高中生物選修一課件：分解纖維素的微生物的分離

1、1教學(xué)目標(biāo):1、知道纖維素酶的種類及作用2、初步掌握從土壤中分離出分解纖維 素的微生物的實(shí)驗(yàn)方法3一、纖維素與纖維素酶4纖維素：棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物；纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)，植物每年產(chǎn)生的纖維素超過70億噸；分布植物的根、莖、葉中；5纖維素酶6纖維二糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶葡萄糖纖維素一、基礎(chǔ)知識(shí)7在一支試管中添加纖維素酶，另一支試管不添加纖維素酶；思考1實(shí)驗(yàn)分析：P27的小實(shí)驗(yàn)是如何構(gòu)成對(duì)照的？濾紙崩潰法8二、纖維素分解菌的篩選1、篩選纖維素分解菌的方法_。該方法可以通過_反應(yīng)直接篩選。剛果紅染色法顏色2、其原理是：剛果紅可以與纖維素形成_，當(dāng)纖維素被_分解

2、后，紅色復(fù)合物無法形成，出現(xiàn)以_為中心的_，可以通過_ 來篩選纖維素分解菌。紅色復(fù)合物纖維素酶纖維素分解菌 透明圈是否產(chǎn)生透明圈9可根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌10(三)、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基挑選菌落什么樣的環(huán)境取樣? 培養(yǎng)的目的? 選擇培養(yǎng)基的特點(diǎn)?挑選什么樣的菌落?鑒別培養(yǎng)基的特點(diǎn)?如何鑒別?根據(jù)：微生物對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)環(huán)境中去找；目的：增加纖維素分解菌的濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物；剛果紅染色法11挑選產(chǎn)生透明圈的菌落 挑取產(chǎn)生明顯的透明圈的菌落，一般即為分解纖維素的菌落。 接種到纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上，在300C 3

3、70C培養(yǎng)，可獲得純培養(yǎng)。121、纖維素分解菌選擇培養(yǎng)基屬于_（固體、液體）培養(yǎng)基，原因是_【資料二】選擇培養(yǎng)閱讀資料二“選擇培養(yǎng)基”，回答以下幾問題：液體沒有添加瓊脂2、該培養(yǎng)基對(duì)微生物_（具有，不具有）選擇作用。如果具有，其選擇機(jī)制是_ 具有 以纖維素粉為唯一碳源，能分解纖維素的微生物可以大量繁殖；13若設(shè)置一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)說明選擇培養(yǎng)的作用，應(yīng)控制的變量是將_改為_。3、你能否設(shè)計(jì)一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，說明選擇培養(yǎng)基的作用？葡萄糖纖維素粉提示：自變量為培養(yǎng)基的種類，即普通培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基?？捎门Ｈ飧嗟鞍纂伺囵B(yǎng)基與之對(duì)照,或者將纖維素改為葡萄糖。1415思考：本實(shí)驗(yàn)的流程與課題2中的實(shí)驗(yàn)流程有哪些異

4、同？ 課題2是將土樣制成的菌懸液直接涂布在以尿素為唯一氮源的選擇性培養(yǎng)基上，直接分離得到菌落。本課題通過選擇培養(yǎng)，使纖維素分解菌得到增殖后，再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。其他步驟基本一致。 16培養(yǎng)基組成提供的主要營養(yǎng)物質(zhì)CMC-Na 510g碳源酵母膏 1g碳源、氮源、生長因子KH2PO4 0.25g無機(jī)鹽土豆汁 100mL碳源、生長因子瓊脂 15g凝固劑上述物質(zhì)溶解后，加蒸餾水定容至1000mL氫元素、氧元素鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基(水溶性羧甲基纖維素鈉)17【資料三】剛果紅染色法方法一：先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)方法二：在倒平板時(shí)就加入剛果紅18染色法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)方法一 方法二 顏

5、色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用 操作繁瑣，剛果紅會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜操作簡便，不存在菌落混雜問題 產(chǎn)生淀粉酶的微生物也產(chǎn)生模糊透明圈，有些微生物能降解色素，形成明顯的透明圈。思考：這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足19 1.培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落 對(duì)照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長則說明培養(yǎng)基制作合格。 如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落，則說明可能獲得了分解纖維素的微生物。 20 為了確定分離得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行_實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有_ 發(fā)酵和_ 發(fā)酵。纖維素酶測定方法是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素所產(chǎn)生的_ 含量進(jìn)行定量測定。發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶 液體 固體 五、

6、課題延伸21分解纖維素的微生物的分離纖維素酶種類、作用、催化剛果紅染色篩選原理實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)土壤取樣選擇培養(yǎng)涂布培養(yǎng)純化培養(yǎng)前置染色法后置染色法富含纖維素土壤增大分解菌含量染色鑒別分離出分解菌課堂總結(jié)22練一練：練一練：1.下列關(guān)于纖維素酶的說法，錯(cuò)誤的是A. 纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括三種B. 纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C. 纖維素酶可用于去掉植物的細(xì)胞壁D. 葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖232.利用剛果紅法可以篩選出纖維素分解菌，下列說法錯(cuò)誤的是A. 剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物 B. 剛果紅能與纖維二糖形成紅色復(fù)合物 C. 剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復(fù)合物D. 若培養(yǎng)基上產(chǎn)生了透

7、明圈，則說明已篩選出了纖維素分解菌243. 微生物體內(nèi)能夠使纖維素分解成纖維二糖的酶是()A.C1酶和Cx酶 B.C1酶和葡萄糖苷酶C.Cx酶和葡萄糖苷酶 D.C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶4.纖維素酶可以將下列哪種物質(zhì)分解()A.牛肉片 B.魚片 C.濾紙條 D.塑料條25(2014全國：生物技術(shù)實(shí)踐（15分）植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉栴}：（1）分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將 _分解成 _。（2）在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅（CR）時(shí)，CR可與纖維素形成 色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的 。 纖維二糖葡萄糖紅透明圈26（3）為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基（成分見下表）： 注：“+”表示有，“-”表示無。據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲 （填“能”或“不能”