食品檢驗(yàn)工微生物基礎(chǔ)

1、目錄 微生物檢測(cè)基礎(chǔ)知識(shí) 食品檢測(cè)基礎(chǔ)知識(shí)(微生物檢驗(yàn)部分) 食品安全衛(wèi)生基礎(chǔ)知識(shí) 飲料中的致病菌、商業(yè)無(wú)菌進(jìn)行測(cè)定 菌落總數(shù)測(cè)定 大腸菌群數(shù)測(cè)定 致病菌檢測(cè)技術(shù) 檢驗(yàn)結(jié)果的分析及檢驗(yàn)報(bào)告的編寫 一、微生物檢測(cè)基礎(chǔ)知識(shí)一、微生物檢測(cè)基礎(chǔ)知識(shí) 1微生物學(xué)檢驗(yàn)的范圍生產(chǎn)環(huán)境的檢驗(yàn) 空氣墻壁、地面及生產(chǎn)用水空氣墻壁、地面及生產(chǎn)用水原輔料的檢驗(yàn) 主料、輔料、添加劑等主料、輔料、添加劑等食品加工、儲(chǔ)藏、銷售環(huán)節(jié)的檢驗(yàn) 對(duì)生產(chǎn)人員的衛(wèi)生狀況、食品加工工具、運(yùn)輸工具及包裝對(duì)生產(chǎn)人員的衛(wèi)生狀況、食品加工工具、運(yùn)輸工具及包裝材料等材料等食品的檢驗(yàn) 出口食品、可疑食品及食物中毒食品出口食品、可疑食品及食物中毒食品

2、 2 微生物學(xué)檢驗(yàn)的指標(biāo)細(xì)菌菌落總數(shù)細(xì)菌菌落總數(shù)反映食品的新鮮度、被細(xì)菌污染的程度及在加細(xì)菌菌落總數(shù)反映食品的新鮮度、被細(xì)菌污染的程度及在加工過(guò)程中細(xì)菌繁殖動(dòng)態(tài)的一項(xiàng)指標(biāo)工過(guò)程中細(xì)菌繁殖動(dòng)態(tài)的一項(xiàng)指標(biāo) 判斷食品衛(wèi)生質(zhì)量的判斷食品衛(wèi)生質(zhì)量的重要依據(jù)重要依據(jù)大腸菌群數(shù) 作為人畜糞便污染的指標(biāo)，評(píng)價(jià)食品衛(wèi)生質(zhì)作為人畜糞便污染的指標(biāo)，評(píng)價(jià)食品衛(wèi)生質(zhì)量的重要依據(jù)量的重要依據(jù)致病菌 3 微生物檢驗(yàn)的要求 微生物檢驗(yàn)室的基本要求 微生物學(xué)檢驗(yàn)人員的要求 微生物檢驗(yàn)程序的基本要求 培養(yǎng)基與試劑的基本要求培養(yǎng)基原料的質(zhì)量控制a合成培養(yǎng)基：由各種純化學(xué)物質(zhì)按一定比例配制而成。合成培養(yǎng)基：由各種純化學(xué)物質(zhì)按一定比例

3、配制而成。 b半合成培養(yǎng)基：有一部分純化學(xué)物質(zhì)和另一部分天然物半合成培養(yǎng)基：有一部分純化學(xué)物質(zhì)和另一部分天然物質(zhì)配制而成。質(zhì)配制而成。c天然培養(yǎng)基：利用天然來(lái)源的有機(jī)物配制而成。天然培養(yǎng)基：利用天然來(lái)源的有機(jī)物配制而成。a基礎(chǔ)培養(yǎng)基：能滿足各種微生物的營(yíng)養(yǎng)需求基礎(chǔ)培養(yǎng)基：能滿足各種微生物的營(yíng)養(yǎng)需求加富培養(yǎng)基：加入某種微生物生長(zhǎng)繁殖所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，加富培養(yǎng)基：加入某種微生物生長(zhǎng)繁殖所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，使其快速生長(zhǎng)，便于分離使其快速生長(zhǎng)，便于分離b選擇培養(yǎng)基：加入某種物質(zhì)抑制其他微生物生長(zhǎng)，使目選擇培養(yǎng)基：加入某種物質(zhì)抑制其他微生物生長(zhǎng)，使目標(biāo)微生物得到富集，便于分離標(biāo)微生物得到富集，便于分離c鑒別培

