高考生物一輪復(fù)習(xí)-第2課時(shí)-微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課件-新人教版選修1

1、第第2課時(shí)課時(shí) 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課前落實(shí)課前落實(shí)知識(shí)點(diǎn)一 微生物的分離與培養(yǎng) 1.培養(yǎng)基判一判 (1)據(jù)物理狀態(tài)的不同，培養(yǎng)基只有液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基兩種類(lèi)型。( ) (2)培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽四種成分。( ) (3)在配制培養(yǎng)基時(shí)，除滿足營(yíng)養(yǎng)需求外，還應(yīng)考慮pH、O2及特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求。( ) 2.無(wú)菌技術(shù)連一連3.純化大腸桿菌(1)制備固體培養(yǎng)基的流程：(2)純化大腸桿菌的方法：常用的微生物接種方法有_和_。平板劃線法：是通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面_操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。稀釋涂布平板法：是將菌液進(jìn)行一系列的_，然后將不

2、同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面。知識(shí)點(diǎn)二 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù) 1.菌種篩選 (1)選擇培養(yǎng)基，允許_的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)_其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。 (2)分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，所選用的選擇培養(yǎng)基中含有的氮源是_。2.統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目(1)稀釋涂布平板法。(2)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法：聯(lián)樣后在顯微鏡下直接觀察計(jì)數(shù)。3.設(shè)置對(duì)照為了證實(shí)培養(yǎng)基是否被雜菌污染，設(shè)置的對(duì)照組應(yīng)是：將不接種微生物的培養(yǎng)基置于恒溫箱中培養(yǎng)。4.分離菌種的鑒定(1)方法：通過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)基pH的變化來(lái)判斷。(2)原理：在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌分泌的脲酶將尿素分解成了氨，氨使培養(yǎng)基中堿性增強(qiáng)，pH升

3、高。知識(shí)點(diǎn)三 分解纖維素的微生物的分離 1.纖維素酶 (1)組成：一種_酶，它至少包括三種組分，即_。 2.篩選方法 (1)方法：剛果紅染色法，即通過(guò)是否產(chǎn)生_來(lái)篩選纖維素分解菌。 (2)培養(yǎng)基：以_為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。 (2)作用：纖維素 _ 葡萄糖C1酶Cx酶葡萄糖 苷酶 3.實(shí)驗(yàn)流程自我校對(duì)知識(shí)點(diǎn)一 1.(1) (2) (3)2.b a a、 b、3.(1)稱(chēng)量 滅菌 倒平板 (2)平板劃線法 稀釋涂布平板法 連續(xù)劃線 梯度稀釋知識(shí)點(diǎn)二 1.(1)特定種類(lèi) 抑制或阻止 (2)尿素2.(1)菌落 活菌知識(shí)點(diǎn)三 1.(1)復(fù)合 C1、Cx、葡萄糖苷酶 (2)纖維二糖2.(1)透明圈 (2

4、)纖維素3.纖維素 選擇培養(yǎng)基 纖維素酶考點(diǎn)透析考點(diǎn)透析考點(diǎn)一 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)核心突破 1.培養(yǎng)基的類(lèi)型 (1)概念：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。 (2)分類(lèi)和應(yīng)用：分類(lèi)、鑒定培養(yǎng)基成分明確(用化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)配成)合成培養(yǎng)基工業(yè)生產(chǎn)含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)天然培養(yǎng)基化學(xué)成分微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、保藏菌種固體培養(yǎng)基觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分類(lèi)、鑒定加凝固劑，如瓊脂半固體培養(yǎng)基工業(yè)生產(chǎn)不加凝固劑液體培養(yǎng)基物理性質(zhì)用途特點(diǎn)培養(yǎng)基種類(lèi)分類(lèi)依據(jù)用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng)培養(yǎng)、分離出特定微

5、生物(如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽)鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類(lèi)的微生物，如可用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌(若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤)2.無(wú)菌技術(shù)(1)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵。無(wú)菌技術(shù)圍繞著如何避免雜菌的污染展開(kāi)，主要包括以下幾個(gè)方面：對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒。將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌。為避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料

6、用具與周?chē)奈锲废嘟佑|。 (2)消毒和滅菌：培養(yǎng)基及容器的滅菌高壓蒸汽滅菌:121 條件下，滅菌1530 min玻璃器皿、金屬工具的滅菌干熱滅菌：160170 下滅菌12 h接種工具的滅菌灼燒滅菌：酒精燈火焰使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物 (包括芽孢和孢子)滅菌接種室紫外線消毒法：30 W紫外燈照射30 min如用酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源等化學(xué)藥劑消毒法一些不耐高溫的液體，如牛奶巴氏消毒法：7075 煮30 min或在80 煮15 min一般物品煮沸消毒法：在100 煮沸56 min使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)消毒

