實驗動物學—人類疾病動物模型

1、 Animal Models of Human Diseases健康家族遺傳生活習慣不良嗜好環(huán)境污染傳染病意外事故DISEASE PROCESSMETABOLOMEPROTEOMETRANSCRIPTOMEGENOME動物模型比較醫(yī)學Medicine Therapy主要內容123ONTENTS456一、發(fā) 展 史無 論 是 近 代 醫(yī) 學 、 現 代 醫(yī) 學 ， 傳 統(tǒng) 醫(yī) 學 還 是 蒙 醫(yī) 、藏 醫(yī) 等 發(fā) 展 之 路 都 凝 集 著 動 物 模 型 的 功 績 。貓 木 乃 伊狒 狒 木 乃 伊1628年心血運動論 威廉哈維一、發(fā) 展 史對40余種動物進行解剖 威廉哈維哥白尼伽利略牛頓心

2、血運動論一書也像天體運行論 、關于托勒密和哥白尼兩大體系的對話、自然哲學之數學原理等著作一樣，成為科學革命時期以及整個科學史上極為重要的文獻?？茖W革命的巨匠一、發(fā) 展 史一、發(fā) 展 史 巴甫洛夫在心臟生理、消化生理和高級神經活動三個方面作出了重大貢獻，利用犬實施各種外科手術，改進實驗方法，建立消化腺神經支配動物模型，形成了條件反射的概念，開辟了高級神經活動生理學。一、發(fā) 展 史 沒有對活動物進行試驗和觀察，人們就無法認識有機界的各種規(guī)律，這是無可爭辯的。 巴甫洛夫二、概 念人類疾病動物模型 (Animal Models of Human Diseases) 醫(yī) 學 研 究 中 建 立 的 具

3、有 人 類 疾 病 模 擬 表 現 的 動 物 實驗 對 象 和 相 關 材 料 。 動物實驗對象：以動物整體作為研究對象 相關材料：以器官、組織、細胞為研究對象三、研 究 意 義1、作為人類的替難者，避免對人體實驗造成傷害 三氯乙烯職業(yè)危害臨 床 上 外 傷 、 中 毒 、 放 射 病 、 職 業(yè) 病 、 腫 瘤 等 研 究三、研 究 意 義2、可提供發(fā)病率低、潛伏期長和病程長等少見疾病的動物模型1010歲 2.28/1000002.28/100000 全世界 1/100001/10000遺 傳 病代謝性疾病內分泌疾病血液性疾病白血病白化病三、研 究 意 義3、實驗條件可嚴格控制，實驗結果具

4、有可比性三、研 究 意 義4、樣品收集方便，實驗結果易分析 可根據實驗的需要采取各種樣品，及時或分批處死動物、收集標本，了解疾病發(fā)生的全過程。三、研 究 意 義5、有助于我們更全面的認識疾病的本質 人 畜 共 患 病 ： 禽 流 感 、 S A R S四、復 制 原 則1、相似性 應再現所要研究的人類疾病，動物疾病表現應與人類疾病相類似，最好能找到與人類疾病相同的動物模型。動 物 自 發(fā) 性 疾 病 ：大 鼠 自 發(fā) 性 高 血 壓 人 類 原 發(fā) 性 高 血 壓小 型 豬 自 發(fā) 性 動 脈 粥 樣 硬 化 人 類 冠 心 病復 制 動 物 模 型動 物 的 選 擇 ： 豬 的 皮 膚 結

5、構 和 生 理 代 謝 與人 相 似四、復 制 原 則2、重復性 理想的人類疾病動物模型應該是可重復的、可標準化的，不能重復的動物模型是無法進行應用研究的。要 求： 選擇標準化的動物 選擇標準化的實驗設施 試劑、儀器及實驗操作等 四、復 制 原 則3、可靠性 可靠地反映人類疾病，即可特異地反映該種疾病或某種機能、代謝、結構變化；具備該種疾病的主要癥狀和體征，并經受一系列檢測(如心電圖、臨床生理、生化指標檢驗、病理切片等)得以證實。 如：蒙古沙鼠鉛中毒模型 大鼠鉛中毒模型（易與地方性肺炎及進行性腎病混淆）四、復 制 原 則4、適用性和可控性 設計復制人類疾病動物模型，應盡量考慮在今后臨床能應用和

