大學細胞工程試題及答案

1、頁眉內(nèi)容來源于網(wǎng)絡細 胞 模 擬 試 題 及 答 案一、填空（每空一分，共 25 分）1. 實驗室的物理防護是由隔離的設備、實驗室的設計、實驗實施等三個方面組成，根據(jù)其密封程度的不同，分為 P1、P2、P3 P4 四個生物安全等級。典型的 P4 實驗室由更衣區(qū)、過濾區(qū)、建 沖區(qū)、消毒區(qū)、核心區(qū)組成。2. 細胞系是原代培養(yǎng)經(jīng)初步純化獲得的以一種細胞為主的、能在體外長期生存的不均一細胞群體。3. 細胞株是指從一個經(jīng)過生物學鑒定的細胞系用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群。4. 干細胞是一類具有自我更新和分化潛能的細胞。干細胞的增殖特性為緩慢性和自穩(wěn)性。5. 培養(yǎng)細胞的生長特點

2、為貼附、接觸抑制和密度抑制。6. 植物細胞培養(yǎng)的原理是基于_動物細胞的全能性。7. 植物細胞懸浮培養(yǎng)的方法為分批培養(yǎng)法、連續(xù)培養(yǎng)法和半連續(xù)培養(yǎng)。8. 植物組織培養(yǎng)中培養(yǎng)材料的消毒過程中，消毒的基本原則是既要殺死附著其上的微生物又不損傷材料。9. 細胞生長測定的一般方法為：細胞計數(shù)、測定細胞密實體積、細胞鮮重或干重。10. 體外培養(yǎng)的細胞根據(jù)其生長方式主要分為貼附型細胞和非貼附型細胞。11. 人工種子的組分包括胚狀體、人工胚乳和人工種皮。12. 細胞融合主要經(jīng)過了兩原生質(zhì)體或細胞互相靠近、細胞橋形成、胞質(zhì)滲透、細胞核融合幾個步 驟。其中細胞橋形成是最關(guān)鍵的一步。13. 花粉單倍體植株的鑒定方法有

3、形態(tài)鑒定、細胞學鑒定、雜交鑒定、分子標記鑒定。I.J九J 護14. 胚胎工程主要是對哺乳類動物的胚胎進行某種人為的工程技術(shù)操作，然后讓它繼續(xù)發(fā)育，獲得 人們所需要的成體動物。15. 人工誘導單倍體形成的方法包括：遠緣雜交、延遲授粉、核置換、射線照射、花藥培養(yǎng)等。二、單項選擇題（每題 1 分，共 10 分）1.人參皂甙粉是人參中重要的藥用成分，以前只能從人參中提取產(chǎn)量極低，因而價格昂貴。目前 人參皂甙粉可以通過下列哪項技術(shù)迅速大量獲?。˙）頁眉內(nèi)容來源于網(wǎng)絡A .基因工程 B .植物組織培養(yǎng)C .植物體細胞雜交D .發(fā)酵工程2.下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的敘述不正確的是（C）頁眉內(nèi)容來源于網(wǎng)絡A 通過

4、動物細胞培養(yǎng)可獲得大量的細胞分泌蛋白B 動物細胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶處理，以使細胞分散C 細胞癌變都發(fā)生于原代培養(yǎng)過程中D 目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為10 代以內(nèi)的，以保持其正常核型3.盡管各種合成培養(yǎng)基給動物細胞培養(yǎng)帶來極大方便，但許多實驗表明，單純使用合成培養(yǎng)基 細胞的貼壁增殖效果常常不理想。因此，在使用時通常仍然需要加入一定量的？（C）A.平衡鹽溶液？?？B.瓊脂糖？?C.動物血清？?？D.甘露醇4. 制備人工種子的關(guān)鍵是控制（A）A.胚狀體的同步發(fā)育B.人工種皮的同步發(fā)育C.胚狀體的單獨發(fā)育D.人工種皮的單獨發(fā)育5. 細胞融合中使用（C）方法可以在顯微鏡下直接定向誘導細胞融合。

5、A.仙臺病毒法B.PEG誘導C.電融合誘導法D.高 Ca+和 pH 誘導法6. 中胚層來源的細胞在體外培養(yǎng)時一般表現(xiàn)為哪種形態(tài)（A）? A.成纖維細胞型細胞？B.多形型細胞？IC.上皮型細胞？D.游走型細胞？?？,哪一個時期的細胞數(shù)隨時間變化成倍增長，活力最佳,最適合進行實驗研究（D） ?8.以下哪種方法或技術(shù)適合進行動物細胞的大規(guī)模培養(yǎng)？ （D）C.旋轉(zhuǎn)管培養(yǎng)法？D.多孔載體培養(yǎng)技術(shù)9.單克隆抗體制備選擇親本時應選擇（A）A. 骨髓瘤細胞系和免疫動物屬于同一品系7.在每一代貼附生長細胞的生長過程中A.穩(wěn)定期？? B.衰亡期？?C.潛伏期？?D.對數(shù)生長期？? A.懸滴培養(yǎng)法？?B.培養(yǎng)瓶培養(yǎng)

