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文檔簡介
1、第一章氨基酸和核苷酸Amino Acids and NucleotidesAmino Acids and Nucleotides生物化學(xué)與分子生物學(xué)系蛋白質(zhì)的單體是蛋白質(zhì)的單體是氨基酸氨基酸(amino acid)核酸的單體是核酸的單體是核苷酸(核苷酸(nucleotide) 生物大分子蛋白質(zhì)、核酸都是由基本結(jié)構(gòu)生物大分子蛋白質(zhì)、核酸都是由基本結(jié)構(gòu)單位組成的單位組成的多聚體(多聚體(polymer);可形成聚合體;可形成聚合體的基本結(jié)構(gòu)單位稱為的基本結(jié)構(gòu)單位稱為單體(單體(monomer)。 氨基酸的結(jié)構(gòu)與功能第一節(jié)第一節(jié)Structure and Function of Amino Acid
2、s生物化學(xué)與分子生物學(xué)系一、構(gòu)成人體蛋白質(zhì)氨基酸均為L-氨基酸 雖然存在于自然界中的氨基酸有雖然存在于自然界中的氨基酸有300余種,余種,但組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸僅有但組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸僅有20種,且均種,且均屬屬 L- -氨基酸氨基酸(甘氨酸除外)。(甘氨酸除外)。生物化學(xué)與分子生物學(xué)系H甘氨酸甘氨酸CH3丙氨酸丙氨酸L-L-氨基酸的通式氨基酸的通式RC+NH3COO-H生物化學(xué)與分子生物學(xué)系二二、氨基酸的側(cè)鏈結(jié)構(gòu)決定其功能氨基酸的側(cè)鏈結(jié)構(gòu)決定其功能(一)氨基酸的差異在于側(cè)鏈(一)氨基酸的差異在于側(cè)鏈 -R基團(tuán)基團(tuán)CCOOHHRH2N各種氨基酸的區(qū)別在于側(cè)鏈各種氨基酸的區(qū)別在于側(cè)鏈R R
3、基的不同。基的不同。2020種基本種基本氨基酸按氨基酸按R R的極性可分為非極性氨基酸、極性中性的極性可分為非極性氨基酸、極性中性氨基酸、酸性氨基酸和堿性氨基酸氨基酸、酸性氨基酸和堿性氨基酸生物化學(xué)與分子生物學(xué)系(二)(二) -R基團(tuán)賦予氨基酸不同的極性基團(tuán)賦予氨基酸不同的極性 蛋白質(zhì)中的蛋白質(zhì)中的L- -氨基酸依據(jù)極性的分類氨基酸依據(jù)極性的分類類別類別主要氨基酸主要氨基酸非非極極性性脂肪族氨基酸脂肪族氨基酸丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、甲硫氨酸芳香族氨基酸芳香族氨基酸苯丙氨酸亞氨基酸亞氨基酸脯氨酸極極性性中性氨基酸中性氨基酸甘氨酸、絲氨酸、半胱氨酸、蘇氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、酪氨酸、色