6、便于控制其疾病的發(fā)展，以利于研究工作的開展。 如：雌激素能終止大鼠和小鼠的早期妊娠，但不能終止人的妊娠四、復 制 原 則5、易行性和經濟性 復制動物模型設計，應盡量做到方法容易執(zhí)行和合乎經濟原則。 動 物 的 選 擇模 型 復 制 方 法檢 測 指 標五、分 類按產生原因分類 1、自發(fā)性動物模型 2、誘發(fā)性動物模型 3、抗疾病型動物模型五、分 類1、自發(fā)性動物模型 (Spontaneous animal model) 實驗動物未經任何人工處置，在自然條件下動物自然發(fā)生、或由于基因突變的異常表現通過遺傳育種保留下來的動物模型。 經 典 模 型 ： 自發(fā)性高血壓大鼠 中國地鼠自發(fā)性真性糖尿病 小鼠

7、各種自發(fā)性腫瘤 山羊家族性甲狀腺腫五、分 類1、自發(fā)性動物模型 (Spontaneous animal model) 優(yōu) 點： 完全在自然條件下發(fā)生的疾病，排除了人為的因素，疾病的發(fā)生、發(fā)展與人類相應的疾病很相似。缺 點：來源比較困難，種類有限。 五、分 類2、誘發(fā)性動物模型 (Experimental animal model) 典 型 模 型 ：藥 物 性 糖 尿 病 模 型 （ 注 射 四 氧 嘧 啶 、 鏈 脲 佐 菌 素 ）誘 發(fā) 性 動 脈 粥 樣 硬 化 模 型豚 鼠 支 氣 管 痙 攣 模 型 小 鼠 肺 癌 模 型五、分 類2、誘發(fā)性動物模型 (Experimental an

8、imal model) 優(yōu) 點 ：制作方法簡便,實驗條件比較簡單,其它因素容易控制,在短時間內可以復制大量的動物模型。缺 點 ：誘發(fā)動物模型與人類自然產生的疾病在某些方面存在差異。 五、分 類3、抗疾病型動物模型(Negative animal model) 特定的疾病不會在某種動物身上發(fā)生，從而可以用來探討為何這種動物對該疾病有天然的抵抗力的動物模型。五、分 類3、抗疾病型動物模型(Negative animal model)五、分 類按系統(tǒng)范圍分類 1、疾病的基本病理構成動物模型 發(fā)熱、缺氧、水腫、休克、電解質紊亂等基本病理過程 2、各系統(tǒng)疾病動物模型 消化、呼吸、泌尿、心血管、神經等各個

9、系統(tǒng)五、分 類按模型種類分類整體動物、離體器官和組織、細胞株和數字模型按中醫(yī)藥體系分類按中醫(yī)證分類：陰虛、陽虛、氣虛、血虛、脾虛和腎虛、厥脫證動物模型按中藥理論分類：有解表藥、清熱藥、瀉下藥、祛風濕藥、止血藥、化痰藥、補益藥、理氣藥等動物模型。六、復制方法（一）腫瘤動物模型1、自發(fā)性腫瘤（spontaneous tumor）動物模型2、誘發(fā)性腫瘤（induced tumor）動物模型3、移植性腫瘤（transplant tumor）動物模型六、復制方法（一）腫瘤動物模型1、自發(fā)性腫瘤（spontaneous tumor）動物模型（ 1 ） 定 義 實 驗 動 物 未 經 任 何 有 意 識 的