4、養(yǎng)基：用來(lái)檢測(cè)微生物的某些代謝特性鑒別培養(yǎng)基：用來(lái)檢測(cè)微生物的某些代謝特性 d 特殊培養(yǎng)基：加入一些特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如血清、血液特殊培養(yǎng)基：加入一些特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如血清、血液等等 培養(yǎng)基原料的質(zhì)量控制 瓊脂質(zhì)量的控制 瓊脂粉和瓊脂條，一般為瓊脂粉和瓊脂條，一般為1.5-2%蛋白胨的質(zhì)量控制 膽鹽的質(zhì)量控制 選擇性培養(yǎng)基選擇應(yīng)控制好選擇性培養(yǎng)基選擇應(yīng)控制好牛肉膏及酵母浸膏的質(zhì)量控制培養(yǎng)基性能的控制染色液的控制各種診斷血清的質(zhì)量控制3 微生物檢驗(yàn)樣品的采取及處理 樣品采集的目的和要求采集目的：準(zhǔn)確評(píng)價(jià)食品的衛(wèi)生狀況，為保證食品質(zhì)量、準(zhǔn)確評(píng)價(jià)食品的衛(wèi)生狀況，為保證食品質(zhì)量、改進(jìn)管理提供依據(jù)改進(jìn)管理提供

5、依據(jù)采集的要求：必須有代表性必須有代表性 采樣前應(yīng)事先準(zhǔn)備好采樣前應(yīng)事先準(zhǔn)備好滅菌的容器和采樣工具，在無(wú)菌條件下，按照國(guó)滅菌的容器和采樣工具，在無(wú)菌條件下，按照國(guó)家有關(guān)樣品采集標(biāo)準(zhǔn)均勻而準(zhǔn)確地取樣，使其具家有關(guān)樣品采集標(biāo)準(zhǔn)均勻而準(zhǔn)確地取樣，使其具有代表性；同時(shí)采樣必須妥善存放，嚴(yán)防污染或有代表性；同時(shí)采樣必須妥善存放，嚴(yán)防污染或再污染；微生物學(xué)檢驗(yàn)必須具有及時(shí)性，采集后再污染；微生物學(xué)檢驗(yàn)必須具有及時(shí)性，采集后的樣品送到檢驗(yàn)室越快越好，一般不超過(guò)的樣品送到檢驗(yàn)室越快越好，一般不超過(guò)3h，若，若路途遙遠(yuǎn)，可進(jìn)行低溫保藏；做好相應(yīng)的記錄。路途遙遠(yuǎn)，可進(jìn)行低溫保藏；做好相應(yīng)的記錄。4 培養(yǎng)基的制備

6、培養(yǎng)基配方的選定培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此，除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法，應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外，一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料，加以比較核對(duì)，再依據(jù)自己的使用目的，加以選用，記錄其來(lái)源。 培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄，包括培養(yǎng)基名稱，配方及其來(lái)源，和各種成份的牌號(hào)，最終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制備的日期和制備者等，記錄應(yīng)復(fù)制一份，原記錄保存?zhèn)洳椋瑥?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。 培養(yǎng)基成分的稱取培養(yǎng)基成分的稱取培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯(cuò)亂，最好一次完成，不要中斷。可將配方置于旁側(cè)，每稱完一種成分即在配方上面做出記號(hào)，并將所需

7、稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后，即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后，還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。 培養(yǎng)基各成份的混合和溶化培養(yǎng)基各成份的混合和溶化 培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中，使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。最好使用不銹鋼鍋加熱溶化，可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng)、以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用，應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分完全溶化，直至煮沸。如為瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過(guò)程中，因蒸發(fā)