6、法？頁眉內(nèi)容來源于網(wǎng)絡B. 骨髓瘤細胞系和免疫動物屬于不同品系C. B 淋巴細胞和骨髓瘤屬細胞屬于不同品系D. B 淋巴細胞與骨髓瘤細胞無親緣關(guān)系10.下列關(guān)于哺乳動物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述，正確的是（D） ?頁眉內(nèi)容來源于網(wǎng)絡A.卵裂期胚胎中細胞數(shù)目和有機物總量在不斷增加?B.胚胎分割時需將原腸胚的內(nèi)細胞團均等分割？?？C胚胎干細胞具有細胞核大、核仁小和蛋白質(zhì)合成旺盛等特點D.胚胎干細胞是一類未分化細胞，可從早期胚胎中分離獲取三、多項選擇（每題 3 份，共 15 分）1. 由外植體或單個細胞形成愈傷組織一般要經(jīng)過三個步驟（ABDA.啟動期B.生長期C.分裂期D.分化期2.植物單細胞培養(yǎng)方法

7、有（ABCD3.動物細胞培養(yǎng)室，無論細胞種類和供體的年齡如何，在細胞的全生長過程中大致都要經(jīng)過三個主要階段（ABCA.原代培養(yǎng)期B.傳代期C.衰退期D.穩(wěn)定期4. 干細胞從所具有的分化功能上分為（ABCIA.單能干細胞B.多能干細胞C.全能干細胞D.胚胎干細胞5. 動物多倍體育種的方法有（ABCA.溫度休克法B.水靜壓法C.細胞松弛素 BD.秋水仙素四、簡答題（共 35 分）1. 二級生物安全適用于處理什么材料，具體要求有哪些（8 分） 答：適用于：（1）來自于來自于靈長類動物的材料和細胞系（2）接觸過靈長類的病毒或被其轉(zhuǎn)化了的細胞系（3）含有支原體的細胞系。A.平板培養(yǎng)法B.看護培養(yǎng)與飼養(yǎng)層

8、培養(yǎng)法C.液體淺層靜置培養(yǎng)法D.細胞懸浮培養(yǎng)法頁眉內(nèi)容來源于網(wǎng)絡要求：（1）所有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作都應使用垂直層流生物安全小室;（2）所有污染物都應放入裝滿蒸餾水的防漏的不銹鋼桶中；（3）大的塑料器皿蓋緊后放入高壓消毒袋中進行高壓消毒；（4）在處理或沖洗用過的器皿前，應先進行高壓消毒；（5）進行操作時要帶乳膠手套。2. 原生質(zhì)體分離的方法有哪些，各有何優(yōu)缺點（6 分）答：（1）機械法優(yōu)點：可避免酶制劑對原生質(zhì)體的破壞。缺點：獲得完整原生質(zhì)體的數(shù)量少，使用此法的植物種類有限。（2）酶解法優(yōu)點：可獲得大量原生質(zhì)體，條件溫和，原生質(zhì)體完整性好，幾乎所有植物都可 用此法。缺點：影響原生質(zhì)體的活力。3

9、. 植物組織培養(yǎng)的基本步驟（6 分）答：（1）培養(yǎng)材料的采集（2）培養(yǎng)材料的消毒（3）制備外植體（4）接種和培養(yǎng)（5）根的誘導i（6）組織苗的練苗移栽4. 細胞系和細胞株的鑒定指標及方法（8 分）答：鑒定指標：（1）純度：分析以何種細胞為主，所占比例為多少，混雜有哪些其他細胞。（2） 細胞生物學特征：細胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)、染色體組型、生長曲線、分裂指數(shù)、 倍增時間是否與來源細胞一致。（3） 穩(wěn)定性：傳代過程中細胞學特征是否發(fā)生變化。（4） 污染情況：檢查是否有微生物或其他細胞系的污染。頁眉內(nèi)容來源于網(wǎng)絡鑒定方法：細胞形態(tài)學觀察；繪制生長曲線，計算分裂指數(shù)；染色體組型和帶型分析；同 工酶譜檢測4.植物

10、細胞固定化的方法及特點答：吸附法：利用固體吸附劑將細胞吸附在其表面而使細胞固定化的方法。包埋法：將細胞包埋在多孔載體內(nèi)部而制成固定化細胞的方法。特點：（1）由于載體的保護作用，減小剪切力作用，提高細胞存活率和穩(wěn)定性。（2）細胞束縛在一定空間內(nèi)，不易聚集成團，促進代謝產(chǎn)物的分散。（3）可簡便地在不同培養(yǎng)階段更換不同的培養(yǎng)液。（4）固定化植物細胞可連續(xù)反復使用，可縮短生產(chǎn)周期，提高生產(chǎn)效率。（5）容易與培養(yǎng)液分離，有利于產(chǎn)品的分離純化，提高產(chǎn)品的質(zhì)量。五、綜合分析題（15 分）植物單細胞培養(yǎng)的程序及各步中應注意的事項答：1.建立細胞株（1） 材料準備a. 確定植物種類品種b. 選擇單細胞或愈傷組織或葉肉、下胚軸等c.借助酶處理：酶的種類、濃度、處理時間都對材料有一定影響（2） 制備細胞懸浮液a. 培養(yǎng)基成分篩選b. 懸浮培養(yǎng)，振蕩次數(shù)為 8090 次/minc.用 200300 目鋼網(wǎng)過濾盒離心沉降2. 選擇細胞株平板篩選ia. 細胞起始密度