色譜法薄層色譜和紙色譜ppt課件

1、色譜法又稱“色譜分析、“色譜分析法、“層析法，是一種分別和分析方法，在分析化學(xué)、有機化學(xué)、生物化學(xué)等領(lǐng)域有著非常廣泛的運用。色譜法利用不同物質(zhì)在不同相態(tài)的選擇性分配，以流動相對固定相中的混合物進展洗脫，混合物中不同的物質(zhì)會以不同的速度沿固定相挪動，最終到達(dá)分別的效果。 色譜法分類分類按兩相形狀按兩相形狀氣相色譜法氣相色譜法氣固色譜法氣固色譜法氣液色譜法氣液色譜法 液相色譜法液相色譜法液固色譜法液固色譜法液液色譜法液液色譜法 按固定相的幾何方式柱色譜法柱色譜法是將固定相裝在一金屬或玻璃柱中或是將固定相附著在毛細(xì)管內(nèi)壁上做成色譜柱，試樣從柱頭到柱尾沿一個方向挪動而進展分別的色譜法。 紙色譜法紙色譜

2、法是利用濾紙作固定液的載體，把試樣點在濾紙上，然后用溶劑展開，各組分在濾紙的不同位置以斑點方式顯現(xiàn)，根據(jù)濾紙上斑點位置及大小進展定性和定量分析。薄層色譜法薄層色譜法是將適當(dāng)粒度的吸附劑作為固定相涂布在平板上構(gòu)成薄層，然后用與紙色譜法類似的方法操作以到達(dá)分別目的。 按分別原理按色譜法分別所根據(jù)的物理或物理化學(xué)性質(zhì)的不同，又可將其分為：吸附色譜法( adsorption chromatography )利用吸附劑外表對不同組分物理吸附性能的差別而使之分別的色譜法稱為吸附色譜法。分配色譜法( partition chromatography )利用固定液對不同組分分配性能的差別而使之分別的色譜法稱為

3、分配色譜法。離子交換色譜法尺寸排阻色譜法親和色譜法 原理原理 色譜過程的本質(zhì)是待分別物質(zhì)分子在固定相和流色譜過程的本質(zhì)是待分別物質(zhì)分子在固定相和流動相之間分配平衡的過程，不同的物質(zhì)在兩相之間的動相之間分配平衡的過程，不同的物質(zhì)在兩相之間的分配會不同，分配會不同， 這使其隨流動相運動速度各不一樣，隨這使其隨流動相運動速度各不一樣，隨著流動相的運動，混合物中的不同組分在固定相上相著流動相的運動，混合物中的不同組分在固定相上相互分別。根據(jù)物質(zhì)的分別機制，又可以分為吸附色譜、互分別。根據(jù)物質(zhì)的分別機制，又可以分為吸附色譜、分配色譜、離子交分配色譜、離子交 換色譜、凝膠色譜、親和色譜等類換色譜、凝膠色譜

4、、親和色譜等類別。別。 色譜法常見的方法有：柱色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法等。 柱色譜柱色譜柱色譜法是最原始的色譜方法，這種方法將固柱色譜法是最原始的色譜方法，這種方法將固定相注入下端塞有棉花或濾紙的玻璃管中，將被樣定相注入下端塞有棉花或濾紙的玻璃管中，將被樣品飽品飽 和的固定相粉末攤鋪在玻璃管頂端，以流動相和的固定相粉末攤鋪在玻璃管頂端，以流動相洗脫。常見的洗脫方式有兩種，一種是自上而下依洗脫。常見的洗脫方式有兩種，一種是自上而下依托溶劑本身的重力洗脫，一種是自下而上依托毛細(xì)托溶劑本身的重力洗脫，一種是自下而上依托毛細(xì)作用洗脫。搜集分作用洗脫。搜集分 離后的純真組分也有兩種

5、不同的離后的純真組分也有兩種不同的方法，一種方法是在柱尾直接接受流出的溶液，另方法，一種方法是在柱尾直接接受流出的溶液，另一種方法是烘干固定相后用機械方法分開各個色帶，一種方法是烘干固定相后用機械方法分開各個色帶，以適宜的溶劑浸泡固定相提取以適宜的溶劑浸泡固定相提取 組分分子。柱色譜法組分分子。柱色譜法被廣泛運用于混合物的分別，包括對有機合成產(chǎn)物、被廣泛運用于混合物的分別，包括對有機合成產(chǎn)物、天然提取物以及生物大分子的分別。天然提取物以及生物大分子的分別。 薄層色譜薄層色譜薄層色譜法是運用非常廣泛的色譜方法，這薄層色譜法是運用非常廣泛的色譜方法，這種色譜方法將固定相圖布在金屬或玻璃薄板上構(gòu)種色譜方法將固定相圖布在金屬或玻璃薄板上構(gòu)成薄層，用毛細(xì)管、鋼筆或者成薄層，用毛細(xì)管、鋼筆或者 其他工具將樣品點其他工具將樣品點染于薄板一端，之后將點樣端浸入流動相中，依染于薄板一端，之后將點樣端浸入流動相中，依托毛細(xì)作用令流動相溶劑沿薄板上行展開樣品。托毛細(xì)作用令流動相溶劑沿薄板上行