8、而丟失的水分，最后必須加以補(bǔ)足。 培養(yǎng)基培養(yǎng)基pH的初步調(diào)整的初步調(diào)整 培養(yǎng)基的過(guò)濾澄清培養(yǎng)基的過(guò)濾澄清 培養(yǎng)基的分裝培養(yǎng)基的分裝 分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時(shí)，分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為恰當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒，以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中，隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌，以測(cè)定該批培養(yǎng)基最終pH之用 培養(yǎng)基的質(zhì)量測(cè)試培養(yǎng)基的質(zhì)量測(cè)試 每批培養(yǎng)基制備好以后，應(yīng)仔細(xì)檢查一遍，如發(fā)現(xiàn)破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養(yǎng)基沾染等、均應(yīng)挑出棄去。并測(cè)定其最終pH。 將全部培養(yǎng)基放入361恒溫箱培養(yǎng)過(guò)夜，如發(fā)現(xiàn)有菌生長(zhǎng)，即棄去。 用有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)

9、菌株接種1-2管或瓶培養(yǎng)基，培養(yǎng)24-48小時(shí)，如無(wú)菌生長(zhǎng)或生長(zhǎng)不好。應(yīng)追查原因并重復(fù)接種一次，如結(jié)果仍同前，則該批培養(yǎng)基即應(yīng)棄去，不能使用。 培養(yǎng)基的保存培養(yǎng)基的保存 培養(yǎng)基應(yīng)存放于冷暗處，最好能放于普通冰箱內(nèi)。放置時(shí)間不宜超過(guò)一周，傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過(guò)3天。每批培養(yǎng)基均必須附有該批培養(yǎng)基制備記錄副頁(yè)或明顯標(biāo)簽。 （1）稱量）稱量 按培養(yǎng)基的配方準(zhǔn)確稱取各成分，其中牛肉膏放在小燒杯里稱量，其他成分放在稱量紙上稱量。（2）溶化）溶化 用燒杯先裝少許水,依次將藥品倒入鋁鍋中，加足水，然后在電爐上加熱溶化。 用精密的PH試紙測(cè)定，并用1%氧化鈉或5%鹽酸調(diào)節(jié)到所需的PH值。 趁熱用紗布將培養(yǎng)基

10、進(jìn)行過(guò)濾。 過(guò)濾后根據(jù)不同需要，立即趁熱裝入試管或三角瓶等容器中。（1）不要使培養(yǎng)基沾在管口，如沾上，需用干凈的紗布擦干凈。（2）液體培養(yǎng)基：分裝高度以試管的1/4左右為宜。（3）固體培養(yǎng)基：分裝試管，其裝量為管高的1/61/5滅菌后制成斜面。分裝三角瓶容量之一半為宜。（4）半固體培養(yǎng)基：分裝試管一般以試管高度的1/3為宜，滅菌后，垂直待凝成半固體深層瓊脂。（6）做棉塞 裝好培養(yǎng)基的試管都要加上棉塞，這樣既可過(guò)濾空氣，避免雜菌侵入，又可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā)，制棉塞的方法多種，形狀各異，總原則如下：（1）用脫脂棉制作（脫脂棉花易吸水）（2）松緊適合（3）塞頭不要太大，一般為球狀。（7）包裝 試管

11、口或三角瓶口棉塞部分，用牛皮紙?jiān)苑罍缇鷷r(shí)水蒸氣打濕棉塞。（8）滅菌）滅菌 滅菌是指殺死物品上或環(huán)境中的所有微生物。 滅菌方法可分為四種：物理滅菌、機(jī)械滅菌、化學(xué)滅菌和生物滅菌。 物理滅菌：1、熱力滅菌： 2、紫外光滅菌：一般應(yīng)用于無(wú)菌室和接種箱的滅菌。 干熱滅菌：適用于玻璃儀器，將物品放入烘箱，160170oC，12小時(shí)。 火焰滅菌：適用于常用用具，如接種環(huán)、鑷子等。滅菌方法是放在火焰上直接灼燒。 濕熱滅菌： (1)高壓蒸汽滅菌：適用于培養(yǎng)基、衣物等的滅菌。 （2）間歇蒸汽滅菌：適用于不耐高溫的培養(yǎng)基或無(wú)高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)。 （3）巴斯德滅菌：適用于牛乳類等不耐高溫的物體。 紫外光滅菌：一般