10、 人 工 處 置 ， 在 自 然 情 況下 發(fā) 生 的 腫 瘤 所 形 成 的 模 型 。六、復制方法（一）腫瘤動物模型1、自發(fā)性腫瘤（spontaneous tumor）動物模型（ 2 ） 優(yōu) 點 ： 自 發(fā) 性 腫 瘤 與 人 體 腫 瘤 相 似 ， 是 研 究 相 應腫 瘤 的 發(fā) 生 、 治 療 和 防 治 理 想 的 模 型 。 缺 點 ： 生 長 緩 慢 ， 不 易 同 時 獲 得 大 批 病 程 基 本 一 致的 動 物 ， 多 用 于 腫 瘤 發(fā) 病 機 理 等 深 入 研 究 ， 很 少 用 于 一般 藥 效 學 研 究 。六、復制方法（一）腫瘤動物模型1、自發(fā)性腫瘤（spo

11、ntaneous tumor）動物模型（ 3 ） 小 鼠 自 發(fā) 性 腫 瘤乳腺腫瘤C3H(90%)、A系經產(60-80%) 、CBA/J(60-65%)肺腫瘤A(90%)、SWR(80%)、PRA(77%) (18月齡以上)肝腫瘤C3H(72-90%)、CBA(65%)(14月齡以上，雄高于雌)淋巴細胞性白血病C58(95-97%)、AKR(76-90%)卵巢腫瘤C3H(64%)、CE(33%)(19月齡以上的生育雌鼠)胃腸道腫瘤A(胃腫瘤90%）；NZO(十二指腸腫瘤15-20%）垂體腫瘤C57BL(老年生育雌鼠33%)六、復制方法（一）腫瘤動物模型1、自發(fā)性腫瘤（spontaneous

12、 tumor）動物模型（ 4 ） 大 鼠 自 發(fā) 性 腫 瘤乳腺腫瘤SD（55%）、F344（50%）、ACI（11%）睪丸腫瘤F344(86%) 、ACI(46%) 子宮腫瘤F344(21%) 、ACI(13%)腎上腺腫瘤ACI(雄鼠16%、雌鼠為6%)垂體腫瘤F344(雌鼠36%、雄鼠24%) 、ACI(雌鼠為21%、雄鼠5%)六、復制方法（一）腫瘤動物模型2、誘發(fā)性腫瘤動物模型（ 1 ） 定 義 經 物 理 、 化 學 、 生 物 等 致 癌 因 素 在 動 物 體 上 誘 導 產生 的 腫 瘤 ( 包 括 良 性 和 惡 性 ) ， 稱 為 誘 發(fā) 性 腫 瘤 動 物 模 型 。六、復

13、制方法（一）腫瘤動物模型2、誘發(fā)性腫瘤動物模型（ 2 ） 誘 發(fā) 方 法 原 位 誘 發(fā) ： 指 將 致 癌 物 直 接 與 動 物 靶 組 織 或 靶 器 官 接 觸而 誘 發(fā) 該 組 織 或 器 官 發(fā) 生 腫 瘤 ， 接 觸 方 法 可 通 過 涂 抹 、 灌注 、 喂 養(yǎng) 或 埋 置 等 。 異 位 誘 發(fā) ： 將 與 致 癌 物 接 觸 后 的 動 物 組 織 或 器 官 埋 置 于該 動 物 或 另 一 正 常 動 物 皮 下 而 產 生 的 該 組 織 或 器 官 的 腫 瘤 。異 位 誘 發(fā) 腫 瘤 具 有 易 于 觀 察 和 取 材 的 優(yōu) 點 。六、復制方法（一）腫瘤動物模

