中國(guó)藥典XX年版一部附錄(二)

1、中國(guó)藥典XX年版一部附錄（二）分光光度法是通過測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范疇內(nèi)的吸光度 或發(fā)光強(qiáng)度，對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。常用的波長(zhǎng)范疇為： （1）200400nm的紫外光區(qū)； （2）400760nm的可 見光區(qū)； （3）7602500nm的近紅外光區(qū)；（4）2.525沖（按波數(shù)計(jì)為 4000 400cm-*）的中紅外光區(qū)。所用儀器為紫外分光光度計(jì)、可見分光光度計(jì)（或比 色計(jì)）、紅外分光光度計(jì)或原子吸取分光光度計(jì)。為保證測(cè)量的周密度和準(zhǔn)確度, 所用儀器應(yīng)按照國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定， 定期進(jìn)行校正檢定。單色光輻射穿過被測(cè)物質(zhì)溶液時(shí)，在一定的濃度范疇內(nèi)被該物質(zhì)吸取的量與

2、該物質(zhì)的濃度和液層的厚度（光路長(zhǎng)度）成正比，其關(guān)系如下式：2_A=lg T =Ecl式中 A為吸光度；T為透光率；E 為吸取系數(shù)，采納的表示方法是七，其物理意義為當(dāng)溶液濃度為 1% （g/ml），液層用度為 1 cm 時(shí)的吸光度數(shù)值；c為 100ml溶液中所含被測(cè)物質(zhì)的重量（按干燥品或無水物運(yùn)算），g；1為液層厚度，CIBo物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸取波長(zhǎng)，以及相應(yīng)的吸取系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng) 已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸取系數(shù)后，可用同樣條件將該供試品配成溶液， 測(cè)定其吸光度，即可由上式運(yùn)算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū)，除某些 物質(zhì)對(duì)光有吸取外，專門多物質(zhì)本身并沒有吸取，但可在一定條件下加

3、入顯色試 劑或通過處理使其顯色后再測(cè)定，故乂稱比色分析。附錄 V A 紫外可見分光光度法儀器的校正和檢定1.波長(zhǎng)山于環(huán)境因素對(duì)機(jī)械部分的阻礙，儀器的波長(zhǎng)經(jīng)常會(huì)略有變動(dòng)、因此除應(yīng)定期對(duì)所用的儀器進(jìn)行全面校正檢定外，還應(yīng)于測(cè)定前校正測(cè)定波長(zhǎng)。常用汞燈中的較強(qiáng)譜線 237.83nm, 253.65nm,275.28nm, 296.73nm, 313.16nm,334 15nm, 365.02nm, 404.66nm, 435.83nm, 546. 07nm 與 576.96nm；或用儀器 中氟燈的 486.02nrn與 656.10nm譜線進(jìn)行校正;欽玻璃在波長(zhǎng) 279.4nm,287.5nm, 3

4、33 7nm, 360.9nm, 418.5nm, 460.0nm,484.5nm, 536.2nm 與 637.5nm 處有尖 銳吸取峰，也可作波長(zhǎng)校正用，但因來源不同或隨著時(shí)刻的推移會(huì)有微小的變化, 使用時(shí)應(yīng)注意；近年來，常使用高氯酸欽溶液校正雙光束儀器，以 10%高氯酸溶 液為溶劑， 配制含氧化秋 （HO2O3） 4%的溶液， 該溶液的吸取峰波長(zhǎng)為 241.13nm, 278.10nm,287.18nm, 333 44nm, 345.47nm, 361.31nm, 416. 28nm, 451.30nm, 485.29nm, 536.64nni 和 640.52nm。儀器波長(zhǎng)的承諾誤差為

5、：紫外光區(qū) Ing 500鄰近土 2nmo2.吸光度的準(zhǔn)確度可用重珞酸鉀的硫酸溶液檢定。取在 120C干燥至恒重 的基準(zhǔn)重珞酸鉀約60mg,周密稱定，用 0.005mol/L 硫酸溶液溶解并稀釋至 1000ml,在規(guī)定的波長(zhǎng)處測(cè)定并運(yùn)算其吸取系數(shù)，并與規(guī)定的吸取系數(shù)比較， 應(yīng)符合表中的規(guī)定。波長(zhǎng)/nm235 （最?。?57 (最大)313 （最?。?50 （最大）吸取系數(shù)（E鳥）的規(guī)定值124.5144.04&6106.6吸取系數(shù)（E人）的許可范疇123.0126. 0142.8146. 247.050. 3105.5108. 53雜散光的檢査 可按下表所列的試劑盒濃度，配制成水溶液，

