正定型血型檢測卡標(biāo)準(zhǔn)操作程序

1、作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：LXYY-3-LJ-01ABO、RhD正定型血型檢測卡標(biāo)準(zhǔn)操作程序版號/修號： 2/ 0頁 碼：第3頁，共3頁編寫者：陳觀英審核者：陳劍鋒批準(zhǔn)者：鮑幫秀編寫日期：2016.05.01審核日期：2016.05.25批準(zhǔn)日期：2016.06.01ABO、RhD正定型血型檢測卡標(biāo)準(zhǔn)操作程序1、 檢驗(yàn)原理 利用微柱凝膠過篩檢測原理。待檢紅細(xì)胞(RBC)如果與凝膠中的單克隆IgM抗A、抗B、抗D試劑發(fā)生特異性凝集反應(yīng)，在一定的離心力作用下，凝集的紅細(xì)胞被排阻在具有三維空間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠表層或凝膠顆粒間隙之中，判為陽性結(jié)果，表示待檢紅細(xì)胞含有相應(yīng)的血型抗原；RBC全部沉積于凝膠孔腔底部

2、，判為陰性結(jié)果，表示待測待檢紅細(xì)胞不含相應(yīng)的抗原。供醫(yī)院臨床對ABO血型系統(tǒng)的A、B抗原，Rh血型系統(tǒng)的D抗原的檢測。二、檢測卡主要組成成份 A、B、O、Control微柱管分別各含凝膠65%，A管含35%單克隆IgM抗A（效價(jià)）128）、B管含35%單克隆IgM抗B（效價(jià)128）、D管含35%單克隆IgM抗D（效價(jià)64）、Control管含35%生理鹽水。檢測卡儲存條件225，有效期為一年。三、適用儀器專用離心機(jī)：TD-2Y醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)多功能離心機(jī)或達(dá)到TD-2Y離心參數(shù)的自動(dòng)化儀器。四、 準(zhǔn)備工作 1.微柱凝膠試劑卡的準(zhǔn)備：觀察外觀，如有干膠、雜質(zhì)、氣 泡不可使用，之后將卡放置室溫（1825）

3、平衡，再用專用離心機(jī)離心，2000rpm 10分鐘。 2. 檢測標(biāo)本的準(zhǔn)備： 紅細(xì)胞懸液的制備：取被檢者壓積紅細(xì)胞10微升，加入1毫升紅細(xì)胞稀釋液（95%生理鹽水)。配置好的紅細(xì)胞懸液外觀應(yīng)為均勻淡紅色，無絮狀物和血塊。 五、操作步驟 1.將準(zhǔn)備好的ABO.RhD血型定型試劑卡做好標(biāo)記 2. 將待檢者0.8%1%紅細(xì)胞懸液分別加入第1至第4管中，每管50ul 3. 即刻使用專用離心機(jī)離心，1000rpm2分鐘，1800rpm3分鐘，取出肉眼判定結(jié)果。 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)按下表：陽性4+表示RBC絕大部分凝聚于凝膠表層。3+表示RBC多數(shù)凝聚于凝膠表層，少數(shù)RBC凝集顆粒懸浮于近膠表層。2+表示部分R

4、BC沉積于膠底，部分RBC凝集顆粒懸浮于凝膠中。1+表示RBC多數(shù)沉積于膠底，可見少數(shù)RBC凝集顆粒懸浮于凝膠中。±表示RBC絕大多數(shù)沉積于膠底，極少數(shù)RBC凝集顆粒懸浮于近膠底。dcp表示混合凝集外觀，部分RBC凝集顆粒集結(jié)于凝膠表層，部分RBC沉于膠底。PH表示部分溶血，凝膠管中液體呈清澈透明紅色，凝膠中有殘留RBC。H表示完全溶血，凝膠管中液體呈清澈透明紅色，凝膠中無RBC。陰性表示RBC全部沉積于膠底。血型正定型結(jié)果判定見表：血型抗A抗B抗D質(zhì)控D陽性ABO ABD陰性ABOAB六、 注意事項(xiàng) 1. 檢測標(biāo)本必須為抗凝血。 2. 紅細(xì)胞標(biāo)本一定不能被細(xì)菌污染，否則出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。盡可能應(yīng)用當(dāng)日采集的新鮮血做本試驗(yàn)。 3. 如在微柱凝膠管中出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，強(qiáng)烈提示為紅細(xì)胞抗原抗體陽性反應(yīng)，也不排除其他原因所致溶血，故對此標(biāo)本一定認(rèn)真分析，并向上級主管技術(shù)人員報(bào)告并討論。4. 若結(jié)果為±或1需進(jìn)一步分析，可能為亞型或弱化抗原。 5. 紅細(xì)胞懸液的濃度控制在0.8-1%之間，否則可能出現(xiàn)漏檢或混合凝集。 6. 每日實(shí)驗(yàn)前，先取出微柱凝膠卡放置一段時(shí)間至室溫，以防冷凝集。 7. 試劑卡應(yīng)放在18-25儲存，如若長期放在4冰箱，建議每1-2個(gè)月取出，用專用離心機(jī)離心一次，以防止