14、型2、誘發(fā)性腫瘤動物模型（ 3 ） 常 用 的 給 藥 基 本 方 法 和 途 徑 涂 抹 法 ： 將 致 癌 物 涂 抹 于 動 物 背 側 及 耳 部 皮 膚 ， 多 用 于誘 發(fā) 皮 膚 腫 瘤 。 經 口 給 藥 法 ： 將 致 癌 物 溶 于 飲 水 或 以 某 種 方 式 混 合 于 動物 食 物 中 自 然 喂 養(yǎng) 或 灌 喂 動 物 而 使 之 發(fā) 生 腫 瘤 ， 多 用 于 誘發(fā) 消 化 道 腫 瘤 如 食 管 癌 、 胃 癌 、 肝 癌 、 大 腸 癌 等 。 六、復制方法（一）腫瘤動物模型2、誘發(fā)性腫瘤動物模型（ 3 ） 常 用 的 給 藥 基 本 方 法 和 途 徑 注

15、 射 法 ： 將 致 癌 物 制 成 溶 液 或 懸 浮 物 ， 經 皮 下 、 肌 肉 、靜 脈 、 胸 腔 及 腹 腔 等 途 徑 注 入 體 內 而 誘 發(fā) 腫 瘤 。 氣 管 灌 注 法 ： 將 顆 粒 性 致 癌 物 制 成 懸 浮 液 直 接 注 入 或 用導 液 管 注 入 動 物 氣 管 內 ， 常 用 于 誘 發(fā) 肺 癌 。 六、復制方法（一）腫瘤動物模型2、誘發(fā)性腫瘤動物模型（ 3 ） 常 用 的 給 藥 基 本 方 法 和 途 徑穿線法：將多芳香烴類致癌物直接置于某特定部位或器官，如宮頸、卵巢、腺胃等。將一定量的致癌物放置于無菌試管內，加熱使致癌物升華，吸附于預制的線節(jié)上

16、，將含有致癌物的線穿入靶器官或組織。埋藏法：將致癌物包埋于皮下或其他組織內，或將經致癌物作用過的細胞、組織、器官移植于同種或同品系動物皮下誘發(fā)腫瘤。 六、復制方法（一）腫瘤動物模型2、誘發(fā)性腫瘤動物模型（ 4 ） 經 典 模 型 二 乙 基 亞 硝 胺 ( D E N ) 誘 發(fā) 小 鼠 肺 癌 小 鼠 皮 下 注 射 1 D E N 生 理 鹽 水 溶 液 ， 每 周 一 次 ， ( 每次 劑 量 為 5 6 m g / k g 體 重 ， 總 劑 量 為 8 6 8 m g ) 。 觀 察 時間 為 1 0 0 d 左 右 。 此 模 型 誘 發(fā) 率 約 4 0 % 。 若 將 D E N

17、 總 劑量 增 到 1 1 7 6 m g 時 ， 半 年 誘 發(fā) 率 可 達 9 0 以 上 。 六、復制方法（一）腫瘤動物模型2、誘發(fā)性腫瘤動物模型（ 4 ） 經 典 模 型 亞 胺 基 偶 氮 甲 苯 ( O A A T ) 誘 發(fā) 小 鼠 肝 癌 1OAAT苯溶液涂于動物兩肩胛間皮膚上，隔日1次，每次2-3滴、一般涂100次。7個月以上誘發(fā)肝腫瘤約55。 黃 曲 霉 素 誘 發(fā) 大 鼠 肝 癌 在大鼠飼料中加入黃曲霉素，含0.011-0.015ppm，喂養(yǎng)6個月，誘發(fā)率達80。 六、復制方法（一）腫瘤動物模型2、誘發(fā)性腫瘤動物模型（5）優(yōu) 點 瘤細胞增殖動力學與人類腫瘤較接近，是癌變機