6、置 1cm 石英 吸取池中，在規(guī)定的波長(zhǎng)處測(cè)定透光率，應(yīng)符合表中的規(guī)定。試劑濃度/%(g/ml)測(cè)定用波長(zhǎng)/nm透光率/%碘化鈉1.002200.8亞硝酸鈉5.0034020ng,含鎘 Ong、 0.5ng2.5ng、 5ng、 lOng,含銅 Ong 50ng、lOOng、200ng、500ng 的系列濃度混合溶 液。另周密量取汞標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液適量，用 10%硝酸洛液稀釋制成每 1ml 分不含 汞 Ong、0.2ng0.5ng、Ing、2ng、5ng的溶液,本液應(yīng)臨用配制。內(nèi)標(biāo)溶液的制備 周密量取錯(cuò)、錮、鈕單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用水稀釋制成 每 lml各含 lpg的混合溶液，即得。供試品溶液的制

7、備 取供試品于 60C 干燥 2 小時(shí)，粉碎成粗粉，取約 0.5g, 周密稱定，置耐壓耐高溫微波消解罐中，加硝酸 510ml（假如反應(yīng)劇烈，放置 至反應(yīng)停止） 。密閉并按各微波消解儀的相應(yīng)要求及一定的消解程序進(jìn)行消解。 消解完全后，消解液冷卻至 60C以下，取出消解罐，放冷，將消解液轉(zhuǎn)入 50ml 量瓶中，用少量水洗滌消解罐 3次，洗液合并于量瓶中，加入金單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液 （lpg/ml） 200卩 1,用水稀釋至刻度，搖勻，即得（如有少量沉淀，必要時(shí)可離 心分取上清液）。除不加金單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液外，余同法制備試劑空口溶液。測(cè)定法 測(cè)定時(shí)選取的同位素為63Cu.75AS.,4Cd. 202 Hg、

8、和 208pb,其中63Cu.75As以72Ge作為內(nèi)標(biāo),4Cd以,5In作為內(nèi)標(biāo)，202Hg 2O8Pb 以？旳 Bi作 為內(nèi)標(biāo)，并依照不同儀器的要求選用適宜校正方程對(duì)測(cè)定的元素進(jìn)行校正。儀器的內(nèi)標(biāo)進(jìn)樣管在儀器分析工作過程中始終插入內(nèi)標(biāo)溶液中，依次將儀器 的樣品管插入各個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液中進(jìn)行測(cè)定（濃度依次遞增），以測(cè)量值（3 次讀數(shù)的平均值）為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。將儀器的樣品管插 入供試品溶液中，測(cè)定，取 3次讀數(shù)的平均值。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上運(yùn)算得相應(yīng)的濃度。在同樣的分析條件下進(jìn)行空口試驗(yàn)，依照儀器講明書的要求扣除空口干擾。附錄 IX C 氯化物檢查法除另有規(guī)定外，取各品種項(xiàng)下規(guī)

9、定量的供試品，加水溶解使成 25ml（溶液 如顯堿性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸 10ml；溶液如不澄清，應(yīng)濾過； 置 50ml納氏比色管中，加水使成約 40ml,搖勻，即得供試品洛液。另取該品種 項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液，置 50ml納氏比色管中，加稀硝酸 10ml,加水使 成 40ml,搖勻，即得對(duì)比溶液。于供試品溶液與對(duì)比溶液中，分不加入硝酸銀 試液 1.0ml,用水稀釋使成 50ml,搖勻，在暗處放置 5分鐘，同置黑色背景上， 從比色管上方向下觀看、比較，即得。供試品溶液如帶顏色，除另有規(guī)定外，可取供試品溶液兩份，分置 50ml 納 氏比色管中，一份中加硝酸銀試液 l.OmL搖

10、勻，放置 10 分鐘，如顯渾濁，可反 復(fù)濾過，至濾液完全澄清，再加規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液與水適量使成 50ml, 搖勻，在暗處放置 5 分鐘，作為對(duì)比溶液；另一份中加硝酸銀試液 1.0ml 與水適 量使成 50ml,搖勻，在暗處放置 5分鐘，按上述方法與對(duì)比溶液比較，即得。標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液的制備稱取氛化鈉 0.165g,置 1000ml 量瓶中，加水適量 使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，周密量取貯備液 10ml,置 100ml 量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻, 即得（每1ml 相當(dāng)于 10隧的 C1）?！靖阶ⅰ坑脼V紙濾過時(shí)，濾紙中如含有氯化物，可預(yù)先用含有硝酸的水溶液 洗凈后使用。附