7、應(yīng)用的范圍常用方法概念項(xiàng)目說(shuō)明：酒精消毒時(shí)，體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精殺菌效果最好。原因是濃度過(guò)高使菌體表面蛋白質(zhì)凝固成一層保護(hù)膜，乙醇分子不能滲入其中；濃度過(guò)低，殺菌力減弱。知能拓展 自養(yǎng)微生物與異養(yǎng)微生物 (1)自養(yǎng)微生物和異養(yǎng)微生物的營(yíng)養(yǎng)比較。有些微生物需要銨鹽、硝酸鹽、蛋白質(zhì)等糖類(lèi)、脂肪酸等異養(yǎng)型微生物一般不需要NH3、銨鹽、硝酸鹽等CO2、NaHCO3等含碳無(wú)機(jī)物自養(yǎng)型微生物生長(zhǎng)因子氮源碳源營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型(2)分類(lèi)依據(jù)。自養(yǎng)微生物與異養(yǎng)微生物類(lèi)型劃分的主要依據(jù)是能否以無(wú)機(jī)碳作為生長(zhǎng)的主要或唯一碳源，而與氮源無(wú)關(guān)。自養(yǎng)微生物以CO2或碳酸鹽為唯一碳源進(jìn)行代謝生長(zhǎng)；異養(yǎng)微生物必須以有機(jī)物作為碳源進(jìn)

8、行代謝生長(zhǎng)。(3)自養(yǎng)微生物的能源。利用光能，如藍(lán)藻等；依靠物質(zhì)氧化過(guò)程中釋放的能量，如硝化細(xì)菌，能利用NH3氧化過(guò)程中釋放的化學(xué)能，NH3既作為氮源，又作為能源。(4)異養(yǎng)微生物的能源：主要來(lái)源于有機(jī)物的氧化分解，碳源不僅為異養(yǎng)微生物提供構(gòu)成細(xì)胞的物質(zhì)，而且提供完成整個(gè)生命活動(dòng)所需的能量。 (5)微生物的類(lèi)型：大腸桿菌有機(jī)物有機(jī)物化能異養(yǎng)型硝化細(xì)菌無(wú)機(jī)物CO2化能自養(yǎng)型紅螺菌光能有機(jī)物光能異養(yǎng)型藍(lán)藻光能CO2光能自養(yǎng)型代表菌能源主要(或唯一)碳源營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型針對(duì)訓(xùn)練1.(2012北京)高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，在接種時(shí)不進(jìn)行嚴(yán)格無(wú)菌操作對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響最大的一項(xiàng)是( )A.將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中

9、B.將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上C.將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無(wú)菌培養(yǎng)基上D.將土壤浸出液涂布在無(wú)菌的選擇培養(yǎng)基上答案 C解析 植物組織培養(yǎng)中的外植體必須在嚴(yán)格的無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)，而且操作的各環(huán)節(jié)都要注意嚴(yán)格滅菌，必須無(wú)菌操作，C對(duì)；葡萄酒的制作原理是利用酵母菌無(wú)氧發(fā)酵時(shí)產(chǎn)生酒精，在無(wú)氧條件下，大部分微生物都不能生存，隨著發(fā)酵的進(jìn)行，酒精度增大，也有殺菌的作用；而制作腐乳時(shí)，主要是將毛霉等微生物接種在豆腐上，此過(guò)程的加鹽、加鹵湯等操作均有一定的殺菌作用；選擇培養(yǎng)基只能允許目的菌生長(zhǎng)，會(huì)抑制其他雜菌生長(zhǎng)，因此不是嚴(yán)格無(wú)菌操作時(shí)A、B、D選項(xiàng)的情況下比C選項(xiàng)受影響要小。2.(2011江蘇)除了

10、高溫加熱以外，其它滅菌方法還有 ( )A.紫外線照射 B.真空包裝C.用保鮮膜密閉D.添加防腐劑答案 A解析 此題考查滅菌的方法。滅菌是使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物(包括芽孢和孢子)。本題中真空包裝、添加防腐劑、用保鮮膜密閉都起到了抑菌的作用，紫外線照射使細(xì)菌的蛋白質(zhì)變性，核酸受破壞，是滅菌方法。考點(diǎn)二 生物技術(shù)實(shí)踐土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)核心突破 1.篩選菌株的原理 微生物的選擇培養(yǎng)：在選擇培養(yǎng)基的配方中，把尿素作為培養(yǎng)基中的唯一氮源，原則上只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長(zhǎng)。2.統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法(1)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡

11、下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量。方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。 (2)間接計(jì)數(shù)法(活菌計(jì)數(shù)法)。原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。操作：a.設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。b.為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)(CV)M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。3.細(xì)菌分離與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣樣品稀釋取樣涂布微生物的培養(yǎng)觀察并記錄結(jié)果細(xì)菌計(jì)

12、數(shù) 記錄數(shù)據(jù)表格：菌數(shù)/克土壤菌落數(shù)/平板平均值321平均值321平均值321106105104稀釋度 4.課題延伸菌種的進(jìn)一步鑒定 (1)原理：CO(NH2) 2+H2O CO2+2NH3；由于NH3的產(chǎn)生，培養(yǎng)基堿性增強(qiáng)，pH升高，因此可通過(guò)檢測(cè)pH的變化來(lái)判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。 (2)方法：以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細(xì)菌，若指示劑變紅，則pH升高，說(shuō)明該種細(xì)菌能分解尿素。脲酶針對(duì)訓(xùn)練3.(2012南通)自然界中的微生物往往是混雜生長(zhǎng)的。人們?cè)谘芯课⑸飼r(shí)一般要將它們分離提純，然后進(jìn)行數(shù)量的測(cè)定。下面是對(duì)大腸桿菌進(jìn)行數(shù)量測(cè)定的實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題。實(shí)驗(yàn)步驟：(1)

13、制備稀釋倍數(shù)為102、103、104、105、106的系列稀釋液。(2)為了得到更加準(zhǔn)確的結(jié)果，你選用_法接種樣品。(3)適宜溫度下培養(yǎng)。結(jié)果分析：(1)測(cè)定大腸桿菌數(shù)目時(shí)，在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，正確可信的是_，其理由是_。A.一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是230B.兩個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是220和260，取平均值240C.三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210、50和520，取平均值260D.四個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210、300、240和50，取平均值250(2)一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為105的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均值為234，那么每毫升樣品中的菌數(shù)是_(涂布

14、平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.1 mL)。(3)用這種方法測(cè)定的大腸桿菌密度，實(shí)際活菌數(shù)量要比測(cè)得的數(shù)量_，因?yàn)開(kāi)。答案 實(shí)驗(yàn)步驟：(2)稀釋涂布平板結(jié)果分析：(1)D 在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)，一定要涂布至少三個(gè)平板作為重復(fù)組，才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性；在分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)，要考慮所設(shè)置的重復(fù)組的結(jié)果是否相當(dāng)(2)2.34108(3)多 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的是一個(gè)菌落解析 本題考查微生物的計(jì)數(shù)方法，可從兩種接種方法的優(yōu)缺點(diǎn)和統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)應(yīng)注意的問(wèn)題入手解答該題。為了得到更加準(zhǔn)確的結(jié)果，應(yīng)用稀釋涂布平板法接種樣品。(1)選取多個(gè)菌落數(shù)相差不大的平板計(jì)數(shù)，取其平均值。(2)2340.1

15、1052.34108。(3)因?yàn)榫淇赡苡蓛蓚€(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起生長(zhǎng)而成，所以實(shí)際活菌數(shù)量要比測(cè)得的數(shù)量多。考點(diǎn)三 分解纖維素的微生物的分離核心突破 1.篩選原理 2.實(shí)驗(yàn)流程 3.兩種剛果紅染色法的比較由于在纖維素粉、瓊脂和土豆汁中都含有淀粉類(lèi)物質(zhì)，可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)；有些微生物具有降解色素的能力，長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)會(huì)降解剛果紅，從而形成明顯的透明圈，這些微生物與纖維素分解菌不易區(qū)分操作煩瑣，加入剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜缺點(diǎn) 操作簡(jiǎn)便，不存在菌落的混雜問(wèn)題 顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用 優(yōu)點(diǎn) 配制CR溶液(質(zhì)量濃度為10 mg/mL) 滅菌按照1 mL C