18、理及癌前阻斷研究的理想模型。缺 點 誘發(fā)腫瘤需時較長，動物腫瘤的發(fā)生往往先后不齊，生長慢，癌細胞增殖比率低，倍增時間長，常有防護問題； 難于觀察腫瘤的動態(tài)發(fā)生、發(fā)展，常缺乏客觀測量腫瘤發(fā)生、發(fā)展或退縮的指標，所以多用于抗致癌作用的研究。 六、復制方法（一）腫瘤動物模型3、移植性腫瘤動物模型（1）定義 將動物或人體腫瘤移植到同系、同種或異種動物體內，經連續(xù)傳代而培養(yǎng)出的模型。六、復制方法（一）腫瘤動物模型3、移植性腫瘤動物模型（2） 按移植對象不同同種移植：將動物腫瘤組織移植于同品系或同種屬動物體內。異種移植：腫瘤組織來源于人體或其他動物，移植到另一種屬的受體動物體內。六、復制方法（一）腫瘤動物

19、模型3、移植性腫瘤動物模型（3）按移植部位及用途不同異位移植：皮下、腎包膜下、肌肉、腦內、腹腔等移植。原位移植：將腫瘤組織（或細胞懸液）移植到與腫瘤原發(fā)部位相對應的移植宿主器官組織內，如人的肝癌細胞移植于裸鼠的肝臟、人的胃癌細胞移植于裸鼠的胃。六、復制方法原位移植手術器械原位移植手術器械六、復制方法六、復制方法兩種免疫缺陷動物胃原位移植兩種免疫缺陷動物胃原位移植六、復制方法（一）腫瘤動物模型3、移植性腫瘤動物模型（4）移植方法 實體瘤移植 腫 瘤 細 胞 皮 下 接 種 7 - 1 0 d 處 死 荷 瘤 動 物 選 擇 生長 良 好 、 無 壞 死 液 化 的 瘤 組 織 2 - 3 m l

20、 生 理 鹽 水 或 其 它營 養(yǎng) 液 無 菌 套 管 針 抽 吸 接 種 同 種 受 體 動 物 右 前 腋窩 皮 下 。六、復制方法六、復制方法六、復制方法六、復制方法（一）腫瘤動物模型3、移植性腫瘤動物模型（4）移植方法 腹水瘤移植 腫瘤細胞皮下接種7-10d處死荷瘤動物取腹水含葡萄糖平衡鹽水稀釋至適當濃度腹腔注射（腹水瘤）。六、復制方法六、復制方法（二）神經系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型2、記憶動物模型六、復制方法（二）神經系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型 疼 痛 作 為 主 觀 的 感 受 和 體 驗 ， 是 一 種 復 雜 的 生 理 心 理反 應 。 動 物 實 驗 只 能 間

21、 接 借 助 由 于 傷 害 性 刺 激 引 起 的“ 痛 ” 反 應 作 為 測 量 指 標 。 按 刺 激 性 質 可 分 為 四 大 類 ，即 熱 刺 激 法 、 電 刺 激 法 、 機 械 刺 激 法 和 化 學 刺 激 法 。 六、復制方法（二）神經系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型 造模機制 用小型聚光燈產生一定強度的光束，經凸透鏡聚焦照射大鼠的尾巴以致痛，大鼠以甩尾為痛反應指標。 儀器：鼠尾光照測痛儀（1）大鼠光熱法六、復制方法（二）神經系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型 造模方法 200g雄性大鼠，裝入固定器內，尾巴外露，先用75乙醇擦凈尾部，用墨汁在尾部下1/3處標出光刺激點的位

22、置(墨汁能易于吸熱)。 調節(jié)輻射熱測痛儀的焦距，在聚焦的鼠臺檔板作標記，使鼠尾光刺激點位置與檔板上標記重合。每次實驗于每日同一時間進行。（1）大鼠光熱法六、復制方法（二）神經系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型 造模方法 照射開始到甩尾反應的潛伏期為痛閾。負載電壓20V，選用潛伏期在5s以內的動物。實驗開始時先測3次，每次間隔5min，計算其平均值為基礎痛閾。 為防止皮膚灼傷，光照截止時間10s或以潛伏期升高150為限。（1）大鼠光熱法六、復制方法（二）神經系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型 模型評價 大鼠甩尾法操作方便，反應恒定，重復性好，對于篩選麻醉性鎮(zhèn)痛藥及非麻醉性鎮(zhèn)痛藥均適用，故使用最多。但