11、錄 IX D 鐵鹽檢査法除另有規(guī)定外，取各品種項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成 25ml,移置 50ml 納氏比色管中，加稀鹽酸 4ml 與過硫酸鞍 50mg,用水稀釋使成 35ml 后， 加 30%硫亂酸鞍溶液 3ml,再加水適量稀釋成 50ml,搖勻；如顯色，趕忙與標(biāo) 準(zhǔn)鐵溶液一定量制成的對(duì)比洛液（取該品種項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液，置 50ml 納氏比色管中，加水使成 25ml,加稀鹽酸 4ml 與過硫酸鞍 50mg,用水稀釋使成 35ml,加 30%硫氤酸讓溶液 3ml,再加水適量稀釋成 50ml,搖勻）比較，即得。如供試管與對(duì)比管色調(diào)不一致時(shí)，可分不移至分液漏斗中，各加正丁醉 20ml

12、提取，俟分層后，將正丁醇層移置 50ml納氏比色管中，再用正丁醇稀釋至 25ml, 比較，即得。標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液的制備 稱取硫酸鐵鞍（FeNH4（SO4）= 12H2O） 0. 863g, 置 1000ml量瓶中，加水溶解后，加硫酸 2.5ml,用水稀釋至刻度，搖勻，作為 貯備液。臨用前，周密量取貯備液 10ml,置 100ml 量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻, 即得（每1ml 相當(dāng)于 10ng的 Fe）。附錄 IX E 重金屬檢査法本法所指的重金屬系指在規(guī)定實(shí)驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯 色的金屬雜質(zhì)。標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的制備 稱取硝酸鉛 0.1599g,置 1000ml 量瓶中，加硝酸 5ml 與

13、水 50ml溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。周密量取貯備液 10ml,置 100ml 量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每 lml 相當(dāng)于 10ng的 Pb）o本液僅供當(dāng)日使用。配制與貯存用的玻璃容器均不得含鉛。除另有規(guī)定外，取 25ml納氏比色管三支，甲管中加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量與醋 酸鹽緩沖液（pH3.5） 2ml 后，加水或各品種項(xiàng)下規(guī)定的溶劑稀釋成 25ml,乙管 中加入按各品種項(xiàng)下規(guī)定的方法制成的供試品溶液 25ml,丙管中加入與乙管相 同量的供試品，加配制供試品溶液的洛劑適量使溶解，再加與屮管相同量的標(biāo)準(zhǔn) 鉛溶液與醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml 后，用洛劑稀釋成 25ml

14、；若供試品溶液帶 顏色，可在屮管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液，使之與乙管、 丙管一致，再在甲、乙、丙三管中分不加硫代乙酰胺試液各 2ml,搖勻，放置 2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，當(dāng)丙管中顯出的顏色不淺于甲管時(shí)，乙管中 顯示的顏色與屮管比較，不得更深。如丙管中顯出的顏色淺于甲管，應(yīng)取樣按第 二法重新檢查。如在中管中滴加稀焦糖洛液或其他無干擾的有色溶液，仍不能使顏色一致 時(shí)，應(yīng)取樣按笫二法檢查。供試品如含高鐵鹽阻礙重金屬檢查時(shí)，可在屮、乙、丙三管中分不加入相同 量的維生素 C 0.5-1.0g,再照上述方法檢查。配制供試品溶液時(shí)，如使用的鹽酸超過 lml,氨試液超過 2ml,

15、或加入其他 試劑進(jìn)行處理者，除另有規(guī)定外，屮管溶液應(yīng)取同樣同量的試劑置瓷 Jill中蒸干后, 加醋酸鹽緩沖液（pH3.5） 2ml 與水 15ml,微熱溶解后，移置納氏比色管中，加 標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量，再用水或各品種項(xiàng)下規(guī)定的溶劑稀釋成 25mlo第二法除另有規(guī)定外，當(dāng)須改用第二法檢查時(shí)，取各品種項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，按 熾灼殘?jiān)鼨z查法（附錄 IX J）進(jìn)行熾灼處理，然后取遺留的殘?jiān)?；或直截了?dāng)取 熾灼殘?jiān)?xiàng)下遺留的殘?jiān)?；如供試品為溶液，則取各品種項(xiàng)下規(guī)定量的溶液，蒸 發(fā)至干，再按上述方法處理后取遺留的殘?jiān)?；加硝?0.5ml,蒸干，至氧化氮蒸 氣除盡后（或取供試品一定量，慢慢熾灼至完全炭化，放冷