16、R溶液/200 mL培養(yǎng)基比例混勻倒平板培養(yǎng)透明圈培養(yǎng)基長(zhǎng)出菌落覆蓋CR溶液(質(zhì)量濃度為1 mg/mL) 倒出CR溶液加入NaCl溶液(物質(zhì)的量濃度為1 mol/L)倒掉NaCl溶液產(chǎn)生透明圈過(guò)程在倒平板時(shí)就加入剛果紅先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅方法1015 min15 min針對(duì)訓(xùn)練4.(2012山東六校聯(lián)考)纖維素分解菌能夠產(chǎn)生纖維素酶分解纖維素?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)在篩選纖維素分解菌的過(guò)程中，通常用_染色法，這種方法能夠通過(guò)顏色反應(yīng)直接對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行篩選。甲同學(xué)在實(shí)驗(yàn)時(shí)得到了如圖所示的結(jié)果，則纖維素分解菌位于( )A. B.C.D.(2)乙同學(xué)打算從牛胃中分離纖維素分解菌并計(jì)數(shù)，與分離

17、醋酸菌相比，進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)除了營(yíng)養(yǎng)不同外，最主要實(shí)驗(yàn)條件差別是_，該同學(xué)采用活菌計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)目往往比細(xì)菌的實(shí)際數(shù)目_。(3)丙同學(xué)在提取和分離纖維素酶的過(guò)程中，為了抵制外界酸和堿對(duì)酶活性的影響，采取的措施是向提取液和分離液中添加_。若探究纖維素酶活性的最適溫度，如何設(shè)置對(duì)照？_。答案 (1)剛果紅 A(2)分離纖維素分解菌需保證無(wú)氧環(huán)境 小(低)(3)緩沖溶液 系列不同的溫度梯度之間相互對(duì)照解析 (1)剛果紅與纖維素形成的紅色復(fù)合物在纖維素被分解后將不再形成，則在培養(yǎng)基上出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。(2)牛胃是一個(gè)厭氧的環(huán)境，所以其中的纖維素分解菌與需氧的醋酸菌培養(yǎng)條件有所不同。因是活

18、菌計(jì)數(shù)法，所以部分死亡菌無(wú)法計(jì)數(shù)。另外當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)平板上只觀察到一個(gè)菌落，所以偏小。(3)探究最適溫度可設(shè)置一系列的溫度梯度相互對(duì)照，其他無(wú)關(guān)變量要適宜。u方法技能方法技能微生物的培養(yǎng)和分離 以培養(yǎng)基為核心的命題很常見(jiàn)，稱(chēng)作“培養(yǎng)基分析型”試題。這類(lèi)試題往往涉及以下一些內(nèi)容： (1)培養(yǎng)基基本成分分析，應(yīng)當(dāng)注意牛肉膏、蛋白胨等成分可提供碳源、氮源及生長(zhǎng)因子。 (2)培養(yǎng)基用途的分析，結(jié)合微生物的營(yíng)養(yǎng)代謝類(lèi)型，分析適合培養(yǎng)哪一類(lèi)微生物。 (3)成分增減變化分析，常涉及改變某一種成分，培養(yǎng)基的類(lèi)型、用途的變化。【典例1】 (2011新課標(biāo)全國(guó))有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造

19、成的土壤污染。某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株?；卮饐?wèn)題：(1)在篩選過(guò)程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以_為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即_和_。(3)為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周?chē)纸馊Φ拇笮?，分解圈大說(shuō)明該菌株的降解能力_。(4)通常情況下，在微生物培養(yǎng)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、_和_。無(wú)菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈_附近進(jìn)行，以避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染?！菊n堂筆記】 _【解析】 (1)要獲得分解原油的細(xì)菌，只有在以原油為唯一碳源的培養(yǎng)基中，這種細(xì)菌可以大量繁

20、殖，而其他細(xì)菌不能生存，此種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)純化菌種常用平板劃線法和稀釋涂布平板法。(3)在以原油為唯一碳源的培養(yǎng)基上，在菌落周?chē)脑捅环纸舛纬煞纸馊?，分解圈越大，說(shuō)明該菌株降解能力越強(qiáng)。(4)實(shí)驗(yàn)室滅菌有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌，實(shí)驗(yàn)操作要在酒精燈火焰附近的無(wú)菌區(qū)進(jìn)行?！敬鸢浮?(1)原油 選擇(2)平板劃線法 稀釋涂布平板法(3)強(qiáng) (4)干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌 火焰易錯(cuò)警示對(duì)題目中給出的信息、材料不會(huì)推斷分析【典例2】 現(xiàn)有兩種固體培養(yǎng)基，已知其配制時(shí)所加的成分如下表： 2% 純淀粉 0.5% 葡萄糖 0.5% 0.5% CaCO3 0.01% 0.01% CaS