23、甩尾反應是一種脊髓反應，骨骼肌松弛藥也可出現陽性結果。（1）大鼠光熱法六、復制方法（二）神經系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型 造模機制 把小鼠放在事先加熱到55的熱板上，以舔后足或跳躍作為疼痛反應指標。（2）小鼠熱板法六、復制方法（二）神經系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型 造模方法 恒溫水浴至550.5，底板接觸水面，記錄小鼠自投入熱板至出現舔后足的時間(s)作為該鼠的痛閾值。 給藥前先測定每只小鼠的痛閾(共測2次，以平均值不超過30s者為合格)。給藥后每隔0.5-1h測定1次，連續(xù)數次。 痛閾值超過60s，即停止測試并按60s計(時間過久，易燙傷足部)。（2）小鼠熱板法六、復制方法（二）神經

24、系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型六、復制方法（二）神經系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型 模型評價 本法簡便易行，痛感指標明確易于觀察，對組織損傷小，動物可反復利用，為目前常用的方法之一，但對作用較弱的鎮(zhèn)痛藥不太敏感。 室溫對實驗有影響，室溫過低小鼠反應遲鈍，過高則敏感，易引起跳躍。室溫在13-18范圍內動物反應波動較小。（2）小鼠熱板法六、復制方法（二）神經系統(tǒng)疾病動物模型2、記憶動物模型 動 物 實 驗 前 應 通 過 跳 臺 試 驗 ( s t e p d o w n t e s t ) 、避 暗 試 驗 ( s t e p t h r o u g h t e s t ) 、 迷 津 (

25、m a z e ， 包括 Y 型 迷 宮 、 水 迷 宮 等 ) 進 行 訓 練 ， 使 動 物 建 立 一 定 的 條件 反 射 ， 學 習 和 記 憶 逃 避 電 擊 或 尋 覓 食 物 的 能 力 ， 然 后 給予 損 害 中 樞 神 經 系 統(tǒng) 因 素 后 ， 觀 察 動 物 記 憶 的 保 留 情 況 。 六、復制方法水迷宮六、復制方法（三）心血管疾病動物模型高 脂 飼 料 誘 發(fā) 高 血 脂 及 動 脈 粥 樣 硬 化 癥 模 型六、復制方法（三）心血管疾病動物模型高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型（1）造模機制 動物飼料中加入過量的膽固醇和脂肪，飼養(yǎng)一定時間后，其主動脈及冠狀

26、動脈處逐漸形成粥樣硬化斑塊，并出現高血脂癥。 高膽固醇和高脂飲食，加入少量膽酸鹽，可增加膽固醇的吸收，如再加入甲狀腺抑制藥（甲基硫氧嘧啶或丙基硫氧嘧啶）可進一步加速病變的形成。 六、復制方法（三）心血管疾病動物模型高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型（2）造模方法 小型豬 選用Gottigen系小型豬較為理想，用12高脂食物飼喂6個月即可形成動脈粥樣硬化病變。 評價：形成動脈粥樣硬化病變特點及分布都與人類近似。六、復制方法（三）心血管疾病動物模型高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型（2）造模方法 猴 選用3.510.5kg，36歲的恒河猴飼喂高脂飼料(50麥粉、8玉米粉、8麥麩、1膽固醇、

