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1、蛋白質(zhì)習(xí)題答案 一、填空題1,蛋白質(zhì)和核酸對紫外光均有吸收。蛋白質(zhì)的最大吸收波長是 280 nm。2,蛋白質(zhì)分子的無規(guī)則卷曲有 緊密環(huán) 和 連接條帶 兩種類型。 3,蛋白質(zhì)分子的b-轉(zhuǎn)角有兩種類型,分為含 脯氨酸 類型和 甘氨酸 類型,由第一個氨基酸殘基的 羰基 -C=O 基與第
2、四個氨基酸殘基的 氨基 -NH 基形成氫鍵。4,構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸中的堿性氨基酸有 組氨酸 、 精氨酸 和 賴氨酸 三種。酸性氨基酸主要是指 _天冬氨酸_、 _谷氨酸_。5,蛋白質(zhì)的紫外吸收主要是因為含有 苯丙氨酸 、 酪氨酸 和 色氨酸
3、; 三種氨基酸。6,蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)主要包括 a-螺旋 、 b-折疊、b-轉(zhuǎn)角 和 無規(guī)則卷曲 類型。7,多肽鏈N-末端主要采用 二硝基氟苯 、 丹磺酰氯 和 異硫氰酸苯酯 方法測定。8,組成蛋白質(zhì)分子中含咪唑基的氨基酸是 組氨酸 ,含有巰基的氨基酸是
4、60; 半胱氨酸 。9,不同蛋白質(zhì)中含量比較接近的元素是 N ,平均含量為 16 。10,組成蛋白質(zhì)的基本單位是 a-氨基酸 ,它們的結(jié)構(gòu)均為 L-構(gòu)型 。它們之間靠 酰胺 鍵彼此連接而形成的物質(zhì)稱為 肽 &
5、#160; 。二、是非題( 錯 )1, 構(gòu)成蛋白質(zhì)的20種氨基酸都具有旋光性。( 錯 )2,一蛋白質(zhì)樣品經(jīng)酸水解后,用氨基酸自動分析儀能準確測定它的所有氨基酸。( 對 )3, 變性后的蛋白質(zhì),分子量不發(fā)生變化。( 錯 )4,推動蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)形成的力是氫鍵作用。( 對 )5,氨基酸、蛋白質(zhì)和核酸都具有等電點。( 錯 )6,在pH呈堿性的溶液中,氨基酸大多以陽離子形式存在。( 錯 )7, 一
6、蛋白質(zhì)樣品經(jīng)酸水解后,能準確測定它的所有氨基酸。( 錯 )8,胰蛋白酶水解由賴氨酸、精氨酸氨基端形成的肽鍵。( 錯 )9,肼解法是測定多肽氨基端的一種方法。( 錯 )10,蛋白質(zhì)的亞基都是具有生物活性的多肽。三、選擇題( c )1,下列氨基酸中哪種是精氨酸 aAsp b His c Arg d Lys( bcd )2,下列關(guān)于蛋白質(zhì)分子中肽鍵的敘述哪些是正確的? (a) 能自由旋轉(zhuǎn)(b)比通常
7、的C-N單鍵短(c)通常有一個反式結(jié)構(gòu)(d) 具有部分雙鍵性質(zhì)( b )3,下列氨基酸中哪種氨基酸具有咪唑基團?a 精氨酸 b 組氨酸 c 酪氨酸 d 脯氨酸( b )4,下列關(guān)于a-螺旋結(jié)構(gòu)的敘述中哪個是錯誤的?a 為右手螺旋 b肽平面圍繞多個軸旋轉(zhuǎn)c螺旋一周為3.6個氨基酸殘基