4、氨酸酸性氨基酸酸性氨基酸天冬氨酸、谷氨酸堿性氨基酸堿性氨基酸精氨酸、賴氨酸、組氨酸生物化學(xué)與分子生物學(xué)系甘氨酸甘氨酸 glycine Gly G 5.97丙氨酸丙氨酸 alanine Ala A 6.00纈氨酸纈氨酸 valine Val V 5.96亮氨酸亮氨酸 leucine Leu L 5.98 異亮氨酸異亮氨酸 isoleucine Ile I 6.02 苯丙氨酸苯丙氨酸 phenylalanine Phe F 5.48脯氨酸脯氨酸 proline Pro P 6.30支鏈氨基酸支鏈氨基酸亞氨基酸亞氨基酸纈氨酸纈氨酸亮氨酸亮氨酸異亮氨酸異亮氨酸ValLeu Ile苯丙氨酸苯丙氨酸Phe
5、芳香族氨基酸芳香族氨基酸脯氨酸脯氨酸Pro吡咯烷環(huán)吡咯烷環(huán)-雜環(huán)氨基酸雜環(huán)氨基酸生物化學(xué)與分子生物學(xué)系色氨酸色氨酸 tryptophan Trp W 5.89絲氨酸絲氨酸 serine Ser S 5.68酪氨酸酪氨酸 tyrosine Tyr Y 5.66 半胱氨酸半胱氨酸 cysteine Cys C 5.07 蛋氨酸蛋氨酸 methionine Met M 5.74天冬酰胺天冬酰胺 asparagine Asn N 5.41 谷氨酰胺谷氨酰胺 glutamine Gln Q 5.65 蘇氨酸蘇氨酸 threonine Thr T 5.602. 極性中性氨基酸極性中性氨基酸含酰胺基氨基酸含
6、酰胺基氨基酸色氨酸色氨酸Trp酪氨酸酪氨酸Tyr苯丙氨酸苯丙氨酸 phenylalanine Phe F 5.48芳香族氨基酸芳香族氨基酸吲哚環(huán)吲哚環(huán)-雜環(huán)氨基酸雜環(huán)氨基酸酪氨酸酪氨酸Tyr絲氨酸絲氨酸蘇氨酸蘇氨酸SerThr羥基氨基酸羥基氨基酸 半胱氨酸半胱氨酸 蛋氨酸蛋氨酸 Cys Met含硫氨基酸含硫氨基酸天冬酰胺天冬酰胺谷氨酰胺谷氨酰胺GlnAsn生物化學(xué)與分子生物學(xué)系天冬氨酸天冬氨酸 aspartic acid Asp D 2.97 谷氨酸谷氨酸 glutamic acid Glu E 3.22 賴氨酸賴氨酸 lysine Lys K 9.74精氨酸精氨酸 arginine Arg
7、R 10.76組氨酸組氨酸 histidine His H 7.593. 酸性氨基酸酸性氨基酸4. 堿性氨基酸堿性氨基酸-胍基胍基咪唑基咪唑基雜環(huán)氨基酸雜環(huán)氨基酸-氨基氨基生物化學(xué)與分子生物學(xué)系幾種特殊氨基酸幾種特殊氨基酸 脯氨酸脯氨酸(亞氨基酸)(亞氨基酸)CH2CHCOO-NH2+CH2CH2CH2CHCOO-NH2+CH2CH2生物化學(xué)與分子生物學(xué)系-OOC-CH-CH2-S+NH3S-CH2-CH-COO-+NH3-OOC-CH-CH2-S+NH3S-CH2-CH-COO-+NH3半胱氨酸半胱氨酸 +胱氨酸胱氨酸二硫鍵二硫鍵-HH-OOC-CH-CH2-SH+NH3-OOC-CH-CH
8、2-SH+NH3HS-CH2-CH-COO-+NH3HS-CH2-CH-COO-+NH3生物化學(xué)與分子生物學(xué)系(三)(三) 氨基酸氨基酸 -R基團(tuán)直接影響多肽鏈結(jié)構(gòu)基團(tuán)直接影響多肽鏈結(jié)構(gòu) -R基團(tuán)的結(jié)構(gòu)和極性會(huì)直接影響所形成的多肽鏈的結(jié)構(gòu),也是其在體內(nèi)執(zhí)行多種功能的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)極性氨基酸常位于水溶性蛋白質(zhì)的表面非極性氨基酸主要嵌插在細(xì)胞膜脂雙層結(jié)構(gòu)中的蛋白質(zhì)外表面生物化學(xué)與分子生物學(xué)系名稱結(jié)構(gòu)與功能特點(diǎn)半胱氨酸氧化狀態(tài)下,多肽鏈中不相鄰的兩個(gè)半胱氨酸通過二硫鍵相連,增強(qiáng)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性;巰基易與重金屬離子結(jié)合 