27、8蛋黃、8豬油、17白糖及適量的小蘇打和食鹽)。1個月后造成猴的實驗性高血脂癥。血清膽固醇較正常時升高3.13.2倍。 評價：猴的膽固醇代謝、血漿脂蛋白組成及高脂血癥與人相似，是較理想的模型。六、復制方法（三）心血管疾病動物模型高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型（2）造模方法 兔 體重2kg左右，每天膽固醇0.3g，4個月后形成主動脈粥樣硬化斑塊；劑量增至0.5g，3個月出現斑塊；增至1.0g，可縮為2個月。在飼料中加入15蛋黃粉、0.5膽固醇和5%豬油，3周后，將膽固醇減去再喂3周，可使斑塊發(fā)生率達100，血清膽固醇可升高至2000mg。 評價：對喂飼膽固醇非常敏感，在短期內便能出現明顯

28、的病變。因為兔對外源性膽固醇的吸收率可高達7590，對高血脂的清除能力低(靜脈注射膽固醇后，高脂血癥可持續(xù)34天)。 六、復制方法（三）心血管疾病動物模型高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型（2）造模方法 大鼠 飼料配方一(1-4膽固醇、10豬油、0.2%甲基硫氧嘧啶、89-86基礎飼料)，喂服710天?？尚纬筛吣懝檀佳Y。 飼料配方二(10蛋黃粉、5豬油、0.5膽鹽、85基礎飼料)，喂服7天可形成高膽固醇血癥。 評價：飼養(yǎng)方便、抵抗力強、食性與人相近。所形成的病理改變與人早期者相似，不易形成似人體的后期病變，較易形成血栓。六、復制方法（三）心血管疾病動物模型高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化

29、癥模型（2）造模方法 雞 48周的萊克亨雞，在飼料中加入1-2膽固醇或15蛋黃粉，再加510豬油，經過610周，血膽固醇即升至1000mg4000mg，胸主動脈斑塊發(fā)生率達100。 評價：雞為雜食動物，僅在普通飼料中加入膽固醇，就可形成動脈粥樣硬化斑塊。病變發(fā)生較快，在斑塊中有時伴有鈣化和形成潰瘍。六、復制方法（四）內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型 2、缺鐵性貧血動物模型3、維生素D缺乏性佝僂病動物模型六、復制方法（四）內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型（1）模型概述 注射致高血糖因子，如生長激素、胰高糖素、糖皮質激素以及兒茶酚胺類激素等，復制出某些繼發(fā)性糖尿病模型。 注射化

30、學物質引起胰島細胞的損傷，如鏈脲佐菌素(STZ)、四氧嘧啶、二苯硫代卡肥腙可造成胰島細胞不可逆損傷；環(huán)丙庚哌、天門冬素酶、6氨基尼克酰胺、2脫氧葡萄糖、甘露庚酮糖可引起細胞可逆性損傷。六、復制方法（四）內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型（1）模型概述 注射生物及生物制品引起細胞破壞，如鼠腦炎、心肌炎病毒M型變異可誘發(fā)若干品系的成年小鼠糖尿病，IL1在一定劑量和范圍內對細胞有選擇性細胞毒作用，導致IDDM。 手術切除胰腺的大部分或全部，并給予高糖飲食刺激，引起繼發(fā)性永久性糖尿病。六、復制方法（四）內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型（1）模型概述 篩選、引種、繁殖遺傳性及自發(fā)性糖尿

31、病，這類動物模型更接近人類糖尿病的自然起病及發(fā)展，尤其適于研究糖尿病的病因學。六、復制方法（四）內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型（2）造模方法 病毒誘發(fā)法 DBA/2雌性小鼠，皮下接種腦炎、心肌炎病毒M型變異株47天后出現明顯的高血糖，伴有血中及胰腺中胰島素含量降低。 評價：其高血糖為特發(fā)性，伴明顯低胰島素血癥，在某些小鼠中可自然緩解，但糖耐量異常及高血糖在恢復期中仍將存在，其生化方面與人類MODP相似。六、復制方法（四）內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型（2）造模方法a. 速發(fā)型 STZ用0.1mmol/L無菌枸櫞酸枸櫞酸鈉緩沖液新鮮配制成2溶液，調節(jié)pH至4.5，濾菌器過