12、應(yīng)用于無(wú)菌室和接種箱的滅菌。高壓蒸汽滅菌 高壓蒸汽滅菌鍋是一個(gè)耐高壓又密閉的金屬鍋。它是利用在密閉條件下產(chǎn)生高壓蒸汽來(lái)達(dá)到滅菌的效果。其溫度在100oC以上，有強(qiáng)大的殺菌能力。因此它是一種用途廣泛，效率高的滅菌工具。 分類：1、臥式 2、立式 具體操作步驟： （1）加入適量自來(lái)水于滅菌鍋中（至水位線） （2）擺入上述包裝好的待滅菌的培養(yǎng)基，注意：不要擺得太擠，以免影響蒸汽流通和滅菌效果。 （3）加蓋旋緊螺旋，使蒸汽鍋密閉不漏氣（對(duì)角線均勻擰旋） （4）打開(kāi)放氣閥，打開(kāi)電源，自開(kāi)始產(chǎn)生蒸汽后10分鐘（此時(shí)蒸汽鍋內(nèi)的冷空氣由排氣閥排盡）關(guān)緊放氣閥，讓溫度隨蒸汽壓力上升而上升，當(dāng)達(dá)所需壓力時(shí)（15磅

13、/時(shí)2）控制熱源維持所需時(shí)間（30分鐘）然后停止加熱，讓其自然冷卻。 （5）待壓力降至0磅時(shí)，打開(kāi)排氣閥，再打開(kāi)鍋蓋，取出滅菌物。 注意：壓力未降至0磅時(shí)，切勿打開(kāi)鍋蓋，否則突然降壓，招致培養(yǎng)基沸騰，沾濕棉塞，甚至沖出管外。 （6）自鍋中取出滅菌好的培養(yǎng)基，放置稍冷卻后擺成斜面，而后至37oC恒溫箱培養(yǎng)24小時(shí)，無(wú)菌生長(zhǎng)，方可保存?zhèn)溆谩?應(yīng)用此法滅菌是否徹底的一個(gè)重要關(guān)鍵是在壓力上升之前，必須將鍋內(nèi)的冷空氣完全排盡，否則雖然壓力表已指15磅/時(shí)，但鍋內(nèi)的溫度還只有100oC，結(jié)果往往造成滅菌不徹底。斜面擺放示意圖： 用10ml量筒量取9.0的自來(lái)水，裝入18*180的中號(hào)試管中，用100ml量

14、筒量取99ml的自來(lái)水裝入250ml的三角瓶中，做好棉塞，用牛皮紙包好，高壓滅菌，備用。移液管、培移液管、培養(yǎng)養(yǎng)皿的皿的干干熱滅熱滅菌菌 （1）在移液管尾部塞上少許脫脂棉花，然后用報(bào)紙條包好。 （2）用報(bào)紙條包好干燥的培養(yǎng)皿。 （3）將已包好的移液管、培養(yǎng)皿放入電烘箱干熱滅菌。干熱滅菌是在恒溫電箱中進(jìn)行，它是利用高熱空氣來(lái)達(dá)到滅菌效果，因此稱干熱滅菌。適合玻璃器皿和金屬用具的滅菌。帶有膠皮的物品，含水份的物質(zhì)，培養(yǎng)基等不可用這種方法。操作步驟： （1）將待滅菌物品包扎好，均勻放入烘箱內(nèi)，注意不要擺的太擠，以免妨礙氣流流通。 （2）打開(kāi)鼓風(fēng)機(jī)、開(kāi)啟電源，當(dāng)溫度100oC時(shí)，關(guān)閉通氣孔，調(diào)溫度至1

