植物生理指標(biāo)測(cè)定

1、實(shí)驗(yàn)22過(guò)氧化物酶活性的測(cè)定過(guò)氧化物牌是植物體內(nèi)普遍存在的、活性較高的一種酶，它與呼吸作用、光合作用及生長(zhǎng)素的氧化等都有密切關(guān)系，在植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中，它的活性不斷發(fā)生變化，因此測(cè)量這種酶，可以反映某一時(shí)期植物體內(nèi)代謝的變化。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)了解過(guò)氧化物酶的作用，掌握常用的測(cè)定過(guò)氧化物酶的方法一愈創(chuàng)木酚法。一、原理在過(guò)氧化物酶（peroxidase）催化下，H2O2將愈創(chuàng)木酚氧化成茶褐色產(chǎn)物。此產(chǎn)物在470m處有最大光吸收，故可通過(guò)測(cè)470nm下的吸光度變化測(cè)定過(guò)氧化物酶的活性。二、材料、儀器設(shè)備及試劑（一）材料馬鈴薯塊莖。（二）儀器設(shè)備722型分光光度計(jì)，離心機(jī)，研缽，容量瓶，量筒，試管，吸管。（

2、三）試劑（1）0.05mol/L.pH5.的磷酸緩沖液。（2）0.05mo/L愈創(chuàng)木份溶液。2%H202。（4）20%三氯乙酸。三、實(shí)驗(yàn)步驟（一）酶液的制備取5.0g洗凈去皮的馬鈴薯塊莖，切碎放入研缽中，加適量的磷酸緩沖液研磨成勻漿。將勻漿液全部轉(zhuǎn)人離心管中，于3000g離心10min,上清被轉(zhuǎn)人25mL,容量瓶中。沉淀用5mL磷酸緩沖液再提取兩次，上清液并人容量瓶中，定容至刻度，低溫下保存?zhèn)溆?。（二）過(guò)氧化物酶活性測(cè)定酶活性測(cè)定的反應(yīng)體系包括:2.9mL.0.05mol/L磷酸緩沖液；1.0ml.2%H2O2；1.0mL.0.05mol/L愈創(chuàng)木面和0.1mL酶液。用加熱煮沸5min的酶成為

3、對(duì)照，反應(yīng)體系加人酶液后，立即于37C水浴中保溫15min.然后迅速轉(zhuǎn)人冰浴中，并加人2.0ml.20%三氯乙酸終止反應(yīng)，然后，過(guò)慮（或5000xg離心10min）,適當(dāng)稀釋.470mm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。四、結(jié)果計(jì)算以每分鐘內(nèi)A470變化0.01為1個(gè)過(guò)氧化物酶活性單位（U）。過(guò)氧化物酶活性二？?w?ju/（g.min）?x?0.01型式中：？A470為反應(yīng)時(shí)間內(nèi)吸光度的變化：W為馬鈴薯鮮重.g;t為反應(yīng)時(shí)間，mins;VT為提取酶液總體積，ml;Vs為測(cè)定時(shí)取用酶液體積，mLo實(shí)驗(yàn)24超氧化物歧化酶（SOD活性測(cè)定（氮藍(lán)四嚏光化還原法）一、原理超氧物歧化酶（Superxidedismtae,

4、SOD滑遍存在于動(dòng)、植物體內(nèi)，是一種清除超氧陰離子自由基（。2的酶，它催化下列反應(yīng):2O2+2H+H2O2+02反應(yīng)產(chǎn)物H2O2可由過(guò)氧化氫酶進(jìn)一步分解或被過(guò)氧化物酶利用。本實(shí)驗(yàn)依據(jù)超氧物歧化酶抑制氮藍(lán)四陛（NBT而光下的還原作用來(lái)確定酶活性大小。在有氧化物質(zhì)存在下，核黃素可被光還原，被還原的核黃素在有氧條件下極易再氧化而產(chǎn)生O2,O2可將氮藍(lán)四陛還原為藍(lán)色的甲腺，后者在560m處有最大吸收。而SOD可清除。2,從而抑制了甲腺的形成。于是光還原反應(yīng)后，反應(yīng)液藍(lán)色愈深，說(shuō)明酶活性愈低，反之酶活性愈高。據(jù)此可以計(jì)算出酶活性大小。二、材料、儀器設(shè)備及試劑（一）材料水稻或小麥葉片。（二）儀器設(shè)備分光光

