高三生物復(fù)習(xí)學(xué)案：專題8生物技術(shù)實踐專題

1、專題八生物技術(shù)實踐核心考點整合考點整合一：微生物的培養(yǎng)及應(yīng)用培養(yǎng)基種類及用途劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類特點途徑物理液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體/口加小加凝固劑，如瓊脂觀察微生物的運動、分類鑒定固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、活菌計數(shù)、保藏菌種化學(xué)成分天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確（用化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)配成）分類、鑒定用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物的生長培養(yǎng)、分離出特定微生物（如培養(yǎng)酵母菌和霉菌時，引在培可基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球國時，引在培喬基中加入高濃度的食鹽）鑒別培養(yǎng).基根據(jù)微生物的代謝特點

2、，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類的微生物，如可用伊紅一美藍培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌（若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤）2 .無菌技術(shù)（消毒和滅菌的區(qū)別）項目滅菌條件使用較為溫和的理化方法使用強烈的理化因素結(jié)果殺死物體表卸或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物（不包括芽抱和抱子）殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽抱和抱子適用實驗操作的空間、操作者的衣服和手微生物的培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等常用方法煮沸消毒法（如在100C,煮沸56min）、巴氏消毒法（如在80C,煮15min）；使用酒精、氯氣、石炭酸等化學(xué)藥劑進行消毒灼燒火菌、干熱火菌、局壓蒸汽滅菌3 .統(tǒng)計菌落數(shù)目的

3、方法（1）稀釋涂布平板法（也叫活菌計數(shù)法）原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品大約含有多少個活菌。操作：A.設(shè)置重復(fù)組，增強實驗的說服力與準(zhǔn)確性。將待測樣品經(jīng)一系列10倍稀釋，然后選擇三個稀釋度的菌液，分別取0.1mL接種到已制備好的平板上，然后用無菌涂布棒將菌液涂布整個平板表面，放在適宜的溫度下培養(yǎng)，計算菌落數(shù)。為使結(jié)果接近真實值，可將同一稀釋度加到三個或三個以上的平板上，經(jīng)涂布、培養(yǎng)，計算出菌落平均數(shù)。B.為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30300個的平板進行計數(shù)，若設(shè)置的重復(fù)組中結(jié)果相差太遠，意味著

4、操作有誤，需重新實驗。計算公式：每個樣品中的菌=，其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mD,M代表稀釋倍數(shù)。說明：此種方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低。這是因為當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。（2）顯微鏡直接計數(shù)法原理：此法利用特定細菌計數(shù)板或血球計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量，但不能區(qū)分細菌的死活。計數(shù)板是一塊特制的載玻片，上面有一個特定的面積（1mm2）和高（0.1mm）的計數(shù)室，在1mm2的面積里又被劃分成25個（或16個）中格，每個中格進一步劃分成16個（或者25個）小格，但計數(shù)室都是由40

5、0個小格組成。操作：將清潔干燥的血球計數(shù)板蓋上蓋玻片，再將稀釋的樣品滴在計數(shù)板上，然后在顯微鏡下統(tǒng)計45個中格中的細菌數(shù)，并求出每個小格所含細菌的平均數(shù)，再按下面公式求出每毫升樣品中所含的細菌數(shù)。計算公式：每毫升原液所含細菌數(shù)=每小格平均細菌數(shù)X400X10000X稀釋倍數(shù)。(3)濾膜法：以測定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目為例，將已知體積的水過濾后，將濾膜放于伊紅一美藍培養(yǎng)基上培養(yǎng)，在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌菌落呈現(xiàn)深紫色，可根據(jù)培養(yǎng)基上深紫色的菌落數(shù)目，計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)量?！纠?】(2009寧夏理綜、遼寧理綜)(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮、和滲透壓等條件。由于該細菌具

6、有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、等優(yōu)點，因此常作為遺傳學(xué)研究的實驗材料。(2)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行(消毒、滅菌)；操作者的雙手需要進行清洗和;靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能溫度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短滅菌消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu)(3)若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想使所得估計值更接近實際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的。(4)通常對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的。(5)培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是