15、60oC，借恒溫調(diào)節(jié)器的自動(dòng)控制調(diào)節(jié)器，保持此溫度12小時(shí)。 （3）中斷電源，待溫度降至70oC以下時(shí)，打開(kāi)箱門，取出滅菌物品。注注意意事事項(xiàng)項(xiàng):(1)凡不能用此法滅菌的物品切不能應(yīng)用。倘若玻璃器皿含有水分，待風(fēng)干或烘干后，才可進(jìn)行滅菌。（2）放入物品不要過(guò)于擁擠，以免影響滅菌效果。（3）在滅菌過(guò)程中，嚴(yán)禁打開(kāi)箱門，以免玻皿破裂。（4）在帶有棉花或紙張物品時(shí)，不要接觸到烘箱內(nèi)壁的鐵板，并嚴(yán)格控制滅菌溫度，均不能超過(guò)180oC，以免燒焦，甚至失火。 1)實(shí)驗(yàn)前，無(wú)菌室應(yīng)打開(kāi)紫外線燈滅菌30分鐘以上,實(shí)驗(yàn)中應(yīng)穿工作衣帽. 2)嚴(yán)格無(wú)菌操作，接種針、接種環(huán)在使用前后都必須火焰灼燒。 3)實(shí)驗(yàn)前后用7

16、5%（v/v）酒精對(duì)手消毒。 4)沾有病原微生物的器材，應(yīng)置于指定地點(diǎn)。廢棄物應(yīng)用5%苯酚浸泡。 5 顯微鏡的使用1665） 列文虎克和他的顯微鏡（約1680）1680荷蘭人A. van Leeuwenhoek成為皇家學(xué)會(huì)會(huì)員，一生中制作了200多臺(tái)顯微鏡和500多個(gè)鏡頭。他是第一個(gè)看到活細(xì)胞的人，觀察過(guò)原生動(dòng)物、人類精子、鮭魚的紅細(xì)胞、牙垢中的細(xì)菌等等。位相差顯微鏡相差顯微鏡是能將光通過(guò)物體時(shí)產(chǎn)生的相位差（或光程差）轉(zhuǎn)變?yōu)檎穹ü鈴?qiáng)度）變化的顯微鏡。人的眼睛只能鑒別可見(jiàn)光的波長(zhǎng)（顏色）和振幅的變化，不能鑒別相位的變化。但是大多數(shù)生物標(biāo)本高度透明，光波通過(guò)后振幅基本不變，卻存在相位的變化，人的

17、眼睛感覺(jué)不到。19世紀(jì)30年代德國(guó)物理學(xué)家澤尼克首先設(shè)計(jì)并于1942年制造了第一臺(tái)相差顯微鏡，能將這種看不見(jiàn)的相位變化轉(zhuǎn)變?yōu)榭吹靡?jiàn)的振幅變化，由于此項(xiàng)發(fā)明，澤尼克于1953年獲諾貝爾獎(jiǎng)。相差顯微鏡主要用于觀察活細(xì)胞，不染色的組織切片或缺少反差的染色標(biāo)本。 此種顯微鏡放大倍率為4X至40X或更高，其倍率雖然不高，但是可以觀察不透明的物體，因?yàn)楣饩€是物體表面反射入鏡，與復(fù)式顯微鏡不同，使用時(shí)用兩眼觀察，可觀察到立體物像，且可邊觀察邊解剖。1、式電子顯微鏡1932年，德國(guó)科學(xué)家用電子替代可見(jiàn)光制成，其解像力是人眼的10000倍，放大倍率達(dá)250000倍或更多。使用穿透式電子顯微鏡的標(biāo)本需要非常薄，(