8、d 肽鏈內(nèi)形成氫鍵( c )5,氨基酸順序測定儀是根據(jù)哪種方法建立的? (a)2,4-二硝基氟苯法 (b)丹磺酰氯法 (c)苯異硫氰酸酯法a (d)酶水解法 ( bcd )6, 不直接參與維系蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵是 a 氫鍵 b 鹽鍵
9、; c 疏水鍵 d 二硫鍵( abd )7, 在生理pH條件下,下列氨基酸中那種以負離子形式存在? a天冬氨酸 b半胱氨酸 c賴氨酸 d亮氨酸( cd )8,下列關(guān)于蛋白質(zhì)分子三級結(jié)構(gòu)的敘述哪項是錯誤的?a天
10、然蛋白質(zhì)分子均有這種結(jié)構(gòu) b具有三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈都具有生物學(xué)活性c三級結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性主要由次級鍵維持 d親水基團大多聚集在分子的表面( d )9, 下列關(guān)于蛋白質(zhì)四級結(jié)構(gòu)的論述哪項是正確的。a其是由多個相同的亞基組成 b其是由多個不同的亞基組成c一定是由種類相同而不同數(shù)目的亞基組成 d亞基的種類和數(shù)目均可不同( b )10,下列哪種試劑可使蛋白質(zhì)的二硫鍵打開?a溴化氰
11、; bb-巰基乙醇 c碘乙酸 d2,4-二硝基氟苯四、問答題 1,假定有1mmol的五肽,酸水解生成2mmol谷氨酸,1mmol賴氨酸,沒有能夠定量回收其它氨基酸,將原來的五肽用胰蛋白酶水解生成兩個肽段,在pH7.0進行電泳,一個肽段移向陽極,另一個則移向陰極。用FDNB(二硝基氟苯)處理胰蛋白酶水解的一個肽段,再用酸水解,生成DNP-谷氨酸。用糜蛋白酶處理原來的五肽生成兩個肽段及游離谷氨酸,試從上述試驗結(jié)果寫出該五肽的氨基酸順序。答:因為酸水解時,色氨酸容易被破壞而不能定量回收,所以該五肽的氨基酸組
12、成為2Glx, 2Trp, Lys。用胰蛋白酶水解得到兩個肽段,說明Lys不是末端氨基酸。用糜蛋白酶水解生成兩個肽段及游離的谷氨酸,說明兩個Trp是分開的,根據(jù)該肽氨基酸組成及FDNB處理胰蛋白酶水解產(chǎn)生的片段可知該肽的順序可能為Glx-Try-Lys-Try-Glu。根據(jù)胰蛋白酶水解兩個肽段為Glx-Try-Lys和Try-Glu在pH7.0時的電泳行為,可以斷定N-末端氨基酸為Gln。因此該肽的順序為Gln-Trp-Lys-Trp-Glu。2,有一種二肽啊,氨基酸組成為phe,His,與2,4-二硝基氟苯不能反應(yīng),用肼解法測不出羧基端氨基酸?該二肽具有什么樣的結(jié)構(gòu)?答:這種二肽是一種環(huán)二肽
13、。3,根據(jù)下列試驗結(jié)果推斷一種多肽的氨基酸順序。(1)酸水解得知其氨基酸組成為2Val, Arg, 2Lys, Met, Phe, 2Ser。(2)羧肽酶A水解得到一種氨基酸Val。(3)胰蛋白酶水解得到四個肽段,其氨基酸組成如下:? Val, Arg;?Lys, Phe, Ser; ?Lys; ?Val, Met, Ser。(4)溴化氰水解得到兩個肽段,其氨基酸組成如下:?Val, Arg, 2Lys, Met, Phe, Ser。?Val, Ser。(5)用嗜熱菌蛋白酶水解得到兩個肽段,其氨基酸組成如下:? Ser, Val, Arg; ?