7、O(6)若用大腸桿菌進行實驗，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。比例合適鑒定(或分類)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生滅菌解析微生物的培養(yǎng)要有適宜的營養(yǎng)物質(zhì)（碳源、氮源、生長因子等）、溫度、pH滲透壓（控制培養(yǎng)液的濃度）等。細菌具有個體微小、結(jié)構(gòu)簡單、生長周期短、繁殖快、代謝旺盛、變異類型簡單（主要是基因突變）等特點。在微生物實驗操作中，防止雜菌污染是貫穿實驗整個過程中的內(nèi)容，因此，對環(huán)境、生物材料、操作者雙手等進行消毒，對培養(yǎng)基、接種環(huán)和培養(yǎng)儀器進行滅菌。紫外線滅菌的原理是紫外線使蛋白質(zhì)和DN感生物分子變性，即空間結(jié)構(gòu)

8、改變。稀釋涂布平板法是細菌分離純化的常用方法，合理的稀釋倍數(shù)是實驗的關(guān)鍵。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長，可以形成肉眼可見的菌落，依據(jù)菌落大小、形態(tài)、色澤等可以對細菌進行鑒定或分類。因為有的大腸桿菌會釋放一種強烈的毒素，并可能導(dǎo)致腸道出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀，所以使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散知識拓展微生物的純化培養(yǎng)（兩種接種方法）平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后，就可以得到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體，這就是菌落。稀釋涂布平板法：將菌液進行一系列梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分

9、別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落?！净犹骄?（2010蘇州模擬）同學(xué)們?yōu)榱颂骄客寥乐械奈⑸飳δ蛩厥欠裼蟹纸庾饔茫O(shè)計了以下實驗，并成功篩選到能高效降解尿素的細菌（目的菌）。培養(yǎng)基成分如下表所示，實驗步驟如圖所示。請分析回答問題：KHPO1.4gNaHPO2.1gMgSO-7H之。0.2g葡萄糖10gwr1g瓊脂15g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸儲水定容到1000mL土壤稀釋倍數(shù)為1。3Iff的試管k)丁接種'*Q、J含尿素的培養(yǎng)基(1)簡述土壤中可分解尿素的細菌的鑒定方法及原理(2)培養(yǎng)

10、基中加入尿素的目的是篩選,這種培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。在以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，細菌合成的月尿酶將尿素分解為氨，pH增高，使酚紅指示劑變?yōu)榧t色目的菌選擇(3)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的,實驗需要振蕩培養(yǎng)，原因(4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時，常采用接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。尿素、葡萄糖為目的菌提供氧氣涂布平板法（或劃線法）解析選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制其他微生物的生長，促進所需微生物的生長，篩選目的菌可用選擇培養(yǎng)基。尿素是培養(yǎng)基中的惟一氮源，因此只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長。由于細菌合成的月尿酶將尿素分解為氨，pH增高，故在以尿素為惟一氮源的培

11、養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，其將變紅；目的菌生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的尿素、葡萄糖?？键c整合二：生物技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用1 .果酒和果醋制作的比較項目果酒制作果醋制作發(fā)酵菌種酵母菌醋酸菌代謝類型異養(yǎng)兼性厭氧型異養(yǎng)需氧型*CsHnOs+60g6CO2+6H2Oft0t，2GH5OH+2cos糖源充足,氧氣充足.C6Hl2Of3CHSCOOH糖源不足,QHi費062CaHsOH+2COsC2HsOH+Oa二CHSCOOH+HaO對酸性環(huán)境苗酸耐酸最適發(fā)博溫度1825七3。35c發(fā)酵時間1012天78天對飆的需求前期需輒，后期不需氧一直需氧2 .腐乳的制作(1)實驗原理：多種微生物發(fā)酵，豆腐

