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文檔簡介
1、操作操作環(huán)境環(huán)境操作操作對象對象操作水平操作水平基本過程基本過程結(jié)果結(jié)果生物生物體外體外基基因因DNA分子分子水平水平剪切剪切連接連接導(dǎo)入導(dǎo)入表達(dá)表達(dá)定向地改定向地改造生物的造生物的遺傳性狀遺傳性狀項(xiàng)項(xiàng)目目Ecoli DNA連接酶連接酶T4DNA連接酶連接酶來來源源_特特點(diǎn)點(diǎn)只能只能“縫合縫合”具具有有 _的雙鏈的雙鏈DNA片段片段既可以既可以“縫合縫合”雙鏈雙鏈DNA片段互片段互補(bǔ)的補(bǔ)的 _，也可以，也可以“縫合縫合”雙鏈雙鏈DNA片段的片段的 _項(xiàng)目項(xiàng)目作用作用應(yīng)用應(yīng)用限制性核限制性核酸內(nèi)切酶酸內(nèi)切酶使特定部位的磷酸使特定部位的磷酸二酯鍵斷裂二酯鍵斷裂用于提取目的基因用于提取目的基因和切割
2、載體和切割載體DNA連接酶連接酶在在DNA片段之間重片段之間重新形成磷酸二酯鍵新形成磷酸二酯鍵用于目的基因和載用于目的基因和載體的連接體的連接項(xiàng)目項(xiàng)目DNA連接酶連接酶DNA聚合酶聚合酶相同點(diǎn)相同點(diǎn)作用實(shí)質(zhì)相同，都是催化兩個核苷酸之間形作用實(shí)質(zhì)相同，都是催化兩個核苷酸之間形成磷酸二酯鍵成磷酸二酯鍵不不同同點(diǎn)點(diǎn)是否需是否需要模板要模板不需要不需要需要需要接接DNA鏈鏈雙鏈雙鏈單鏈單鏈作用過程作用過程在兩個在兩個DNA片段間片段間形成磷酸二酯鍵形成磷酸二酯鍵將單個核苷酸加到已存將單個核苷酸加到已存在的核酸片段上，形成在的核酸片段上，形成磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵作用結(jié)果作用結(jié)果將已存在的將已存在的DNA片片段連接段連接合成新的合成新的DNA分子分子用途用途基因工程基因工程DNA復(fù)
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