18、7.5-15nm)。 2、掃描式電子顯微鏡掃描式電子顯微鏡的電子束不穿過(guò)標(biāo)本，所以標(biāo)本無(wú)需切片處理，而代之在標(biāo)本表面涂上一層鉑金，當(dāng)電子撞擊標(biāo)本表面各點(diǎn)時(shí)，便產(chǎn)生次及電子，呈現(xiàn)立體狀態(tài)，可觀察標(biāo)本的形狀及表面的特征。 顯微鏡基本構(gòu)造顯微鏡基本構(gòu)造 普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造可分為兩大部分：一為機(jī)械裝置，一為光學(xué)系統(tǒng)。機(jī)械裝置機(jī)械裝置 顯微鏡的機(jī)械裝置包括等部件（1 1）鏡座）鏡座 鏡座是顯微鏡的基本支架，它由底座和鏡臂兩部分組成。在它上面連接有載物臺(tái)和鏡筒，它是用來(lái)安裝光學(xué)放大系 統(tǒng)部件的基礎(chǔ)。 （2 2）鏡筒）鏡筒 鏡筒上接接目鏡，下接轉(zhuǎn)換器，形成接目鏡與物鏡（裝在轉(zhuǎn)換器下）間的暗室。（3 3）物

19、鏡轉(zhuǎn)換器）物鏡轉(zhuǎn)換器 物鏡轉(zhuǎn)換器上可安裝34個(gè)接物鏡，一般是三個(gè)接物鏡（低倍、高倍、油鏡）。轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，可以按需要將其中的任何一個(gè)接物鏡和鏡筒接通，與鏡筒上面的接目鏡構(gòu)成一個(gè)放大系統(tǒng)。（4 4）載物臺(tái)）載物臺(tái) 載物臺(tái)中央有一孔，為光線通路。在臺(tái)上裝有彈簧標(biāo)本夾和推動(dòng)器，其作用為固定或移動(dòng)標(biāo)本的位置，使得鏡檢對(duì)象恰好位于視野中心。 （5 5）推動(dòng)器）推動(dòng)器 是移動(dòng)標(biāo)本的機(jī)械裝置，它是由一橫一縱兩個(gè)推進(jìn)齒軸的金屬架構(gòu)成的，在縱橫架桿上刻有刻度標(biāo)尺。 （6 6）粗動(dòng)螺旋）粗動(dòng)螺旋 是移動(dòng)鏡筒調(diào)節(jié)物鏡和標(biāo)本間距離的機(jī)件（7 7）微動(dòng)螺旋）微動(dòng)螺旋 用粗動(dòng)螺旋只可以粗放的調(diào)節(jié)焦距，要得到最清晰的物象，需

20、要用微動(dòng)螺旋做進(jìn)一步調(diào)節(jié)。微動(dòng)螺旋每轉(zhuǎn)一圈鏡筒移動(dòng)0.1毫米。光學(xué)系統(tǒng)光學(xué)系統(tǒng) 由等組成，光學(xué)系統(tǒng)使物體放大，形成物體放大像 。 顯微鏡基本操作顯微鏡基本操作 a、 觀察前的準(zhǔn)備觀察前的準(zhǔn)備 （1）顯微鏡的搬運(yùn) 顯微鏡從顯微鏡柜或鏡箱內(nèi)拿出時(shí)，要用緊握，左手左手托住，平穩(wěn)地將顯微鏡搬運(yùn)到實(shí)驗(yàn)桌上。 （2）顯微鏡的放置 將顯微鏡放在自己身體的左前方左前方，離桌子邊緣約左右，。（3）調(diào)節(jié)光的強(qiáng)度 接通電源，可利用燈光通過(guò)反光鏡來(lái)調(diào)節(jié)光強(qiáng)度。 b、觀察、觀察 （1）低倍鏡觀察 將標(biāo)本片放置在載物臺(tái)上，用標(biāo)本夾夾住，移動(dòng)推動(dòng)器，使被觀察的標(biāo)本處在物鏡正下方，轉(zhuǎn)動(dòng)，使物鏡調(diào)至接近標(biāo)本處，用調(diào)節(jié)慢慢下降載

