶手,易溶于,能隨一同蒸懦,通常采用法中的法。提取玫瑰精油的實驗流、o思考:在提取過程中,如何對乳濁液的處理和玫瑰液的回收?3 、橘皮精油的提取從橘皮中提取的,主要成分為,具有很高的經(jīng)濟價值。橘皮精油主要儲藏在部分,由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸儲時會發(fā)生部分水解,使用水中蒸僧法又會產(chǎn)生原料焦糊的問題,所以一般采用法。具體的流程是、r實驗案例案例一玫瑰精油的提取5月上、中
32、旬是玫瑰的盛開期,最好是選用當(dāng)天采摘的鮮玫瑰花。將花瓣用清水沖洗,去掉上面的灰塵等雜質(zhì),瀝干水分。由于玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,從玫瑰花中提取玫瑰精油可采取水中蒸播法。本實驗的具體操作步驟如下。1.稱取50g玫瑰花瓣,放入500mL的圓底燒瓶中,加入200mL蒸馀水。按教科書圖6-2所示安裝蒸鐳裝置。蒸馀裝置包括:鐵架臺兩個、酒精燈、石棉網(wǎng)、蒸鐳瓶、橡膠塞、蒸儲頭、溫度計、直型冷凝管、接液管、錐形瓶,以及連接進水口和出水口的橡皮管。所有儀器必須事先干燥,保證無水。整套蒸儲裝置可分為左、中、右三部分,其中左邊的部分通過加熱進行蒸儲,中部將蒸儲物冷凝,右邊的部分用來接收。安裝儀器一般都按照自下而上、從
33、左到右的順序。拆卸儀器的順序與安裝時相反。具體安裝順序和方法如下。(1)固定熱源酒精燈。(2)固定蒸鐳瓶,使其離熱源的距離如教科書中圖6-2所示,并且保持蒸飾瓶軸心與鐵架臺的水平面垂直。(3)安裝蒸鐳頭,使蒸鐳頭的橫截面與鐵架臺平行。(4)連接冷凝管。保證上端出水口向上,通過橡皮管與水池相連;下端進水口向下,通過橡皮管與水龍頭相連。(5)連接接液管(或稱尾接管)。(6)將接收瓶瓶口對準(zhǔn)尾接管的出口。常壓蒸鐳一般用錐形瓶而不用燒杯作接受器,接收瓶應(yīng)在實驗前稱重,并做好記錄。(7)將溫度計固定在蒸馀頭上,使溫度計水銀球的上限與蒸馀頭側(cè)管的下限處在同一水平線上。2 .蒸飾裝置安裝完畢后,可以在蒸鐳瓶
34、中加幾粒沸石,防止液體過度沸騰。打開水龍頭,緩緩?fù)ㄈ肜渌?,然后開始加熱。加熱時可以觀察到,蒸鐳瓶中的液體逐漸沸騰,蒸氣逐漸上升,溫度計讀數(shù)也略有上升。當(dāng)蒸氣的頂端達到溫度計水銀球部位時,溫度計讀數(shù)急劇上升。在整個蒸鐳過程中,應(yīng)保證溫度計的水銀球上常有因冷凝作用而形成的液滴??刂普翕诺臅r間和速度,通常以每秒12滴為宜。蒸譚完畢,應(yīng)先撤出熱源,然后停止通水,最后拆卸蒸儲裝置,拆卸的順序與安裝時相反。3 .收集錐形瓶中的乳白色的乳濁液,向錐形瓶中加入質(zhì)量濃度為0.1g血L的氯化鈉溶液,使乳化液分層。然后將其倒入分液漏斗中,用分液漏斗將油層和水層完全分開。打開頂塞,再將活塞緩緩旋開,放出下層的玫瑰精油