14、Val, 2Lys, Met, Phe, Ser。答:根據(jù)條件(1)可知該肽含有9個氨基酸;根據(jù)條件(2)可知C-末端為Val;根據(jù)條件(3)胰蛋白酶水解Arg, Lys羧基端的肽鍵,可以判定肽段位于C-末端;而肽段的基本順序為Val-Arg; 肽段的基本順序為(Phe,Ser)-Lys;根據(jù)條件(4)溴化氰水解甲硫氨酸羧基端的肽鍵,可以確定C-末端的氨基酸順序為Met-Ser-Val;再根據(jù)條件(5)嗜熱菌蛋白酶水解Phe的氨基端肽鍵,可以確定整個小肽的順序是Val-Arg-Ser-Phe-Lys-Lys-Met-Ser-Val。4,某多肽具有以下氨基酸順序:Glu-Val-Lys
15、-Met-Phe-Arg-Trp-Leu-Gly-Ser-Leu-Met-Glu-Ala-Thr-Arg-His-Gln-Lys,如果該肽用胰蛋白酶水解,可產(chǎn)生哪幾個肽段?;用溴化氰裂解可產(chǎn)生哪幾個肽段?答:用胰蛋白酶水解可產(chǎn)生4個肽段,Trp-Leu-Gly-Ser-Leu-Met-Glu-Ala-Thr-Arg; Glu-Val-Lys;Met-Phe-Arg;His-Gln-Lys。用溴化氰裂解可產(chǎn)生3個肽段,Glu-Val-Lys-Met;Phe-Arg-Trp-Leu-Gly-Ser-Leu-Met;Glu-Ala-Thr-Arg-His-Gln-Lys。5,蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)分
16、為四級,請簡述這四級結(jié)構(gòu)的基本定義。答:蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)包括組成蛋白質(zhì)的多肽鏈數(shù)目,多肽鏈的氨基酸順序,以及多肽鏈內(nèi)或鏈間二硫鍵的數(shù)目和位置。其中最重要的是多肽鏈的氨基酸順序。蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)是指肽鏈主鏈折疊產(chǎn)生的有規(guī)則的幾何走向,它只涉及肽鏈主鏈的構(gòu)象及鏈內(nèi)或鏈間形成的氫鍵。蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)是指在二級結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上,肽鏈在空間進一步盤繞、折疊形成的包括主鏈和側(cè)鏈構(gòu)象在內(nèi)的特征三維結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)(Quaternary Structure)是指由多條各自具有一、二、三級結(jié)構(gòu)的肽鏈通過非共價鍵連接起來的結(jié)構(gòu)形式;各個亞基在這些蛋白質(zhì)中的空間排列方式及亞基之間的相互作用關(guān)系。6,蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)
17、有哪幾種類型?毛發(fā)也是一種蛋白質(zhì),燙發(fā)過程實際上是一種蛋白質(zhì)構(gòu)象的變化過程,請解釋燙發(fā)過程中,蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)究竟發(fā)生了什么變化?答:毛發(fā)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)是由a-螺旋構(gòu)成的,在燙發(fā)過程中,蛋白質(zhì)中的二硫鍵被還原,a-螺旋結(jié)構(gòu)被破壞,形成b-折疊形式。7,在pH10 條件下,丙氨酸主要以哪中結(jié)構(gòu)形式存在?天冬氨酸在PH7.0的水溶液中,以哪種離子形式存在?答:在pH10 條件下,丙氨酸主要以H2N-CH(CH3)-COO?-形式存在;天冬氨酸在PH7.0的水溶液中,以-OOC-CH2CH(NH3+)COO-形式存在?8,谷胱甘肽過氧化物酶重量上含有0.34%的硒(Se的原子量為7
