維生素類藥物分析

1、維生素類藥物的分析主要內(nèi)容維生素A維生素D維生素E維生素B維生素C脂溶性水溶性維生素 維持人體正常生理機(jī)能所必須的生物活性物質(zhì)40%谷類和麥類主食12%水果18%蔬菜10%肉類、蛋類制品10%乳類制品10%油、脂肪及甜品人體缺少某種維生素，就會(huì)引起維生素缺乏癥，而影響人體的正常生理機(jī)能。例如： VA夜盲癥 VB1腳氣病 VD缺乏佝僂病按溶解性分類 脂溶性：VA、VD、VE、VK等 水溶性：B族，VC、煙酸、葉酸、泛酸等維生素A的分析 結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：具有共軛多烯側(cè)鏈的環(huán)己烷，有多種異構(gòu)體 性質(zhì)：有強(qiáng)紫外吸收，易被氧化，脂溶性維生素A醇維生素A醋酸酯維生素A棕櫚酸酯結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：環(huán)己烯+共軛多烯側(cè)鏈天然V

2、A側(cè)鏈為全反式天然來(lái)源主要是魚肝油，人工合成醋酸酯，棕櫚酸酯結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：環(huán)己烯+共軛多烯側(cè)鏈天然VA側(cè)鏈為全反式天然來(lái)源主要是魚肝油，人工合成醋酸酯，棕櫚酸酯鑒別試驗(yàn)三氯化銻反應(yīng)：維生素A+三氯化銻顯藍(lán)色漸變成紫紅色紫外吸收光譜：維生素A的無(wú)水乙醇-鹽酸溶液在326nm波長(zhǎng)處有單一吸收峰，將該溶液加熱后再測(cè)定，在348，367，389nm處出現(xiàn)3個(gè)尖銳吸收峰。這是維生素A在鹽酸催化下加熱，發(fā)生脫水反應(yīng)所致含量測(cè)定紫外分光光度法（三點(diǎn)校正法） 維生素A醋酸酯的環(huán)己烷溶液在328nm有最大吸收，吸收系數(shù)E=1530 維生素A醇的異丙醇溶液在325nm有最大吸收，吸收系數(shù)E=1820 由于維生素A中稀

3、釋用油和有關(guān)雜質(zhì)也具有紫外吸收，干擾測(cè)定，故采用三點(diǎn)校正法測(cè)定含量等波長(zhǎng)差法等吸收差法中國(guó)藥典收載方法 第一法（維生素A醋酸酯的測(cè)定） 將維生素A溶于環(huán)己烷，在規(guī)定波長(zhǎng)測(cè)定吸收度，計(jì)算吸收度比值（A/A328 ）維生素B1的分析 又稱鹽酸硫胺，結(jié)構(gòu)特點(diǎn)： 有兩個(gè)堿性基團(tuán)，有紫外吸收，在水中易溶嘧啶環(huán)噻唑環(huán)鑒別反應(yīng)沉淀反應(yīng)氯化物反應(yīng)本品為鹽酸鹽，顯氯化物反應(yīng)硝酸鉛反應(yīng)與氫氧化鈉共熱，分解產(chǎn)生硫化鈉，與硝酸鉛生成黑色沉淀硫色素反應(yīng) 維生素B1在氫氧化鈉溶液中，與鐵氰化鉀作用，被氧化成硫色素，在正丁醇中顯藍(lán)色熒光，加酸，熒光消失，加堿，熒光又出現(xiàn) 這是維生素B1的專屬反應(yīng)含量測(cè)定非水溶液滴定法 用于

4、原料藥測(cè)定 加醋酸汞消除鹽酸干擾 1mol維生素B1與2mol高氯酸相當(dāng)紫外分光光度法 片劑、注射劑采用此法 以吸收系數(shù)法計(jì)算含量硫色素?zé)晒夥?對(duì)照品對(duì)照法 計(jì)算含量，方法專屬，不受氧化產(chǎn)物干擾維生素C的分析結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 二烯醇結(jié)構(gòu)，有強(qiáng)還原性 C3顯酸性，可成鈉鹽 具共軛雙鍵，有紫外吸收 兩個(gè)手性碳，有旋光性 水中易溶，有糖類性質(zhì)鑒別試驗(yàn) 硝酸銀反應(yīng)維生素C被氧化，銀被還原成黑色銀沉淀 使高錳酸鉀、亞甲藍(lán)褪色 與堿性酒石酸銅作用，產(chǎn)生紅色氧化銅沉淀 二氯靛酚鈉反應(yīng)二氯靛酚被還原成無(wú)色糖類性質(zhì) 維生素C+三氯乙酸水解成戊糖失水糠醛+吡咯藍(lán)色澄清度與顏色控制氧化變色產(chǎn)物，以測(cè)定一定波長(zhǎng)下吸光度控制有

