TSH熒光定量檢測方法和臨床意義綜述_第1頁
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文檔簡介

1、TSHTSH應(yīng)用及臨床意義應(yīng)用及臨床意義TSH背景TSH應(yīng)用及意義內(nèi)內(nèi) 容容檢測方法比較關(guān)于寶太結(jié)構(gòu):結(jié)構(gòu):l人類TSH為一種糖蛋白,含210個(gè)氨基酸,由和兩個(gè)亞單位組成;糖類約占整個(gè)分子的15。l亞單位:92個(gè)氨基酸,與LH和HCG的亞單位相同。 亞單位的基因位于第6號(hào)染色體。l亞單位:118個(gè)氨基酸,提供了TSH的特異性。與亞單位以非共價(jià)鍵連接才具有生物活性。 亞單位的基因位于第1號(hào)染色體。背景背景形成:形成:l促甲狀腺激素(TSH)是調(diào)控甲狀腺細(xì)胞生長和甲狀腺激素合成及分泌的主要因子,由垂體促甲狀腺素細(xì)胞合成和分泌,并受甲狀腺激素的負(fù)反饋性調(diào)節(jié)。lTSH受下丘腦分泌的促甲狀腺激素釋放激素

2、(TRH)的促進(jìn)性影響,另方面又受到T3、T4反饋性的抑制性影響,二者互相拮抗,它們組成下丘腦-腺垂體-甲狀腺軸。背景背景l(fā)放射免疫分析法(RIA)-競爭法l免疫放射分析法(IRMA)-夾心法l化學(xué)發(fā)光免疫分析法(ICMA)l熒光免疫層析法(IFA)檢測方法檢測方法檢測方法檢測方法方法樣本優(yōu)缺點(diǎn)放射定量血清、血漿試劑有效期短、操作繁瑣、環(huán)境污染和放射危害等問題,而且檢測濃度范圍窄,用于定量過于繁瑣。 化學(xué)發(fā)光全定量血清、血漿靈敏度高線性范圍寬,檢測需靜脈血,試劑儀器價(jià)格昂貴、測試所需時(shí)間長。膠體金半定量血清、血漿、全血只做半定量,肉眼觀察誤差大,操作簡便熒光免疫層析全定量血清、血漿、全血線性范

3、圍寬且可檢測全血,所需樣本量少,操作簡易,檢測時(shí)間短,價(jià)格實(shí)惠。診斷原發(fā)性甲亢和甲減診斷原發(fā)性甲亢和甲減診斷原發(fā)性甲亢和甲減最早期、最敏感的指標(biāo)發(fā)現(xiàn)亞臨床疾病。應(yīng)用及臨床意義應(yīng)用及臨床意義TSHTSHT T3 3或或T T4 4 疾病診斷疾病診斷降低升高 臨床甲亢正常 亞臨床甲亢升高降低 臨床甲減正常 亞臨床甲減診斷原發(fā)性甲亢和甲減:診斷原發(fā)性甲亢和甲減:lTSH是判斷甲狀腺功能的敏感指標(biāo)。血清T4和T3變化2倍時(shí),血清TSH已經(jīng)變化100倍。而且TSH的變化先于T4和T3數(shù)月或者數(shù)年。l中樞性甲減和非甲狀腺的疾病需聯(lián)合T4檢測。應(yīng)用及臨床意義應(yīng)用及臨床意義甲狀腺激素抵抗綜合征:甲狀腺激素抵抗