12、中的蛋白質(zhì)、脂肪被分解為肽和氨基酸、甘油和脂肪酸等。(2)實驗流程：讓豆腐上長出毛霉一加鹽腌制一加鹵湯裝瓶一密封腌制。(3)操作注意事項：控制好材料的用量：鹽的濃度不能過低或過高，鹵湯中酒的含量應(yīng)控制在12流右;防止雜菌的污染。3 .制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量(1)實驗原理：利用乳酸菌制作泡菜的過程中會引起亞硝酸鹽含量的變化；在酸性條件下，亞硝酸鹽通過顯色反應(yīng)，與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液對比，可以估算泡菜中亞硝酸鹽的含量。(2)實驗流程原料加工修整、洗滌、晾 曬、切分成條狀加鹽鹽水冷卻一泡菜鹽水加調(diào)味料，裝壇f發(fā)酵成品測亞硝酸鹽含量4.水蒸氣蒸儲法、壓榨法、有機溶劑萃取法的比較提取方法實驗原理方法步驟

13、適用范圍水蒸氣蒸播法利用水蒸氣將揮發(fā)性較強的植物芳香油攜帶出來水蒸氣蒸儲；分離油層；除水過濾適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強的芳香油壓榨法通過機械加壓，壓榨出果皮中的芳香油石灰水浸泡、漂洗；壓榨、過濾、靜置；再次過濾適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取有機溶劑萃取使芳香油溶解在有機溶劑中，蒸發(fā)溶劑后就可救得芳香油粉碎、干燥；萃取、過濾；濃縮適用范圍廣，要求原料的顆粒盡可能細小，能充分浸泡在有機溶劑中【例2】(2009海南卷)請回答下列與實驗室提取芳香油有關(guān)的問題：(1)植物芳香油的提取可采用的方法有壓榨法、和。(2)芳香油溶解性的特點是不溶于,易溶于,因此可用作為提取劑來提取芳香油。(3)橘子

14、果實含有芳香油，通常可用作為材料提取芳香油，而且提取時往往選用新鮮的材料，理由是。蒸播法萃取法水有機溶劑有機溶劑（其他合理答案也可）橘子皮芳香油含量較高（4）對材料壓榨后可得到糊狀液體，為除去其中的固體物獲得乳狀液可采用的方法是（5）得到的乳狀液加入氯化鈉并放置一段時間后，芳香油將分布于液體的層，原因是?加入氯化鈉的作用是。過濾（其他合理答案也可）上油層的密度比水層小（其他合理答案也可）增加水層密度，使油和水分層（6）從乳狀液中分離得到的芳香油中要加入無水硫酸鈉，此劑的作用是吸收芳香油中殘留的水分解析本題考查芳香油的提取方法、原理、材料選擇及依據(jù)壓榨法提取的主要操作方法和目的等。（1）植物芳香

15、油的提取可采用的方法有壓榨法、蒸儲法和萃取法等。（2）芳香油溶解性的特點是不溶于水，易溶于有機溶劑，因此可用有機溶劑作為提取劑來提取芳香油。（3）一般采用新鮮的橘皮來提取橘皮精油，因為新鮮的橘皮中芳香油含量較高。（4）除去液體中的固體常用方法是過濾。（5）芳香油密度比水小，且不溶于水，會浮在液體的表面。加入氯化鈉會增加水層密度，使油和水分層。（6）無水硫酸鈉的作用是吸收芳香油中殘留的水分?！净犹骄?（2010海南模擬）腐乳是我國古代勞動人民創(chuàng)造出的一種經(jīng)過微生物發(fā)酵的大豆食品，下面是腐乳制作的流程示意圖：讓豆腐長出毛霉一|加鹽讓制|一|加鹵讓裝瓶一|密封腌制|（1）現(xiàn)代科學(xué)研究表明，許多種微

16、生物參與了豆腐的發(fā)酵，比如、和毛霉等。其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種狀真菌，分布廣泛，常見于土壤、水果、蔬菜、谷物上。毛霉生長迅速，具有發(fā)達的白色菌絲。（2）腐乳制作的原理是。青霉酵母曲霉絲毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸（3）傳統(tǒng)的制作過程中，豆腐塊上生長的毛霉來自。而現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的無菌條件下，將優(yōu)良的毛霉菌種接種在豆腐上，這樣做的目的是空氣中的毛霉孢子避免其他菌種的污染，保證產(chǎn)品質(zhì)量（4）加鹽的作用是。（5）鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的，鹵湯中的酒可以選用料酒、黃酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在12%左