21、物臺(tái)，直至物像出現(xiàn)直到物像清晰為止。用推動(dòng)器移動(dòng)標(biāo)本片，找到合適的目的像并將它移到視野中央進(jìn)行觀察。（2）高倍鏡觀察 在低倍物鏡觀察的基礎(chǔ)上轉(zhuǎn)換高倍物鏡。（3）油鏡觀察 先用粗調(diào)節(jié)旋鈕將載物臺(tái)下降，并將高倍鏡轉(zhuǎn)出；在玻片標(biāo)本的鏡檢部位滴上一滴；用調(diào)節(jié)旋鈕將載物臺(tái)緩緩地上升，使油鏡浸入香柏油中；用調(diào)節(jié)旋鈕調(diào)至最清晰為止；觀察完畢，下降載物臺(tái)，將油鏡頭轉(zhuǎn)出，先用擦鏡紙擦去鏡頭上的油。 3、顯微鏡的保養(yǎng)、顯微鏡的保養(yǎng) （1）觀察完后，移去觀察的載玻片標(biāo)本。 （2）用過(guò)油浸鏡的，先用擦鏡紙將鏡頭上的油擦去，再用擦鏡紙蘸著二甲苯二甲苯擦拭23次，再用擦鏡紙將二甲苯二甲苯擦去。 （3）轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器，將。

22、 （4）將載物臺(tái)下降到最低位置。香柏油注意！整個(gè)過(guò)程，油鏡都不整個(gè)過(guò)程，油鏡都不能離開(kāi)香柏油！能離開(kāi)香柏油！顯微鏡的使用 1 測(cè)微 細(xì)菌和酵母細(xì)胞很小，肉眼直接看不到，不可能直接用尺去測(cè)量。它們的大小測(cè)量是應(yīng)用顯微鏡測(cè)微尺。測(cè)微尺包括兩個(gè)部分：目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺 目鏡測(cè)策尺是一塊圓形玻片，在玻片中央刻有一小尺。是在5mm內(nèi)作50等分刻度的。另一種規(guī)格是5mm作100等分刻度的（如圖所示）。目鏡測(cè)微尺每一格實(shí)際代表的長(zhǎng)度隨使用目鏡子和接物鏡的放大倍數(shù)而改變，因此在測(cè)量微生物大小前必須用鏡臺(tái)測(cè)微尺進(jìn)行校正。 鏡臺(tái)測(cè)微尺是在一塊載玻片中央的小尺，它是在1mm內(nèi)作100等分刻度的每一等分格為0.0

23、1mm，即10m。是專為校正目鏡測(cè)量尺刻度的每格長(zhǎng)度而用的。目鏡上面的透鏡旋開(kāi)，把目鏡測(cè)微尺放在目鏡的光闌上，刻度朝下，然后把目鏡的透鏡放上，最后把目鏡套入鏡筒內(nèi)。把鏡臺(tái)測(cè)微尺放在顯微鏡載物臺(tái)上，使刻度朝上。（先用低倍物鏡，光線不要太強(qiáng)。對(duì)好焦距，將鏡臺(tái)測(cè)微尺移至視野中央并能看到刻度線），然后轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡，使目鏡測(cè)微尺的刻度與鏡臺(tái)測(cè)微尺的刻度平行，移動(dòng)推動(dòng)器定位，使兩尺重迭，再使兩尺的“0”刻度重迭。定位后，仔細(xì)尋找兩尺之間另一個(gè)重迭的刻度。計(jì)算兩個(gè)重迭刻度之間目鏡測(cè)微尺的格數(shù)和鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)。（因?yàn)殓R臺(tái)測(cè)微尺的刻度（每格為10um）是鏡臺(tái)測(cè)微尺上長(zhǎng)度的實(shí)際度量），由下列公式可以算出所校正的正在