4、綜合征: 全身型:TH TSH均高,臨床無甲亢表現(xiàn) 垂體選擇型:TH TSH均高的甲亢、甲狀腺毒癥的臨床表現(xiàn) 外周組織選擇型:甲減表現(xiàn)(外周組織對(duì)甲狀腺激素不敏感)l血清TSH升高或者正常,TT4,TT3升高。診斷要采取TSH+T4檢查策略。lRTH主要與垂體TSH腫瘤鑒別。 1、TRH刺激實(shí)驗(yàn):前者TSH升高,后者無反應(yīng)。 2、T3抑制試驗(yàn):前者TSH下降,后者不被抑制。 3、前者血清TSH a亞單位與TSH的比值1.0。 4、垂體MRI: 前者無異常,后者存在垂體腫瘤。應(yīng)用及臨床意義應(yīng)用及臨床意義中樞性甲減:中樞性甲減:lTSH-first strategy檢查策略容易誤診,要采取TSH+

5、FT4檢查策略。l典型病例是血清TSH減低,TT4 /FT4減低,20%病例TSH可以正?;蛘呱?。l原發(fā)性甲減當(dāng)FT4低于正常時(shí),血清TSH應(yīng)10mIU/L;若TSH正常或輕度增高,應(yīng)疑及中樞性甲減。lTRH刺激實(shí)驗(yàn)可以鑒別原發(fā)性甲減。 下丘腦性甲減TSH的分泌呈現(xiàn)高峰延遲(注射后6090分鐘出現(xiàn)); 垂體性甲減則TSH呈現(xiàn)低平曲線應(yīng)用及臨床意義應(yīng)用及臨床意義新生兒疾病篩查:新生兒疾病篩查: 新生兒疾病篩查是提高人口素質(zhì),減少出生缺陷的三級(jí)預(yù)防措施之一。CH 是因先天性因素使甲狀腺激素合成障礙、分泌減少,導(dǎo)致患兒生長障礙,智力落后。PKU 是由于肝臟苯丙氨酸羥化酶缺陷導(dǎo)致苯丙氨酸代謝障礙所致

6、的常染色體隱性遺傳性氨基酸代謝病。應(yīng)用及臨床意義應(yīng)用及臨床意義新生兒疾病篩查:新生兒疾病篩查:l標(biāo)本采集時(shí)間應(yīng)在出生后35天。l足跟全血,TSH篩查。TSH 50mIU/L,高度懷疑,經(jīng)血清標(biāo)本測定確診;20 50mIU/L復(fù)查血清; TSH20mIU/L可以排除。l新生兒甲減血清診斷標(biāo)準(zhǔn):新生兒14周,TSH 7mIU/L, TT4 6.5g/dL ( 84nmol/L)。l必須在產(chǎn)后46周內(nèi)治療。如果在45天內(nèi)足量L-T4替代治療,智商與正常兒童沒有區(qū)別。應(yīng)用及臨床意義應(yīng)用及臨床意義TSHTSH作為治療的監(jiān)測指標(biāo):作為治療的監(jiān)測指標(biāo):l甲減替代治療的目標(biāo):原發(fā)性甲減血清TSH達(dá)到0.52.

7、0mIU/L(正常范圍的下1/2)(老年人除外)。l中樞性甲減血清FT4達(dá)到正常范圍的上1/3。l原發(fā)性甲亢抗甲狀腺藥物治療效果:TSH靶值 :正常范圍上1/2。lTSH的反應(yīng)滯后于FT4,一般要在6周后達(dá)到下丘腦-垂體-甲狀腺軸的新平衡。應(yīng)用及臨床意義應(yīng)用及臨床意義妊娠婦女的血清妊娠婦女的血清TSHTSH:l妊娠期,特別是妊娠T1期,對(duì)血清TSH值影響較大。T1期的TSH平均降低3050%。就是說,妊娠期診斷亞臨床甲減的TSH上限應(yīng)該降低)。l妊娠T1期婦女的血清 TSH應(yīng)當(dāng)在0.32.5mIU/L。 高于2.5mIU/L提示存在亞臨床甲減或甲減l應(yīng)用妊娠月份特異性的TSH參考值。中國醫(yī)科大