21、O42H2O 0.02% 0.02% NaCl 0.02% 0.02% MgSO47H2O 0.02% 0.02% KHSO4 含量 含量 成分 乙培養(yǎng)基 甲培養(yǎng)基 用這兩種培養(yǎng)基分別分離土壤中的兩種微生物，你認(rèn)為它們適于分離( )A.甲培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型自生固氮菌；乙培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型自生固氮菌B.甲培養(yǎng)基適于分離酵母菌，乙培養(yǎng)基適于分離真菌C.甲培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型自生固氮菌；乙培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型自生固氮菌D.甲培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型共生細(xì)菌；乙培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型共生固氮菌 【課堂筆記】 _【解析】 根據(jù)所提供的甲、乙兩種培養(yǎng)基的成分分析，兩者之間的主要差別是：甲培養(yǎng)基有葡萄糖和淀粉

22、作為有機(jī)碳源和能源，也有少量的無(wú)機(jī)碳源(CaCO3)；乙培養(yǎng)基無(wú)有機(jī)碳源和能源。兩者之間的共同點(diǎn)是：都不含氮源。說(shuō)明這兩種培養(yǎng)基分別適于培養(yǎng)異養(yǎng)型自生固氮微生物和自養(yǎng)型自生固氮微生物。【答案】 C【糾錯(cuò)筆記】 (1)例如選擇培養(yǎng)基特定條件或特定C、N源只有該種或該類(lèi)微生物能存活或利用。如纖維素粉做碳源時(shí)選擇分離出分解纖維素的微生物，無(wú)任何氮源的培養(yǎng)基選擇固氮微生物；高鹽、強(qiáng)酸、無(wú)氧等特定條件選擇耐鹽、耐酸、厭氧的微生物；加抗生素的培養(yǎng)基選擇真菌；根據(jù)是否含有機(jī)碳選擇自養(yǎng)、異養(yǎng)微生物。(2)根據(jù)劃線法得到的培養(yǎng)基上菌落的生成及分布情況，推斷分析微生物是否產(chǎn)生抗生素及相互抑制現(xiàn)象。u高考隨堂1.(

23、2011重慶)下列有關(guān)細(xì)菌培養(yǎng)的敘述，正確的是( )A.在瓊脂固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的單個(gè)菌落含有多種細(xì)菌B.在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制真菌而促進(jìn)細(xì)菌生長(zhǎng)C.向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進(jìn)破傷風(fēng)桿菌的生長(zhǎng)D.在半固體培養(yǎng)基中接種細(xì)菌培養(yǎng)后可以觀察其運(yùn)動(dòng)答案 D解析 菌落就是由單個(gè)細(xì)菌或同種細(xì)胞繁殖成的具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)特征的子細(xì)胞群體，一個(gè)菌落就是一個(gè)種群，所以單個(gè)菌落就只有一種細(xì)菌。青霉素能抑制細(xì)菌的細(xì)胞壁的形成從而抑制細(xì)菌的繁殖。破傷風(fēng)桿菌是厭氧型的生物。半固體培養(yǎng)基中可以觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)。2.(2009安徽)下列是關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是( )A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白

24、胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B.取104、105、106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各0.1 mL，分別涂布于各組平板上C.將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，37 恒溫培養(yǎng)2448小時(shí)D.確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)答案 D解析 檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)，用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各0.1 mL，分別涂布于各組平板上，將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，37 恒溫培養(yǎng)2448小時(shí)，在確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在30300的一組平板為代表進(jìn)行計(jì)數(shù)。3.(2007寧夏)某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)

25、行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察與計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問(wèn)題。(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了_和_。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是_和_。(2)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是_。(3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于_中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37 。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種_作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(4)培養(yǎng)20小時(shí)后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說(shuō)明湖水樣品中有_種細(xì)菌。一般說(shuō)來(lái)，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越_。(5)如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐_細(xì)菌，這種培養(yǎng)基被稱(chēng)為_(kāi)。答案 (1)氮源(碳源不作要求) 碳源 無(wú)機(jī)鹽 水(2)高壓蒸汽滅菌(3)恒溫培養(yǎng)箱 無(wú)菌水(4)多 高(5)鹽(或NaCl) 選擇培養(yǎng)基解析 蛋白胨來(lái)源于動(dòng)物原料，含有維生素、糖和有機(jī)氮等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，此培養(yǎng)基主要是為微生物提供氮源，微生物的培養(yǎng)基一般都要含有水、碳源、氮