天冬氨酸、谷氨酸攜帶強(qiáng)負(fù)電荷,常位于水溶性蛋白的表面;可結(jié)合帶正電荷的分子或金屬離子苯
9、丙氨酸、酪氨酸、色氨酸側(cè)鏈結(jié)構(gòu)大且極性較弱或無極性,常位于水溶性蛋白的內(nèi)部甘氨酸是唯一不存在不對(duì)稱立體結(jié)構(gòu)的氨基酸,有較大的旋轉(zhuǎn)自由度,賦予多肽鏈更多的柔性;是最小的氨基酸,能夠存在于空間致密的蛋白質(zhì)中,如膠原組氨酸咪唑基團(tuán)容易發(fā)生質(zhì)子化,進(jìn)而影響其所在的蛋白質(zhì)構(gòu)象,因此是許多蛋白質(zhì)功能的調(diào)節(jié)機(jī)制 異亮氨酸、亮氨酸、纈氨酸均含有較大的疏水側(cè)鏈,其剛性結(jié)構(gòu)特征及疏水相互作用都對(duì)蛋白折疊有重要的影響力,常作為水溶性蛋白的內(nèi)部支撐結(jié)構(gòu)賴氨酸、精氨酸有帶正電荷的柔性側(cè)鏈,常作為蛋白的親水表面,且易于結(jié)合帶有負(fù)電荷的其他分子,如DNA甲硫氨酸是多肽鏈生物合成的起始氨基酸;參與體內(nèi)含硫化合物代謝及甲基化反
10、應(yīng)脯氨酸N原子在雜環(huán)中移動(dòng)的自由度受到限制,常位于多肽鏈的轉(zhuǎn)角處絲氨酸、蘇氨酸側(cè)鏈短,所含羥基常作為酶反應(yīng)中的供氫體;親水性強(qiáng),位于水溶性蛋白表面重要的重要的L- -氨基酸的主要功能特點(diǎn)氨基酸的主要功能特點(diǎn)生物化學(xué)與分子生物學(xué)系 細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)為了行使其功能,氨基酸R基團(tuán) 可以發(fā)生各種化學(xué)修飾 化學(xué)修飾的功能蛋白質(zhì)的溶解度穩(wěn)定性亞細(xì)胞定位及與其他蛋白質(zhì)的相互作用等等(四)(四) 氨基酸的側(cè)鏈可有其他化學(xué)基團(tuán)修飾氨基酸的側(cè)鏈可有其他化學(xué)基團(tuán)修飾 生物化學(xué)與分子生物學(xué)系(四)(四) 氨基酸的側(cè)鏈可有其他化學(xué)基團(tuán)修飾氨基酸的側(cè)鏈可有其他化學(xué)基團(tuán)修飾 常見的化學(xué)修飾種類發(fā)生修飾的主要氨基酸殘基磷酸化絲氨
11、酸、蘇氨酸、酪氨酸N-糖基化天冬酰胺O-糖基化絲氨酸、蘇氨酸羥基化脯氨酸 賴氨酸甲基化賴氨酸、精氨酸、組氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酸乙?;嚢彼?、絲氨酸硒化半胱氨酸生物化學(xué)與分子生物學(xué)系三三、氨基酸及其衍生物具有多種其他重要功能氨基酸及其衍生物具有多種其他重要功能名稱重要功能及衍生物甘氨酸神經(jīng)遞質(zhì);參加體內(nèi)嘌呤類、卟啉類和肌酸的合成谷氨酸 神經(jīng)遞質(zhì);其-脫羧產(chǎn)物GABA亦是重要的神經(jīng)遞質(zhì)色氨酸轉(zhuǎn)化生成重要的神經(jīng)遞質(zhì)5羥色胺精氨酸產(chǎn)生重要的信號(hào)物質(zhì)NO;參加合成尿素的鳥氨酸循環(huán)甲硫氨酸合成SAM,是體內(nèi)甲基的供體天冬氨酸神經(jīng)遞質(zhì);三羧酸循環(huán)中的重要成分;參與尿素循環(huán)酪氨酸合成黑色素;合成甲狀