8、學(xué)第一附屬醫(yī)院報(bào)告的T1、T2和T3期的TSH上限分別是3.93,4.53和5.17mIU/L。應(yīng)用及臨床意義應(yīng)用及臨床意義關(guān)于寶太關(guān)于寶太l廈門寶太生物科技有限公司,創(chuàng)建于2008年4月,是一家集研發(fā)、生產(chǎn)和銷售一體的 “POCT體外診斷試劑”高科技生物公司。公司具備雄厚的技術(shù)力量和科技實(shí)力,并組建了一支技術(shù)過硬,思維活躍,工作嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膹?qiáng)大隊(duì)伍,在全體人員的努力下公司逐漸擁有一些產(chǎn)品的自主權(quán),并獲得多項(xiàng)產(chǎn)品技術(shù)專利。 l在充分的市場調(diào)研的基礎(chǔ)上,公司緊緊抓住體外診斷試劑的發(fā)展方向,引進(jìn)積極海外科技人士并與廈門大學(xué)等科研單位進(jìn)行技術(shù)合作,致力于POCT產(chǎn)業(yè)技術(shù)的研發(fā)和產(chǎn)業(yè)化。公司現(xiàn)建立了較強(qiáng)的技

9、術(shù)和研發(fā)團(tuán)隊(duì) ,核心技術(shù)平臺(tái)基于熒光稀土絡(luò)合物硅納顆粒標(biāo)記物及其制備方法和用熒光稀土納米顆粒作為標(biāo)記物的免疫層析方法及其檢測紙條 。寶太熒光定量產(chǎn)品:寶太熒光定量產(chǎn)品:lHCG定量檢測試劑盒(熒光免疫層析法)lAFP定量檢測試劑盒(熒光免疫層析法)lTSH定量檢測試劑盒(熒光免疫層析法)lCRP定量檢測試劑盒(熒光免疫層析法)l免疫熒光分析儀(一代機(jī))l免疫熒光分析儀(二代機(jī)) 可連續(xù)測試關(guān)于寶太關(guān)于寶太唐氏綜合癥篩查TSHTSH定量檢測試劑盒定量檢測試劑盒l(wèi)TSH熒光免疫層析反應(yīng)原理: 樣本與緩沖液混勻,滴加到檢測卡加樣孔后,樣本中的TSH抗原與熒光微球標(biāo)記的鼠抗TSH單克隆抗體結(jié)合形成反應(yīng)

10、復(fù)合物(熒光微球-Ab1-Ag),反應(yīng)復(fù)合物在層析作用下沿著硝酸纖維素膜前移,移至檢測線(T線)處,反應(yīng)復(fù)合物被檢測線包被的鼠抗TSH單克隆抗體捕獲,形成最終反應(yīng)復(fù)合物(熒光微球-Ab1-Ag-Ab2)。樣本中的TSH濃度與熒光信號(hào)成正相關(guān),多余的復(fù)合物層析至C先處,可被包被的羊抗鼠捕獲,形成對(duì)照線。通過熒光免疫分析儀,可檢測出樣本中TSH的濃度。 關(guān)于寶太關(guān)于寶太TSHTSH技術(shù)參數(shù):技術(shù)參數(shù):l反應(yīng)原理:熒光雙抗夾心免疫層析l檢測范圍:0-100uIU/mll樣本類型:血清、血漿和全血l反應(yīng)時(shí)間:20min 檢測時(shí)間:30Sl成人正常范圍值:0.5-5.0uIU/ml關(guān)于寶太關(guān)于寶太與羅氏

11、電化學(xué)發(fā)光方法參比與羅氏電化學(xué)發(fā)光方法參比l儀器:羅氏公司E601型全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀及配套試劑;廈門寶太公司BIOT-YG-I型免疫熒光分析儀及配套試劑。l實(shí)驗(yàn)樣本:來自福州軍區(qū)總院采集的80例甲減患者,所有患者均已用羅氏化學(xué)發(fā)光檢測系統(tǒng)檢查過TSH,診斷為甲減,其中原發(fā)性甲減患者51例,繼發(fā)性甲減患者26例,急性甲狀腺炎患者3例,男41例,女39例;年齡1855歲。同時(shí)選取40例體檢健康者的血清。標(biāo)本要求為未溶血、無嚴(yán)重脂濁、無黃疸、標(biāo)本量足夠的血清。l經(jīng)過在羅氏化學(xué)發(fā)光檢測過后的血清里,前后分多次共抽取上述120份樣本,用寶太熒光分析儀再次檢測對(duì)比,歷時(shí)10 個(gè)工作日連續(xù)對(duì)比監(jiān)測。關(guān)

