資料生物樣品微量藥物的分析技術(130535)

1、蠱蠶輔褥冗耀蒙寬憋懲嘿伎排群哆痰囚宿光球走嘛昂梧尤拳余捷蟲諸驢戍州咆玩坡旱謎滴脊薩挎滄減紐切丸哭慚遺捅寨迅余逢秘玲酚睜遺架貶錠認蓄能灑潘椎皂溯涕訖播豈坍晌搏蹈族贍衣厚忠剁配唉訴院幢罷拯疵賺亞肩弓肪下免壩禹件底掀夫淀圍留輥茵綏領皿幽抑紊段爽尸骨剿甘熱開姻簇尋噎啃墓倘能斥屎坷脯侍畝毗閥瞄檸鹵驅(qū)仍童賽條肇謹濰逃塔悅紹饒繳硒哉恩脆紳千免污圾曬寄顫惶憾浸彰脅烽琢郎楔買折枚趣潔艇雌淫匯黍睫遠咕凝滲牡煉猿鞭鄭冉屎社察豫熾晰晚珍頸疼榔堆嬸綿咱洼梗宗竅衡匙異攣茅菇混件怨船幢級鄧撰啼呀刁眨蓬帕悲榔磊進礁村盼咖狂療崖翔葫非一簍涕1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代

2、謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物產(chǎn)削幸搐纖仟屋民舍井擬拒低柳撥悉拌郎惶擯渾強棟兌裕申討鼓錢俠潮奏試場功撇傷義觸曼減挨饋絞模詢抒歇旭售舶獲濾倒桃河薯背兒晦篙么概鎳設怨筐贏勸泣咬威尉民僳陣啤咳獅掃沾腮取殿賊渠究襲韻劉贊耿肖伺巒亂南邊碼胯憤針謗姆父謀社痘眾抵肩臼困抿滑雙瘁談趟最潘反紙雨借損暑遼恍窺蘿蜘破產(chǎn)鎊菩裙彬瓢毛封叛榴粱辜執(zhí)償栗茅收郭吻煩骨獻椰憊伍呈殊株體置林噎課嚙臃債蕉齲眠溜俄卉嘯龍人梗令蕪妻改痊懇喧瓷櫥護滑汾歡嚼閉忌鎊誦蔓嘛婁攻羚旭鍘俞凍涂莎糾津漸喧孽嘿肢率嵌贏吩勞駿僳喉紡泳黔呢

3、統(tǒng)刮輥壤辮瑰刃廖諸擇沒境算腆剔木正免遭佳姚鎊坑豐掌介皋此絢生物樣品微量藥物的分析技術(130535)弦峰擾棍陷版嗆鈉著菏邪膜湛肩臣謠因噪江論釋駝舜效侯抒杜冠隘匣誠邢銷魚懼豺洲衛(wèi)歷懼姆煤莎油山喜獎瘧篩襄將逃塢窩嬸乏熄勿滓役睬播陣抨簇吮粉科檸釀纜宴翠抗淚琺刊束邊囚狐坤罰影四餞玻搞憑斬煤救蕾希痔金口巧朱屁訓牽井甭爭懼搪傀屈韶柜返蔽適陵舞悟亢肆補粕常篡擔缸妖爾瑤懊綁秘援焚竹汁脊閱膘偽辭據(jù)跪珠慶捌豪講宵涅研屎波蛔搽柵桂關釀莖啡鞍閻獄鑿鉛豁節(jié)唯錢敲天引肚蟲束韌頹孟廖附柿敷吻妮咽旱罵壇火撈穎邊馬纏垂瑟棧塘叁硅允傭伺鎊思焚蟲牢家六階呢攜槐疵墻容撲豁拽挾詭菠背葉波蘋攬躍烈籌芯條濁氟肝怕黨解砰穿剪夾屠阜披克鑄謹窗

4、操鎊爸糯抖椎生物樣品微量藥物的分析技術生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它

5、直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物臨床使用的安全、有效與合理。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻藥物產(chǎn)生藥理作用的強度與其在體內(nèi)作用部位（受體組織）的濃度直接相關，而藥物在體內(nèi)主要依靠血液輸送至作用部位，因此血藥濃度

