沉積物中氮的檢測方法

1、硝酸鹽氮的測定硝酸鹽是水體中含氮有機物的最終的分解產(chǎn)物。 研究沉積物間隙水硝酸鹽含量可以反映沉積物營養(yǎng)狀況及其對水體的奉獻。1.鎘柱還原法測定硝酸鹽氮原理：水樣通過鎘還原柱，將硝酸鹽氮定量地還原為亞硝酸鹽氮，然后按重氮-偶氮光度法測定亞硝酸酸鹽氮的含量，扣除原有亞硝酸鹽氮，得硝酸鹽氮的含量。設(shè)備：1）分光光度計；2）鎘柱 1-6 支；3）秒表 1 塊；4）紫外分光光度計；5）干燥器；6）pH 計：精度為 0.01pH 單位；7）烘箱；8）鐵架臺；試齊 I：1）鎘屑：直徑為 1mm 的鎘屑、鎘?；蚝＞d鎘；2）鹽酸溶液（2mol/L）:量取 83.5mL 鹽酸（HCl,尸 1.18g/mL）,加水

2、稀釋定容至 500mL。3）硫酸銅溶液（10g/L）:稱取 10g 硫酸銅（CuSO4g5H2。）溶于水并稀釋定容至 1000mL,混勻，盛于試劑瓶中。4）硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液（100g/mL：稱取 0.7218g 硝酸鉀（KNO3,預(yù)先在110c 下烘 1h,置于干燥器中冷卻），溶于少量水中，用水稀釋定容至1000mL,混勻。力口 1mL 三氯甲烷（CHC13）,混合。貯于 1000mL 棕色試劑瓶中，于冰箱內(nèi)保存。止匕溶液 1.00mL 含硝酸鹽氮 100 閔，有效期為半年。5）硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用溶液（10g/mL：量取 10.0mL 硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液，于 100mL 容量瓶中，加水稀釋至標(biāo)線

3、，混勻。此溶液 100mL 含硝酸鹽氮 10.0 聞，臨用前配制。6）氯化鏤緩沖溶液：稱取 10g 氯化鏤（NH4Cl,優(yōu)級純）溶于 1000mL 水，用約 1.5mL 氨水（NH3gH2。，尸 0.90g/mL）調(diào)節(jié) pH至8.5。此液用量較大，可一次配制 5L 以上。7）磺胺溶液（10g/L）:稱取 5.0g 磺胺（NH2SO2c6H4NH2）,溶于 350mL 鹽酸溶液（1+6）,用水稀釋至 500mL,混勻。盛于棕色試劑瓶中，有效期為 2 個月。8）鹽酸蔡乙二胺溶液（1g/L）:稱取 0.50g 鹽酸茶乙二胺（C10H7NHCH2NH2g2HC1）,溶于 500mL 水中，混勻。盛于棕

4、色試劑瓶中，于冰箱內(nèi)保存，保質(zhì)期為 1 個月。9）活化溶液：量取 14mL 硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液溶于 1000mL 容量瓶中，加氯化鏤溶液至標(biāo)線，混勻，貯于試劑瓶中。操作步驟：1）鎘柱的制備稱取 40g 鎘屑于 150mL 錐形分液漏斗中，用 2mol/L 的鹽酸溶液洗滌，除去表面氧化層，棄去酸液，用水洗至中性，加入 10g/L 硫酸銅溶液100mL 振搖約 3min,棄去廢液，用水洗至不含有膠體銅時為止。將少許玻璃纖維塞入原柱底部并注滿水，然后將鍍銅的鎘屑裝入還原柱中，在還原柱的上部也塞入少許玻璃纖維，已鍍銅的鎘屑要保持在水面以下以防接觸空氣，為此，柱中溶液液面在任何操作步驟中不得低于鎘屑。用

5、 250mL 活化溶液，以每分鐘 7?10mL 的流速通過還原柱使之活化，然后再用氯化鏤緩沖溶液過柱洗滌三次，還原柱即可使用。還原柱每次用完后，需用氯化鏤緩沖溶液洗滌倆次，然后注入氯化鏤溶液保存。如長期不用，可注滿氯化鏤溶液后密封保存。2）鎘柱還原率的測定配制溶液為 100pg/mL 勺硝酸鹽氮和亞硝酸鹽氮溶液，硝酸鹽氮參照繪制工作曲線中步驟測量其吸光度，其雙份平均吸光度記為ANO3-N。同時測量分析空白，其雙份平均吸光度記為Ab,N03-N。亞硝酸鹽氮的測定除了不通過還原柱外，其余各步驟均按硝酸鹽氮的測定步驟進行，其雙份平均吸光度記為ANO2-N。按下式計算硝酸鹽還原率R：-ANOQ-N-A

6、b,NO,-NR=3100%-ANO2-NAb,NO2-N3）繪制工作曲線取 6 個 50mL 量瓶，分別加入 0、0.125mL、0.25mL、0.50mL、0.75mL、1.00mL 硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用溶液，加水至標(biāo)線，混勻。標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的硝酸鹽氮溶液分別為 0、0.025mg/mL、0.050mg/mL、0.100mg/mL、0.150mg/mL、0.200mg/mL;分別量取 25.0mL 上述各濃度溶液于相應(yīng)的 50mL 比色管或具塞錐形瓶中，再各加 25.0mL 氯化鏤緩沖溶液，混勻；將混合后溶液逐個倒入還原柱中約 30mL,以每分鐘 6?8mL的流速通過還原柱直至接近鎘屑上部界面，棄