35、,用接收瓶收集。向接收瓶中加入無水硫酸鈉,吸去油層中含有的水分,放置過夜。為了更好地將油、水兩層液體分離,操作時應(yīng)注意正確使用分液漏斗。分液漏斗的使用方法如下。(1)首先把活塞擦干,為活塞均勻涂上一層潤滑脂,注意切勿將潤滑脂涂得太厚或使?jié)櫥M入活塞孔中,以免污染萃取液。(2)塞好活塞后,把活塞旋轉(zhuǎn)幾圈,使?jié)櫥植季鶆颉2⒂盟畽z查分液漏斗的頂塞與活塞處是否滲漏,確認(rèn)不漏水后再使用。(3)將分液漏斗放置在大小合適的、并已固定在鐵架臺上的鐵圈中,關(guān)好活塞。將待分離的液體從上部開口處倒入漏斗中,塞緊頂塞,注意頂塞不能涂潤滑脂。(4)取下分液漏斗,用右手手掌頂住漏斗頂塞并握住漏斗頸,左手握住漏斗活塞
36、處,大拇指壓緊活塞,將分液漏斗略傾斜,前后振蕩(開始振蕩時要慢)。(5)振蕩后,使漏斗口仍保持原傾斜狀態(tài),左手仍握在漏斗活塞處,下部管口指向無人處,用拇指和食指旋開活塞,使其釋放出漏斗內(nèi)的蒸氣或產(chǎn)生的氣體,以使內(nèi)外壓力平衡,這一步操作也稱做“放氣”。(6)重復(fù)上述操作,直至分液漏斗中只放出很少的氣體時為止。再將分液漏斗劇烈振蕩23m公,然后將漏斗放回鐵圈中,待液體靜置分層。案例二橘皮精油的提取課前準(zhǔn)備在實驗前一天,教師需要準(zhǔn)備新鮮的、沒有霉?fàn)€的橘皮,用量可根據(jù)實驗人數(shù)來決定。用清水沖洗橘皮,去掉灰塵等雜質(zhì),瀝干水分后,將橘皮攤放在干燥通風(fēng)處。將晾干的橘皮浸泡在pH大于12、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7%8%的
37、石灰水中,時間為1624h,中間翻動23次。浸泡好的橘皮呈黃色、無白芯、稍硬、脆而不斷、具有彈性。這樣的橘皮在壓榨時不易打滑,橘油的噴射力強;壓榨后的殘渣呈顆粒狀,殘渣中的含水量低,黏稠度不太高,過濾時比較順利,不易堵塞篩孔。提取橘皮精油的具體步驟如下。1 .將浸泡后的橘皮,用流動的水漂洗,洗凈后撈起、瀝干。切記一定要將橘皮徹底沖洗干凈。然后將橘皮粉碎至3mm大小,放入家用榨汁機或手動壓榨機中粉碎。粉碎時加入與橘皮同質(zhì)量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.25%的小蘇打和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的硫酸鈉溶液,并調(diào)節(jié)pH為78o2 .在榨出的油水混合液中加入明磯,使之沉淀并變澄清,然后用布袋過濾,除去糊狀殘渣。再將得到的混合
38、物,用6000r血48000mii的轉(zhuǎn)速進行高速離心。在正常情況下,離心后獲得的香精油將是澄清透明的。3 .分離出的香精油往往帶有少量水分和蠟質(zhì)等雜質(zhì),為了進一步除去雜質(zhì),可以將分離的產(chǎn)品放在5C10C的冰箱中,靜置57d,讓雜質(zhì)與水下沉。然后用吸管吸出上層澄清的油層,再通過墊有濾紙或石棉紙的漏斗進行減壓抽濾,得到黃色油狀的橘皮精油。課題成果評價(-)是否提取出了植物精油觀察學(xué)生提取出的玫瑰精油或橘皮精油,從顏色、氣味等方面來評價所提取的精油的純度和質(zhì)量。從玫瑰花提取的芳香油是淺黃色至黃色的液體,并帶有甜韻的玫瑰香;從橘皮提取的橘皮精油無色透明,具有誘人的橘香味。本課題只是對兩種精油進行了初步