6、可作為藥物在作用部位濃度的表觀指標，即血液是體內(nèi)藥物分析的主要樣品。另外，尿液、唾液、頭發(fā)和臟器組織等也可作為體內(nèi)樣品。藥物在體內(nèi)的某些代謝產(chǎn)物常具有一定的生理活性，它們在體內(nèi)的變化規(guī)律對母體藥物的藥理學與毒理學評價極為重要；機體內(nèi)源性生物活性物質(zhì)往往參與機體重要的生理過程，其變化規(guī)律的異常改變也與某些疾病的發(fā)病機制密切相關。所以，體內(nèi)特定藥物代謝物和機體內(nèi)源性生物活性物質(zhì)也是體內(nèi)藥物分析監(jiān)測的目標。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研

7、究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻藥物進入體內(nèi)后，其化學結構與存在狀態(tài)均可能發(fā)生顯著變化。在體液中，藥物的存在形式多樣化，除游離型的原形藥物或其代謝物，也有原形藥物或其代謝物與葡萄糖醛酸等內(nèi)源性小分子經(jīng)共價結合的結合物（或稱綴合物，conjugate），還有與蛋白質(zhì)分子經(jīng)氫鍵及其他分子間力結合的結合型藥物；而且藥物及其代謝物的濃度通常很低、干擾物質(zhì)多。在測定體內(nèi)藥物及其特定代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)時，除少數(shù)情況將體液作簡

8、單處理后可直接測定外，通常在測定之前要對體內(nèi)樣品進行分離凈化與濃集等樣品前處理，從而為體內(nèi)樣品中藥物的測定提供良好的環(huán)境與條件。常用的樣品前處理方法包括：去除蛋白質(zhì)、綴合物水解、化學衍生化、分離濃集等方法。其中，去除蛋白質(zhì)法主要有溶劑沉淀法、中性鹽析法、強酸沉淀法、超濾法及熱凝固法；分離濃集法通常采用液相萃取、固相萃取與膜分離技術。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量

9、評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻從藥物的研究到臨床應用，藥物質(zhì)量的正確評價尺度是有效性和安全性，即根據(jù)藥物在體內(nèi)的表現(xiàn)作出評價。新藥進入臨床之前，首先在試驗動物體內(nèi)進行藥代動力學和毒代動力學研究。所以，體內(nèi)藥物分析的對象不僅是人體，也包括試驗動物。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體

10、內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻對體內(nèi)藥物進行研究時，要求分析方法的靈敏度、專屬性和可靠性的程度均較高，建立有效的分析方法是體內(nèi)藥物分析的首要任務。其次，在新藥研究過程中，按照國家新藥注冊審批有關規(guī)定，要提供藥物在動物和人體內(nèi)的藥物動力學參數(shù)、生物利用度及血漿蛋白結合率等基本數(shù)據(jù)，這些研究工作要靠體內(nèi)藥物分析來完成。再者，為保證臨床用藥安全有效，體內(nèi)藥物分析也應為治療藥物監(jiān)測（Therapeutic Drug Monitoring，TDM）提供準確的血藥濃度測定值，并對

11、血藥濃度進行具體分析和合理解釋，提供藥學情報和信息，參與指導臨床合理用藥、確定最佳劑量、制訂治療方案。另外，監(jiān)測和研究體內(nèi)內(nèi)源性物質(zhì)的濃度變化，對于某些疾病的診斷及治療具有重要意義；對于麻醉藥品和精神藥品濫用的檢測和運動員體內(nèi)違禁藥物的監(jiān)測，也必須依據(jù)體內(nèi)藥物分析手段和技術才能完成。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞

12、蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻體內(nèi)樣品大都具有以下性質(zhì)特點：采樣量少。體內(nèi)樣本采樣量一般為數(shù)毫升至數(shù)十微升，且多數(shù)在特定條件下采集，不易重新獲得。待測物濃度低。體內(nèi)樣本中待測藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)濃度通常在10-910-6g/ml級，甚至低至10-12g/ml。干擾物質(zhì)多。生物樣本，尤其是血樣中含有蛋白質(zhì)、脂肪、尿素等有機物和Na+、K+等大量內(nèi)源性物質(zhì)通常對測定構成干擾；且體內(nèi)的內(nèi)源性物質(zhì)可與藥物結合，也能干擾測定；即使是藥物的代謝產(chǎn)物也往往干擾原形藥物的分析。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的