17、右。加酒的作用是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，抑制微生物的生長，避免豆腐變質(zhì)抑制微生物的生長，同時能使腐乳具有獨特的香味考點整合三：酶的研究與應(yīng)用1酶的活性及影響酶活性因素的實驗探究（以果膠酶在生產(chǎn)中的應(yīng)用為例探究溫度或pH對果膠酶活性的影響）（1）探究不同溫度（或pH）對酶活性的影響時，溫度（或pH）作為自變量，通常通過設(shè)置合理的梯度來確定最適值，最適值是通過比較相同時間內(nèi)獲得的產(chǎn)量或效果來確定的。（2）在混合蘋果泥和果膠酶之前，要將果泥和果膠酶分裝在不同的試管中恒溫（或同pH），處理的目的是保證底物和酶在混合時的溫度（或pH）相同，避免果泥與果膠酶混合日影響混合物的溫度（或pH）,從而影

18、響果膠酶的活性。(3)通過測定濾出的蘋果汁的體積大小來判斷果膠酶活性的原理是：果膠酶將果膠分解為小分子物質(zhì),小分子物質(zhì)可以通過濾紙，因此蘋果汁的體積大小反映了果膠酶催化分解果膠的能力。在不同的溫度和pH下，果膠酶的活性越大，蘋果汁的體積就越大。2.探究不同種類加酶洗衣粉的洗滌效果(1)實驗原理：加酶洗衣粉的酶制劑有多種，包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纖維素酶等。加入不同的酶制劑，會制成用于不同污漬洗滌的加酶洗衣粉。復(fù)合酶洗衣粉加入的酶制劑種類較多，對各種污漬都有較好的洗滌效果。(2)實驗操作程序步驟燒杯編號Inm注入自來水500mL500mL500mL加入物質(zhì)(州)奶漬布奶漬布奶漬布控制水溫37

19、C37C37C加入洗衣粉(州)蛋白酶洗衣粉復(fù)合酶洗衣粉脂肪酶洗衣粉觀察實現(xiàn)現(xiàn)象3.固定化酶和固定化細胞的比較項目固定化酶固定化細胞常用方法化學(xué)結(jié)合法、物理吸附法包埋法優(yōu)點可反復(fù)使用；有利于工藝的連續(xù)化、管道化，同時降低了生產(chǎn)成本可以連續(xù)發(fā)酵，節(jié)約成本；保持酶在細胞內(nèi)的原始狀況，增加了酶的穩(wěn)定性；操作容易不足酶在固定化時活力有所損失；不適用于多酶反應(yīng)細胞膜、細胞壁會阻礙底物的滲透和擴散，降低反應(yīng)效率【例3】(2010臨沂模擬)某工廠生產(chǎn)了一種加酶洗衣粉，其包裝袋上印有如下說明:成分：含堿性蛋白酶等。用法：洗滌前先將衣服浸于洗衣粉水內(nèi)數(shù)小時。使用溫水效果最佳。注意：切勿用于絲質(zhì)及羊毛衣料。用后徹底

20、清洗雙手。請回答下列問題：(1)質(zhì)檢局針對該洗衣粉設(shè)計了如下圖所示裝置進行實驗:涂上蛋白膜的膠片洗衣粉涂上蛋白.溶液膜的膠片經(jīng)煮沸的洗 '衣粉溶液適宜溫度適宜溫度該實驗的目的是。檢查該洗衣粉是否含蛋白酶1(2)一學(xué)生為探索該洗衣粉中酶催化作用的最適溫度，參考上述(1)的實驗材料及方法進行了如下實驗,并把結(jié)果用曲線圖A.B表示如下：AB由圖可知，使用該加酶洗衣粉的最適溫度約為。在0c和75c時，酶的催化效率基本都降為零，但溫度再度回到45C,后者的催化作用已不能恢復(fù)，這是因為。該學(xué)生在實驗過程中可通過觀察現(xiàn)象來判斷酶的催化效率。45C酶的活性已喪失膠片上的蛋白膜消失時間的長短(3)該加酶