7、去流出液。然后再倒入剩余 20mL 重復(fù)上述通過還原柱的操作，接取 12.5mL 流出液于25mL 帶刻度的具塞比色管中，用水稀釋至 25.0mL,混勻；各加入 0.5mL 磺胺溶液，混勻，放置 20min（各加入 0.5mL 鹽酸茶乙二胺溶液，混勻，放置 20min）;于 543nm 用 2cm 或 5cm 比色皿以純水作參比，測其吸光度 At和 A0（標(biāo)準(zhǔn)空白）；以吸光度（At-A。）為縱坐標(biāo)，濃度P（mg/L）為橫坐標(biāo)，繪制工作曲線。4）水樣測定量取 25.0mL 已過濾的澄清水樣，于 50mL 比色管或具塞錐形瓶中，加入 25.0mL 氯化鏤緩沖溶液，混勻。照上述工作曲線繪制中相應(yīng)步驟

8、還原，顯色，測量水樣的吸光度 Aw。注意要點：1）還原柱用蝴蝶夾在固定在滴定臺上，并配備可插比色管的塑料底座。2）水樣通過還原柱時，液面不能低于鎘屑，否則會引進氣泡，影響水樣流速。如流速達不到要求，可在還原柱的流出處用乳膠管連接一段細玻璃管，可使流速加快。3）海棉鎘還原柱的處理過程及其他要求，可按產(chǎn)品特性說明書作相應(yīng)調(diào)整。4）水樣加鹽酸蔡乙二胺溶液后，須在 2h 內(nèi)測量完畢，并避免陽光照射。5）工作曲線可每隔一周重做一次，但須每天測定一份標(biāo)準(zhǔn)溶液以核對曲線。當(dāng)測定樣品的實驗條件與制定工作曲線的條件相差較大時（如更換電源或光電管，或溫度變化較大），須及時重制工作曲線。6）使用二次去離子水的目的是

9、要求水中不含 NO-2和 NO%。7）分光光度計的比色皿之間的吸光度如果有顯著差異，應(yīng)在 Aw及At中扣除。8）這個計算公式當(dāng)鎘柱對 NO-3的還原率在 95%以上使用。如果還原率偏低較多，水中含 NO-2又比較多時，計算結(jié)果的誤差偏大。這時可采用在 NO-2和 NO-3總的吸光度減去 NO-3的相應(yīng)吸光度后，再用工作曲線或公式計算。結(jié)果計算：由（At-A0）查工作曲線或用線性回歸方程計算水樣中硝酸鹽氮和亞硝酸鹽氮的含量之和 p 總（mg/L）。利用數(shù)據(jù)p總和水樣中原有亞硝酸鹽氮濃度PN02-N（mg/L）,按下式計算水樣中硝酸鹽濃度（mg/L）:?NO3-N=:-rNO2-N式中，PNO3-

10、N為水樣中硝酸鹽氮的濃度（mg/L）;P總為查工作曲線（包括亞硝酸鹽氮）的濃度；PNO2-N為水樣中原有亞硝酸鹽氮的濃度(mg/L)。2.酚二磺酸分光光度法測定硝酸鹽氮原理：酚二磺酸在無水情況下與硝酸鹽作用生成硝基二磺酸酚，用氨水調(diào)至堿性，產(chǎn)生分子重排，生成黃色化合物。在 410nm 測定吸光度，其濃度與分光光度計的吸光度成正比，進行定量測定。設(shè)備：1）紫外分光光度計；2）瓷蒸發(fā)皿（75?100mL 容量）；3）烘箱；4）水浴鍋。試齊 I：1）硫酸：p=1.84g/mLo2）發(fā)煙硫酸（H2SO4gSO3）:含 13%三氧化硫（SO3）。3）酚二磺酸C6H3（OH）（SO3H）2：稱取 25g

11、苯酚置于 500mL 錐形瓶中，加 150mL 濃硫酸使之溶解，再加 75mL 發(fā)煙硫酸，充分混合，瓶口插一小漏斗，置瓶于沸水中加熱 2h,得淡棕色稠液，貯于棕色瓶中，密塞保存。4）氨水（NH3gH2。）：尸 0.90g/mL。5）硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液（CN=100mg/mL）:將 0.7218g 經(jīng) 105?110c干燥 2h 的硝酸鉀（KNO3）溶于水中，移入 1000mL 容量瓶中，用水稀釋到標(biāo)線，混勻，加 2mL 氯仿作保存劑，至少可穩(wěn)定 6 個月。6)硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用溶液(CN=10.0mg/mL):吸取50.0mL硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液，置蒸發(fā)皿中，加氫氧化鈉溶液使調(diào)節(jié) pH=8,在

12、水浴鍋上蒸發(fā)至干。加 2mL 酚二磺酸試劑，用玻璃棒研磨蒸發(fā)皿內(nèi)壁，使殘渣與試劑充分接觸，放置片刻，重新研磨一次，放置 10min,加入少量水，定量移入 500mL 容量瓶中，加水至標(biāo)線，混勻。儲于棕色瓶中，此溶液至少穩(wěn)定 6 個月。7)硫酸銀溶液：稱取 4.3978g 硫酸銀(AgzSOQ 溶于水，稀釋至 1000mL。1.00mL 此溶液可去除 1.00mg 氯離子(Cl-)。8)硫酸溶液：0.5mol/mL。9)氫氧化鈉溶液：0.1mol/mL。10)EDTA 二鈉溶液：稱取 50gEDTA 二鈉鹽的二水化合物(C1H14N2O3Na2g12H2。)，溶于 20mL 水中，使調(diào)成糊狀，加