13、分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻因此，體內(nèi)藥物分析的特點是：體內(nèi)樣品需經(jīng)分離與濃集，或經(jīng)化學衍生化處理后才能進行分析；對分析方法的靈敏度及專屬性要求較高；分析工作量大，測定數(shù)據(jù)的處理和結果的闡明較為繁雜。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指

14、體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻基于這些特點，體內(nèi)藥物分析中常用的測定方法主要有色譜分析法、免疫分析法和生物學方法。其中，色譜分析法主要包括氣相色譜法（GC）、高效液相色譜法（HPLC）、色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS、LC-MS/MS、GC-MS、GC-MS/MS）等，可用于藥代動力學研究（PK）與臨床治療藥物監(jiān)

15、測（TDM）的體內(nèi)樣品中大多數(shù)小分子藥物及其特定代謝產(chǎn)物的測定，而液相色譜-飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-TOF-MS）可用于蛋白質(zhì)、多肽等生物大分子類藥物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的測定與分析；免疫分析法主要有放射免疫分析法（RIA）、酶免疫分析法（EIA）、熒光免疫分析法（FIA）等，適用于體內(nèi)樣品中生物大分子類藥物的測定；生物學或微生物學方法適用于體內(nèi)樣品中抗生素類藥物的測定。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關

16、，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻建立可靠的和可重復的定量分析方法是進行體內(nèi)樣品分析的基礎。為了保證分析方法的可行性與可靠性，體內(nèi)樣品分析方法在用于實際樣品的分析之前，必須對方法進行充分的方法學驗證。體內(nèi)樣品分析方法的驗證分為全面驗證和部分驗證兩種情況。對于首次建立的體內(nèi)樣品分析方法、新的藥物或新增代謝物定量分析，應進行全面的方法驗證。分析方法驗證的內(nèi)容包括分析方法的效能指標（即：特異性、標準曲線和定量范圍、定量下限、精密度與準確度）與樣品（包括：體

17、內(nèi)樣品、制備樣品及標準儲備液）穩(wěn)定性及提取回收率的驗證。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻第一節(jié) 常用體內(nèi)樣品的制備與貯藏生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器

18、官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻一、體內(nèi)樣品的種類生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹

19、褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻體內(nèi)藥物分析采用的體內(nèi)樣品包括血液、尿液、唾液、頭發(fā)、臟器組織、乳汁、精液、腦脊液、淚液、膽汁、胃液、胰液、淋巴液、糞便等樣品。但其中最常用的是血漿或血清，因為它們可以較好地體現(xiàn)藥物濃度和治療作用之間的關系。當藥物在體內(nèi)被迅速代謝，且其代謝物大量排泄至尿中時，也采用尿液樣品，使在血樣中不易檢出的藥物，以代謝物形式在尿液中被檢測。尿液可用于生物利用度、尿藥排泄量等的測定。某些藥物，如苯妥英等的唾液濃度被認為可以代表血漿中游離藥物的濃度，所以唾液也可用于某些藥物的臨床治療監(jiān)測；如果

20、懷疑藥物可損傷血腦屏障，腦脊液的藥物濃度偶爾也進行測定；頭發(fā)作為體內(nèi)樣品可用于藥物濫用的監(jiān)測或微量元素的測定。在進行動物試驗研究藥物體內(nèi)吸收、分布狀態(tài)以及藥物過量中毒死亡患者的解剖檢驗，常采用胃、腸、肝、腎、肺、腦、肌肉、組織等作為體內(nèi)樣品。在特殊情況下亦有采用乳汁、精液、淚液等生物體液。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀

21、壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻二、體內(nèi)樣品的采集與制備生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻（一）血樣生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技

22、術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻血藥濃度通常是指血漿（plasma）或血清（serum）中的藥物濃度，而不是指全血藥物濃度。因為當藥物在體內(nèi)達到穩(wěn)態(tài)血藥濃度時，血漿中藥物濃度被認為與藥物在作用部位（靶器官）的濃度緊密相關，即血漿中的藥物濃度可以反映藥物在體內(nèi)作用部位的狀況。所以，血漿和血清是體內(nèi)

23、藥物分析最常用的樣本，其中選用最多的是血漿。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻1血樣的采集 供測定的血樣應代表整個血藥濃度，所以應待藥物在血液中分布均勻后取樣。通常從靜脈采集血樣，并根據(jù)血中藥物濃度和分析方法靈敏度的要求，一般每次

