全P含量的測定

1、全P含量的測定-王水酸熔鋁睇抗比色法土壤全磷測定是用強酸高溫消化，使不溶性磷酸鹽轉(zhuǎn)化為正磷酸狀態(tài)進入溶液。同時，強酸(王水)是一種強氧化劑，能使土壤中有機質(zhì)完全分解，使有機磷轉(zhuǎn)化為正磷酸而進入溶液，并使土壤中的二氧化硅脫水沉淀。用水和鹽酸溶解熔塊，在規(guī)定條件下樣品溶液與鋁睇抗顯色劑反應，生成磷鋁藍，用分光光度法定量測定。主要試劑：(1) 5mg/L磷標準溶液：105C下烘2h的KH2PO40.4390g加水消解后，加入5mL濃硫酸，加水定容至1L,即100mg/L母液。取5mL稀釋至100mL,即為5mg/L.(2) 2,4-二硝基酚指示劑：溶解0.20g2,4-二硝基酚于100mL95%無水

2、乙醇1(3)鋁睇貯存液：126mL濃硫酸加入400mL水中，冷卻后另取10g分析純鋁酸俊溶解于60C300mL水中，冷卻后，將硫酸溶液緩倒入鋁酸溶液中，加100mL0.5%酒石酸睇鉀，定容至1000mL,避光貯存。(4)鋁睇抗顯色劑：稱取分析純抗壞血酸1.5g,溶于100mL鋁睇貯存液中，有效期為24ho(5)100g/L碳酸鈉溶液：10g無水碳酸鈉(GB639)溶于水后，稀釋至100mL,搖勻。(6)50mL/L硫酸溶液：吸取5mL濃硫酸(GB625,95.0%98.0%,比重1.84)緩慢加入90mL水中，冷卻后加水至100mL0(7)王水：濃鹽酸和濃硝酸按3:1配制而成的混合物。(8)濃

3、硝酸溶液(9)濃鹽酸溶液(10)1:1鹽酸溶液：1體積濃鹽酸(一般是38%)與1體積的水混合而配成的鹽酸熔樣：準確稱取風干樣品1.0000g,精確到0.0001g,小心放入地竭底部，切勿粘在壁上，將培竭放入高溫電爐(馬福爐)，550C灰化6h,冷卻后加入5mL王水(1份硝酸+3份鹽酸)在電熱板上低溫加熱直至蒸干熔液(注意不要太干，恰好干)，然后加5mL1:1的鹽酸溶解，過濾于50mL容量瓶中，定容作為待測液。繪制校準曲線分別準確吸取5mg/L磷標準溶液0、2、4、6、8、10mL于50mL容量瓶中，同時加入與顯色測定所用的樣品溶液等體積的空白溶液二硝基酚指示劑23滴，并用100g/L碳酸鈉溶液

4、或50mL/L硫酸溶液調(diào)節(jié)溶液至剛呈微黃色，準確加入鋁睇抗顯色劑5mL,搖勻，加水定容，即得含磷量分別為0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/L的標準溶液系列。搖勻，于15C以上溫度放置30min后，在波長700nm處測定其吸光度，在方格坐標紙上以吸光度為縱坐標，磷濃度為橫坐標，繪制校準曲線。測定顯色：準確吸取待測樣品溶液210mL（含磷0.041.0ug）于50mL容量瓶中，用水稀釋至總體積約3/5處，加入二硝基酚指示劑23滴，并用100g/L碳酸鈉溶液或50mL/L硫酸溶液調(diào)節(jié)溶液至剛呈微黃色，準確加入5mL鑰睇抗指示劑，搖勻，加水定容，室溫15°C以上，放置30m

5、in。比色：顯色的樣品溶液在分光光度計上，用700nm、1cm光徑比色皿，以空白試驗為參比液調(diào)節(jié)儀器為零，進行比色測定，讀取吸光度，從校準曲線上查得相應的磷量。結(jié)果計算公式如下：全磷（）cvts二6-100m10從校準曲線上查得待測樣品溶液中磷的質(zhì)量濃度顯色液體積,、250ts一分取倍數(shù)（ts=巴）25烘干樣質(zhì)量全N含量的測定-凱氏半微量定氮法土壤、植株和其它有機體全氮的測定通常都采用凱氏消煮法，用硫酸鉀-硫酸銅-硒粉作加速劑。此法雖然消煮時間長，但控制好加速劑的用量，不易導致氮素損失，消化程度容易掌握，測定結(jié)果穩(wěn)定，準確度較高，適用于常規(guī)分析。主要儀器和試劑（1）凱氏管（50mL）、全自動凱

