NHS磁珠使用原理及詳細(xì)的操作步驟應(yīng)用范疇

1、 專注于專注于“磁納米，微萃取磁納米，微萃取”NHSNHS磁珠磁珠產(chǎn)品介紹產(chǎn)品介紹 -英芮誠生化科技英芮誠生化科技目錄 CONTENTS產(chǎn)品介紹產(chǎn)品特點應(yīng)用實例背景知識背景知識 免疫磁珠，免疫磁珠，也稱免疫磁性微球， 是一種均勻、具有超順磁性及保護(hù)性殼的球形小粒子，基本上由載體微球和免疫配基結(jié)合而成。其核心為順磁性粒子，核心外層包裹聚合物， 最外層是免疫配基。 免疫磁珠技術(shù)：免疫磁珠技術(shù)：是一種以特異的抗原抗體反應(yīng)為基礎(chǔ)的免疫學(xué)檢測和分離技術(shù)。它是以抗體包被的磁珠為載體，通過抗體與反應(yīng)介質(zhì)中特異性抗原結(jié)合，形成抗原抗體復(fù)合物，此復(fù)合物在外加磁場的作用下發(fā)生定向移動，從而達(dá)到分離抗原的目的。 產(chǎn)

2、品介紹NHS磁珠磁珠|Prot Elut NHS【偶聯(lián)容量】：200-300ug生物分子/ml磁珠懸浮液【性 狀】：棕黑色均勻懸濁液；【保 存】： 28保存，請勿凍融使用。分散劑：DMF?！疽?guī) 格】：100-120nm，單分散；1mL；【用 途】：適用于含伯胺（或者伯胺標(biāo)記）的蛋白、抗體、酶、多肽、核酸等生物分子。 通過獨特的高分子聚合技術(shù)，在超順磁性Fe3O4納米核外形成結(jié)構(gòu)致密、性能穩(wěn)定的核-殼聚合體，在單分散的磁珠表層鍵合高密度的功能基團(tuán)，形成界限清晰核殼結(jié)構(gòu)的NHS磁珠。 與傳統(tǒng)的羧基、氨基磁珠相比，采用Prot Elut NHS無需事先采用EDC或戊二醛活化，在偶聯(lián)緩沖液中室溫混合3

3、0min，Prot Elut NHS即可與帶有伯氨基的生物配體直接偶聯(lián)，形成穩(wěn)定的C-N共價鍵，實現(xiàn)生物配體與Prot Elut NHS的共價偶聯(lián)。操作流程磁珠磁珠準(zhǔn)備準(zhǔn)備目標(biāo)生物分子目標(biāo)生物分子 的偶聯(lián)的偶聯(lián)封閉未反應(yīng)封閉未反應(yīng)的活性基團(tuán)的活性基團(tuán) 偶聯(lián)后偶聯(lián)后磁珠保存磁珠保存 IP實驗實驗（可選擇）（可選擇）1.磁珠的準(zhǔn)備（以磁珠的準(zhǔn)備（以100uL為例）為例） 100ulNHS磁珠磁珠PBS清洗清洗2次次棄上清棄上清100ul偶聯(lián)緩沖液偶聯(lián)緩沖液2.目標(biāo)生物分子的偶聯(lián) 500ul偶聯(lián)緩沖液10-15ug IgG孵育1-2h棄上清 可用于偶聯(lián)率測定 3.封閉未反應(yīng)的活性基團(tuán)混勻15-30m

4、in /4反應(yīng)1h棄上清棄上清1ml PBS重復(fù)一次 500ul 封閉劑4.磁珠保存/后續(xù)實驗 1ml 保存劑保存劑4保存保存 偶聯(lián)量高，每100ul磁珠約偶聯(lián)2030ug生物分子；1 1產(chǎn)品特點100ul2030ug100ul510ug 由于SDS-PAGE加樣緩沖液中含有巰基乙醇從而導(dǎo)致抗體的重鏈與輕鏈之間的二硫鍵被破壞從而使得抗體分子變成重鏈分子(55KD)和輕鏈分子(25KD)。所以當(dāng)目的蛋白的大小接近重鏈或者輕鏈分子時，重鏈或者輕鏈分子的WB信號常常由于信號過強而導(dǎo)致影響對目的蛋白的WB結(jié)果判斷。 與ProteinA/G相比，免疫反應(yīng)后洗脫可獲得無背景干擾的目標(biāo)蛋白； （輕重鏈影響）

5、2 2 5 5操作簡單、條件溫和，可直接與生物配體共價偶聯(lián)，偶聯(lián)生物配體后穩(wěn)定； 生物相容性好，非特異性吸附少；3 3 快速分離，效率高，外加磁場10-20s實現(xiàn)磁珠分離。4 4應(yīng)用范圍 NHS磁珠可與帶有伯氨基的生物配體直接偶聯(lián)，形成穩(wěn)定的C-N共價鍵，實現(xiàn)生物配體與 NHS磁珠的共價偶聯(lián)。封閉劑封閉劑抗抗體體發(fā)光試劑盒發(fā)光試劑盒應(yīng)用實例英芮誠NHS磁珠與A公司磁珠偶聯(lián)甲胎蛋白（AFP）測試對比（Bradford 蛋白定量法測定） 與A公司磁珠相比，英芮誠NHS磁珠的偶聯(lián)量更高，偶聯(lián)效率達(dá)85%。NHS磁珠偶聯(lián)黃曲霉毒素單克隆抗體AFM1測試（Bradford 蛋白定量法測定）(*)*：偶聯(lián)體系：偶聯(lián)體系：1mL，pH=8.0；磁珠使用量：；磁珠使用量：100L。隨