24、使用的目鏡測(cè)微尺每格長(zhǎng)度。 兩個(gè)重迭刻度間鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)兩個(gè)重迭刻度間鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)10目鏡測(cè)量微尺每格長(zhǎng)度（m）= 兩個(gè)重迭刻度間目鏡測(cè)量尺的格數(shù)兩個(gè)重迭刻度間目鏡測(cè)量尺的格數(shù)用同法分別校正在高倍鏡、油鏡下正在使用的目鏡測(cè)微尺各格長(zhǎng)度記錄好。二、食品檢測(cè)基礎(chǔ)知識(shí)(微生物檢驗(yàn)部分) 食品從生產(chǎn)加工到銷售的整個(gè)過(guò)程中，有很多情況和因素均可促使食品腐敗變質(zhì)并具有毒性，而且可能使食品產(chǎn)生毒性的有毒物質(zhì)多種多樣，食品被污染的方式和程度也很復(fù)雜，因而腐敗變質(zhì)食品對(duì)人體健康造成的危害也表現(xiàn)不同。 一是引起急性中毒。 在一般情況下，常引起急性中毒，輕者多以急性胃腸炎癥狀出現(xiàn)，如嘔吐、惡心、腹痛、腹瀉、發(fā)

25、燒等，經(jīng)過(guò)治療可以恢復(fù)健康；但重者可出現(xiàn)呼吸、循環(huán)、神經(jīng)等系統(tǒng)癥狀，搶救及時(shí)可轉(zhuǎn)危為安；如貽誤時(shí)機(jī)還可危及生命，有的急性中毒，雖經(jīng)千方百計(jì)治療，但仍給中毒者留下后遺癥。 二是慢性中毒或潛在性危害。 有些變質(zhì)食品中的有毒物質(zhì)含量少，或者由于本身毒性作用的特點(diǎn)，并不引起急性中毒，但長(zhǎng)期食用，往往可造成慢性中毒，甚至可以表現(xiàn)有致癌、致畸、致突變的作用。食用腐敗變質(zhì)、霉變食物除了可以引起急性中毒外，還具有極其嚴(yán)重的潛在危害1食品被微生物污染后對(duì)人體的危害食品被微生物污染后對(duì)人體的危害 自然界有許多微生物存在，其中有少數(shù)微生物對(duì)人類、動(dòng)物或植物有病害作用，這類微生物就稱為病原微生物，也可稱它為致病微生物

26、，或簡(jiǎn)稱致病菌。 在自然界中除了少數(shù)能引起人體病害的病原微生物存在外，還有大量的、種類繁多的、非致病的腐生微生物存在，其中一部分微生物在一定的條件下，可以引起食品變質(zhì)。 引起人類病害的微生物有多種，其中一部分是因侵入消化道而引起疾病的，與食品衛(wèi)生有關(guān)的致病菌基本上就是這一類的病菌。 在引起食品變質(zhì)的微生物中，有些還能產(chǎn)生對(duì)人體有毒害的物質(zhì)，當(dāng)人體誤食含有大量腐生微生物的食品或含有微生物毒素的食品后，就會(huì)發(fā)生不同程度的中毒。能在食品中產(chǎn)生毒素的微生物，多見(jiàn)于細(xì)菌和霉菌。 食品被微生物污染后對(duì)人體的危害可分為三種：細(xì)菌性食物中毒（常見(jiàn)的食物中毒）、真菌性食物中毒、消化道傳染病。各種致病菌引起人類癥狀如下：沙門氏菌：主要有傷寒，食物中毒和敗血癥等等。（急性胃腸炎癥狀）金黃色葡萄球菌：侵入人體傷口會(huì)產(chǎn)生化膿性感染，惡心、多次嘔吐、腹痛。致病性大腸桿菌：腹瀉 消化道傳染病是傳染病中的一大類疾病，是由于食用了被微生物或寄生蟲污染了的食品而發(fā)生的傳染性疾病。這種傳染病的病原菌具有很強(qiáng)的致病力，僅少量病原菌即可引起疾病的發(fā)生，并且人與人之間可以直接傳染。細(xì)菌性痢疾、傷寒及副傷寒、霍亂等。2食品微生物檢測(cè) 食品微生物檢測(cè)就是應(yīng)用微生物學(xué)的理論與方法，研究食品中微生物的種類數(shù)量、生理特性、活動(dòng)規(guī)律及其對(duì)人和動(dòng)物健康的影響。1）菌落總數(shù)的檢測(cè)意義 食品可能被多種類