藥物分析課件第十三章

1、目 錄CONTENTS緒論第一章 藥品質量研究的內容與藥典概況第二章 藥物的鑒別試驗第三章 藥物的雜質檢查第六章 芳酸類非甾體抗炎藥物的分析第七章 苯乙胺類擬腎上腺素藥物的分析第八章 對氨基苯甲酸酯和酰苯胺類局麻藥物的分析第九章 二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物的分析第十章 巴比妥及苯二氮類鎮(zhèn)靜催眠藥物的分析第十一章 吩噻嗪類抗精神病藥物的分析第十二章 喹啉與青蒿素類抗瘧藥物的分析第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析第十四章 維生素類藥物的分析第十五章 甾體激素類藥物的分析第十六章 抗生素類藥物的分析第十七章 合成抗菌藥物的分析第十八章 藥物制劑分析概論第十九章 中藥材及

2、其制劑分析概論第二十章 生物制品分析第二十一章 藥品質量控制中現(xiàn)代分析方法的進展第四章 藥物的含量測定與分析方法的驗證第五章 體內藥物分析2 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析學習要求掌握了解熟悉莨菪烷類抗膽堿藥物的結構特征、理化性質、鑒別和含量測定的基本原理與方法。了解其他分析方法在莨菪烷類藥物分析中的應用 本類藥物含量測定的酸性比色法，非水滴定法和HPLC法。3 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪（莨菪（Semen Semen HyoscyamiHyoscyami）本草綱目本草綱目一年或二年生草本植物。生于林邊、田野、路旁

3、等處，有少量栽培。干燥的成熟種子可入藥，于夏、秋間采摘炮制。其性溫，味苦辛，入心、胃、肝三經，有毒，具有定癇、止痛的功效。分類地位：分類地位：界：植物界界：植物界 門：雙子植物門門：雙子植物門 綱：雙子葉植物綱綱：雙子葉植物綱 目：茄目目：茄目 科：茄科科：茄科 屬：天仙屬：天仙子屬子屬 種：種：莨菪莨菪4 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物莨菪烷類抗膽堿藥物是由莨菪烷衍生物的氨基醇與不同有機酸縮合成酯的生物堿是由莨菪烷衍生物的氨基醇與不同有機酸縮合成酯的生物堿。如：顛茄生物堿，古柯生物堿。如：顛茄生物堿，古柯生物堿。從茄科植物，如顛茄、莨菪和

4、曼陀羅等從茄科植物，如顛茄、莨菪和曼陀羅等中提取的生物堿中提取的生物堿，5 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析第一節(jié)結構性質第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析016 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析（一）（一）典型藥物的結構典型藥物的結構 硫酸阿托品硫酸阿托品 氫溴酸東莨菪堿氫溴酸東莨菪堿 （atropine sulfate） ( Scopolamine hydrobromide）OOHNOHCH3*2H2SO4H2OONOHCH3OOHH*HBr7 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析ONOHCH

5、3OHHHO*HBrNOOOH,HBrCH3*氫溴酸山莨菪堿氫溴酸山莨菪堿( Anisodamine hydrobromide）氫溴酸后馬托品氫溴酸后馬托品( Hormatropine hydrobromide）8 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析ONOHCH3HOCH2OHO*ONOHCH3OH3CHOH*+Br-樟柳堿樟柳堿 ( Anisodine ）甲溴東莨菪堿甲溴東莨菪堿( Methscopolamin Bromide ）9 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析NOOHOn莨菪烷（Tropane）骨架n莨菪醇的構象n外消旋

6、體10 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析 莨菪烷3位帶有羥基為莨菪醇（托品），羥基位于3位為偽莨菪醇。 手性碳原子C1、C3和C5， 內消旋而無旋光性NOH*135莨菪烷（Tropane）11 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪醇的構象 莨菪烷及莨菪醇都有兩種穩(wěn)定的構象 (椅式和船式)， 二者互為平衡。由于船式能量稍高于椅式，故通常寫成椅式。NOHH椅式NOHH船式12 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析 -羥甲基苯乙酸簡稱為莨菪酸（亦稱托品酸，Tropic acid）。 天然的（-）-莨菪酸