12、腺素,兒茶酚胺類等激素組氨酸脫羧形成組胺具有血管舒張作用,并參與多種變態(tài)反應(yīng)生物化學(xué)與分子生物學(xué)系非蛋白質(zhì)組成氨基酸及其衍生物功能舉例非蛋白質(zhì)組成氨基酸及其衍生物功能舉例氨基酸名稱功能瓜氨酸、鳥氨酸參加體內(nèi)尿素合成同型半胱氨酸體內(nèi)轉(zhuǎn)甲基作用的產(chǎn)物-丙氨酸泛酸(一種維生素)的成分之一L-肉毒堿化學(xué)結(jié)構(gòu)為L-羥-三甲氨基丁酸,參與脂?;霓D(zhuǎn)運(yùn) 生物化學(xué)與分子生物學(xué)系四四、氨基酸的理化性質(zhì)是其分離和鑒定的依據(jù)氨基酸的理化性質(zhì)是其分離和鑒定的依據(jù) (一)(一) 氨基酸具有兩性離子氨基酸具有兩性離子(zwitterion)特征特征在某溶液中,氨基酸解離成陽離子和陰離子的趨勢(shì)及在某溶液中,氨基酸解離成陽離
13、子和陰離子的趨勢(shì)及程度相等,成為偶極離子程度相等,成為偶極離子 (dipolar ion),呈電中性。此時(shí),呈電中性。此時(shí)溶液的溶液的pH值值稱為該氨基酸的稱為該氨基酸的等電點(diǎn)等電點(diǎn)(isoelectric point, pI) 。生物化學(xué)與分子生物學(xué)系(二)氨基酸的化學(xué)反應(yīng)特性決定其體內(nèi)功能(二)氨基酸的化學(xué)反應(yīng)特性決定其體內(nèi)功能u 一個(gè)氨基酸的羧基可與另一個(gè)氨基酸的氨基縮水形成一個(gè)氨基酸的羧基可與另一個(gè)氨基酸的氨基縮水形成共價(jià)的共價(jià)的肽鍵肽鍵。通過連續(xù)的肽鍵,許多氨基酸即可聚合成。通過連續(xù)的肽鍵,許多氨基酸即可聚合成多肽或蛋白質(zhì)分子。多肽或蛋白質(zhì)分子。u -氨基參與體內(nèi)多種化學(xué)反應(yīng)。氨基酸
14、的氨基參與體內(nèi)多種化學(xué)反應(yīng)。氨基酸的 -氨基能與氨基能與醛類化合物生成弱堿,稱為醛類化合物生成弱堿,稱為Schiff堿,這是體內(nèi)氨基酸堿,這是體內(nèi)氨基酸轉(zhuǎn)氨基作用的中間代謝物。轉(zhuǎn)氨基作用的中間代謝物。體內(nèi)氨基酸化學(xué)反應(yīng)體內(nèi)氨基酸化學(xué)反應(yīng)生物化學(xué)與分子生物學(xué)系(三)(三) 可利用氨基酸理化特性對(duì)其進(jìn)行定性定量分析可利用氨基酸理化特性對(duì)其進(jìn)行定性定量分析u 氨基酸與氨基酸與茚三酮茚三酮試劑發(fā)生呈色反應(yīng)試劑發(fā)生呈色反應(yīng) u 氨基酸與氨基酸與2,4-二硝基氟苯二硝基氟苯反應(yīng)生成二硝基苯基反應(yīng)生成二硝基苯基氨基酸氨基酸u 氨基酸與亞硝酸反應(yīng)生成氨基酸與亞硝酸反應(yīng)生成氮?dú)獾獨(dú)鈛 含共軛雙鍵的氨基酸具有含共
