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文檔簡介

1、實驗四糖發(fā)酵實驗一、目的要求1.了解糖發(fā)酵的原理和在腸道細菌鑒定中的重要作用。2.掌握通過糖發(fā)酵鑒別不同微生物的方法。二、基本原理 糖發(fā)酵試驗是最常用的生化反應，在腸道細菌的鑒定上尤為重要。絕大多數細菌都能利用糖類作為碳源和能源，但是它們在分解糖的能力上有很大的差異，有些細菌能分解某種糖并產酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和氣體（如氫、甲烷、二氧化碳等）；有些細菌只產酸不產氣。例如大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖產酸并產氣；傷寒桿菌能分解葡萄糖產酸不產氣，不能分解乳糖；普通變形桿菌分解葡萄糖產酸產氣，不能分解乳糖。二、基本原理 酸的產生可利用指示劑來斷定。在配制培養(yǎng)基時預先加入溴甲酚紫Ph5.2（黃色）-

2、6.8（紫色），當發(fā)酵產酸時，可使培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S色。 氣體的產生可由發(fā)酵管中倒置的德漢氏小管中有無氣泡來證明。 三、實驗材料1.大腸桿菌，普通變形桿菌（ Proteus vulgaris）斜面各1支；2.盛有葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管和乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管各3支（內裝有倒置的德漢氏小管），試管架，接種環(huán)等。圖1 糖類發(fā)酵試驗 四、操作步驟四、操作步驟1、編號 用記號筆在各試管上分別標明發(fā)酵培養(yǎng)基名稱和所接種的菌名。2、接種 取盛有葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管3支，按編號1支接種大腸桿菌，另1支接種普通變形桿菌，第3支不接種，作為對照。另取乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管3支，同樣1支接種大腸桿菌，1支接種普通變形桿菌，第3支不接種，作為對照。3將上述已接種的葡萄糖和乳糖發(fā)酵試管和對照管置37溫室中培養(yǎng)24小時。 注意事項： 接種后應輕輕搖動試管，使其均勻，防止倒置的小管進入氣泡。否則會造成假象，得出錯誤答案。觀察結果: 觀察結果時，看各管顏色變化及杜氏小管有無氣泡。 產酸產氣用“”表示； 只產酸不產氣用“+”表示； 不產酸也不產氣用“”表示

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