6、氏定氮儀、100mL三角瓶（2）濃硫酸（相對密度1.84,優(yōu)級純（一級）。（3） 40%NaOH:稱取固體氫氧化鈉400g,放入硬質(zhì)燒杯中，加入蒸儲水，不斷攪拌（防止燒杯底部固結(jié)），溶解后，定容至1000mL,轉(zhuǎn)入塑料試劑瓶，加塞，防止吸收空氣中的CO2。（4） 2%硼酸溶液：稱取20g硼酸（分析純，二級）用熱蒸儲水（約60°C）溶解，冷卻后稀釋至1000mL,每升硼酸溶液中加入甲基紅-澳甲酚綠指示齊【J20mL,并用稀酸或稀堿調(diào)節(jié)至紫紅色（pH4.5）。（5）甲基紅-澳甲酚綠指示劑：0.099g澳甲酚綠和0.666g甲基紅與瑪瑙研缽中，加入少量95%乙醇，研磨至指示劑完全溶解為止，

7、最后加95%乙醇至100mL。（6） 0.02mol/LHCL標準溶液：取濃鹽酸（比重1.19）1.67mL,用蒸儲水稀釋至1000mL然后用標準堿或硼砂標定。（7） 混合加速劑：K2SO4:CuSO4:Se=100:10:1即100gSO4（分析純）、10gCuSO4?5H2。（分析純）、和1gSe粉混合研磨，通過80號篩充分混勻（注意戴口罩），貯于具塞瓶中。操作步驟（1）土樣的消煮稱取風干土樣約1g,將土樣送入干燥的開氏瓶（或消煮管）底部，加入加速劑2g和濃硫酸5mL,搖勻，然后，放到石墨消煮儀上消煮，在溫度為380C,消煮2.5h-3h,取出冷卻。在消煮土樣的同時，做兩份空白測定，除不加

8、土樣外，其他操作皆與測定土樣相同。（2）將消煮過后的凱氏瓶放在全自動凱氏定氮儀上，關(guān)閉安全門。將100mL三角瓶放在承接管下。設(shè)置模式：蒸儲水10mL、硼酸20mL、堿液30mL、時間4m30s、淋洗5mL。確認后開始測定。（3）測定完畢后，取出三角瓶，用標準酸滴定至紫紅色。計算公式：1_二V-V0c（-H2SO4）14.010土壤全氮（N）量（g?kg_1）=2父103m式中：V滴定試液時所用酸標準溶液的體積（mL）;V0滴定空白時所用酸標準溶液的體積（mL）;c0.01mol?L-1（1/2H2SO4）或HCl標準溶液濃度；14.0氮原子的摩爾質(zhì)量（g?mo-1）;10-3將mL換算為L;

9、m烘干土樣的質(zhì)量（g）0兩次平行測定結(jié)果允許絕對相差：土壤全氮量大于1.0g?kg1時，不得超過0.005%；含氮1.00.6g?kg1時，不得超過0.004%；含氮0.6g?kg1時，不得超過0.003%。土壤有機質(zhì)的測定一重銘酸鉀法-稀釋加熱方法原理稀釋熱法（水合熱法）是利用濃硫酸和重銘酸鉀迅速混合時所產(chǎn)生的熱來氧化有機質(zhì)，以代替外加熱法中的油浴加熱，操作更加方便。由于產(chǎn)生的熱，溫度較低，對有機質(zhì)氧化程度較低，只有77%。剩余的重銘酸鉀用硫酸亞鐵來滴定，從所消耗的重銘酸鉀量，計算有機碳的含量。試齊I（1） 1mol?L-1（1/6K2Cr2O7）溶液。準確稱取K2Cr2O7（分析純，105

10、c烘干）49.04g,溶于水中,稀釋至1L。（2） 0.4mol?L-1（1/6K2Cr2O7）的基準溶液。準確稱取K2Cr2O7（分析純）（在130c烘3h）19.6132g于250mL燒杯中，以少量水溶解，將全部洗入1000mL容量瓶中，加入濃H2SO4約70mL,冷卻后用水定容至刻度，充分搖勻備用其中含硫酸濃度約為2.5mol?L-1（1/2H2SO4）。（3） 0.5mol?L-1FeSO4溶液。稱取FeS。?7H20140g溶于水中，加入濃H2SO415mL,冷卻稀釋至1L。此溶液的準確濃度以0.4mol?L-1（1/6K2Cr2O7）的基準溶液標定之。即準確分別吸取3份0.4mol