21、洗衣粉的去污原理是(4)大力推廣使用加酶洗衣粉代替含磷洗衣粉，有利于生態(tài)環(huán)境保護這是因為(5)除加酶外，很多洗衣粉中還加有香精，高檔洗衣粉中的香精都是由植物芳香油制成的，目前從植物中提取芳香油的方法有、等。(寫出兩種)用蛋白酶分解衣服中的污垢，所含的蛋白質(zhì)變?yōu)橐追纸獾男》肿?，使之易被洗去酶本身無毒，含量少，又能被微生物分解，不會引起富營養(yǎng)化，對環(huán)境無污染萃取法蒸播法解析本題以生活中常用的加酶洗衣粉為實驗材料，進行有關(guān)酶方面的問題研究。實驗的變量是酶的有無，影響的條件主要是溫度，涉及到的內(nèi)容還有環(huán)境問題。通過此題體現(xiàn)了“觀察現(xiàn)象一提出問題一設(shè)計實驗步驟一分析結(jié)果一得出結(jié)論”的探究途徑?！净犹骄?/p>

22、3(2010江蘇卷)為探究洗衣粉加酶后的洗滌效果，將一種無酶洗衣粉分成3等份，進行3組實驗。甲、乙組在洗衣粉中加入1種或2種酶，丙組不加酶，在不同溫度下清洗同種化纖布上的2種污漬，其他實驗條件均相同，下表為實驗記錄。水溫/C1020304050組別甲乙丙甲乙丙甲乙丙甲乙丙甲乙丙清除血漬時間/min67668852518336347711126891167清除油漬時間/min93789587639182468575277769868請回答下列問題。(1)提高洗衣粉去污能力的方法有。甲組在洗衣粉中加入了乙組在洗衣粉中加入了。(2)甲、乙組洗滌效果的差異，說明酶的作用具有。(3)如果甲、乙和丙3組均

23、在水溫為80c時洗滌同一種污漬，請比較這3組洗滌效果之間的差異并說明理由加酶和適當(dāng)提高溫度蛋白酶蛋白酶和脂肪酶專一性沒有差異，因為高溫使酶失活(4)加酶洗衣粉中的酶是用特殊的化學(xué)物質(zhì)包裹的，遇水后包裹層很快溶解，釋放出來的酶迅速發(fā)揮催化作用。請說明這是否運用了酶的固定化技術(shù)及其理由未運用酶的固定化技術(shù)，因為酶未固定在不溶于水的載體上，也不能重復(fù)利用解析本題考查考生解讀表格的能力和運用所給信息處理相關(guān)問題的能力。(1)根據(jù)所給信息，提高洗衣粉去污能力的方法有加酶和適當(dāng)提高溫度。血漬中含有血紅蛋白，油漬中主要成分是脂肪，根據(jù)甲、乙兩組去除血漬和油漬的能力比較，能夠得出甲組加入了蛋白酶，乙組加入了蛋

24、白酶和脂肪酶。(2)加入的酶的種類不同，洗滌效果有差異，充分體現(xiàn)了酶的專一性。(3)酶在高溫的情況下會變性失活，因此甲、乙、丙三組在水溫為80c時，效果一樣。(4)固定化酶的優(yōu)點是可以重復(fù)利用，酶的固定化技術(shù)是把酶固定在不溶于水的載體上。考點整合四：生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用1 .DNA的粗提取與鑒定(1)材料準(zhǔn)備：本實驗用雞血細胞作實驗材料有兩.個原因：雞血細胞核的DNA含量豐富，材料易得；雞血細胞極易吸水脹破，而用動物肝臟細胞作實驗材料常常需要勻漿和離心，對設(shè)備要求較高，操作繁瑣，歷時較長。2 2)DNA勺粗提取和鑒定步驟操作原理破碎細胞，加入20mL蒸儲水，攪拌5min,用12層紗使細胞吸