15、軛雙鍵的氨基酸具有紫外吸收紫外吸收性質(zhì)性質(zhì)u 薄層層析是鑒定氨基酸及其修飾的經(jīng)典方法薄層層析是鑒定氨基酸及其修飾的經(jīng)典方法 生物化學(xué)與分子生物學(xué)系生物化學(xué)與分子生物學(xué)系 該藍(lán)紫色化合物在該藍(lán)紫色化合物在570nm570nm波長處有最大吸收波長處有最大吸收生物化學(xué)與分子生物學(xué)系含含共軛雙鍵共軛雙鍵的氨基酸具有紫外吸收性質(zhì)的氨基酸具有紫外吸收性質(zhì) 色氨酸、酪氨酸的最色氨酸、酪氨酸的最大吸收峰在大吸收峰在 280 nm 附近。附近。大多數(shù)蛋白質(zhì)含有這兩大多數(shù)蛋白質(zhì)含有這兩種氨基酸殘基,所以測(cè)定蛋種氨基酸殘基,所以測(cè)定蛋白質(zhì)溶液白質(zhì)溶液280nm的光吸收值的光吸收值是分析溶液中蛋白質(zhì)含量的是分析溶液中
16、蛋白質(zhì)含量的快速簡便的方法??焖俸啽愕姆椒?。生物化學(xué)與分子生物學(xué)系氨基酸定量定性分析已進(jìn)入自動(dòng)化時(shí)代氨基酸定量定性分析已進(jìn)入自動(dòng)化時(shí)代隨著隨著毛細(xì)管電泳(毛細(xì)管電泳(capillary electrophoresis,CE;液相層析(液相層析(liquid chromatography, LC)自)自動(dòng)化及動(dòng)化及質(zhì)譜(質(zhì)譜(mass spectrometry,MS)技術(shù)的發(fā))技術(shù)的發(fā)展,目前氨基酸的檢測(cè)分析可以在自動(dòng)分析儀器展,目前氨基酸的檢測(cè)分析可以在自動(dòng)分析儀器中快速完成。中快速完成。 生物化學(xué)與分子生物學(xué)系甘丙纈亮異脂鏈甘丙纈亮異脂鏈絲蘇半蛋羥硫添絲蘇半蛋羥硫添脯酪色苯雜芳環(huán)脯酪色苯雜芳
17、環(huán)天谷精賴組酸堿天谷精賴組酸堿Structure and Function of Nucleotides核苷酸的結(jié)構(gòu)與功能第第 二二 節(jié)節(jié)生物化學(xué)與分子生物學(xué)系u 脫氧核糖核酸脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid, DNA):其基本組成:其基本組成單位是脫氧核糖核苷酸(單位是脫氧核糖核苷酸(deoxyribonucleotide)u 核糖核酸核糖核酸(ribonucleic acid, RNA):其基本組成單位是核糖:其基本組成單位是核糖核苷酸(核苷酸(ribonucleotide) 核酸(核酸(nucleic acid)是生物信息大分子)是生物信息大分子天然存在的核酸可以
18、分為天然存在的核酸可以分為 :生物化學(xué)與分子生物學(xué)系核酸的化學(xué)組成核酸的化學(xué)組成 元素組成元素組成C、H、O、N、P(9 % 10%) 分子組成分子組成 堿基堿基 (base):嘌呤堿,嘧啶堿:嘌呤堿,嘧啶堿 戊糖戊糖 (pentose):核糖,脫氧核糖:核糖,脫氧核糖 磷酸磷酸 (phosphate)生物化學(xué)與分子生物學(xué)系一、戊糖、磷酸和堿基是核苷酸的基本成分一、戊糖、磷酸和堿基是核苷酸的基本成分核苷酸由核苷酸由堿基堿基(base)、戊糖戊糖(pentose)和和磷酸磷酸3種成分種成分以共價(jià)鍵依次連接而成。以共價(jià)鍵依次連接而成。核酸在酶的作用下水解為核酸在酶的作用下水解為核苷酸(核苷酸(nu