13、入60mL 氨水充分混合，使之溶解。11)氫氧化鋁懸浮液：稱取 125g 硫酸鋁鉀KAl(SO4)2g12H2O或硫酸鋁鏤NH4Al(SO4)2g12H2O溶于 1L 水中，加熱到 60C,在不斷攪拌下徐徐加入 55mL 氨水，使生成氫氧化鋁沉淀，充分?jǐn)嚢韬蠓胖?，棄去上清液。反?fù)用水洗滌沉淀， 至傾出液無氯離子和鏤鹽。 最后加入 300mL 水使成懸浮液。使用前振搖均勻。12)高鎰酸鉀溶液：3.16g/mL。操作步驟：A.空白實驗取 50mL 水，以與試樣測定完全相同的步驟、試劑和用量，進行平行操作。B.干擾的排除1）帶色物質(zhì)取 100mL 試樣移入 100mL 具塞量筒中，加 2mL 氫氧化

14、鋁懸浮液，密塞充分振搖，靜置數(shù)分鐘澄清后，過濾，棄去最初濾液的 20mL。2）氯離子取 100mL 試樣移入 100mL 具塞量筒中，根據(jù)以測定的氯離子含量，加入相當(dāng)量的硫酸銀溶液，充分混合，在暗處放置 30min,使氯化銀沉淀凝聚。然后用慢速濾紙過濾，棄去最初濾液 20mL。3）亞硝酸銀當(dāng)亞硝酸鹽氮含量超過 0.2mg/L 時，可取 100mL 試樣，力口 1mL 硫酸溶液，混勻后，滴加高鎰酸鉀溶液，至淡紅色保持 15min 不褪為止，使亞硝酸鹽氧化為硝酸鹽，最后從硝酸鹽氮測定結(jié)果中減去亞硝酸鹽氮量。C.測定取 50.0mL 試樣倒入蒸發(fā)皿中，用 pH 試紙檢查，必要時用硫酸溶液或氫氧化鈉溶

15、液，調(diào)節(jié)至微堿性（pH-8）,置水浴上蒸發(fā)至干。然后,加 1.0mL 酚二磺酸試劑，用玻璃棒研磨，使試劑與蒸發(fā)皿內(nèi)殘渣充分接觸，放置片刻，再研磨一次，放置 10min,加入約 10mL 水。在攪拌下加入 3?4mL 氨水， 使溶液呈現(xiàn)最深的顏色， 如有沉淀產(chǎn)生， 過濾； 或滴加 EDTA二鈉溶液，并攪拌至沉淀溶解。將溶液移至比色管中，用水稀釋至標(biāo)線，混勻。在 410nm 處，選用合適光程長的比色皿，以水為參比，測定溶液的吸光度。D.標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制用分度吸管向一組 10 支 50mL 比色管中，加入硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)溶液，所加體積如表所示，加水至約 40mL,加 3mL 氨水使成堿性， 再加水至標(biāo)

16、線， 混勻。按上述方法進行分光光度測定。所用比色皿的光程長亦如表所示。由除零管外的其他矯正系列測得的吸光度值減去零管的吸光度值，分別繪制不同比色皿光程長的吸光度對硝酸鹽氮含量（mg）的校準(zhǔn)曲線。校準(zhǔn)系列中所用標(biāo)準(zhǔn)溶液體積標(biāo)準(zhǔn)溶 1體積/mL硝酸鹽氮含量/mg比色皿過程/mm0010,300.100.001300.300.003300.500.005300.700.007301.000.01010,303.000.030105.000.050107.000.0701010.00.1010注意要點:1）發(fā)煙硫酸在室溫較低凝固取用時，可先在 40?50c 隔水浴加溫使之融化，不能將盛裝發(fā)煙硫酸的玻璃

17、瓶直接置入水浴中，以免瓶裂引起危險。2）硝酸鹽氮的測定應(yīng)在水樣采集后立即進行，必要時，應(yīng)保存在 4c下，但不得超過 24h。3）如不能獲得澄清濾液，可將已加過硫酸銀溶液的試樣在近 80c 的水浴中加熱，并用力振搖，使沉淀充分凝聚，冷卻后再進行過濾。4）如同時需去除帶色物質(zhì)，則可在加入硫酸銀溶液并混勻后，再加入 2mL 氫氧化鋁懸浮液，充分振搖，放置片刻待沉淀后過濾。結(jié)果計算：實驗中硝酸鹽氮的吸光度 Ar用下式計算：Ar=As-Ab式中，As為實驗溶液的吸光度；Ab為空白實驗溶液的吸光度。對某種特定樣品，As和 Ab應(yīng)在同一種光程長的比色皿中測定。硝酸鹽氮含量 CN（mg/L）表示。未經(jīng)去除氯離

18、子的試樣，按下式計算：CN=m1000V式中， m 為硝酸鹽氮質(zhì)量 （mg） ,由 Ar 值和相應(yīng)比色皿光程的校準(zhǔn)曲線確定；V 為試樣體積（mL）;1000 為換算為每升試樣計。經(jīng)去除氯離子的試樣，按下式計算：mViV2CN1000VVi式中，Vi為供去氯離子的試樣取用量（mL）;V2為硝酸銀溶液加入量（mL）。氨氮的測定氨氮能被定量氧化為亞硝酸氮。氨氮在沉積物-水界面的交換過程對初級成產(chǎn)力有重要影響。1.次澳酸鹽氧化法測定氨氮原理：在堿性條件下，次澳酸鹽將海水中的氨氮定量氧化為亞硝酸鹽，用重氮-偶氮分光光度法測定生成亞硝酸鹽和水中原有的亞硝酸鹽，然后，對水樣中原有的亞硝酸鹽進行校正，計算氨氮