18、8.96),該酶最低分子量是多少?用凝膠過濾法測得此酶的分子量為88,000,試問此酶具有什么樣的四級結(jié)構(gòu)? 答:根據(jù)Se的原子量78.96和谷胱甘肽過氧化物酶硒的含量0.34%,該酶最低分子量約為78.96/0.0034=23224,而用凝膠過濾法測得此酶的分子量為88,000,說明該酶是有四個亞基構(gòu)成的寡聚蛋白質(zhì)。 酶化學(xué)練習(xí)題一、填充題1磷酸吡哆醛是 轉(zhuǎn)氨酶 的輔酶。2酶的立體化學(xué)專一性分為 幾
19、何專一性 和 手性(或光學(xué))專一性 。3酶的活性中心可分為底物 結(jié)合 和 催化 兩個部位。4解釋酶催化反應(yīng)立體專一性的學(xué)說主要有 三點結(jié)合學(xué)說 、 鎖鑰學(xué)說和 誘導(dǎo)契合學(xué)說 。5酶的非竟爭性抑制動力學(xué)特點是Vmax_變小_而Km_不變_。6構(gòu)成輔酶I和
20、輔酶II的維生素是_煙酰胺_。7米氏常數(shù)Km是反應(yīng)速度為最大應(yīng)速度 1/2時 的 底物濃度 ,其單位為 mol/L 。8酶催化的特點為_高效性、_選擇性_、_反應(yīng)條件溫和_ 、_活性可調(diào)控_。9一碳轉(zhuǎn)移酶的輔酶是 四氫葉酸 。其前體是維生素 葉酸 。二、是非題( 對 )1.硫辛酸是a酮戊二酸脫氫
21、酶系的輔酶之一。( 錯 )2.酶活力的降低一定是因為酶失活作用引起的。( 錯 )3.核酶(核酸酶)是一種水解蛋白質(zhì)的酶類。( 錯 )4.維生素B5是含有鈷原子的化合物。( 對 )5,當?shù)孜锾幱陲柡退綍r,酶促反應(yīng)的速度與酶的濃度成正比。( 錯 )6,輔酶Q是許多脫氫酶的輔酶。( 錯 )7,酶的米氏常數(shù)(Km)是底物濃度的一半時的反應(yīng)速度。三、選擇題(單選題)(
22、0; d )1,下列那種因素不使酶活力發(fā)生變化?a增高溫度b加抑制劑c改變pH d加硫酸銨( c )2,下列哪一種維生素是甲基和甲?;妮d體?a硫胺素b抗壞血酸c葉酸d核黃素( e )3. 關(guān)于酶的性質(zhì)哪一種說法不對? a高效催化性 b專一性c反應(yīng)條件溫和 d可調(diào)節(jié)控制 e可使反應(yīng)平衡向有利于產(chǎn)物方向移動( a )4.下列哪一種維生素是脫羧酶
23、的輔酶前體 a硫胺素 b抗壞血酸 c葉酸 d輔酶A( d )5. 轉(zhuǎn)氨酶的輔酶是下列化合物中的哪一種? aVB1 b葉酸 c生物素 d磷酸吡哆醛( c )6,米氏常數(shù)Km是一個用來度量 a 酶被底物飽和程度的常數(shù) b酶促反應(yīng)速度大小的常數(shù)c 酶與
24、底物親和力大小的常數(shù) d酶穩(wěn)定性的常數(shù)( c )7,烷基劑如碘乙酸使酶失活屬于那種抑制 a競爭性 b非競爭性 c 不可逆 d可逆性( a )8,下列哪一項不是酶具有高催化效率的
25、因素?a有調(diào)控能力 b酸堿催化 c“張力”和“形變” d鄰近定位效應(yīng)( d )9,下列哪一項不是呼吸鏈的組成部分: a 輔酶Q bNADH cFADH2 d Cytf( b
