小鼠巨噬細胞功能測定ppt課件

1、1.1.實驗目的實驗目的 了解小鼠腹腔巨噬細胞吞噬景象的原理；了解小鼠腹腔巨噬細胞吞噬景象的原理；熟習和掌握巨噬細胞吞噬實驗的方法。熟習和掌握巨噬細胞吞噬實驗的方法。小鼠巨噬細胞功能測定小鼠巨噬細胞功能測定 2.2.實驗原理實驗原理 巨噬細胞具有吞噬、分泌和參與免疫巨噬細胞具有吞噬、分泌和參與免疫應對的各種功能，是機體免疫程度和功能應對的各種功能，是機體免疫程度和功能的重要目的，與抗腫瘤免疫也有重要關(guān)系的重要目的，與抗腫瘤免疫也有重要關(guān)系。本實驗將雞紅細胞注入小鼠腹腔時，會。本實驗將雞紅細胞注入小鼠腹腔時，會被腹腔中的巨噬細胞吞噬。取小鼠腹腔液被腹腔中的巨噬細胞吞噬。取小鼠腹腔液涂片、染色，在

2、顯微鏡下察看可見雞紅細涂片、染色，在顯微鏡下察看可見雞紅細胞被吞噬的景象。計算吞噬百分率和吞噬胞被吞噬的景象。計算吞噬百分率和吞噬指數(shù)，可判別巨噬細胞的吞噬功能，據(jù)此指數(shù)，可判別巨噬細胞的吞噬功能，據(jù)此可判別機體的非特異性免疫程度。可判別機體的非特異性免疫程度。3.3.實驗器材實驗器材 1 1 器具：注射器、離心管、器具：注射器、離心管、載玻片、平皿、燒杯、橡皮乳頭、解剖載玻片、平皿、燒杯、橡皮乳頭、解剖剪和鑷子、解剖盤。剪和鑷子、解剖盤。 2 2 資料：無菌生理鹽水、資料：無菌生理鹽水、HanksHanks液、液、6%6%淀粉肉湯液、瑞氏染色淀粉肉湯液、瑞氏染色液、液、 1% 1%雞紅細胞懸

3、液、雞紅細胞懸液、 小鼠。小鼠。 4.4.實驗方法小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能體內(nèi)實驗方法小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能體內(nèi)測定法測定法1 1實驗前實驗前3d3d，給小鼠腹腔內(nèi)注射無菌，給小鼠腹腔內(nèi)注射無菌6%6%淀粉淀粉肉湯液肉湯液1ml1ml。 2 2實驗當天，給小鼠腹腔注射實驗當天，給小鼠腹腔注射1 1的雞紅細的雞紅細胞懸液胞懸液1ml 1ml ，輕，輕 揉腹部使雞細胞分散，令其活動揉腹部使雞細胞分散，令其活動2030min2030min。 3 3然后頸椎脫臼處死小鼠，仰臥固定。常規(guī)然后頸椎脫臼處死小鼠，仰臥固定。常規(guī)消毒腹部皮膚，消毒腹部皮膚， 左手持鑷提起腹中部皮膚。右手用左手持鑷提起腹中部皮

4、膚。右手用剪子剪長剪子剪長5mm5mm的小口，的小口， 從剪口處朝頭、尾部用力，扯開皮從剪口處朝頭、尾部用力，扯開皮膚，暴露腹壁。膚，暴露腹壁。 5提起腹前壁，避開血管剪一小口，用毛細吸管吹吸提起腹前壁，避開血管剪一小口，用毛細吸管吹吸混勻腹腔內(nèi)液體，并搜集于試管內(nèi)?；靹蚋骨粌?nèi)液體，并搜集于試管內(nèi)。6在干凈的載玻片上滴加一滴腹腔液制造涂片在干凈的載玻片上滴加一滴腹腔液制造涂片 。待涂。待涂片晾干后，瑞氏染液染色片晾干后，瑞氏染液染色5min。 7結(jié)果判別：高倍鏡結(jié)果判別：高倍鏡/油鏡下鏡檢。鏡下可見巨噬細胞油鏡下鏡檢。鏡下可見巨噬細胞核呈藍色，被吞噬的雞紅細胞呈橢圓形，其胞漿呈紅色而核核呈藍色

5、，被吞噬的雞紅細胞呈橢圓形，其胞漿呈紅色而核被染成藍色。計數(shù)巨噬細胞吞噬雞紅細胞情況，計算吞噬百被染成藍色。計數(shù)巨噬細胞吞噬雞紅細胞情況，計算吞噬百分率和吞噬指數(shù)。分率和吞噬指數(shù)。 吞噬百分率：即吞噬百分率：即100個巨噬細胞中吞噬有雞紅細胞的個巨噬細胞中吞噬有雞紅細胞的巨噬細胞數(shù)。巨噬細胞數(shù)。 吞噬指數(shù)：將吞噬指數(shù)：將100個巨噬細胞中所吞噬的雞紅細胞個巨噬細胞中所吞噬的雞紅細胞總數(shù)除以總數(shù)除以100即得吞噬指數(shù)，即平均每個巨噬細胞吞噬的雞即得吞噬指數(shù)，即平均每個巨噬細胞吞噬的雞紅細胞數(shù)。紅細胞數(shù)。 未被吞噬的雞紅細胞未被吞噬的雞紅細胞吞噬了雞紅細胞吞噬了雞紅細胞的巨噬細胞的巨噬細胞5.5.本卷須知本卷須知 1涂片的薄厚要適當，否那么影響計數(shù)。涂片的薄厚要適當，否那么影響計數(shù)。2小鼠腹腔注射時不要刺傷內(nèi)臟。小鼠腹腔注射時不要刺傷內(nèi)臟。3如小鼠腹腔液過少，可腹腔注入適量如小鼠腹腔液過少，可腹腔注入適量Hanks液揉動液揉動 后再取。后再取。 4剪開小鼠腹腔時應防止出血，否那么將影響實驗結(jié)果剪開小鼠腹腔時應防止出血，否那