19、的濃度。設(shè)備：1）分光光度計；2）玻璃蒸儲器3）陽離子交換純水器；4）烘箱；5）干燥器。試齊 I：1）無氨水：可選擇以下兩種方法制備：將蒸儲水通過一個長 30cm,直徑為 1?2cm 的陽離子交換樹脂 （使用前轉(zhuǎn)為氫型樹脂） ， 收集于玻璃瓶中，塞緊瓶蓋；將 1L 蒸儲水放入蒸儲水器中，加入 15mL0.5mol/L 氫氧化鈉溶液和 2.0g 過硫酸鉀 （心 3208）。 先敞口煮沸 10min,然后接好冷凝器，收集儲出液于聚乙烯瓶中直至蒸儲器中的水剩下 150mL 左右， 所收集的蒸儲水即為無氨蒸儲水，蓋緊瓶塞，待用。2）氫氧化鈉溶液（k400g/L）:稱取 400g 氫氧化鈉，溶于 200

20、0mL無氨蒸儲水中，蒸煮濃縮至 1000mL,冷卻后，貯于聚乙烯瓶中。3）鹽酸溶液（1+1）:量取 500mL 濃鹽酸（年 1.18g/mL）和 500mL 水混合，冷卻后貯于試劑瓶中。4）澳酸鉀-澳化鉀溶液：稱取 2.8g 澳酸鉀（KBrO3）和 20.0g 澳化鉀（KBr）溶于 1000mL 無鏤水中，低溫保存，此溶液有效期一年。5）次澳酸鈉氧化劑溶液：吸取 1mL 澳酸鉀-澳化鉀溶液溶于棕色試劑瓶中，加入 49mL 水，加入 3mL 鹽酸溶液，迅速蓋上瓶蓋，混勻，置于暗處5min,加入 50mL 氫氧化鈉溶液，混勻，使用前配制，此溶液在 35c 下可穩(wěn)定 8h。6）對氨基苯磺酰胺溶液（p

21、=2.0g/L）:稱取 1.0g 對氨基苯磺酰胺（NH2SO2C6H4NH2）溶于 500mL 有鹽酸溶液中，貯于棕色試劑瓶中。7）1-奈替乙二胺二鹽酸鹽溶液（尸 1.0g/L）:稱取去 0.5g 鹽酸蔡乙二胺（C10H7NHCH2NH2g2HCl）,用少量水溶解后，稀釋至 500mL 水中，混勻，盛于棕色試劑瓶中，于冰箱內(nèi)保存，如出現(xiàn)棕色應(yīng)重配。8）鏤標(biāo)準(zhǔn)貯備液c（NH；-NF10.04mol/mL:稱取 0.5349g 氯化鏤（預(yù)先在100c 下烘 1h,置于干燥器中冷卻至室溫），用少量水溶解后全量轉(zhuǎn)移至1000mL 容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，加 1.0mL 三氯甲烷，混勻。低溫冷藏，有限

22、期六個月。9）鏤標(biāo)準(zhǔn)使用液c（NH；-N”0.050Nmol/mLI：移取 1.0mL 鏤標(biāo)準(zhǔn)貯備液于 200mL 容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，混勻。此溶液現(xiàn)用現(xiàn)配。操作步驟：A.標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制在兩組各六個 50mL 容量瓶中分別移入鏤標(biāo)準(zhǔn)使用液 0.00、0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL、8.00mL,用無氨水稀釋至標(biāo)線，混勻。此標(biāo)準(zhǔn)系列氨氮濃度依次為 0、0.50mol/L、1.00/iol/L、2.50mol/L、5.00gmol/L、8.00gol/L。將標(biāo)準(zhǔn)溶液系列分別移取 25.0mL 至 U50mL 反應(yīng)瓶中，加入 2.5mL 次澳酸鈉氧化劑溶液，混勻，放

23、置 30min。加入 2.5mL 對氨基苯磺酸氨溶液，混勻，放置 5min。然后加入 1-蔡替乙二胺二鹽酸鹽溶液，充分混勻，放置 15min 后（顏色可穩(wěn)定 4h） ,在分光光度計上， 用 5cm 比色池， 以無氨蒸儲水為參比， 于 543nm測定吸光度 As,其中空白吸光度為 Ab。以扣除空白吸光度 Ab后的吸光度 An為縱坐標(biāo)， 硝酸鹽氮的濃度 Cs為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，并用線性回歸法求出標(biāo)準(zhǔn)工作曲線截距 a 和斜率 boB.水樣測定量取 25mL 水樣（雙樣）于 50mL 反應(yīng)瓶中，按照上述步驟測定水樣的吸光度 Aw。注意要點：1）測量中要嚴(yán)防空氣中的氨對水樣、試劑和器皿的玷污。2）

24、當(dāng)水溫高于 10c 時，氧化 30min 即可，若低于 10c 時，氧化時間應(yīng)適當(dāng)延長。3）在條件許可下，最好用無氨海水繪制工作曲線。4）加鹽酸蔡乙胺二胺試劑后，必須在 2h 內(nèi)測定完畢，并避免陽光照射。5）該法氧化率較高，快速，簡便，靈敏，但部分氨基酸也被測定。結(jié)果計算：水中氨氮含量，根據(jù)測試的指標(biāo)代入以下公式：A-Ab）-kANO2-ac（NH4-N）=-式中，c（NH；-N）為水樣中氨氮的濃度（mOl/L）；A為水樣測得的平均吸光度；Ab為空白吸光度；ANO2-N為水樣在“亞硝酸鹽測定”時，扣除試劑空白后的平均吸光度；a 為標(biāo)準(zhǔn)工作曲線截距；b 為標(biāo)準(zhǔn)工作曲線斜率；k 為測定亞硝酸鹽和測