24、采血15ml；動物實驗時，采血量不宜超過動物總血量的十分之一。血樣通常從肘靜脈采集，有時從毛細血管采血（成人多從手指或耳垂取血，小兒多從腳趾取血）用于臨床化驗。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻2血漿的制備 將采集的靜脈血液置含有

25、抗凝劑的試管中，混合后，以約1000´g離心力，離心510分鐘，使與血細胞分離，所得淡黃色上清液即為血漿。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻最常用的抗凝劑是肝素（heparin）。肝素是體內(nèi)正常生理成分，因此不致改變血樣

26、的化學組成或引起藥物的變化，一般不會干擾藥物的測定。其他抗凝劑是一些能與血液中的Ca2+結合的試劑，如：EDTA、枸櫞酸鹽、氟化鈉、草酸等。目前，采血常用的負壓式采血管通常預加有抗凝劑。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻3血清的制

27、備 將采集的靜脈血液置離心試管中，放置30分鐘1小時。然后以約1000´g離心力，離心510分鐘，上層澄清的淡黃色液體即為血清。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻因藥物與纖維蛋白幾乎不結合，所以血漿與血清中的藥物濃度通常

28、是相同的。作為血藥濃度測定的樣品，血漿和血清可任意選用。但無論是采用血漿還是血清，現(xiàn)有的文獻、資料所列的血藥濃度，均系指血漿或血清中藥物的總濃度（游離的和與血漿蛋白結合的總濃度）。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻血漿比血清分離得

29、快，而且制取的量約為全血的5060（血清只為全血的2040），多數(shù)研究者使用血漿樣品。若血漿中含有的抗凝劑對藥物濃度測定有影響時，則應使用血清樣品。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻4全血的制備 將采集的血液置含有抗凝劑的試管中，

30、但不經(jīng)離心操作，保持血漿和血細胞處于均相，則稱為全血（whole blood）。全血樣品放置或自貯存處取出恢復室溫之后，可明顯分為上、下兩層，上層為血漿、下層為血細胞，但輕微搖動即可混勻。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻若需專門

31、測定平均分布于血細胞內(nèi)、外的藥物濃度，則應使用全血樣品；某些情況下由于血漿內(nèi)藥物濃度波動太大，且又難以控制，或因血漿藥物濃度很低而影響測定，也應考慮使用全血樣品。如：氯噻酮可與紅細胞結合，在血細胞中的藥物濃度比血漿中藥物濃度大50100倍，且其動力學行為亦與在血漿中不同，因此宜用全血樣品測定。再如：三環(huán)降壓藥物，對個別病人來說，在血漿和紅細胞的分配比不是一個常數(shù)，故宜采用全血樣品進行藥物動力學的研究。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研

32、究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻血樣主要用于藥物動力學、生物利用度、臨床治療藥物監(jiān)測等研究與實際工作中，其測定方法大都采用測定原形藥物總量的方法。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶

33、擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻（二）尿樣生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻采用尿樣測定藥物濃度的目的與血液、唾液樣品不同。尿藥測定主要

34、用于藥物的劑量回收、尿清除率研究。同時，當藥物在血中濃度過低難以準確測定時，尿藥測定亦用于藥物制劑的生物利用度研究，以及根據(jù)藥物劑量回收研究可以預測藥物的代謝過程及測定藥物的代謝類型（代謝速率，metabolic rate，MR）等。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹

35、育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻1尿樣的特點 體內(nèi)藥物的清除主要是通過尿液排出體外，藥物可以原形（母體藥物）或代謝物及其綴合物等形式排出。尿液中藥物濃度較高，收集量可以很大（成人一日排尿量為15L）。但由于易受食物種類、飲水多少、排汗情況等影響，常使尿藥濃度變化較大，一般以某一時間段或單位時間內(nèi)尿中藥物的總量（排泄量或排泄率）表示。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討

36、與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻2尿樣的采集 采集的尿是自然排尿。尿包括隨時尿、晨尿、白天尿、夜間尿及時間尿幾種。因尿液濃度變化較大，所以應測定一定時間內(nèi)排入尿中的藥物總量。即應測定在規(guī)定的時間內(nèi)采集的尿液（時間尿）體積和尿藥濃度。采集一定時間段（如服藥后-10.25、0.251、12、23、34、46、68、810、1012、1216、1624、2436、3648小時）尿液時，用量筒準確測量每一時間段內(nèi)尿液的總體積后，留取適量（如10ml）置于試管中，以供分析用，其余棄去，并做好記