7、為S-構型。HOOHO*莨菪酸NOOHO（二）主要化學性質（二）主要化學性質1. 水解性水解性 阿托品和東莨菪堿分子結構中，阿托品和東莨菪堿分子結構中，具有酯的結構，易水解具有酯的結構，易水解。以。以阿托品為例，阿托品為例，水解水解生成生成莨菪醇莨菪醇()和和莨菪酸莨菪酸()，其反應結構式，其反應結構式: : 2. 堿性堿性 阿托品和東莨菪堿結構中，五原脂環(huán)含有阿托品和東莨菪堿結構中，五原脂環(huán)含有叔胺氮原子叔胺氮原子，較強的，較強的堿性，易于酸成鹽，如阿托品堿性，易于酸成鹽，如阿托品pKb1為為4.353. 旋光性旋光性 氫溴酸東莨菪堿含有不對稱碳原子，左旋體比旋度為氫溴酸東莨菪堿含有不對稱碳

8、原子，左旋體比旋度為-24至至-27。阿托品雖然含有不對稱碳原子，但外消旋化，無旋光性。阿托品雖然含有不對稱碳原子，但外消旋化，無旋光性OOCH3NHH3COHNHH3C+HOOCH3()()14 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析第二節(jié)鑒別實驗第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析0215 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析1 12 23 34 45 5 16 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析阿托品、莨菪堿等托烷類生物堿水解后阿托品、莨菪堿等托烷類生物堿水解后生成莨菪酸，均可發(fā)生生成莨菪酸，均可發(fā)生

9、Vitaili反應反應 生成具有生成具有共軛結構共軛結構的陰離子的陰離子而顯而顯深紫色深紫色 與發(fā)煙硝酸共熱，得到黃色三硝與發(fā)煙硝酸共熱，得到黃色三硝基衍生物，放冷，加醇制氫氧化基衍生物，放冷，加醇制氫氧化鉀少許，即鉀少許，即脫羧脫羧 一、托烷生物堿的鑒別反應（一、托烷生物堿的鑒別反應（Vitaili反應）反應）17 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪酸的特征反應 HOOCOH+3HNO3HOOCOHNO2O2NNO2+3H2OKOHC2H5OHHOOCOHNO2O2NNOHOKOHHOOCOHNO2O2NNOKO莨菪酸莨菪酸硝基化硝基化脫羧化脫羧化共軛結構

10、共軛結構深紫深紫18 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析托烷生物堿托烷生物堿水解水解莨菪酸莨菪酸發(fā)煙硝酸發(fā)煙硝酸 三硝基衍生物三硝基衍生物KOH（C2H5OH）固體固體KOH有色的醌型產物有色的醌型產物深紫色深紫色取供試品約取供試品約10mg10mg，加發(fā)煙硝酸，加發(fā)煙硝酸5 5滴，置水浴上蒸干，得黃色的殘渣，滴，置水浴上蒸干，得黃色的殘渣，放冷，加乙醇放冷，加乙醇2 23 3滴，加固體氫氧化鉀一小粒，即顯深紫色。滴，加固體氫氧化鉀一小粒，即顯深紫色。19 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析二、氧化反應二、氧化反應(與硫酸與硫酸-

11、重鉻酸鉀的反應）重鉻酸鉀的反應）HOOCOHH2OH2SO4HOOCCH22O2CHO+2CO2H2On與硫酸及重鉻酸鉀加熱水解生成的莨菪酸被氧化為苯甲醛有苦杏仁特異臭味20 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析三三、 阿托品氯化汞醇試液阿托品氯化汞醇試液黃色沉淀黃色沉淀東莨菪堿氯化汞醇東莨菪堿氯化汞醇白色復鹽沉淀白色復鹽沉淀21 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析氫溴酸東莨氫溴酸東莨菪堿的鑒別菪堿的鑒別即生成白色沉淀（與即生成白色沉淀（與阿托品及后馬托品的阿托品及后馬托品的區(qū)別）區(qū)別） 取本品約取本品約10mg，加，加水水1ml溶