26、; )10,某一符合米氏方程的酶,當S=2Km時,其反應(yīng)速度V等于: aVmax b2/3Vmax c3/2 Vmax d2Vm ( b )11, L-氨基酸氧化酶只能催化L-氨基酸是氧化,此種專一性屬于:a幾何專一性 b光學(xué)專一
27、性, c結(jié)構(gòu)專一性 d絕對專一性( c )12,下列關(guān)于酶活性中心的描述哪個是正確的? a酶分子上的幾個必需基團 b 酶分子與底物的結(jié)合部位 c酶分子結(jié)合底物并發(fā)揮催化作用的三維結(jié)構(gòu)區(qū)域 d 酶分子催化底物轉(zhuǎn)化的部位( c )13,下列哪一項是酶具有高催化效率的因素之一?a有調(diào)控能力 b三點結(jié)合作用 c形成過渡態(tài)復(fù)合物 d反應(yīng)條件溫和四、問答題
28、 1,酶作為生物催化劑的特點有哪些?答:(1)高效性 酶的催化作用可使反應(yīng)速度提高1071016倍。比普通化學(xué)催化劑效率至少高幾倍以上。(2)選擇性 酶是具有高度選擇性的催化劑,酶往往只能催化一種或一類反應(yīng),作用一種或一類極為相似的物質(zhì)。(3)反應(yīng)條件溫和酶促反應(yīng)一般在pH 5-8 水溶液中進行,反應(yīng)溫度范圍為20-40°C。由于反應(yīng)條件溫和,使某些不希望的副反應(yīng),如分解反應(yīng)、異構(gòu)化反應(yīng)和消旋化反應(yīng)等可以盡量減少。(4)酶活力可調(diào)節(jié)控制如抑制劑調(diào)節(jié)、共價修飾調(diào)節(jié)、反饋調(diào)節(jié)、酶原激活及激素控制等。2,如何判斷兩種抑制劑的抑制類型?答:
29、通過酶抑制作用的動力學(xué)研究,計算無抑制劑和有抑制劑時的Km與Vmax,當Vmax值不變,而Km變大時,該抑制劑屬于競爭性抑制劑;當Vmax變小,Km不變時,該抑制劑屬于非競爭性抑制劑;當Vmax值減小,Km變小時,該抑制劑屬于反競爭性抑制劑。3,酶作為催化劑的重要特點是催化效率高,請舉出3種以上解釋酶催化高效率的理論學(xué)說。答:(1)鄰基效應(yīng)和定向效應(yīng) 在酶促反應(yīng)中,底物分子結(jié)合到酶的活性中心,一方面底物在酶活性中心的有效濃度大大增加,有利于提高反應(yīng)速度;另一方面,由于活性中心的立體結(jié)構(gòu)和相關(guān)基團的誘導(dǎo)和定向作用,使底物分子中參與反應(yīng)的基團相互接近,并被嚴格定向定位,使酶促
30、反應(yīng)具有高效率和專一性特點。(2)與反應(yīng)過渡狀態(tài)結(jié)合作用在酶催化的反應(yīng)中,與酶的活性中心形成復(fù)合物的實際上是底物形成的過渡狀態(tài),所以,酶與過渡狀態(tài)的親和力要大于酶與底物或產(chǎn)物的親和力。(53) 共價催化酶通過與底物形成反應(yīng)活性很高的共價過渡產(chǎn)物,使反應(yīng)活化能降低,從而提高反應(yīng)速度的過程,4,請簡單論述為什么酶可以降低反應(yīng)的自由能?答:酶催化作用的本質(zhì)是酶的活性中心與底物分子通過短程非共價力(如氫鍵,離子鍵和疏水鍵等)的作用,形成E-S反應(yīng)中間物,其結(jié)果使底物的價鍵狀態(tài)發(fā)生形變或極化,起到激活底物分子和降低過渡態(tài)活化能作用。在底物S與酶E結(jié)合之前,二者均處于自由運動狀態(tài),在結(jié)合過程中,