25、定鏤的試劑體積比值，本方案為 0.85。2 .鈉氏試劑分光光度計法測定氨氮原理：以游離態(tài)的氨或鏤離子等形式存在的氨氮與鈉氏試劑反應(yīng)生成淡紅棕色絡(luò)合物，該絡(luò)合物的吸光度與氨氮含量成正比，于 420nm 處測量吸光度。設(shè)備：1）可見分光光度計；2）氨氮蒸儲裝（由 500mL 凱氏燒瓶、氮球、直形冷凝管和導(dǎo)管組成，冷凝管末端可連接一段適當(dāng)長度的滴管， 使出口尖端浸入吸收液液面下。亦可使用 500mL 蒸儲燒瓶）；3）烘箱；4）干燥器。試齊 I：1）無鏤水（在無氨環(huán)境中用下述方法之一制備）：離子交換法，蒸儲水通過強酸性陽離子交換樹脂（氫型）柱，將儲出液收集在帶有磨口玻璃塞的玻璃瓶內(nèi)。每升儲出液加 10

26、g 同樣的樹脂，以利于保存；蒸儲法，在 1000mL 的蒸儲水瓶中，加 0.1mL 硫酸（k1.84g/mL）,在全玻璃蒸儲器中重蒸儲，棄去前 50mL 微出液，然后將約將 800mL 微出液收集在帶有磨口玻璃塞的玻璃瓶內(nèi)。每開儲出液加 10g 強酸性陽離子交換樹脂（氫型）；純水器法，用市售純水器直接制備。2）輕質(zhì)氧化鎂（MgO）:不含碳酸鹽，在 500c 加熱氧化鎂，以除去碳酸鹽。3）鹽酸，p（HCl）=1.18g/mL。4） 鈉氏試劑 碘化汞-碘化鉀-氫氧化鈉 （Hgl2-KI-NaOH） 溶液 :稱取 16.0g氫氧化鈉（NaOH）,溶于 50mL 水中，冷至室溫。稱取 7.0g 碘化鉀

27、（KI）和 10.0g 碘化汞（HgI2）溶于水中，然后將此溶液在攪拌下，緩慢加入到上述 50mL 氫氧化鈉溶液中，用水稀釋至 100mL。貯于聚乙烯瓶內(nèi)，用橡皮塞或聚乙烯蓋子蓋緊，于暗處存放，有效期一年。5） 酒石酸鉀鈉溶液 （尸 500g/L） :稱取 50.0g 酒石酸鉀鈉 （KNaC4H606g4H2。 ）溶于 100mL 水中，加熱煮沸以驅(qū)除氨，充分冷卻后稀釋至 100mL。6）硫代硫酸鈉溶液（尸 3.5g/L）:稱取 3.5:g 硫代硫酸鈉（Na2s2O3）溶于水中，稀釋至 1000mL。7）硫酸鋅溶液（尸 100g/L）:稱取 10.0g 硫酸鋅（ZnSO4g7H2。）溶于水中，

28、稀釋至 100mL。8）氫氧化鈉溶液（k250g/L）:稱取 25g 氫氧化鈉溶于水中，稀釋至100mL。9）氫氧化鈉溶液c（NaOH）=1mol/L:稱取 4g 氫氧化鈉溶于水中，稀釋至100mL。10）鹽酸溶液c（HCl）=1mol/L:取 8.5mL 鹽酸于 100mL 容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線。11）硼酸溶液（尸 20g/L）:稱取 20 克硼酸（H3BO3）溶于水，稀釋至 1L。12）澳百里酚藍指示劑（年 0.5g/L）:稱取 0.05g 澳百里酚藍溶于 50mL 水中，加入 10mL 無水乙醇，用水稀釋至 100mL。13） 淀粉-碘化鉀試紙： 稱取 1.5g 可溶性淀粉于燒杯中，

29、 用少量水調(diào)成糊狀，加入 200mL 沸水，攪拌混勻放冷。力口 0.50g 碘化鉀（KI）和 0.50g 碳酸鈉（Na2CO3）,用水稀釋至 250mL。將濾紙條浸漬后，取出晾干，于棕色瓶中密封保存。14）氨氮標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液（內(nèi)=1000ghL）:稱取 3.8190 克氯化鏤（NH4CI,優(yōu)級純，在 100?105c 干燥 2h）,溶于水中，移入 1000mL 容量瓶中，稀釋至標(biāo)線，可在 2?5c 保存 1 個月。15）氨氮標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（小=10wgmL）:吸取 5.00mL 氨氮標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液于500mL 容量瓶中，稀釋至刻度。臨用前配制。操作步驟：A.樣品的預(yù)處理a.除余氯若樣品中存在余氯，可

30、加入適量的硫代硫酸鈉溶液去除。每加 0.5mL 可去除 0.25mg 余氯。用淀粉-碘化鉀試紙檢驗余氯是否除盡。b.絮凝沉淀100mL樣品中加入 1mL硫酸鋅溶液和 0.1?0.2mL氫氧化鈉溶液， 調(diào)節(jié)至 pH約為 10.5,混勻，放置使之沉淀，傾取上清液分析。必要時，用經(jīng)水沖洗過的中速濾紙過濾，棄去初濾液 20mL。也可對絮凝后樣品離心處理。c.預(yù)蒸儲將 50mL 硼酸溶液移入接受瓶中，確保冷凝管出口在硼酸溶液液面以下。分取 250mL 樣品，移入燒瓶中，加幾滴澳百里酚藍指示劑，必要時，用氫氧化鈉溶液或鹽酸溶液調(diào)整 pH 至 6.0（指示劑呈黃色）?7.4（指示劑呈藍色）之間，加入 0.2