25、水脹破釋放DNA布過濾備用溶解細加入2mol/L的氯化鈉溶液40mL,攪拌1minDNA在高濃度氯化鈉溶液中，溶解度最大胞核中的DNADNA的加入蒸儲水約300mL,不停地進行均勻攪拌，降低氯化鈉濃度，使DNA勺溶解度降到最析出然后用34層紗布過濾混合液低DNA的初步提純加入2mol/L的氯化鈉溶液20mL,不停地攪拌，然后用2層紗布過濾混合液DNA的加入95帆酒精50mL,然后進行攪拌濃縮沉淀DNA再次提純DNA的向兩支試笆中分別加入4ml_一苯胺試劑，然后沸水浴中DNA遇二苯胺試劑呈藍色鑒定將試管在沸水浴中加熱5min,比較試管中的顏色變化。注：一苯胺溶液要現(xiàn)用現(xiàn)配，否則會影響鑒定效果3

26、.血紅蛋白的提取(1)凝膠色譜法：根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)。(2)電泳技術(shù)：在電場的作用下，利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)以及分子本身大小、形狀等性質(zhì)的差異，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而達到對樣品進行分離、鑒定或提純的目的。(3)蛋白質(zhì)的提取和分離步驟操作樣品處理通過紅細胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液等操作收集到血紅蛋白溶液粗分離通過透析法去除血紅蛋白溶液中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)純化通過凝膠色譜法分離相對分子質(zhì)量不向的蛋白質(zhì)3.生物體內(nèi)DNAM制與PC阪應(yīng)的區(qū)別項目體內(nèi)復(fù)制PC或應(yīng)解旋在解旋酶作用下，細胞提供能量，部分解開加熱至90C,雙鏈全部解開，不需解旋酶引物一

27、小段RNA可以是RNA或單鏈DNA分子片段合成子鏈在引物基礎(chǔ)上，一條鏈連續(xù)合成，另一條鏈不連續(xù)合成分別從兩條鏈的引物端開始，都是連續(xù)合成，控制溫度72C特點邊解旋邊復(fù)制；半保留復(fù)制體外迅速擴增TaqDNA聚合酶不需要循環(huán)次數(shù)受生物體自身控制30多次相同點生物體內(nèi)的DNAM制和PC林外DNAT增者B需要模板、四種脫氧核甘酸，且都需要在一定的緩沖溶液中進行4.花粉植株的產(chǎn)生與植物莖的組織培養(yǎng)的比較項目菊花莖的組織培養(yǎng)月季的花藥培養(yǎng)理論依據(jù)細胞的全能性基本過程脫分化、再分化影響因素選材、營養(yǎng)、激素、pH、溫度、光照等選材、營養(yǎng)、激素、pH、溫度等操作流程制備培養(yǎng)基一外植體消毒一接種一培養(yǎng)一移栽栽培選

28、材一材料消毒一接種和培養(yǎng)一篩選和誘導(dǎo)-移栽一栽培選育【例4】(2009山東理綜)人參是一種名貴中藥材，其有效成分主要是人參皂甘。利用細胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)人參皂昔的大致流程如圖：人參根旬狹延few|_*,附扇或小麗空”網(wǎng)凰培養(yǎng)蟠!收集墻藕節(jié)一!一取人請回答：(1)配制誘導(dǎo)愈傷組織的固體培養(yǎng)基，分裝后要進行。接種前，要對人參根進行(2)用于離體培養(yǎng)的根切塊，叫做。培養(yǎng)幾天后發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)基被污染，若是有顏色的絨毛狀菌落，屬于污染；若是有光澤的黏液狀菌落，屬于污染。(3)用少量酶處理愈傷組織，獲取單細胞或小細胞團，在液體培養(yǎng)基中進行懸浮培養(yǎng)，可有效提高人參皂昔合成量。滅菌消毒外植體真菌（霉菌）細菌果膠（4

29、）人參皂苷易溶于水溶性（親水性）有機溶液，從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷宜選用方法，操作時應(yīng)采用加熱。萃?。ń。┧〗馕霰绢}以植物組織培養(yǎng)為材料背景考查了植物組織培養(yǎng)過程中涉及的培養(yǎng)基消毒、滅菌的相關(guān)的知識及污染后的菌落特征的比較。同時考查了關(guān)于物質(zhì)的提取和鑒定的內(nèi)容，跨度較大，考查的知識面較廣。（1）接種前，要對材料進行消毒，配制的培養(yǎng)基分裝后要進行高壓蒸汽滅菌。（2）比較菌落特征。真菌污染：有顏色的絨毛狀菌落；細菌污染：有光澤的黏液狀菌落。（3）植物細胞胞間層的組成成分是果膠，利用果膠酶處理愈傷組織可以獲得單個的細胞。（4）植物有效成分的提取常采用萃取法、蒸餾法和壓榨法。人參皂苷易溶于親水性