12、解后，置分溶解后，置分液漏斗中液漏斗中分取三氯甲烷液，置分取三氯甲烷液，置水浴上蒸干，殘渣中水浴上蒸干，殘渣中加二氯化汞的乙醇溶加二氯化汞的乙醇溶液液1.5ml 加氨試液使成堿性后加氨試液使成堿性后，加三氯甲烷，加三氯甲烷5ml，搖勻搖勻 22 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析生物堿沉淀試劑生物堿沉淀試劑反應條件及結果反應條件及結果碘化鉍鉀試液（碘化鉍鉀試液（Dragendorff試劑）試劑）橙紅或棕紅色沉淀橙紅或棕紅色沉淀碘化鉀碘試液碘化鉀碘試液(Wagnen試劑試劑)棕色或棕褐色沉淀棕色或棕褐色沉淀碘化汞鉀試液碘化汞鉀試液(Mayen試劑試劑)在酸性或堿性

13、溶劑中生成白色或淡黃在酸性或堿性溶劑中生成白色或淡黃色沉淀色沉淀三硝基苯酚試液（三硝基苯酚試液（Hager試劑或苦味試劑或苦味酸試液）酸試液）結晶性沉淀并有特定熔點結晶性沉淀并有特定熔點硅鎢酸試液（硅鎢酸試液（Bertrend試劑）試劑）白色、淡黃色或黃棕色沉淀白色、淡黃色或黃棕色沉淀磷鎢酸試液（磷鎢酸試液（Scheibler試劑）試劑）酸性或中性溶液中，淡黃色沉淀酸性或中性溶液中，淡黃色沉淀常用的生物堿沉淀試劑及反應常用的生物堿沉淀試劑及反應The precipitation reagents and reaction for testing alkaloids 23 第十三章第十三章 莨菪

14、烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析四、硫酸鹽與溴化物反應四、硫酸鹽與溴化物反應阿托品阿托品+氯化鋇溶液氯化鋇溶液 白色沉淀白色沉淀氫溴酸東莨菪堿氫溴酸東莨菪堿+硝酸銀溶液硝酸銀溶液 淡黃色沉淀淡黃色沉淀藥物大都以硫酸鹽或溴化物的形式存在，藥物大都以硫酸鹽或溴化物的形式存在，通過加沉通過加沉淀試劑如硝酸銀等生成溴化銀沉淀或加入氯試劑生淀試劑如硝酸銀等生成溴化銀沉淀或加入氯試劑生成溴溶于三氯甲烷而顯色成溴溶于三氯甲烷而顯色24 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析通過比較max、min或吸收光譜的一致性進行鑒別，也可比較其吸光度或吸收系數(shù)的比值來鑒別絕大多數(shù)

15、生物堿原料藥都采用IR法鑒別 UV IR25 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析四、光譜鑒別法氫溴酸東莨菪氫溴酸東莨菪紅外光譜紅外光譜The infrared spectrum of Scopolamine Hydrobromide 26 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析色譜法一般用于已知生物堿的鑒別色譜法一般用于已知生物堿的鑒別TLCHPLCGCPC五、色譜法五、色譜法27 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析第三節(jié)有關物質第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析0328 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽

16、堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析 氫溴酸東莨菪堿中特殊雜質檢查氫溴酸東莨菪堿中特殊雜質檢查氫溴酸東莨菪堿氫溴酸東莨菪堿來源來源： 茄科植物顛茄、白曼陀羅、莨菪中等提取茄科植物顛茄、白曼陀羅、莨菪中等提取（我國，白曼陀羅的干燥品：洋金花中提取東莨菪堿，制成氫溴酸鹽）（我國，白曼陀羅的干燥品：洋金花中提取東莨菪堿，制成氫溴酸鹽） 制備方法制備方法： 洋金花粗粉洋金花粗粉乙醇乙醇/滲漉滲漉滲漉液滲漉液減壓蒸餾減壓蒸餾浸膏浸膏H2SO4/提取提取酸性提取液酸性提取液Na2CO3, CHCl3/提取提取總生物堿總生物堿Na2CO3, CHCl3/分離分離東莨菪堿東莨菪堿HBr/成鹽成鹽氫溴酸東莨菪堿