5、色雜質(zhì) 原料溶液應(yīng)澄清無(wú)色，若有色，在420nm處測(cè)定吸光度，不得過(guò)0.03 片劑在440nm處測(cè)定吸光度，不得過(guò)0.07 注射劑在420nm處測(cè)定吸光度，不得過(guò)0.06鐵、銅離子采用原子吸收分光光度法測(cè)定雜質(zhì)檢查含量測(cè)定 碘量法維生素C分子中的烯二醇基具有還原性，能被I2定量的氧化成二酮基測(cè)定方法取本品約0.2g，精密稱定，加新沸過(guò)的冷水100mL與稀醋酸10mL，振搖使溶解，加淀粉指示液1mL，立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液顯藍(lán)色并持續(xù)30秒鐘不褪。每1mL碘滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于8.806mg的C6H8O6討論：滴定前加入稀醋酸可減緩維生素C受空氣氧化，用新沸過(guò)

6、的冷水做溶劑，除去水中溶解氧對(duì)測(cè)定的影響維生素C片也采用碘量法測(cè)定含量，但需過(guò)濾除去輔料維生素C注射液含量測(cè)定 精密量取本品適量（約相當(dāng)于維生素C0.2g）加水15mL與丙酮2mL，搖勻，放置5min，加稀醋酸4mL與淀粉指示液1mL，用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液顯藍(lán)色并持續(xù)30s不褪。每1mL碘滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于8.806mg的C6H8O6 注意：滴定前加丙酮是用來(lái)消除注射液中含有的抗氧劑亞硫酸鈉對(duì)測(cè)定的干擾，丙酮與亞硫酸鈉形成加成物而消除影響維生素D的分析 為一類抗佝僂病的維生素總稱，都是甾醇的衍生物，ChP收載維生素D2（Ergocalciferol）， D3

7、 有多個(gè)烯鍵，不穩(wěn)定，易氧化變質(zhì)，使毒性增加，多個(gè)手性碳，具旋光性鑒別試驗(yàn)顯色反應(yīng)（甾類化合物的反應(yīng)） D2+醋酐-濃H2SO4 黃紅紫綠色 D3+醋酐-濃H2SO4 黃紅紫藍(lán)綠綠色比旋度tD測(cè)定 D2無(wú)水乙醇液：+102.5+107.5 D3無(wú)水乙醇液：+105+112 D2 、D3區(qū)別反應(yīng)維生素D的醇溶液+85% H2SO4 含量測(cè)定采用正相HPLC法根據(jù)樣品純度，ChP采用三種方法第一法（適用于無(wú)VitA醇及其它雜質(zhì)干擾） 對(duì)照品（ D2 、D3 ）+異辛烷超聲助溶，充氮，避光0保存 內(nèi)標(biāo)液：鄰苯二甲酸甲酯-正己烷溶液 色譜柱：硅膠柱 流動(dòng)相：正己烷-正戊醇（997：3） 檢測(cè)波長(zhǎng)：25

8、4nm維生素E分析 結(jié)構(gòu)特征：具有苯并二氫吡喃結(jié)構(gòu)，苯環(huán)上有1個(gè)乙酰化的酚羥基，易被水解、氧化；為脂溶性維生素。鑒別與硝酸反應(yīng)維生素E與硝酸共熱，顯橙紅色（生育紅）水解后氧化反應(yīng)維生素E在堿性條件下水解，與聯(lián)吡啶和三氯化鐵作用，顯血紅色。在該反應(yīng)中，維生素E水解游離出生育酚，氧化Fe2+Fe3+ ，后者與聯(lián)吡啶生成血紅色配位離子雜質(zhì)檢查合成型檢查有關(guān)物質(zhì)（GC）天然型檢查生育酚生育酚采用硫酸鈰滴定法含量測(cè)定 采用GC法 色譜條件 色譜柱：硅酮（OV-17），載氣：N2 檢測(cè)器：FID 內(nèi)標(biāo)：正三十二烷（正己烷溶液） 系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以維生素E峰計(jì)算應(yīng)不低于500（毛細(xì)管柱5000），維生素E與內(nèi)標(biāo)的分離度應(yīng)大于2測(cè)定方法校正因子測(cè)定：取正三十二烷適量，加正己烷溶解并稀釋成每1mL中含1.0mg的溶液，搖勻，作為內(nèi)標(biāo)溶液。另取維生素E對(duì)照品