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1、 1 無菌器材的準(zhǔn)備一一培養(yǎng)基的制備二二樣品的制備三三接種及培養(yǎng)四四計(jì)數(shù)報(bào)告五五 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學(xué)資源庫 目錄頁 2 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學(xué)資源庫 無菌器材的準(zhǔn)備一一1.檢驗(yàn)設(shè)備的準(zhǔn)備2.無菌器皿的準(zhǔn)備 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學(xué)資源庫 食品中霉菌和酵母菌計(jì)數(shù) 無菌器材的準(zhǔn)備1.檢驗(yàn)設(shè)備的準(zhǔn)備檢驗(yàn)設(shè)備的準(zhǔn)備:恒溫培養(yǎng)箱:36 1 ,30 1 恒溫水浴箱:46 1 感量為0.1 g 天平均質(zhì)器 振蕩器菌落計(jì)數(shù)器 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學(xué)資源庫 食品中霉菌和酵母菌計(jì)數(shù) 無菌器材的準(zhǔn)備2.無菌器皿的準(zhǔn)備無菌器皿的準(zhǔn)備:無菌吸管:1 mL (具0.01 mL 刻度)、10 mL (具0.1 m
2、L 刻度)或微量移液器及吸頭。 無菌錐形瓶:容量250 mL、500 mL。 無菌培養(yǎng)皿:直徑 90 mm。 2 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學(xué)資源庫 培養(yǎng)基的制備二二1.加熱溶解2.包扎滅菌 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學(xué)資源庫 食品中霉菌和酵母菌計(jì)數(shù) 培養(yǎng)基的制備1.加熱溶解加熱溶解:馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂 或孟加拉紅培養(yǎng)基干粉加于蒸餾水中,煮沸溶解,調(diào)節(jié)pH ,分裝于試管或錐形瓶。2.包扎滅菌包扎滅菌:121 高壓滅菌20 min。 2 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學(xué)資源庫 樣品的制備三三1.固體和半固體樣品的制備2.液體樣品的制備 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學(xué)資源庫 食品中霉菌和酵母菌計(jì)數(shù) 樣品的制備1.固體
3、和半固體樣品固體和半固體樣品的制備的制備:稱取25 g樣品至盛有225 mL滅菌蒸餾水的錐形瓶中,充分振搖,即為1:10稀釋液,或放入盛有225 mL無菌蒸餾水的均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì)器拍打2 min,制成1:10的樣品勻液。 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學(xué)資源庫 食品中霉菌和酵母菌計(jì)數(shù) 樣品的制備2.液體樣品液體樣品的制備的制備:以無菌吸管吸取25 mL樣品至盛有225 mL無菌蒸餾水的錐形瓶(可在瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠)中,充分混勻,制成1:10的樣品勻液。 2 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學(xué)資源庫 接種及培養(yǎng)四四1.系列稀釋2.接種培養(yǎng) 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學(xué)資源庫 食品中霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)
4、 接種及培養(yǎng)1.系列稀釋系列稀釋:樣品稀釋取1 mL 1:10稀釋液注入含有9 mL無菌水的試管中,另換一支1 mL無菌吸管反復(fù)吹吸,此液為1:100稀釋級(jí)。按上述操作程序,制備10倍遞增稀釋液,如此每遞增稀釋一次即更換一次無菌吸管。 25ml1ml檢樣檢樣225ml無菌水無菌水9ml無菌水無菌水 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學(xué)資源庫 食品中霉菌和酵母菌計(jì)數(shù) 接種及培養(yǎng)2.接種培養(yǎng)接種培養(yǎng):選擇2-3個(gè)適宜稀釋度的樣品均液,吸取該稀釋度的吸管移取1 mL稀釋液于無菌平皿中,每個(gè)稀釋度做2個(gè)平皿。及時(shí)將15-20 mL冷卻至46 的馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂或孟加拉紅培養(yǎng)基傾注于平皿,并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿,使其混合
5、均勻。同時(shí)將作空白對(duì)照。待瓊脂凝固后,將平板倒置于(28 1)溫箱培養(yǎng)5 d,觀察并記錄。 2 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學(xué)資源庫 計(jì)數(shù)報(bào)告五五1.菌落計(jì)數(shù)2.結(jié)果報(bào)告 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學(xué)資源庫 食品中霉菌和酵母菌計(jì)數(shù) 計(jì)數(shù)報(bào)告1.菌落計(jì)數(shù)菌落計(jì)數(shù):肉眼觀察,必要時(shí)可用放大鏡,菌落計(jì)數(shù)以菌落形成單位CFU表示。選取菌落數(shù)在10-150 CFU的平板,根據(jù)菌落形態(tài)分別計(jì)數(shù)霉菌和酵母數(shù)。霉菌蔓延生長覆蓋整個(gè)平板的可記錄為多不可計(jì)。菌落數(shù)應(yīng)采用兩個(gè)平板的平均數(shù)。 1 食品營養(yǎng)與檢測專業(yè)教學(xué)資源庫 食品中霉菌和酵母菌計(jì)數(shù) 計(jì)數(shù)報(bào)告2.結(jié)果報(bào)告結(jié)果報(bào)告: 若所有平板上菌落數(shù)均大于150 CFU,則對(duì)稀釋度最高的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),其他平板可記為“多不可計(jì)”,結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計(jì)算。 若所有平板上菌落數(shù)均小于10 CFU,則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。若所有稀釋度平板均無
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