菠菜籽中脂肪酸成分的氣相色譜-質(zhì)譜分析ppt課件

1、 摘要本實驗以菠菜籽為原料，采用索氏提取法對菠菜籽中的脂肪酸成分進(jìn)展了提取。用KOH/CH3OH酯交換法進(jìn)展甲酯化脂肪酸，利用氣相色譜-質(zhì)譜法對樣品中的組成和含量進(jìn)展了檢測。實驗結(jié)果闡明：菠菜籽中含有6種脂肪酸，其中亞油酸含量為85.30，11-二十碳烯酸甲酯含量為1.08%，反式-9,12-十八碳二烯酸為1.28%，十五烷酸甲酯的含量約為10.99%，十八烷酸甲酯為0.72%，1-環(huán)己烷基乙醇含量為1.08%。其中飽和脂肪酸的相對含量為12.34，不飽和脂肪酸的相對含量大約為87.66。關(guān)鍵詞：菠菜籽；脂肪酸；分別鑒定；氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀；索氏提取法整體構(gòu)造l1前言l2 實驗資料與方法l3

2、分別鑒定l4 結(jié)果與討論l5 致 謝1 前言 脂肪酸構(gòu)造 脂肪酸是羧基-COOH)與脂肪烴基(開鏈烴)銜接而成的一元羧酸。它可以被看作烴的羧酸衍生物(甲酸除外)，通式是R-COON,R代表烴基。脂肪酸按其烴基構(gòu)造的不同可分為兩大類:一類是飽和脂肪酸，因其室溫下呈固態(tài)，又稱固體脂肪酸，如硬脂酸、棕櫚酸等;另一類是不飽和脂肪酸，因其室溫下呈液態(tài)，又稱液體脂肪酸2,3，如油酸、亞油酸、亞麻酸等。 脂肪酸的分類 脂肪酸分為飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸，其中飽和脂肪酸分為短鏈飽和脂肪酸和中鏈飽和脂肪酸；不飽和脂肪酸可分為單不飽和脂肪酸MU-FA和多不飽和脂肪酸(PUFA)。 脂肪酸的作用 1多不飽和脂肪酸與

3、心血管系統(tǒng)疾病 2多不飽和脂肪酸與生長發(fā)育 3多不飽和脂肪酸與抗癌 4多不飽和脂肪酸與免疫調(diào)理 5多不飽和脂肪酸與肥胖 6多不飽和脂肪酸與抗氧化氣相色譜-質(zhì)譜原理 使混合物中各組分在兩相間進(jìn)展分配，其中一相是固定不動的，稱為固定相。令一相是攜帶混合物流過此固定相的流體，稱為流動相。當(dāng)流動相中所含混合物經(jīng)過固定相時，就會與固定相發(fā)生作用。各組分在性質(zhì)和構(gòu)造上有存在差別，與固定相發(fā)生作用的大小、強弱也有差別。因此在同一推進(jìn)力作用下，不同組分在固定相中的滯留時間有長有短，從而按照先后不同的次序從固定相中流出。這種借在兩相間分配原理而使混合物中各組分分別的技術(shù)，稱為色譜法。 2 實驗資料與方法 原料與

4、試劑原料與試劑 菠菜種子菠菜種子: :鞍山農(nóng)貿(mào)市場鞍山農(nóng)貿(mào)市場 試劑：無水乙醇、石油醚、甲醇、氫氧化鉀、濃硫試劑：無水乙醇、石油醚、甲醇、氫氧化鉀、濃硫酸、正己烷、三氯甲烷、碘化鉀、冰乙酸。酸、正己烷、三氯甲烷、碘化鉀、冰乙酸。 儀器設(shè)備儀器設(shè)備 電熱恒溫鼓風(fēng)枯燥箱南京實驗儀器廠、華西電熱恒溫鼓風(fēng)枯燥箱南京實驗儀器廠、華西高速中藥粉碎機浙江省永康溪岸五金藥具廠、旋高速中藥粉碎機浙江省永康溪岸五金藥具廠、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上海亞榮生化儀器廠、索式提取器沈轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上海亞榮生化儀器廠、索式提取器沈陽市衛(wèi)工玻璃計器廠、離心機陽市衛(wèi)工玻璃計器廠、離心機( (上海安亭科學(xué)儀器上海安亭科學(xué)儀器廠廠) )、氣相色譜、