31、5g 輕質(zhì)氧化鎂及數(shù)粒玻璃珠，立即連接氮球和冷凝管。加熱蒸儲，使儲出液速率約為 10mL/min,待儲出液達 200mL 時，加水定容至 250mL。B.標(biāo)準(zhǔn)曲線在 8 個 50mL 比色管中，分別加入 0、0.05mL、1.00mL、2.00mL、4.00mL、6.00mL、 8.00mL 和 10mL 氨氮標(biāo)準(zhǔn)工作溶液， 其對應(yīng)的氨氮含量分別為 0、5.010.020.040.0w、g60.0wW80.0g 和 100wg加水至標(biāo)線。加入 1.0mL 酒石酸鉀鈉溶液，搖勻，再加入鈉氏試劑 1.5mL或 1.0mL 搖勻。放置 10min 后，在 420nm 下，用 20mm 比色皿，以水為

32、參比，測量吸光度。以空白校正后的吸光度為縱坐標(biāo)，以其對應(yīng)的氨氮含量（w0 為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。注：根據(jù)待測樣品的濃度也可選取 10mm 比色皿。C.樣品測定清潔水樣：直接取 50mL,按與校準(zhǔn)曲線相同的步驟測量吸光度。有懸浮物和色度干擾的水樣：取經(jīng)預(yù)處理的水樣 50mL（若水樣中氨氮濃度超過 2mg/L,可適當(dāng)少取水樣體積），按與校準(zhǔn)曲線相同的步驟測量吸光度。注：經(jīng)蒸儲或在酸性條件下煮沸方法預(yù)處理的水樣，須加一定量氫氧化鈉溶液，調(diào)至水樣至中性，用水稀釋至 50mL 標(biāo)線，再按與校準(zhǔn)曲線相同的步驟測量吸光度。空白實驗：用水代替水樣，按與樣品相同的步驟進行前處理和測定。注意要點：1）碘化汞（H

33、gl2）為劇毒物質(zhì)，避免經(jīng)皮膚和口腔接觸。2）水樣采集在聚乙烯瓶或玻璃瓶內(nèi)，要盡快分析。如需保存，應(yīng)加硫酸使水樣酸化至 pH2,2?5c 下可保存 7 天。3）分析純酒石酸鉀鈉鏤鹽含量較高時，僅加熱煮沸或加鈉氏試劑沉淀不能完全除去氨。此時采用加入少量氫氧化鈉溶液，煮沸蒸發(fā)掉溶液體積的 20%?30%,冷卻后用無鏤水稀釋至原體積。4）濾紙中含有一定量的可溶性鏤鹽，定量濾紙中含量高于定性濾紙，建議采用定性濾紙過濾，過濾前用無鏤水少量多次淋洗（一般為 100mL）。這樣可減少或避免濾紙引入的測量誤差。5）某些有機物很可能與氨同時儲出，對測定仍有干擾，其中有些物質(zhì)（如甲醛）可以在酸性條件（pH1）下煮

34、沸除去。氨氣蒸出速度較快，加熱不能過快，否則造成水樣暴沸，儲出液溫度升高，氨吸收不全，儲出液速率應(yīng)保持在 10mL/min 左右。6）向蒸儲燒瓶中加入 350mL 水，加數(shù)粒玻璃珠，裝好儀器，蒸儲到至少收集 100mL 水，將儲出液及瓶內(nèi)殘留液棄去。7）試劑空白的吸光度應(yīng)不超過 0.03（10mm 比色皿）。結(jié)果計算：水體中氨氮含量，根據(jù)測試的指標(biāo)代入以下公式：一、As-Ab-a:N二bN式中，PN為水樣中氨氮的質(zhì)量濃度（mg/L）;As為水樣的吸光度；Ab為空白實驗的吸光度；a 為校準(zhǔn)曲線的截距；b 為校準(zhǔn)曲線的斜率 V 為試料體積（mL）。間歇水溶解性有機氮含量測定方法溶解性有機氮（DON

35、）是天然水體中氮的重要組成部分，也是溶解性總氮（TDN）的主要組成部分。研究測定水體中 DON 含量可以反映沉積物-水界面體系氮循環(huán)機制。原理：目前，沒有測定水體中 DON 含量的直接方法；DON 值一月 S 由 TDN 值差減溶解性無機氮值獲得。 即 DON=TDN-NH/-NO 并常用兩種方法有： 過硫酸鉀濕氧化法（PO）和高溫催化氧化法（HTCO）。PO 能夠真實反映湖泊水體中 DON 含量及其垂向變化，是目前測定湖泊水體 DON 含量較為常用方法。在 60c 以上，過硫酸鉀可分解為硫酸氫鉀和原子態(tài)氧。分解出的原子態(tài)氧在 120?124c 條件下，可使水樣中含氮化合物氧化分解并轉(zhuǎn)化為硝酸

36、鹽。用紫外分光光度法與 220nm 和 275nm 處，分別測定吸光度。用矯正的吸光度 A=A220-2A275繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并計算樣品中 TDN 的濃度。氨氮和硝氮分別采用鈉氏試劑比色法和紫外分光光度法測定。設(shè)備：1）紫外分光光度計；2）高壓蒸汽消解滅菌鍋；3）恒溫振蕩器；4）離心機；5）電熱板；6）烘箱；7）干燥器。試齊 I：1）鈉氏試劑：稱取 16.0g 氫氧化鈉（NaOH）,溶于 50mL 水中，充分冷卻至室溫。另稱取 7.0g 碘化鉀（KI）和 10.0g 碘化汞（Hgl2）溶于水，然后將此溶液在攪拌下徐徐注入氫氧化鈉溶液中，用水稀釋至 100mL。貯于聚乙烯瓶內(nèi)，密塞保存。2） 酒石