31、由于底物與酶分子的相互作用產(chǎn)生結(jié)合能,結(jié)合后,形成高度有序、底熵的復(fù)合物。在酶-底物復(fù)合物ES形成過程中,酶分子活性中心結(jié)合的水分子和底物分子結(jié)合的水分子相繼發(fā)生脫溶劑化作用,脫溶劑化作用增加了ES復(fù)合物的能量,使其更活潑而容易反應(yīng)。當?shù)孜镞M入酶的活性中心時,底物分子的帶電荷基團被迫與酶活性中心的電荷相互作用,導(dǎo)致靜電去穩(wěn)定化作用,底物分子發(fā)生扭曲、形變,從而引起反應(yīng)加速進行。 5,有哪些因素可以影響酶催化反應(yīng)的速度,如何影響的? 答:底物濃度對酶促反應(yīng)速度的影響,當酶的濃度不變,底物濃度S較小時,反應(yīng)速率V與S
32、呈正比;但當?shù)孜餄舛群芨邥r,V幾乎不隨S的改變而變化。pH 對酶的活性具有明顯的影響。在一定的pH 下, 酶具有最大的催化活性,通常稱此pH 為最適 pH。在最適 pH 條件下,酶促反應(yīng)速度最大。溫度對酶促反應(yīng)速度的影響有兩個方面:一方面是溫度升高,酶促反應(yīng)速度加快。另一方面,溫度升高,酶的高級結(jié)構(gòu)將發(fā)生變化或變性,導(dǎo)致酶活性降低甚至喪失。因此大多數(shù)酶都有一個最適溫度。在最適溫度條件下,反應(yīng)速度最大。某些化合物能與酶相互作用,使酶分子中的活性基團發(fā)生變化,從而影響酶與底物分子的結(jié)合或減小酶的再生速度,使酶的活性降低或喪失的現(xiàn)
33、象,稱為酶的抑制作用。能夠引起酶的抑制作用的化合物則稱為抑制劑。核酸練習(xí)題一、填充題1,核糖核酸RNA主要分為 tRNA 、 mRNA 和 rRNA 三種類型。2,脫氧核糖核酸(DNA)的基本結(jié)構(gòu)單位是 脫氧核糖核苷酸 。3,脫氧核糖核酸DNA雙鏈中若 G+C% 含量高,則
34、;Tm 值高。4,轉(zhuǎn)移核糖核酸t(yī)RNA的二級結(jié)構(gòu)為 三葉草 形狀,三級結(jié)構(gòu)為 倒L 形狀5,DNA和RNA中的堿基不同的是 T 和 U 。二、是非題( 錯 )1,tRNA分子的3末
35、端具有聚腺苷酸的“尾”結(jié)構(gòu)。( 錯 )2,若DNA一條鏈的堿基順序是pCpTpGpGpApC,則另一條鏈的堿基順序是pGpApCpCpTpG.( 錯 )3,DNA的二級結(jié)構(gòu)由兩條平行的多核苷酸鏈構(gòu)成。 ( 錯 )4,堿溶液水解RNA產(chǎn)生5-核苷酸。( 錯 )5,稀堿溶液可以水解DNA,但不可以水解RNA。( 對 )6, 在變性后,DNA的紫外吸收增加。三、選擇題(單選題)(
36、; b )1,熱變性的DNA在適當條件可以復(fù)性,條件之一是: a 驟然冷卻 b 緩慢冷卻 c 能縮 d 加入濃的鹽( a )2.如果反密碼子是UGA,它可識別下列哪個密碼子? a ACU b CUA c UCA d UAC( c )3,DNA中含有18.4%的A時,其堿基C+G%
37、總含量為多少? a36.8 b37.2 c 63.2 d 55.2;( d )4,熱變性的DNA具有下列哪種特征? a核苷酸間的磷酸二酯鍵斷裂 b形成三股螺旋 c260nm處的光吸收下降 d GC對的含量直接影響Tm值四、問答題1,請簡單敘述DNA的組成和結(jié)構(gòu)的特點。答:DNA是由2-脫氧核苷酸聚合而成的線性高分子,DNA中存在的堿基是:腺嘌呤(A)、鳥嘌呤 (G)、胞嘧啶(C)和胸腺嘧啶(T)。DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的要點如下:(1)DNA分子由兩條多聚脫氧核糖核苷酸鏈(簡稱DNA單鏈)組成。兩條鏈沿著同一根軸平行盤繞,形成右手雙螺旋結(jié)構(gòu)。螺旋中的兩條鏈方向相反,即其中一條鏈的方向為53,而另一條鏈的方向為35。(2)嘌呤堿和嘧啶堿基位于螺
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