5、氣相色譜- -質(zhì)譜聯(lián)用儀質(zhì)譜聯(lián)用儀( (美國惠普公司美國惠普公司) )。菠菜籽粉碎處置實驗流程圖索氏提取器提取KOH-CH3OH甲酯化氣相色譜-質(zhì)譜分析數(shù)據(jù)處置與記錄脂肪酸的甲酯化FAME的制備準(zhǔn)確稱取油脂0.30.4g，參與1mol/L的氫氧化鉀-甲醇溶液3mL，60水浴30min(至油滴完全消逝)，冷卻后參與40mL濃硫酸-甲醇(1:7，V/V)溶液，放入恒溫振蕩搖床中38、130r/min酯化12h，用正已烷萃取2次，合并萃取液，用飽和Nacl溶液洗滌多次，無水Na2SO4枯燥，離心分層，取上清液FAME備用。脂肪酸甲酯化氣相色譜條件： 色譜柱：HP-525m0.20mm0.33m,彈性

6、石英毛細(xì)管柱；進(jìn)樣口溫度230；程序升溫100280堅持10min升溫速率為10/min.；分流比100：1。進(jìn)樣量0.4L，載氣流量1mL/min。脂肪酸甲酯化質(zhì)譜條件： 離子源為電子轟擊源；離子源溫度為230；電離電壓為70eV；電子倍增器電壓為2019V；發(fā)射電流為34.6A；接口溫度為230；質(zhì)量范圍為m/z 20-500。鑒定與分析按上述步驟得出菠菜籽脂肪油的GC-MS總離子流色譜圖圖1所示4.006.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.0022.0024.0026.005000000 1e+071.5e+07 2e+07 2.5e+07 3e+07

7、3.5e+07 4e+07 4.5e+07 5e+07 5.5e+07 6e+07 6.5e+07 7e+07Time-Abundance213456圖圖1 1菠菜籽的脂肪酸甲酯化的菠菜籽的脂肪酸甲酯化的GC/MSGC/MS圖圖經(jīng)過數(shù)據(jù)處置系統(tǒng)，按峰面積歸一化法分析確定的菠菜籽中脂肪酸的相對含量列于表1。所確定的化學(xué)成分的質(zhì)譜圖由聯(lián)用儀的計算機譜圖庫檢索，并分別與EPA/NIH及有關(guān)文獻(xiàn)對照確定其結(jié)果。分析結(jié)果與討論 結(jié)果 從實驗結(jié)果得出，菠菜籽中的脂肪酸以不飽和脂肪酸亞油酸為主，含量為85.30，在許多植物油中的亞油酸含量在40%左右，如大豆油為50-60%、花生油為37.6%、芝麻油為37

8、.7-48.4%、葵花籽油為70%14，可以看出菠菜籽中不飽和脂肪酸占87.66，其中亞油酸含量高達(dá)85.30，明顯高于普通植物種子中的亞油酸。 討論 亞油酸是人體不能合成，或是合成的量遠(yuǎn)不能滿足需求的脂肪酸，廣泛分布于植物的油脂中，為哺乳動物營養(yǎng)所必需。亞油酸是公認(rèn)的獨一的必需脂肪酸。由于亞油酸能降低血液膽固醇，預(yù)防動脈粥樣硬化而備受注重。反式脂肪酸存在很多食品中，其與人類很多疾病有關(guān)29，有必要在膳食中減少反式脂肪酸的攝入量。致謝致謝 本論文是在教師的悉心指點下完成的，從論文的選題、設(shè)計、實驗進(jìn)程直至論文的定稿，無不凝聚著教師的瀝瀝心血。恩師淵博的學(xué)問，嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)態(tài)度，孜孜以求、斗爭不息的任務(wù)作風(fēng)、對學(xué)科高度的把握與敏銳的洞察力、平易近人的精神風(fēng)范、詼諧幽默的談吐都使我受害匪淺，教師高尚的品德涵養(yǎng)和謙遜寬厚的為人更是我敬仰和學(xué)習(xí)的楷模，嚴(yán)謹(jǐn)向恩師給予的培育和照顧致以深深的敬意和衷心的贊賞！ 論文的完成也離不開多位教師的協(xié)助,實驗室的教師在實驗條件