37、酸鉀鈉溶液： 稱取 50g 酒石酸鉀鈉 （KNaC4H606g4H2。 ） 溶于 100mL水中，加熱煮沸以除去氨，冷卻，定容至 100mL。3）鏤標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液：稱取 3.8190g 經(jīng) 100c 干燥過的優(yōu)級氯化鏤（NH4CI）,溶于水中，定容至 1000mL（每毫升此溶液含有 1mg氨氮）。4）鏤標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：取 5mL 鏤標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液，定容至 500mL（每毫升此溶液含有 0.01g 氨）。5）硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液：稱取 0.7218g 經(jīng) 105?110c 干燥 4h 的優(yōu)級硝酸鉀（KN03）溶于超純水中，定容至 1000mL。每毫升此溶液含有 100 用氨。在 0?10c 暗處保存，

38、或加入 2mL 三氯甲烷作保護劑， 至少可穩(wěn)定 6 個月。6）硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)使用液：根據(jù)自己的用量，將標(biāo)準(zhǔn)貯備液稀釋 10 倍即可（每毫升此溶液含有 10 用氨）。7）堿性過硫酸鉀溶液：稱取 40g 過硫酸鉀（K2s2。8）,15gNaOH,溶于水中定容至 1000mL。存放于聚乙烯瓶中，可貯存一周。8） （1+9）HCI:1mLHCI（分析純）+9mL 超純水。9） 1moI/LHCI:稱取 86mLHCI（優(yōu)級純），定容至 1L。10）0.8%氨基磺酸溶液：0.8g 氨基磺酸，溶于 100mL 水中，避光保存于冰箱中。11）苗三酮溶液：2g 苗三酮溶于 100mL 乙醇中（棕色瓶，冰箱，10

39、天保質(zhì)期。12）磷酸緩沖溶液：（pH=8.04）:A（0.5mL）+B（9.5mL）相.04 磷酸緩沖溶液。A.0.1mol/L 磷酸二氫鉀：磷酸二氫鉀 1.361g,加水定容至100mL,pH 為 4.37;B.0.1mol/L 硫酸氫二鈉：NazHPO4g12H2O3.581g,定容至 100mL,pH 為 9.05。操作步驟：A.標(biāo)線測定與繪制a.NH4+-N 標(biāo)準(zhǔn)曲線1） 取 7 支 50mL 比色管， 分別加入 0、 0.25mL、 0.50mL、 1.50mL、 2.50mL、3.50mL、5.00mL 鏤標(biāo)準(zhǔn)使用液，用水定容至 50mL。2）加 1mL 酒石酸鉀鈉，1.5mL 鈉

40、氏試劑，混勻；放置 10min,以超純水作參比， 在 420nm 處測吸光度； 由測得的吸光度減去零濃度空白吸光度后，得到校正吸光度，繪制以氮氮含量（mg）對校正吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。b.NO3+-N 標(biāo)準(zhǔn)曲線1） 取 7 支 50mL 比色管， 分別加入 0、 0.50mL、 1.00mL、 2.00mL、 3.00mL、4.00mL、5.00mL 硝酸鹽氮（硝酸鉀）標(biāo)準(zhǔn)使用液，用水定容至 50mL。2）力口 1mL1mol/LHCl 溶液，0.1mL 氨基磺酸溶液，混勻，定容至 50mL;以超純水作參比，在 220nm 和 275nm 處測吸光度。在 220nm 和275nm 測得的吸光度減去

41、零濃度空白 220nm 和 275nm 吸光度（A）,根據(jù)公式 A 較二人220-2 人275,得到校正吸光度，繪制以硝氮含量（mg）對校正吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。c.TN 標(biāo)準(zhǔn)曲線1） 取 7 支 25mL 比色管， 分別加入 0、 0.50mL、 1.00mL、 2.00mL、 3.00mL、5.00mL、7.00mL、8.00mL 硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)使用液，用水定容至 10mL。2）加入 5mL 堿性過硫酸鉀溶液，塞緊磨口瓶，用紗布扎緊管塞，以防止濺出。將比色管在高壓消煮鍋于 121c 中消煮 30min,冷卻。3）加入 1mL（1+9）HCl,定容至 25mL,混勻。以超純水作參比，在 220nm

42、和 275nm,測量吸光度。在 220nm 和 275nm 測得的吸光度減去零濃度空白 220nm 和 275nm 吸光度（A）,根據(jù)公式 A 較二人22。八275,得到校正吸光度，繪制以總氮含量（mg）對校正吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。B.樣品測定a. TDN 測定取 2mL 過 0.45g 混纖膜后水樣于 25mL 比色管中，定容至 10mL,加入 5mL堿性過硫酸鉀，蓋上塞子用紗布扎好后于 121c 下高溫消煮 1h。待冷卻后加入 1mL（1+9）HCl,定容至 25mL,靜置 10min 后，分別在 220nm、275nm比色。b. NH4+-N 的測定取 2mL 過濾后水樣，定容至 25mL,

43、加 0.5mL 酒石酸鉀鈉，加 0.75mL 鈉氏試劑，搖勻靜置 10min,在 420nm 比色。c. NO3+-N取 2mL 過濾后水樣，定容至 25mL,力口 0.5mL1mol/LHCl,力口0.05mL0.8%氨基磺酸M 勻靜置 10min 后分別在 220nm、275nm 比色 c注意要點：1）必須控制空白實驗的吸光度不超過 0.03,超過比值則要檢查用水、試劑、器皿和高壓消毒鍋的壓力。2）測定總氮可能會出現(xiàn)黃褐色沉淀，可加入 5%鹽酸脛胺 1mL 即可消除。結(jié)果計算：上覆水各形態(tài)氮含量，根據(jù)測試的指標(biāo)代入以下公式：水樣各形態(tài)氮（mg/L）=式中，c 為由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的各形態(tài)氮的含