16、，加硫酸 0.5lml, 使恰潮濕，用低溫加熱至硫酸除盡后，加硝酸 0.5ml,燕干，至氧化氮蒸氣除盡 后，放冷，在 500600C熾灼使完全灰化），放冷，加鹽酸 2ml,置水浴上蒸干 后加水 15ml,滴加氨試液至對(duì)酚豔指示液顯微粉紅色，再加酷酸鹽緩沖液 （pH3.5）2ml,微熱溶解后，移置納氏比色管中，加水稀釋成25ml,作為乙管;另取配制供試品溶液的試劑， 置瓷皿中蒸干后， 加醋酸鹽緩沖液 （pH3.5）2ml 與水 15ml,微熱溶解后，移置納氏比色管中，加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量，再用水稀 釋成 25ml,作為甲管；再在甲、乙兩管中分不加硫代乙酰胺試液各 2ml,搖勻, 放置 2分鐘，同置

17、白紙上，自上向下透視，乙管中顯出的顏色與甲管比較，不得 更深。第三法除另有規(guī)定外，取供試品適量，加氫氧化鈉試液 5ml 與水 20ml溶解后，置 納氏比色管中，加硫化鈉試液 5 滴，搖勻，與一定量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液同樣處理后的 顏色比較，不得更深。附錄 IX F 碎鹽檢査法標(biāo)準(zhǔn)碑溶液的制備 稱取三氧化二神 0.132g,置 1000ml 量瓶中，加 20%氫 氧化鈉溶液 5ml溶解后，用適量的稀硫酸中和，再加稀硫酸 10ml,用水稀釋至 刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前， 周密量取貯備液 10ml,置 1000ml 量瓶中， 加稀硫酸 10ml,用水稀 釋至刻度，搖勻，即得（每 lml 相當(dāng)于 lpg

18、 的 As）。儀器裝置 如圖 1，A為 100ml 標(biāo)準(zhǔn)磨口錐形瓶；B為中空的標(biāo)準(zhǔn)磨口塞， 上連導(dǎo)氣管 C （外徑&0mm,內(nèi)徑 6.0mm）,全長(zhǎng)約 180mm； D為具孔的有機(jī)玻 璃旋塞，其上部為圓形平面，中央有一圓孔，孔徑與導(dǎo)氣管 C的內(nèi)徑一致，其 下部孔徑與導(dǎo)氣管 C的外徑相適應(yīng)，將導(dǎo)氣管 C的頂端套入旋塞下部孔內(nèi)，并 使管壁與旋塞的圓孔適相吻合，黏合固定；E為中央具有圓孔（孔徑 6.0mm）的 有機(jī)玻璃旋塞蓋，與 D緊密吻合。圖1第一法儀器裝置測(cè)試時(shí)，于導(dǎo)氣管 C 中裝入酷酸鉛棉花 60mg （裝管高度為 6080mm）,再 于旋塞 D的頂端平面上放一片澳化汞試紙（試紙大小以

19、能履蓋孔徑而不露出平 面外為宜），蓋上旋塞蓋 E并旋緊，即得。標(biāo)準(zhǔn)碑斑的制備 周密量取標(biāo)準(zhǔn)神洛液 2ml,置 A 瓶中，加鹽酸 5ml 與水 21ml,再加碘化鉀試液 5ml 與酸性氛化亞錫試液 5 滴，在室溫放置 10 分鐘后， 加鋅粒 2g,趕忙將照上法裝妥的導(dǎo)氣管 C 密塞于 A 瓶上，并將 A 瓶置 2540C 水浴中，反應(yīng) 45 分鐘，取出澳化汞試紙，即得。若供試品需經(jīng)有機(jī)破壞后再行檢碑，則應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)碑溶液代替供試品，照該品 種項(xiàng)下規(guī)定的方法同法處理后，依法制備標(biāo)準(zhǔn)神斑。檢査法取按各品種項(xiàng)下規(guī)定方法制成的供試品溶液，置 A瓶中，照標(biāo)準(zhǔn) 神斑的制備，自“再加碘化鉀試液 5ml“起，依法操作。將生成的神斑與標(biāo)準(zhǔn)神斑 比較，不得更深。第二法（二乙基二硫代氨基屮酸銀法）儀器裝置 如圖 2。A為 100ml 標(biāo)準(zhǔn)磨口錐形瓶；B為中空的標(biāo)準(zhǔn)磨口塞， 上連導(dǎo)氣管 C（一端的外徑為 8mm,內(nèi)徑為 6mm；另一端長(zhǎng) 18.0mm ,外徑 4mm, 內(nèi)徑 1.6mm,尖端內(nèi)徑為 1mm）。D為平底玻璃管（長(zhǎng) 180mm,內(nèi)徑 10mm,于 5.0ml處有一刻度）。測(cè)試時(shí)，于導(dǎo)氣管 C中裝入醋酸鉛棉花 60mg（裝管高度約 80mm）,并于 D管中周密加入二乙基二硫代氨基屮酸銀試液 5mlo標(biāo)準(zhǔn)確對(duì)比液的制備 周密量取標(biāo)準(zhǔn)