39、的提取,其中仍然含有大量的雜質(zhì)。(二)出油率的計算根據(jù)教科書提供的公式計算出油率。如果出油率高,說明實驗方案設(shè)計合理;如果出油率低,教師可以幫助學(xué)生從實驗方法的選擇、實驗過程的操作等各方面分析原因,改進后再作嘗試。答案和提不練習(xí)1 .答:植物芳香油一般都是由23種芳香油混合調(diào)配而成的,其中的基底油常取自植物的種子或果實,比如胡桃油、甜杏油?;子团c其他芳香油調(diào)配在一起,能夠加強功效。從玫瑰花中提取出的玫瑰油稱為“液體黃金”,是世界香料工業(yè)不可取代的原料,多用于制造高級香水等化妝品。提取出的玫瑰油不含有任何添加劑或化學(xué)原料,是純天然的護膚品,具有極好的抗衰老和止癢作用,能夠促進細胞再生、防止肌膚
40、老化、平撫肌膚細紋,還具有使人放松、愉悅心情的功效。杏仁油富含礦物質(zhì)和維生素,是一種質(zhì)地輕柔、高滲透性的保濕劑。熏衣草精油取自熏衣草花,具有怡神、助睡眠、舒緩壓力的作用,此外它還具有降壓、止痛、促進細胞再生的功能,可以用于治療燙傷和蚊蟲叮咬、預(yù)防和改善脫發(fā)。檸檬精油取自檸檬果皮,具有消除緊張、焦慮、振奮精神的作用,可用于治療神經(jīng)衰弱、關(guān)節(jié)炎,還具有促進血液循環(huán)、殺菌止痛、平衡油脂分泌、舒緩肌膚老化、滋養(yǎng)頭發(fā)的功效。茶樹精油具有新鮮、強烈的藥草香味,能改善毛孔阻塞,凈化肌膚,抗感染,對治療青春痘有奇效。它也能消除疲勞、緩解壓力。天竺葵精油能收斂皮膚,平衡、調(diào)理、潤滑中干性皮膚和敏感性皮膚,改善橘
41、皮樣表皮,還有助于恢復(fù)精力,平緩心情。茉莉精油能防止肌膚老化,對中干性皮膚和敏感性皮膚具有良好的保濕和滋潤作用,尤其對女性的妊娠紋和內(nèi)分泌有獨特的改善效果。橙花精油具有清新的水果香味,不但能使人鎮(zhèn)靜,還能防止中干性肌膚的老化現(xiàn)象發(fā)生,給肌膚賦予青春活力,促進皮膚再生。2 .建議:教師可以組織學(xué)生進行一次社會調(diào)查,并要求學(xué)生寫出詳細的調(diào)查報告。課題2胡蘿卜素的提取【導(dǎo)學(xué)誘思】1 .胡蘿卜素是:,化學(xué)性質(zhì)比較不溶于水,微溶至易溶于甯有機溶劑。根據(jù)雙鍵的數(shù)目可以將胡蘿卜素劃分為a、6、丫三類。一是其中最主要的組成成分。與B-胡蘿卜素化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的胡蘿卜素約有100多種,它們大多存在于蔬菜中。等蔬菜是
42、提取天然8-胡蘿卜素的原料。工業(yè)生產(chǎn)上,提取天然B-胡蘿卜素的方法主要有三種,一是從,中提取,二是從中獲得,三是利用生產(chǎn)。本課題所提供的方法只能提取胡蘿卜素的,若要獲得胡蘿卜素,還需要進一步的。2.提取胡蘿卜素的實驗流程有,、思考:影響萃取的因素有哪些?實驗案例提取胡蘿卜素的主要步驟如下。1 .選取500g新鮮的胡蘿卜,用清水洗凈,瀝干、切碎,然后在40C的烘箱中烘干,時間約需h,將干燥后的胡蘿卜進一步粉碎過篩。注意胡蘿卜的粉碎一定要徹底。2 .將樣品放入500mL圓底燒瓶中,加入200mL石油酸混勻,按教科書中圖6-7所示安裝萃取回流裝置,萃取30mil,然后過濾萃取液,除去固體物質(zhì)。3 .
