動(dòng)物細(xì)胞工程學(xué)案

1、 動(dòng)物細(xì)胞工程 1簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程、條件及應(yīng)用。2簡(jiǎn)述通過(guò)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆動(dòng)物的過(guò)程和應(yīng)用前景。1舉例說(shuō)出動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的原理和應(yīng)用。2舉例說(shuō)出單克隆抗體技術(shù)的原理和應(yīng)用。一、動(dòng)物細(xì)胞工程的常用技術(shù)手段動(dòng)物細(xì)胞工程的常用技術(shù)手段有_、動(dòng)物細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等，其中_技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1概念動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成_，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和_。2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程動(dòng)物_或幼齡動(dòng)物的器官、組織 剪碎，用_或膠原蛋白酶處理單個(gè)細(xì)胞（分離細(xì)胞）加培養(yǎng)液細(xì)胞懸液 _培養(yǎng)_培養(yǎng) 細(xì)胞株 _培養(yǎng)遺

2、傳物質(zhì)改變細(xì)胞系（1）原代培養(yǎng)：將動(dòng)物組織消化后_培養(yǎng)的過(guò)程。（2）傳代培養(yǎng)：把_培養(yǎng)增殖的細(xì)胞定期用_處理，使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來(lái)，然后將其分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)的過(guò)程。（3）細(xì)胞株：傳代培養(yǎng)的細(xì)胞能傳到1050代，這種傳代細(xì)胞叫做_。（4）細(xì)胞系：傳代培養(yǎng)至50代后，少部分細(xì)胞的_會(huì)發(fā)生改變，具有癌變的特點(diǎn)，能無(wú)限地傳代下去，這種傳代細(xì)胞叫做_。思考：所培養(yǎng)的細(xì)胞具有哪些特點(diǎn)？3動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具應(yīng)進(jìn)行_處理。（2）營(yíng)養(yǎng)：合成培養(yǎng)基的成分包括糖、_、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入_、血漿等一些天然成分。（3）溫度：適宜的

3、溫度為_(kāi)±0.5 ；適宜pH為_(kāi)7.4。（4）氣體環(huán)境：95%空氣加5%_。4動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用（1）生產(chǎn)_疫苗、干擾素、單克隆抗體等。（2）動(dòng)物細(xì)胞是基因工程技術(shù)中常用的受體細(xì)胞。（3）為皮膚大面積燒傷病人培養(yǎng)供_。（4）用于檢測(cè)_。（5）科學(xué)家培養(yǎng)正常的或各種病變的細(xì)胞，用于生理、_、藥理等方面的研究，為治療和預(yù)防疾病提供理論依據(jù)。三、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1動(dòng)物核移植動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的_，移入另一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的_細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為_(kāi)。2種類哺乳動(dòng)物核移植可以分為_(kāi)細(xì)胞核移

4、植和_細(xì)胞核移植。動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度_胚胎細(xì)胞核移植。3體細(xì)胞核移植的過(guò)程4體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景（1）加速家畜_改良進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。（2）保護(hù)_物種。（3）生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。（4）轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物細(xì)胞、組織和器官可以作為_(kāi)移植的供體。（5）人的核移植胚胎干細(xì)胞經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)分化，形成相應(yīng)的組織、器官后，可以用于組織、器官的移植。（6）研究克隆動(dòng)物和克隆細(xì)胞可使人類更深入地了解胚胎發(fā)育及衰老過(guò)程。（7）用_做疾病模型，有利于人們追蹤研究疾病的發(fā)展過(guò)程和治療疾病。5體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題克隆動(dòng)物存在健康問(wèn)題，許多還表現(xiàn)出_和遺傳缺陷等。四、動(dòng)物細(xì)胞融合1概念動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指

5、_或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成_的過(guò)程。融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱為_(kāi)。2動(dòng)物細(xì)胞融合的基本原理和方法（1）原理：膜的_。（2）方法：與植物原生質(zhì)體融合的方法類似，常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、_、電激等。五、單克隆抗體1原理每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體，B淋巴細(xì)胞在體外_增殖，而腫瘤細(xì)胞具有_增殖的特點(diǎn)，將_B淋巴細(xì)胞與_融合，可以使雜交細(xì)胞具有兩個(gè)親本的遺傳特性，既能_增殖又能產(chǎn)生_抗體。2單克隆抗體的制備（1）過(guò)程： （2）雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能迅速大量_，又能產(chǎn)生_的抗體。（3）單克隆抗體的特點(diǎn)：_強(qiáng)、_高、產(chǎn)量大。3單克隆抗體的應(yīng)用（1）作為診斷試劑：能準(zhǔn)

6、確識(shí)別各種_物質(zhì)的細(xì)微差異，并與一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合。（2）用于治療疾病和運(yùn)載藥物：制成“生物導(dǎo)彈”。思考：治療癌癥時(shí)，能否讓治療癌癥的藥物只殺癌細(xì)胞，不殺正常體細(xì)胞？題型一 動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)【例1】 關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合的說(shuō)法不正確的是（）。A動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程B動(dòng)物細(xì)胞融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞稱為雜交細(xì)胞C常用于誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的手段有：聚乙二醇、滅活的病毒、電激、紫外線照射D細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能題型二 動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆技術(shù)【例2】 （2011·北京朝陽(yáng)

7、期末）下列有關(guān)克隆的敘述，錯(cuò)誤的是（）。A動(dòng)物難以克隆的根本原因是基因組中的基因不完整B細(xì)胞克隆可用于從普通細(xì)胞系中分離出缺乏特殊基因的突變細(xì)胞系C“多利”綿羊的性狀與供核綿羊不完全相同D克隆動(dòng)物的核心技術(shù)手段是核移植，屬于無(wú)性生殖題型三 單克隆抗體的制備【例3】 下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。（1）_技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。（2）在圖中HAT培養(yǎng)上，未融合的_和融合的_都會(huì)死亡，只有融合的雜種細(xì)胞才能生長(zhǎng)。動(dòng)物細(xì)胞融合除了采用植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合常用的誘導(dǎo)劑外，還可以采用_。（3）單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最主要的優(yōu)點(diǎn)是_。（4）選出的雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的迅速_特點(diǎn)，