30、有機溶液，故而采用有機溶劑萃取的方法從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷?！净犹骄?（2010泰州模擬）對血紅蛋白（Hb）的研究結(jié)果表明，血紅蛋白實際上是由珠蛋白、原嚇咻和二價鐵離子（Fe2+）所組成的結(jié)合蛋白質(zhì)，由4條肽鏈各結(jié)合一個輔基即血紅素，O2結(jié)合于Fe2上，血紅蛋白與氧疏松結(jié)合形成氧合血紅蛋白（HbO2），這種氧合作用在氧分壓高時容易進行，在氧分壓低時易于解離。紅細胞結(jié)合和攜帶O2的過程并不影響二價鐵離子，也就是說不會使之氧化為三價鐵離子。Fe3+無攜帶O2的能力。COWHb的親和力大于02,結(jié)合成HbCO后不能重新分離，致使Hb喪失運輸02和CO前機能，此稱為一氧化碳中毒，即煤氣中毒。根據(jù)

31、以上資料，回答下列問題：（1）用凝膠色譜法分離血紅蛋白時，待接近色譜柱底端時，才用試管收集。血紅蛋白因含而呈現(xiàn)紅色。（2）要使血紅蛋白從紅細胞中釋放出來，可選用的方法是3）紅細胞具有運輸氧的功能，是因為紅色區(qū)帶血紅素將紅細胞置于蒸儲水中，加40琳積的甲苯，并攪拌使之破裂紅細胞中的血紅蛋白與氧在氧分壓高時容易結(jié)合，在氧分壓低時又容易分離（4）亞硝酸鹽為強氧化劑，進入人體后，可使血紅蛋白失去運輸氧的功能，導(dǎo)致組織缺氧，其可能的原因是亞硝酸鹽可使血中低鐵血紅蛋白氧化成高鐵血紅蛋白高考鏈接1. （2010江蘇卷，7）如圖表示果酒和果醋制作過程中的物質(zhì)變化過程，下列敘述正確的是H.O+COd|醋酸+H1

32、0葡一糖I啰丙酮酸T*畫1+網(wǎng)A.過程和都只能發(fā)生在缺氧條件下B.過程和都發(fā)生在酵母細胞的線粒體中C.過程和都需要氧氣的參與D.過程所需的最適溫度基本相同答案：C解析：本題以流程圖為載體，綜合考查果酒和果醋的制作過程及有氧呼吸與無氧呼吸的過程的相關(guān)知識，意在考查考生對所學(xué)知識的綜合應(yīng)用與分析能力。據(jù)圖分析可知：是細胞呼吸的第一階段；是無氧呼吸的第二階段；是有氧呼吸的第二、第三階段；是果醋制作中乙醇氧化為醋酸的階段。過程在有氧或無氧的條件下都可以進行，故A項錯誤；過程是在細胞質(zhì)基質(zhì)中進行的，故B項錯誤；和都必須在有氧的條件下才可以進行，故C項正確；、是果酒制作的階段，其適宜的溫度為18c25C,是果醋制作的階段，其適宜的溫度為30c35C,故D項錯誤。2. （2010上海卷，25）如圖1表示制備固定化酵母細胞的有關(guān)操作，圖2是利用固定化酵母細胞進行酒精發(fā)酵的示意圖，下列敘述不正確的是注射器海藻酸鈉與酵母菌混合液固定化酵母X溶液10%葡萄糖溶液圖1圖2A.剛?cè)芑暮Ｔ逅徕c應(yīng)迅速與活化的酵母菌混合制備混合液B.圖1中X溶液為CaCl2溶液，其作用是使海藻酸鈉形成凝膠珠C.圖2發(fā)酵過程中攪拌的目的是,使培養(yǎng)液與酵母菌充分接觸D.圖1中制備的凝膠珠用蒸