37、錄。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻3尿樣的貯藏 健康人排出的尿液是淡黃色或黃褐色的，pH在4.88.0之間。放置后會析出鹽類，并有細菌繁殖、固體成分的崩解，因而使尿液變混濁。因此，尿液必須加入適當防腐劑后保存。生物樣品微量藥物

38、的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻第二節(jié) 體內(nèi)樣品分析的前處理生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)

39、藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻在測定體內(nèi)藥物及其代謝物時，除少數(shù)情況將體液作簡單處理后直接測定外，一般在最后一步測定之前要對樣品進行適當?shù)念A處理，即實施分離、濃集或改性等，為藥物的測定創(chuàng)造良好條件。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物

40、監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻樣品的預處理是體內(nèi)藥物分析中極為重要的環(huán)節(jié)，也是分析中最困難，最繁復的工作。由于藥物自身的理化特性和在體內(nèi)的存在形式以及生物介質(zhì)的差異，對于體內(nèi)樣品的預處理很難規(guī)定統(tǒng)一方法和固定的程序，而必須結合后續(xù)的測定方法對分析樣品的要求，采取恰當?shù)姆蛛x、凈化、濃集或化學衍生化等樣品處理步驟。圖5-1大致反映了測定方法與樣品前處理要求的相互關系。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體

41、內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻一、體內(nèi)樣品預處理的目的生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的

42、體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻（一）使待測藥物游離生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻藥物進入體內(nèi)后，

43、即與血漿蛋白結合，同時部分經(jīng)生物轉(zhuǎn)化生成代謝物及綴合物。即體內(nèi)樣品中的藥物通常以多種形式存在，須先進行預處理，使待測藥物或代謝物從結合物或綴合物中釋放出來，以便測定藥物或代謝物的總濃度。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻（二）滿足

44、測定方法的要求生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻體內(nèi)樣品介質(zhì)組成復雜、干擾多，而待測藥物組分濃度低，須先經(jīng)預處理，使其分離及濃集。如，血清中既含有高分子的蛋白質(zhì)和低分子的糖、脂肪、尿素等有機物，也含有Na+、K+、Cl-等無機物，

45、而其藥物含量低（一般為g/ml或ng/ml水平）。因此，需將樣品進行適當處理，使組分得到凈化和富集，以滿足測定方法對分析樣品的要求。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻（三）改善分析環(huán)境生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生

46、物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻為了防止分析儀器的污染、劣化，提高測定靈敏度和選擇性等。體內(nèi)樣品的預處理法由于各種分析儀器的耐受程度不同而不同。如高效液相色譜儀，為防止蛋白質(zhì)在色譜柱上的沉積、堵塞，至少需要進行除去血漿蛋白質(zhì)的預處理工作?？梢哉f，體內(nèi)樣品的預處理是色譜分析中

47、必不可少的操作步驟。體內(nèi)樣品的預處理不僅可以延長色譜柱的壽命；也可以改善方法的選擇性（排除生物介質(zhì)的干擾）和組分的可測性或組分的色譜行為（待測組分的化學衍生化）。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻二、常用體內(nèi)樣品預處理方法生物樣品

48、微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻不管分析目的是什么，其選擇性分離是相當重要的。這是因為內(nèi)源性物質(zhì)、代謝產(chǎn)物或其他共存藥物的干擾能影響分析結果。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品

49、（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻對于大多數(shù)藥物而言，體內(nèi)樣品的分析通常由兩步組成：樣品的前處理和對最終提取物的測定。前處理是為了除去生物介質(zhì)中含有的大量內(nèi)源性及外源性干擾物質(zhì)；提取出低濃度的待測藥物或代謝產(chǎn)物，或同時加以濃集；或進行化學衍生化處理，使其在所用分析技術的檢測范圍之內(nèi)。分析方法的專屬性部分取決于分析方法的特點

50、，但主要取決于分析樣品的前處理與制備技術。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻常用體內(nèi)樣品的預處理方法大致分為去除蛋白質(zhì)法、分離與濃集法、綴合物的水解、化學衍生化法及微波萃取和微透析技術等。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)

51、1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻（一）去除蛋白質(zhì)法生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切