8、又具備淋巴細(xì)胞的_特點(diǎn)，經(jīng)過(guò)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行_和_，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。最后將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或小鼠腹腔內(nèi)增殖，從_或_中，就可以提取出大量的單克隆抗體了。（5）淋巴細(xì)胞是由動(dòng)物體_中的_細(xì)胞分化、發(fā)育而來(lái)的。1下列不屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)必需條件的是（）。A無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境B適宜的溫度和pHCO2等氣體環(huán)境D適宜的光照條件2在動(dòng)物細(xì)胞工程中，其他細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)的一項(xiàng)技術(shù)是（）。A動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)B細(xì)胞核移植技術(shù)C動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)D生產(chǎn)單克隆抗體的技術(shù)3下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是（）。A動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的就是獲得細(xì)胞分

9、泌蛋白B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶處理使細(xì)胞分散開(kāi)C動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)通常不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象D可以通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得完整的動(dòng)物個(gè)體4 下列有關(guān)克隆綿羊“多利”的說(shuō)法，不正確的是（）。A“多利”的誕生屬無(wú)性繁殖B“多利”的誕生采用了核移植技術(shù)C“多利”的誕生采用了細(xì)胞融合技術(shù)D動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是整個(gè)技術(shù)的基礎(chǔ)5下列有關(guān)核移植的說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）。A用核移植得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物B核移植的受體細(xì)胞最好是受精卵C核移植可以充分發(fā)揮優(yōu)良種畜的生殖潛力D核移植得到的克隆動(dòng)物屬于無(wú)性生殖答案：一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)二、1.單個(gè)細(xì)胞增殖2胚胎胰蛋白酶原代傳代傳代（1）初次（2）原代胰蛋白酶（3）細(xì)胞株（4）遺

10、傳物質(zhì)細(xì)胞系思考：貼壁生長(zhǎng)，接觸抑制。3（1）無(wú)菌（2）氨基酸血清（3）36.57.2（4）CO24（1）病毒（3）移植的皮膚（4）有毒物質(zhì)（5）病理三、1.細(xì)胞核卵母克隆動(dòng)物2胚胎體高于4（1）遺傳（2）瀕危（4）異種（7）克隆動(dòng)物5生理答案：一、1.兩個(gè)一個(gè)細(xì)胞雜交細(xì)胞2（1）流動(dòng)性（2）滅活的病毒二、1.不能無(wú)限無(wú)限單個(gè)骨髓瘤細(xì)胞無(wú)限單一2（1）B瘤（2）繁殖專一（3）特異性靈敏度3（1）抗原思考：把單克隆抗體與放射性同位素、化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素相結(jié)合，制成“生物導(dǎo)彈”，使之專殺癌細(xì)胞。題型一答案：C解析：紫外線照射不能誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合，物理誘導(dǎo)方法還有離心、振動(dòng)等。題型二解析：動(dòng)物難以克

11、隆的原因是，動(dòng)物細(xì)胞的全能性會(huì)隨著動(dòng)物細(xì)胞分化程度的提高而逐漸受到限制，分化潛能逐漸變?nèi)?，因而用體細(xì)胞克隆的動(dòng)物實(shí)際是通過(guò)核移植來(lái)實(shí)現(xiàn)的。其全能性受到限制的根本原因是基因組中某些基因的表達(dá)受限制，而不是基因的不完整。細(xì)胞克隆即通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)獲得相同細(xì)胞后代的過(guò)程，在培養(yǎng)的過(guò)程中，可以利用特定的篩選培養(yǎng)基在普通細(xì)胞系中分離出特定基因發(fā)生突變的細(xì)胞。“多利”是通過(guò)核移植技術(shù)獲得的，其絕大多數(shù)性狀與供核綿羊相同，但部分性狀是由細(xì)胞質(zhì)中的基因決定的，并且基因的表達(dá)還要受到環(huán)境的影響，因而C項(xiàng)正確。核移植過(guò)程中沒(méi)有經(jīng)過(guò)兩性生殖細(xì)胞的兩兩結(jié)合，因而屬于無(wú)性生殖。答案：A題型三解析：解決本題首要要對(duì)課本內(nèi)容熟

12、練掌握，命題的主要方式是對(duì)課本內(nèi)容進(jìn)行挖空，所以立足課本是解決這類問(wèn)題的關(guān)鍵。細(xì)胞融合技術(shù)最主要的應(yīng)用就是制備單克隆抗體，動(dòng)物細(xì)胞融合和植物細(xì)胞融合的不同點(diǎn)在于動(dòng)物細(xì)胞融合可以使用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo)。滅活是指使病毒失去感染能力，但是具有誘導(dǎo)細(xì)胞融合的能力。答案：（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（2）親本細(xì)胞具有同核的細(xì)胞滅活的病毒（3）特異性強(qiáng)，靈敏度高，并可大量制備（4）在體外大量增殖分泌專一克隆化培養(yǎng)抗體檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液小鼠腹水（5）骨髓造血干答案：1D2.A3B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的主要是利用有絲分裂的原理，獲得大量具有相同遺傳特性的細(xì)胞；通常培養(yǎng)前要將動(dòng)物組織用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理細(xì)胞，使其分散開(kāi)；分散的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中很快就貼附在瓶壁上生長(zhǎng)，當(dāng)生長(zhǎng)到