19、cleotide)。)。 核酸核酸核苷酸核苷酸磷酸磷酸核苷或核苷或脫氧脫氧核苷核苷核酸酶核酸酶水解水解核苷酶核苷酶核糖核糖脫氧核糖脫氧核糖堿基堿基戊糖戊糖嘌呤嘌呤嘧啶嘧啶生物化學(xué)與分子生物學(xué)系NNH132456嘧啶嘧啶(pyrimidine)胞嘧啶胞嘧啶(cytosine, C)NNHNH2O尿嘧啶尿嘧啶(uracil, U)NHNHOO胸腺嘧啶胸腺嘧啶(thymine, T)NHNHOOCH3核酸中的堿基分為嘧啶堿和嘌呤堿兩類核酸中的堿基分為嘧啶堿和嘌呤堿兩類生物化學(xué)與分子生物學(xué)系嘌呤嘌呤 (purine) NNNHN123456789NNNHNNH2腺嘌呤腺嘌呤(adenine, A)NN
20、HNHNNH2O鳥嘌呤鳥嘌呤(guanine, G)堿堿 基基:662生物化學(xué)與分子生物學(xué)系DNA 和和RNA 含有兩種嘌呤:含有兩種嘌呤:A &GDNA和和RNA也含有兩種嘧啶:都含有也含有兩種嘧啶:都含有CDNA 含有含有 TRNA 含有含有 U生物化學(xué)與分子生物學(xué)系核酸中存在稀有堿基核酸中存在稀有堿基 核酸中還有一些含量甚少的堿基,稱為核酸中還有一些含量甚少的堿基,稱為稀有堿基稀有堿基(rare base)。稀有堿基種類很多,大多數(shù)都是。稀有堿基種類很多,大多數(shù)都是甲基化甲基化堿基。堿基。tRNA中含有較多的稀有堿基,可高達(dá)中含有較多的稀有堿基,可高達(dá)10%。 DNARNA嘌呤m
21、7G 7-甲基鳥嘌呤 N6,N6-2 m6A N6,N6-二甲基腺嘌呤N6-m6A N6-甲基腺嘌呤N6-m6A N6-甲基腺嘌呤m7G 7-甲基鳥嘌呤嘧啶m5 C 5-甲基胞嘧啶DHU 二氫尿嘧啶Hm5 C 5-羥甲基胞嘧啶T 胸腺嘧啶生物化學(xué)與分子生物學(xué)系OCH2HHHOHOHOHHHOHOOCH2HHHOHHOHH2. 2. 戊糖戊糖DNA中的戊糖為中的戊糖為-D-2-脫氧核糖脫氧核糖 (deoxyribose)RNA中的戊糖為中的戊糖為-D-核糖核糖 (ribose) 1234512345生物化學(xué)與分子生物學(xué)系3.核苷核苷 (ribonucleoside)堿基堿基核糖(脫氧核糖)核糖(
22、脫氧核糖)糖苷鍵糖苷鍵Purines + 核糖:核糖:N9-C1 Pyrimidines + 核糖:核糖:N1-C1 核苷核苷(脫氧核苷)(脫氧核苷)生物化學(xué)與分子生物學(xué)系G+核糖核糖GRG+脫氧核糖脫氧核糖 dGRC+核糖核糖CR A+脫氧核糖脫氧核糖 dARU+核糖核糖 URT+脫氧核糖脫氧核糖911命名:堿基命名:堿基 的名稱的名稱+核苷(脫氧核苷)核苷(脫氧核苷)ARdCRdTR1生物化學(xué)與分子生物學(xué)系4. 核苷酸核苷酸(ribonucleotide)核苷(脫氧核苷)和磷酸以核苷(脫氧核苷)和磷酸以酯鍵酯鍵連接形成核苷連接形成核苷酸(脫氧核苷酸)。酸(脫氧核苷酸)。 核苷酸:核苷酸:A