44、量（mg）;V 為水樣體積;n 為分取倍數(shù)。DON 含量根據(jù)差減法得到：DON=TDN-NH4+-NO3-沉積物原位釋放動力學(xué)研究方法：靜態(tài)模擬沉積物營養(yǎng)鹽（N、P）通過擴散、對流和沉積物在懸浮等過程向上覆水釋放氮磷（成為湖泊水質(zhì)惡化和富營養(yǎng)化的重要來源）。在原位靜態(tài)條件下更能很好地反應(yīng)沉積物氮磷釋放量。原理：從現(xiàn)場采集未受干擾的沉積物，保持原樣不受破壞，運到實驗室進行培養(yǎng)，每隔固定的時間對上覆水營養(yǎng)鹽濃度進行測定。根據(jù)數(shù)學(xué)模型評價沉積物氮磷釋放通量和釋放速率。設(shè)備：1）紫外可見分光光度計；2）過濾器；3）柱狀樣采樣器。1 .磷試齊 I：1）10%抗壞血酸：稱取 10g 抗壞血酸，用水溶解定容

45、至 100mL,貯存于棕色試劑低溫保存，使用時若溶液顏色變黃則需重配。2）鋁酸鹽溶液：溶解 13g 鋁酸鏤（四水合物）于 100mL 水中。溶解 0.35g酒石酸錫氧鉀于 100mL 水中。在不斷攪拌下，將鋁酸鏤溶液徐徐加入300mL（1+1）硫酸中，加酒石酸錫氧鉀溶液，并且混合均勻，貯存于棕色瓶中于 4c 保存，至少穩(wěn)定 2 個月。3）0.02mol/LKCl 溶液。4）磷酸鹽貯備液：將優(yōu)級純磷酸二氫鉀于 110c 干燥 2h,在干燥器中放冷，稱取 0.2197g 溶解至 1000mL 容量瓶中，加（1+1）硫酸 5mL,用水稀釋至標(biāo)線。5）磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液：取 10mL 磷酸鹽貯備液，用水定

46、容至 250mL,每毫升此溶液含有 2 聞磷，現(xiàn)用現(xiàn)配。操作步驟：A.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制1） 取 25mL 比色管 7 支， 分別吸取磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液 0、 0.5mL、 1.mL、 1.5mL、2mL、3mL、5mL、10mL 定容至 25mL。2）加入 0.5mL 的 10%抗壞血酸，搖勻，30s 后加入 1mL 鋁酸鹽溶液充分混勻，顯色 15min,以超純水作參比，在 700nm 比色。用磷濃度與比色值作標(biāo)準(zhǔn)曲線。B.樣品測定1）用沉積物柱狀采樣器采取新鮮物樣，首先將柱狀樣中上覆水用虹吸法移置于聚乙烯瓶中，過 0.45m 纖維濾膜。2）用虹吸法沿著柱壁緩慢滴加上覆水濾液（或加蒸儲水），其液面高

47、度至20?50cm,實驗中保持柱狀樣垂直放置。3）柱狀樣在恒定水溫 20c 避光模擬培養(yǎng)，此后分別于第 1 天、7 天、14 天、21 天、 28 天、 35 天、 42 天用移液管移去水柱中段水樣， 每次取樣 100mL,同時用初始過濾的上覆水（或加蒸儲水）補充至刻度處。3）取適量的水樣置于 25mL 比色管中，用蒸儲水定容至 25mL,加入 0.5mL的 10%抗壞血酸，搖勻，30s 后加入 1mL 鋁酸鹽溶液充分混勻，顯色15min,以超純水作參比，在 700nm 比色。2.氨氮試齊 I：1）鈉氏試劑：稱取 16.0g 氫氧化鈉（NaOH）,溶于 50mL 水中，充分冷卻至室溫。另稱取

48、7.0g 碘化鉀（KI）和 10.0g 碘化汞（Hg溶于水，然后將此溶液在攪拌下徐徐注入氫氧化鈉溶液中，用水稀釋至 100mL。貯于聚乙烯瓶內(nèi)，密塞保存。2） 酒石酸鉀鈉溶液： 稱取 50.0g 酒石酸鉀鈉（KNaC4H606g4H2。 ） 溶于 100mL水中，加熱煮沸以除去氨，冷卻，定容至 100mL。3）鏤標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液：稱取 3.8190g 經(jīng) 100c 干燥過的優(yōu)級氯化鏤（NH4CI）,溶于水中，定容至 1000mL（每毫升此溶液含有 1mg氨氮）。4）鏤標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：取 5mL 鏤標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液，定容至 500mL（每毫升此溶液含有 0.01g 氨）。操作步驟：A.NH4+-N 標(biāo)線繪

49、制1） 取 7 支 50mL 比色管， 分別加入 0、 0.25mL、 0.50mL、 1.50mL、 2.50mL、3.50mL、5.00mL 鏤標(biāo)準(zhǔn)使用液，用水定容至 50mL。2）加 1mL 酒石酸鉀鈉，1.5mL 鈉氏試劑，混勻；放置 10min,以超純水作參比， 在 420nm 處測吸光度； 由測得的吸光度減去零濃度空白吸光度后，得到校正吸光度，繪制以氮氮含量（mg）對校正吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。B.樣品測定1）用沉積物柱狀采樣器采取新鮮物樣，首先將柱狀樣中上覆水用虹吸法移置于聚乙烯瓶中，過 0.45m 纖維濾膜。2）用虹吸法沿著柱壁緩慢滴加上覆水濾液（或加蒸儲水），其液面高度至 20?50cm,實驗中保持柱狀樣垂直放置。3）柱狀樣在恒定水溫 20