5、度計(jì)，高速臺(tái)式離心機(jī)，研缽，容量瓶，量筒，試管，吸管，熒光燈。（三）試劑的配制（1） 0.05mol/L磷酸緩沖液（PBSpH7.8）:A母液：0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液：取N&HPO412H2O（分子量358.14）71.7g；B母液：0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液：取NaH2P042H2O（分子量156.01）31.2g。分別用蒸儲(chǔ)水定容到1000ml。0.05mol/LPBS（pH7.8）的配制：分別取A母液（NazHPQ）228.75ml,B母液（NaH2PO4）21.25ml,用蒸儲(chǔ)水定容至1000mlo加入10gPVP（聚乙烯口比咯烷酮）（2） 130mmol/L甲硫氨酸溶液：

6、取1.399gMet用磷酸緩沖液（pH7.8）定容至100ml。(3)100科mol/LEDTA-N和溶液：取0.03721gEDTA-N用磷酸緩沖液定容至1000ml。20dM核黃素溶液：取0.00753g核黃素用蒸儲(chǔ)水定容至1000ml,避光保存。(5)750科mol/L氮藍(lán)四陛（NBT）溶液：稱取0.06133gNBT用磷酸緩沖液定容至100ml避光保存。三、實(shí)驗(yàn)步驟酶液制備：取一定部位的植物葉片（視需要定，去葉脈）0.5g于預(yù)冷的研缽中，加1ml磷酸緩沖液在冰浴下研磨成漿，加緩沖液使終體積為5ml。取1.5-2ml于1000r/min下離心20min,上清液即為SOD粗提液。提取酶?時(shí)

7、如何保存；如果沒(méi)有測(cè)完的需要放在4c的冰箱里。顯色反應(yīng)取試管（要求透明度好）4,2為樣品測(cè)定管，2為對(duì)照管，按表39-1加入各溶液?；靹蚝髮?支對(duì)照管置于暗處其他管于4000lx日光反應(yīng)20min（要求各管受光情況一致,應(yīng)室的溫度高時(shí)時(shí)間可適當(dāng)縮短，溫度低時(shí)時(shí)間可適當(dāng)延長(zhǎng)）試劑（酶）用量（ml）終濃度（比色時(shí)）0.05mol/L磷酸緩沖液1.5130mmol/LMet溶液0.313mmol750科mol/LNBT溶液0.375mol100科mol/LEDTA-Na2液0.310mol20科mol/L核黃素0.32.0mol酶液0.052支對(duì)照以緩沖液代替酶液蒸儲(chǔ)水0.25總體積3.0表39-1

8、各溶液加入量SOD活性測(cè)定與計(jì)算至反應(yīng)結(jié)束后，以不照光的作空白，分別測(cè)定其它各管560nm波長(zhǎng)下的消光度值，已知SOD活性單位以抑制NBT光化還原的50%為一個(gè)酶活性單位表示。按下式計(jì)算SOD活性:Ack-AESOD心活性=0.5)?x?式中SOD總活性以每克鮮重酶單位表示；比活力單位以酶單位/mg蛋白表示;Ack為照光管的消光度值；AE為樣品管的消光度值；V為樣品液總體積（ml）;Vt為測(cè)定時(shí)樣品用量（ml）;W為樣鮮重，g。苯酚法測(cè)定可溶性糖一、原理植物體內(nèi)的可溶性糖是指能溶于水及乙醇的單糖和寡聚糖。苯酚法測(cè)定可溶性糖的原理是:糖在濃硫酸作用下，脫水生成的糠醛或羥甲基糠醛（分子式見(jiàn)慈酮法）