23、MP, GMP, UMP, CMP脫氧核苷酸:脫氧核苷酸:dAMP, dGMP, dTMP, dCMP 5OHOCH2OHOHNNNH2OPOOOHOHOCH2OHOHNNNH2O+ -H2OHH生物化學(xué)與分子生物學(xué)系生物化學(xué)與分子生物學(xué)系A(chǔ)MP、ADP、ATPGMP、GDP、GTPCMP、CDP、CTPUMP、UDP、UTPdAMP、dADP、dATPdGMP、dGDP、dGTPdCMP、dCDP、dCTPdTMP、dTDP、dTTP核苷酸的類別核苷酸的類別生物化學(xué)與分子生物學(xué)系體內(nèi)重要的游離核苷酸及其衍生物體內(nèi)重要的游離核苷酸及其衍生物 多磷酸核苷酸多磷酸核苷酸 NMP NDP NTP生物
24、化學(xué)與分子生物學(xué)系cAMPocGMP生物化學(xué)與分子生物學(xué)系生物化學(xué)與分子生物學(xué)系二、核苷酸在人體具有除構(gòu)成核酸外的多種功能二、核苷酸在人體具有除構(gòu)成核酸外的多種功能 核苷酸是細(xì)胞內(nèi)化學(xué)能載體(核苷酸是細(xì)胞內(nèi)化學(xué)能載體(ATP) 核苷酸可以作為細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)信使(核苷酸可以作為細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)信使( cAMP和和cGMP ) 核苷酸是一些重要輔酶(核苷酸是一些重要輔酶( NAD+和和NADP+ )的結(jié)構(gòu)成分)的結(jié)構(gòu)成分 核苷酸是重要的藥物研究對(duì)象核苷酸是重要的藥物研究對(duì)象 生物化學(xué)與分子生物學(xué)系三、核苷酸的理化性質(zhì)是其分離鑒定的基礎(chǔ)三、核苷酸的理化性質(zhì)是其分離鑒定的基礎(chǔ)核苷酸一般為白色粉末或結(jié)晶狀
25、物,平均分子核苷酸一般為白色粉末或結(jié)晶狀物,平均分子量約為量約為340。溶于水,水溶液呈酸性。不溶于丙酮、。溶于水,水溶液呈酸性。不溶于丙酮、乙醇等有機(jī)溶劑。乙醇等有機(jī)溶劑。生物化學(xué)與分子生物學(xué)系(一)核苷酸的紫外吸收特征可用于其定性定量分(一)核苷酸的紫外吸收特征可用于其定性定量分析析生物化學(xué)與分子生物學(xué)系1. DNA或或RNA的定量的定量OD260=1.0相當(dāng)于相當(dāng)于50g/ml雙鏈雙鏈DNA40g/ml單鏈單鏈DNA(或(或RNA)20g/ml寡核苷酸寡核苷酸2. 判斷核酸樣品的純度判斷核酸樣品的純度DNA純品純品: OD260/OD280 = 1.8RNA純品純品: OD260/OD280 = 2.0OD260的應(yīng)用的應(yīng)用生物化學(xué)與分子生物學(xué)系(二)(二) 核苷酸的解離特征可用于其分離純化核苷酸的解離特征可用于其分離純化核苷酸分子在特定溶液中各基團(tuán)的解離常數(shù)核苷酸分子在特定溶液中各基團(tuán)的解離常數(shù)(pK)和等電點(diǎn)()和等電點(diǎn)(pI)均為特征性常數(shù),這些)均為特征性常數(shù),這些特性賦予核苷酸以層析和電泳行為的差異,因此特性賦予核苷酸以層析和電泳行為的差異,因此被廣泛用于核苷酸的分離和純化。例如,薄層層被廣泛用于核苷酸的分離和純化。例如,薄層層析、離子交換層析、毛細(xì)管電泳等技術(shù)都可用于析、離子交換層析、毛細(xì)管電泳等技術(shù)
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