43、按教科書中圖6也所示安裝蒸儲裝置,對萃取的樣品進行濃縮。具體的操作步驟及注意事項見本專題課題1的案例lo8提取方k實驗原理方法步驟適用范圍水蒸氣 蒸儲利用水蒸氣將揮發(fā)性 較強的方杳油攜帶出 來一1 .水蒸氣蒸儲2 .分離油層3 .除水過濾適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā) 性強的芳香油壓榨法通過機械加壓,壓榨 出果皮中的芳香油1 .石灰水浸泡、漂洗2 .壓榨、過濾、靜置3 .再次過濾適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取有機浴劑萃取使芳香油溶解在有 機溶劑中,蒸發(fā)溶劑 后就可獲得芳香油1 .粉碎、干燥2 .萃取、過濾3 .濃縮適用范圍廣,要求原料的顆粒要盡 可能細小,能充分浸泡在有機溶液中4 .收集接
44、受器中的樣品,觀察樣品的顏色和氣味,并通過紙層析進行鑒定。層析時注意選擇干凈的濾紙,為了防止操作時對濾紙的污染,應(yīng)盡量避免用手直接接觸濾紙,可以帶手套進行操作。點樣時應(yīng)注意點樣斑點不能太大(直徑應(yīng)小于0.5cm),如果用吹風(fēng)機吹干,溫度不宜過高,否則斑點會變黃。將點好樣的濾紙卷成筒狀,卷紙時注意濾紙的兩邊不能相互接觸,以免因毛細管現(xiàn)象導(dǎo)致溶劑沿濾紙兩邊的移動加快,溶劑前沿不齊,影響結(jié)果。課題成果評價(一)確定提取胡蘿卜素的最佳方案在進行本實驗時,教師可以將學(xué)生分組,每組可以采用不同的有機溶劑和時間進行萃取,比較各組的實驗結(jié)果,確定提取胡蘿卜素的最佳方案。(二)是否出現(xiàn)對應(yīng)的層析帶如果萃取樣品中
45、出現(xiàn)了和標(biāo)準(zhǔn)樣品一樣的層析帶,說明提取胡蘿卜素的實驗成功。由于提取物中含有雜質(zhì),萃取樣品的顏色可能比標(biāo)準(zhǔn)樣品的顏色淺,我們也可以通過顏色的比較,初步確定提取的胡蘿卜素的量。答案和提不(一)資料一萃取劑的選擇討論題1 .乙醇和丙酮能夠用于胡蘿卜素的萃取嗎?為什么?答:胡蘿卜素可溶于乙醇和丙酮,但它們是水溶性有機溶劑,因萃取中能與水混溶而影響萃取效果,所以不用它們作萃取劑。2 .在石油酸、醋酸乙酯、乙醛、苯和四氯化碳這幾種有機溶劑中,哪種最適宜用來提取胡蘿卜素?答:在這五種有機溶劑中,石油酸的沸點最高,在加熱萃取時不易揮發(fā),所以石油醛最適宜用作萃取劑。(二)練習(xí)1.答:列表分析如下。-參考答案專題
46、一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題1果酒和果醋的制作1. (1)酵母菌兼性厭氧型有氧時C6H1206+6H20+602f6co.2+12H2。+能量,無氧時C6H12O62cTiF50H+2C0-2+能量,酒精(2)附著于葡萄品皮上的野生型酵母菌20酸性(3)酒精度色素深紅(4)缺氧酸性2. (1)醋酸菌需氧型(2)醋酸乙醇乙醛C2H50H+02-CH3C00H+H203. (1)體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精(2) 1/5(3) 18251012天(4) 303578天通氣口4. (1)重銘酸鉀(2)酸性灰綠色5. 沖洗榨汁酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵課題2腐乳的制作1.(1).肽氨基酸甘油脂肪酸(2) .青霉酵母曲霉毛霉毛霉真菌土壤水果蔬菜谷物(3) .無菌毛霉污染
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