32、濾除菌。大鼠禁食10h按5065mg/kg腹腔內或尾靜脈一次性注射，24h內隨機血糖16.7mmol/L，穩(wěn)定5d即可作為成功模型。 評價：一次足量給予鏈脲佐菌素，造成細胞大量損傷，胰島素合成和分泌減少，引起糖代謝紊亂，導致糖尿病。速發(fā)型模型較適于NIDDM的相關研究。通常單劑量達50mg/kg體重不出現自然緩解現象，第627天，胰島有一定程度再生，功能部分恢復，但仍處于高血糖狀態(tài)。六、復制方法（四）內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型（2）造模方法b. 遲發(fā)型 STZ配制同前，福氏佐劑(CFA)按4:1稱取液體石蠟和羊毛脂，研碎混勻，經高壓消毒后低溫保存，使用前按1.5mg/0.5ml

33、加入無菌滅活卡介苗。第1天腹腔注射0.5mlCFA，次日按25mg/kg腹腔內注射STZ溶液。每周1次，連續(xù)3周，第2周部分大鼠就可成模型，第3周成模率87.5。 評價：福氏完全佐劑可激發(fā)機體免疫功能，將小劑量STZ和CFA聯合使用，可激活大鼠體內淋巴細胞誘導胰島細胞發(fā)生輕度改變，被激活的體內淋巴細胞可將輕度變性的細胞作靶細胞攻擊，導致自身免疫，胰島細胞損害加重，引起糖尿病。遲發(fā)型模型有免疫學的改變，更接近人類IDDM的發(fā)生發(fā)展變化。六、復制方法（四）內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型（2）造模方法四氧嘧啶和鏈脲佐菌素比較評價： 化學誘導是一種簡便，價廉的方法。其中STZ優(yōu)于四氧嘧啶，

34、其造模穩(wěn)定、快速、無自然緩解，種屬選擇性不強(豚鼠只能用鏈脲菌素造模)，復制前不需禁食。糖尿病形成后無需特意安排動物飼養(yǎng)條件。 STZ可作用于對四氧嘧啶致糖尿作用有抵抗的豚鼠。但價格較四氧嘧啶貴。六、復制方法（四）內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型（2）造模方法四氧嘧啶和鏈脲佐菌素比較評價： 四氧嘧啶和鏈脲菌素均為一種可以選擇性作用于胰島細胞的化學物質，其作用機制目前有不同認識，有人認為是破壞了細胞本身，有人則認為僅是細胞脫顆?；蚴前ど掀咸烟鞘荏w的變化。六、復制方法（四）內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型（2）造模方法 高糖飼喂誘發(fā)法 選用SHR/NLHCP大鼠5周齡，喂飼含

35、54蔗糖飲食。1個月時，觀察到OGTT異常，6.5個月時胰島素反應異常，9個月時可見體重減輕，衰弱。 評價：一些動物品系有自發(fā)或在施加誘導的條件下發(fā)生糖尿病的傾向。SHR/NLH-CP大鼠模型某些代謝和組織病理特征與人類非胰島素依賴性糖尿病相似，該模型還可觀察糖尿病肝腎損害。六、復制方法（四）內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型2、缺鐵性貧血動物模型(1) 造模機制 由于鐵的攝入不足和/或鐵丟失過多，引起機體血紅蛋白合成障礙。IDA模型有大鼠、小鼠、兔、雞、貓、狗、猴等，其中以大鼠最為常用。六、復制方法（四）內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型2、缺鐵性貧血動物模型(2) 造模方法 給予低鐵飲食 飼料含鐵量50mg/kg能滿足大鼠的基本需要，標準飼料鐵含量為220-270mg/kg，低鐵飼料的鐵含量10mg/kg。六、復制方法（四）內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型2、缺鐵性貧血動物模型(2) 造模方法 給動物逐次少量放血，造成鐵的慢性丟失