9、能與苯酚縮合成一種橙紅色化合物，在10-100mg范圍內(nèi)其顏色深淺與糖的含量成正比，且在485m波長(zhǎng)下有最大吸收峰，故可用比色法在此波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的測(cè)定，方法簡(jiǎn)單，試劑便宜，靈敏度高，實(shí)驗(yàn)時(shí)基本不受蛋白質(zhì)存在的影響，并且產(chǎn)生的顏色可穩(wěn)定160min以上。二、材料、儀器設(shè)備及試劑（一）材料新鮮的植物葉片。（二）儀器設(shè)備分光光度計(jì)，水浴鍋，刻度試管，刻度吸管。（三）試劑90%苯酚溶1取90g苯酚（AR）加蒸儲(chǔ)水10mL溶解，在室溫下可保存數(shù)月。（2）9%苯酚溶?夜。取3ml90%苯酚溶液，加蒸儲(chǔ)水至30ml,現(xiàn)配現(xiàn)用。（3）濃硫酸（比重1.84）。（4） 1

10、%蔗糖標(biāo)準(zhǔn)液。將分析純蔗糖在80C下烘至恒重，精確稱取1.000g加少量水溶解，轉(zhuǎn)人100mL容量瓶中，加人0.5m濃硫酸，用蒸儲(chǔ)水定容至刻度線。（5） 100ug/蔗糖標(biāo)準(zhǔn)液。精確吸取1%蔗糖標(biāo)準(zhǔn)液1mL,加入100mL容量瓶中，加水至刻度。三、實(shí)驗(yàn)步驟1 .標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作取20mL刻度試管11支，從010分別編號(hào)，按表2-32-3加人溶液和水。表2-32-3苯酚法測(cè)可溶性糖繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的試劑量試齊i=r,呂勺01、23、45、67、89、10100ug.L-1蔗糖液/mL00.20.40.60.81.0水/mL2.01.81.61.41.21.0庶糖量/ug020406080100然后按順

11、序向試管內(nèi)加人1mL9%苯酚溶液，搖勻，再?gòu)墓芤赫嬉?20s加人5mL濃硫酸，求出標(biāo)準(zhǔn)曲線方搖勻。比色液總體積為8mL,在室溫下放置30min,比色。然后以空白為參比，在485nm波長(zhǎng)下比色測(cè)定吸光度，以糖含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線程。2 .可溶性糖的提取取新鮮植物葉片，擦凈表面污物，剪碎混勻，稱取0.10-0.30g,共3份（或干材料）,分別放人3支刻度試管中，加入5-10mL蒸儲(chǔ)水，塑料薄膜封口，于沸水中提取30min（提取2次），提取液過(guò)濾入25mL容量瓶中，反復(fù)漂洗試管及殘?jiān)?，定容至刻度?.測(cè)定吸0.5ml樣品液于試管中（重復(fù)2次），加蒸儲(chǔ)水1.5mL,步聚與制作標(biāo)

12、準(zhǔn)曲線相同，按順序分別加人苯酚、濃硫酸溶液，顯色并測(cè)定吸光度。由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出糖的含量。四、結(jié)果計(jì)算按下式計(jì)算測(cè)試樣品的糖含量可溶性糖含量從標(biāo)準(zhǔn)曲線查的糖的含量用仃小如工一.測(cè)定用樣品液的體積*提取次體和*稀料倍數(shù)106X樣品重量X100%實(shí)驗(yàn)53脯氨酸含量的測(cè)定在逆境條件下（旱、鹽堿、熱、冷、凍），植物體內(nèi)脯氨酸（proline,Pro）的含量顯著增加。植物體內(nèi)脯氨酸含量在一定程度上反映了植物的抗逆性,抗旱性強(qiáng)的品種往往積累較多的脯氨酸，因此測(cè)定脯氨酸含量可以作為抗旱育種的生理指標(biāo)。另外,由于脯氨酸親水性極強(qiáng),能穩(wěn)定原生質(zhì)膠體及組織內(nèi)的代謝過(guò)程，因而能降低冰點(diǎn),有防止細(xì)胞脫水的作用。在低溫條件