17、（粗品）氫溴酸東莨菪堿（粗品）75% C2H5OH/精制精制成品成品29 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析特殊雜質與檢查特殊雜質與檢查取本品0.50g，加水10ml溶解后，依法測定（附錄 H），pH值應為4.05.5。強酸弱堿強酸弱堿取本品0.15g,加水5ml溶解后，在1520加高錳酸鉀滴定液(0.02mol/L)0.05ml，10分鐘內紅色不得完全消失。阿撲東莨菪堿、其他含有不阿撲東莨菪堿、其他含有不飽和雙鍵的有機物質飽和雙鍵的有機物質取本品0.10g ，加水2ml 溶解后，分成兩等份：一份中加氨試液23滴，不得發(fā)生渾濁；另一份中加氫氧化鉀試液數(shù)滴，只許發(fā)

18、生瞬即消失的類白色渾濁。阿撲阿阿撲阿托品、顛茄堿托品、顛茄堿 酸度易氧化物其他生物堿30 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析第四節(jié)含量測定第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析0431 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析一、酸性染料比色法的基本原理一、酸性染料比色法的基本原理有機相(BH+ In-)水相(BH+ In-)+HIn H+ In-+B H+ BH+UV 32 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析酸性染料酸性染料如磺酸酞類指示劑等，如溴甲酚綠、溴麝香草酚藍、溴甲酚紫、溴酚藍如磺酸酞類指示劑等，如

19、溴甲酚綠、溴麝香草酚藍、溴甲酚紫、溴酚藍等等 其與酸性離子定量結合、生成具有吸收光譜明顯紅移的有色離子對，其與酸性離子定量結合、生成具有吸收光譜明顯紅移的有色離子對，且可以被有機溶劑定量萃取，通過測定有機相中有色離子對的特征波長處且可以被有機溶劑定量萃取，通過測定有機相中有色離子對的特征波長處的吸光度，即可進行含量測定。的吸光度，即可進行含量測定。33 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析應用示例硫酸阿托品片的含量測定精密量取對照品溶液和供試品溶液各精密量取對照品溶液和供試品溶液各2ml2ml，分別置預先精密，分別置預先精密加入加入三氯甲烷三氯甲烷10ml10ml

20、的分液漏斗中，各加的分液漏斗中，各加溴甲酚綠溴甲酚綠溶液溶液4ml4ml，振搖提取后，靜置使分層；分取三氯甲烷液，照紫外振搖提取后，靜置使分層；分取三氯甲烷液，照紫外- -可見可見分光光度法，在分光光度法，在420nm420nm波長處分別測定吸光度，計算，即得。波長處分別測定吸光度，計算，即得。34 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析35 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析u 水性最佳pH值：使得使得BHBH+ +和和InIn- -最多最多u 酸性染料及其濃度：定量結合；對離子對的溶解定量結合；對離子對的溶解性好；有較高的吸收度；

21、足夠量即可性好；有較高的吸收度；足夠量即可u 有機溶劑的選擇：提取效率高，氯仿最理想提取效率高，氯仿最理想u 水分的影響：影響結果，脫水劑或濾紙除去水分影響結果，脫水劑或濾紙除去水分u 酸性染料中的有色雜質：有機溶劑萃取除去有機溶劑萃取除去36 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析 測定法測定法 精密量取對照品溶液和供試品溶液各2ml，分別置預先精密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚綠2.0ml，振搖提取兩分鐘后，靜止分層，分取澄清的三氯甲烷液，在420nm波長處分別測定吸光度，計算，并將結果與1.027相乘，即得本品（C17H23NO3）2H2SO4H2O相當標示量的百分含量。百分標示量%100027. 150標示量mWCAASSx式中Ax、AS分別為供試品和對照品溶液的吸光度； CS為對照品溶液的濃度mg/ml； m為樣品質量；為平均片重。1.027為（C17H23NO3）2H2SO4H2O與（C17H23NO3）2H2SO4H2O的質