11、?L-1（1/6KzCrzO?）的基準溶液各25mL于150mL三角瓶中，加入鄰啡羅咻指示劑23滴，然后用0.5mol?L-1FeSO4溶液滴定至終點，并計算出的準FeSO4確濃度。硫酸亞鐵（FeSQ）溶液在空氣中易被氧化，需新鮮配制或以標準的K2Cr2O7溶液每天標定之。（4）鄰啡羅咻指示劑：稱取鄰啡羅咻（GB1293-77,分析純）1.6g與FeFeSQ?7H2O0.7g,溶于100mL水中。操作步驟準確稱取0.5000g土壤樣品于500mL的三角瓶中，然后準確加入1mol?L-1（1/6K2Cr2O7）溶液10mL于土壤樣品中，轉(zhuǎn)動瓶子使之混合均勻，然后加濃H2SO420mL,將三角瓶緩

12、緩轉(zhuǎn)動1min,促使混合以保證試劑與土壤充分作用，并在石棉板上放置約30min,然后加水220mL,力口34滴鄰啡羅咻指示劑，用0.5mol?L-1FeSO4標準溶液滴定至近終點時溶液顏色由綠變成暗綠色，逐漸加入FeSQ直至生成磚紅色為止。用同樣的方法做空白測定（即不加土樣）。如果K2Cr2O7被還原的量超過75%,則須用更少的土壤重做。結(jié)果計算土壤有機碳（gkg-b=皿一二.；3.0"33'©。烘干土重土壤有機質(zhì)（gkg-1）二土壤有機碳（gkg-1）>1.724式中：1.33為氧化校正系數(shù)；c為0.5molL-1FeSO4標準溶液的濃度;Vo空白滴定用去F

13、eSO4體積（mL）;V樣品滴定用去FeSO4體積（mL）;i一一一一，一一1、3.01/4碳原子的摩爾質(zhì)重（gmol）;10-3將mL換算為L;注釋：注1.泥碳稱0.05g,土壤有機質(zhì)含量低于10gkg-1者稱2.0g土壤微生物生物有機碳、氮含量微生物有機碳、氮均采用氯仿熏蒸法，并結(jié)合德國耶拿TOCMultiN/C3100總碳-總氮分析儀進行測量。實驗儀器真空干燥器，水循環(huán)式真空泵，培養(yǎng)皿，150ml三角瓶，燒杯，恒溫搖床，德國耶拿TOCMultiN/C3100總碳一總氮分析儀。實驗藥品0.5mol/lK2SO4溶液，無乙醇氯仿，NaOH溶液，黃油；其中無乙醇氯仿為國家公安管制類藥品，實驗室

14、內(nèi)使用均為氯仿分析純，所以使用前應進行提純。將氯仿試劑按1:2與蒸儲水混合放入分液漏斗內(nèi)，充分搖動1min,慢慢放出底層氯仿于燒杯中，反復洗滌三次。每次使用前洗滌適量氯仿，并保存與暗色試劑瓶中。在熏蒸時為了更好的降低氯仿沸點，在盛有氯仿的燒杯內(nèi)加入適量CaCL2/沸石，吸取洗滌時殘留的蒸儲水。操作方法稱取過2mm篩的土樣（10g粉）四份，分別作氯仿熏蒸處理和無氯仿熏蒸處理于培養(yǎng)皿中，比燒杯盛裝更能很好的被氯仿熏蒸。將土樣放入真空干燥器，并放置無乙醇氯仿（內(nèi)有CaCL2）,同時放入盛有1mol/LNaOH稀溶液的燒杯，用于吸收熏蒸過程中釋放出來的CO2。用凡士林對真空干燥劑進行密封，水循環(huán)式真空泵抽真空，使氯仿沸騰5min。關(guān)閉真空干燥器閥門，于25c黑暗條件下培養(yǎng)24h。熏蒸結(jié)束后，打開真空干燥器應聽到空氣進入的聲音，否則為熏蒸不完全，應重新熏蒸。熏蒸完全后，應先取出氯仿溶液和NaOH稀溶液，再密封真空干燥器反復抽真空，將土壤中殘留的氯仿抽出。在氯仿熏蒸和無氯仿熏蒸的土樣中加入40ml0.5mol/lK2