12、于寶太關(guān)于寶太與羅氏電化學(xué)發(fā)光方法參比與羅氏電化學(xué)發(fā)光方法參比l儀器:羅氏公司E601型全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀及配套試劑; 廈門寶太公司BIOT-YG-I型免疫熒光分析儀及配套試劑。l判斷標(biāo)準(zhǔn):關(guān)于寶太關(guān)于寶太結(jié)果:結(jié)果:序號(hào)羅氏值寶太值序號(hào)羅氏值寶太值序號(hào)羅氏值寶太值序號(hào)羅氏值寶太值10.51 0.53 313.35 2.62 613.24 2.54 911.50 1.26 233.51 38.46 324.20 3.91 6212.97 14.22 9250.59 56.52 34.98 4.72 3337.69 40.51 636.18 10.22 931.15 0.73 41.08 0

13、.99 341.82 2.09 6439.72 36.15 9470.91 79.14 50.86 0.66 353.89 1.29 657.43 8.17 953.49 4.36 61.16 1.18 3669.23 65.37 6625.09 30.54 964.15 3.42 731.44 29.44 373.94 3.76 677.69 9.68 9710.16 8.94 87.29 9.03 386.49 5.86 6821.36 19.65 981.68 1.03 93.88 3.07 397.65 10.12 698.15 10.75 9949.98 52.71 1082.06

14、97.68 403.22 3.61 7019.50 25.32 1001.95 2.35 112.45 2.83 414.98 5.14 719.69 8.41 10188.48 90.13 1226.96 29.24 424.78 5.08 7225.22 25.69 1021.94 1.14 131.81 1.15 435.13 6.03 7323.23 20.46 10345.25 39.50 143.92 3.22 4420.47 25.41 7411.58 12.64 1043.31 3.51 1553.87 50.23 4560.89 67.83 759.60 10.30 1057

15、.82 11.76 167.94 8.24 463.45 2.19 766.56 8.95 1063.37 4.32 1735.14 40.64 476.19 8.66 7715.16 12.92 1071.42 1.10 182.00 1.77 4818.79 13.47 7825.51 25.77 1085.34 5.94 192.02 2.05 498.06 7.16 7916.44 12.60 10990.12 86.89 202.10 1.62 5034.84 47.50 806.18 5.94 11057.48 64.06 212.31 3.45 514.87 4.89 811.7

16、6 2.27 11168.20 71.60 2271.11 82.91 526.69 7.05 8243.92 38.64 1121.98 1.16 232.64 2.21 5319.69 28.64 832.89 2.71 1138.86 6.86 241.06 1.01 545.43 7.04 847.17 8.14 1147.01 10.54 258.99 10.68 5530.69 40.45 851.63 1.27 1158.19 8.69 263.02 2.63 566.08 7.58 862.66 3.26 1168.00 8.14 2746.28 48.98 5716.42 19.38 8710.84 9.99 11746.46 50.98 2897.42 94.48 586.39 6.00 881.47 1.42 11881.68 99.46 295.43 6.87 5913.46 14.07 895.46 6.83 11975.98 86.16 3027.29 30.57 605.34 6.08 906.82 8.64 1205.16 5.99 結(jié)果:結(jié)果:結(jié)果:結(jié)果:結(jié)果:線性相關(guān)性結(jié)果:線性相關(guān)性討論:討論:1. 這兩種系

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