實驗四-酶的特性實驗

1、精選優(yōu)質文檔-傾情為你奉上說明：本實驗由四個小實驗組成，其中第一個實驗（酶的專一性）必做，其他三個小實驗選做（至少做一個）寫實驗報告時，可以只寫需要做的實驗內容！實驗四 酶的特性實驗一、實驗目的酶是生物催化劑，生物體內化學反應基本上都是在酶的催化下進行的。通過本實驗了解酶催化的特異性、溫度對酶活力的影響、PH對酶活力的影響、激活劑和抑制劑對酶活力的影響，對于進一步掌握代謝反應及其調控機理具有十分重要的意義。二、實驗內容本實驗由酶的專一性實驗、溫度對酶活力的影響、PH對酶活力的影響、激活劑和抑制劑對酶活力的影響4個小實驗組成。（一）酶的專一性1、實驗原理本實驗以唾液淀粉酶對淀粉和蔗糖的作用為例，

2、來說明酶的專一性。淀粉和蔗糖無還原性，唾液淀粉酶水解淀粉生成有還原性二糖的麥芽糖，但不能催化蔗糖的水解。用班氏試劑檢查糖的還原性。班氏試劑為堿性硫酸銅，能氧化具還原性的糖，生成磚紅色沉淀氧化亞銅。2、材料、儀器與試劑(1)材料：新鮮配制的唾液及其稀釋液(2)儀器：恒溫水??；沸水??；試管及試管架；(3)試劑：2%蔗糖溶液；溶于0.3% NaCl的0.5%淀粉溶液；班氏試劑。3、實驗操作（1）稀釋唾液的制備唾液的獲取用一次性杯取一定量的飲用水，漱口以清潔口腔，然后在嘴中含10-20ml飲用水，輕漱2min左右時間，即可獲得唾液的原液，內含唾液淀粉酶。不同稀釋度唾液的制備（用大試管）本實驗需制備1：

3、1、1：5、1：20、1：50、1：200等五個不同濃度的稀釋唾液。舉例說明：1:5指的是稀釋了5倍的唾液，制備方法為1份原液+4份蒸餾水。 1：20指的是稀釋了20倍的唾液，制備方法為1份1：5的稀釋液+3分蒸餾水。（2）唾液淀粉酶最佳稀釋度的確定（嚴格按表1添加順序做實驗，用小試管做實驗）表1 唾液淀粉酶稀釋度的確定管號1（1：1）2（1：5）3（1：20）4（1：50）5（1：200）0.5%淀粉溶液（滴）44444稀釋唾液（ml）1111137恒溫水浴中保溫5分鐘班氏試劑（ml）11111沸水浴23分鐘實驗結果（2）淀粉酶的專一性 表2 淀粉酶專一性實驗管號1234560.5%淀粉溶液

4、（滴）4442%蔗糖溶液（滴）444最佳稀釋度唾液（ml）11煮沸過的最佳稀釋度唾液（ml）11蒸餾水（ml）1137恒溫水浴中保溫5分鐘班氏試劑（ml）111111沸水浴23分鐘實驗結果（二）溫度對酶活力的影響1、實驗原理酶的催化作用受溫度的影響。在最適溫度下，酶的反應速度最高。淀粉和可溶性淀粉遇碘呈藍色，糊精按其分子的大小，遇碘可呈藍色、紫色、暗褐色或紅色。最簡單的糊精遇碘不呈顏色，麥芽糖遇碘也不呈色，在不同溫度下，淀粉被唾液淀粉酶水的程度可由水解混合物遇碘呈現(xiàn)的顏色來判斷。2、材料、儀器與試劑（1）材料：新鮮配制的唾液及其稀釋液（2）儀器：試管及試管架；恒溫水??；冰??；沸水?。唬?）試劑

5、：溶于0.3% NaCl的0.5%淀粉溶液；KII2碘溶液；3、實驗操作取4支干燥的試管，編號后按下表加入試劑：表3 溫度對酶活力影響實驗加樣順序管號1230.5%淀粉溶液（ml）1.51.51.5最佳稀釋度唾液（ml）11煮沸過的稀釋唾液（ml）1實驗結果搖勻后，將1、3號試管放入37恒溫水浴中，2號試管放入冰水中。10分鐘后1、2、3管均取出（將2號內液體分兩半），用KII2溶液來檢驗1、2、3號管內淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。記錄并解釋結果。將2號管剩下的一半溶液放入37水浴中繼續(xù)保溫10分鐘后，再用KII2液實驗，記錄實驗結果。（三）PH對酶活力的影響1、實驗原理酶的活力受環(huán)境PH值的

6、影響極為顯著。不同酶的最適PH不同。本實驗觀察PH對唾液淀粉酶活性的影響。唾液淀粉酶的最適PH約為6.8。2、材料、儀器與試劑（1）材料：新配制的溶于0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液（2）儀器：試管及試管架；吸管；滴管；恒溫水浴（3）試劑：PH為5.0、5.8、6.8、8.0的緩沖溶液；KII2碘溶液；PH試紙3、實驗操作表4 PH對酶活性的影響實驗PH558688.0緩沖液（ml）33330.5%淀粉溶液（ml）1111向第一個試管加入稀釋唾液后，置于37的恒溫水??；等待1min后向第二個試管加入稀釋唾液，置于37的恒溫水??；依次類推！最佳稀釋度的唾液（ml）1111檢查淀粉水解程度待向第

7、四只試管加入唾液2min后，每隔1分鐘從第3管中取出1滴反應液于白瓷板上，加碘液檢查反應進行情況，直至反應液變?yōu)榈攸S色（顏色有點淡即可）。即可從第一只試管依次添加碘液，時間間隔也為1min。碘液(滴)11112現(xiàn)象為了更好的理解表格內容，下面對實驗過程進行說明：各取緩沖液3ml，分別注入4支帶有號碼的試管，隨后于各個試管中添加0.5%淀粉溶液1ml和最佳稀釋度的唾液1ml。向各試管中加入稀釋唾液的時間間隔為1分鐘。將各試管中物質混勻，并依次置于37恒溫水浴中保溫。待向第4管加入唾液2ml后，每隔1分鐘由第3管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1小滴KII2溶液。添加KII2溶液，檢驗淀粉的水解

8、程度。待混合變?yōu)榈攸S色（顏色有點淡即可）后，向所有試管依次添加1-2滴KII2溶液。添加滴KII2溶液的時間間隔，從第1管起，亦均為1分鐘。觀察各試管中物質呈現(xiàn)的顏色，分析pH對唾液淀粉酶活性的影響。（四）唾液淀粉酶的活化及抑制1、實驗原理酶的活性受活化劑或抑制劑的影響，氯離子為唾液淀粉酶的活化劑，銅離子為其抑制劑。2、材料、儀器與試劑（1）材料：0.5%淀粉溶液；最佳稀釋度的唾液（2）儀器：試管及試管架；恒溫水?。?）試劑：1% NaCl溶液；1% CuSO4溶液；KII2碘溶液；1%Na2SO4溶液3、實驗操作（注意本實驗的淀粉溶液為無NaCl的淀粉溶液）表4 唾液淀粉酶活化及抑制實驗管號12340.5%淀粉溶液（ml）1.51.51.51.5最佳稀釋度唾液（ml）0.50.50.50.51% NaCl溶液（ml）0.51% CuSO4溶液（ml）0.51% Na2SO4溶液（ml）0.5蒸餾水（ml）0.537恒溫水浴中保溫10分鐘KII2溶液（滴）23232323