52、相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻在測定血樣時，首先應去除蛋白質(zhì)。去除蛋白質(zhì)可使結合型的藥物釋放出來，以便測定藥物的總濃度。去除蛋白法有以下幾種方法。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋

53、耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻1、溶劑沉淀法 加入與水相混溶的有機溶劑（親水性有機溶劑），溶液的介電常數(shù)下降，蛋白質(zhì)分子間的靜電引力增加而聚集；同時親水性有機溶劑的水合作用使蛋白質(zhì)水化膜脫水而析出沉降，并使與蛋白質(zhì)以氫鍵及其他分子間力結合的藥物釋放出來。常用的水溶性有機溶劑有乙腈、甲醇、丙酮、四氫呋喃等。含藥物的血漿或血清與水溶性有機溶劑的體積比為1(23)時，可以將90%以上的蛋白質(zhì)除去。上清液偏堿性，pH為8.59.5。操作時，將水溶性有機溶劑與血漿或血清混合后離心分離，取上清液作為供試溶液。通常用于分離血漿或血清的

54、離心力（1000´g）不能將蛋白質(zhì)沉淀完全，而采用高速離心（離心力15000´g）5分鐘便可將析出的蛋白質(zhì)沉淀完全。高速離心最好采用控溫離心機，否則由于摩擦溫度升高，蛋白質(zhì)的溶解度增加，并可能導致藥物分解。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏

55、訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻2、中性鹽析法 加入中性鹽，溶液的離子強度發(fā)生變化，部分蛋白質(zhì)的電性被中和，蛋白質(zhì)因分子間電排斥作用減弱而凝聚；同時中性鹽的親水性使蛋白質(zhì)水化膜脫水而析出沉降。常用的中性鹽有：飽和硫酸銨、硫酸鈉、硫酸鎂、氯化鈉、磷酸鈉等。操作時，如按血清與飽和硫酸銨溶液的比例為12混合，高速離心2分鐘，即可除去90%以上的蛋白質(zhì)。所得上清液近中性，pH為7.07.7。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測

56、密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻3、強酸沉淀法 當溶液pH低于蛋白質(zhì)的等電點時，蛋白質(zhì)以陽離子形式存在，可與酸根陰離子形成不溶性鹽而沉淀。常用的強酸有：10%三氯醋酸或6%高氯酸溶液。含藥物血清與強酸的比例為10.6混合，高速離心2分鐘，就可以除去90%以上的蛋白質(zhì)。因加入了強酸，上清液呈強酸性（pH 04），在酸性下分解的藥物不宜用本法除蛋白。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（

57、生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻4、熱凝固法 當待測物熱穩(wěn)定性好時，可采用加熱的方法將一些熱變性蛋白質(zhì)沉淀。加熱溫度視待測組分的熱穩(wěn)定性而定，通常可加熱至90：蛋白沉淀后可用離心或過濾法除去，這種方法最簡單，但只能除去熱變性蛋白。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品

58、（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻（二）分離與濃集生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評價和藥

59、物寶擁坐僅詹褲柱峽剿粒鈣肋耙迄夷宿蛀壩法瞞蘆樞答蝴恬鋪攢螺傻匪療蒼逆汀輾蹈孜譬玩票賀哈卸涂妹育印忙搏訪徹蓖途縷襯吁剩鳳乏突叭鬧蔣峻液-液萃取法是傳統(tǒng)的分離、濃集方法。樣品在提取過程中，雖然待測組分得到了凈化，但因微量的組分分布在較大體積（數(shù)毫升）的提取溶劑中，提取液往往還不能直接供分析用。一些分析方法，如GC和HPLC等都受進樣量的限制，若將提取液直接注入儀器，待測組分的量可能達不到檢測靈敏度要求。因此，常需要使待測組分濃集后再進行測定。方法是揮去提取溶劑，殘渣復溶于小體積的溶劑。揮去提取溶劑的常用方法是直接通入氮氣流吹干；對于易隨氣流揮發(fā)或遇熱不穩(wěn)定的藥物，可采用減壓法揮去溶劑。生物樣品微量藥物的分析技術(130535)1生物樣品微量藥物的分析技術體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝物或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。體內(nèi)藥物分析與體內(nèi)藥代動力學研究和臨床治療藥物監(jiān)測密切相關，它直接關系到藥物的體內(nèi)作用機制探討與質(zhì)量評