13、下，植物組織中脯氨酸增加，可提高植物的抗寒性，因此,亦可作為抗寒育種的生理指標(biāo)。、原理當(dāng)用磺基水楊酸提取植物樣品時(shí)，脯氨酸便游離于磺基水楊酸的溶液中，然后用酸性苛三酮加熱處理后，溶液即成紅色，再用甲苯處理,則色素全部轉(zhuǎn)移至甲苯中。色素的深淺即表示脯氨酸含量的高低。在520nm波長(zhǎng)下比色測(cè)定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出（或用同歸方程計(jì)算)脯氨酸的含量。二、材料、儀器設(shè)備及試劑(-)材料待測(cè)植物(水稻、小麥、玉米、高梁、大豆等)葉片。(二)儀器設(shè)備分光光度計(jì)，研體，小燒杯，容量瓶，大試管，普通試管，移液管，注射器，水浴鍋，漏斗，漏斗架，濾紙，剪刀。(三)試劑(1)酸性苛三酮溶液：將1.25g苛三酮溶于

14、30mL冰醋酸和20ml6mol/L磷酸中.攪拌加熱(70C)溶解，貯于冰箱中。(2)3%磺基水楊酸：3g磺基水楊酸加蒸儲(chǔ)水溶劑解后定容至100mL(3)冰醋酸。(4)甲苯。三、實(shí)驗(yàn)步驟1 .標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制(1)在分析天平上精確稱取25mg脯氨酸，倒人小燒杯內(nèi)，用少量蒸儲(chǔ)水溶解，然后倒人250mL容量瓶中，加蒸儲(chǔ)水定容至刻度，此標(biāo)準(zhǔn)液中每毫升含脯氨酸100ug。(2)系列脯氨酸濃度的配制。取6個(gè)50mL容量瓶，分別盛入脯氨酸原液0.5mL1.0mL、1.5mL2.0mL、2.5mL及3.0mL用蒸儲(chǔ)水定容至刻度，搖勻，各瓶的脯氨酸濃度分別為1ug/mL、2 ug/mL、3ug/mL、4ug/m

15、L、5ug/mL及6ug/mL。(3)取6支試管，分別吸取2mL系列標(biāo)準(zhǔn)濃度的脯氨酸溶液及2mL冰醋酸和2mL酸性苛三酮溶液，每管在沸水浴中加熱30min。(4)冷卻后各試管準(zhǔn)確加人4mL甲苯，探蕩30s,前置片刻，使包素全部轉(zhuǎn)至甲苯溶液。(5)用注射器輕輕吸取各管上層脯氨酸甲苯溶液至比色杯中，以甲苯溶液為空白對(duì)照，于520nm波長(zhǎng)處進(jìn)行比色。(6)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：先求出吸光度值(y)依脯氨酸濃度(x)而變的回歸方程式，再按回歸方程式繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算2mL測(cè)定液中脯氨酸的含量(ug/mL)。2.樣品的測(cè)定(1)脯氨酸的提?。簻?zhǔn)確稱取不同處理的待測(cè)植物葉片各0.5g,分別置大管中，然后向各管分

16、別加人5mL3%勺磺基水楊酸溶液，在沸水浴中提取10min（提取過(guò)程中要經(jīng)常播動(dòng)）,冷卻后過(guò)濾于干凈的試管中，濾液即為脯氨酸的提取液。（2）吸取2mL取液于另一干凈的帶玻塞試管中，加人2mL冰醋酸及2mL酸性苛三酮試劑，在佛水浴中加熱30min,溶液即呈紅色。（3）冷卻后加人4mL甲苯，搖蕩30s,靜置片刻，取上層液至10mL離心管中，在3000r/min下離心5min。（4）用吸管輕輕吸取上層脯氨酸紅色甲苯溶液于比色杯中，以甲苯為空白對(duì)照，在分光光度計(jì)上520nm波長(zhǎng)處比色，求得吸光度值。四、結(jié)果計(jì)算根據(jù)回歸方程計(jì)算出（或從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出）2mL測(cè)定液中脯氨酸的含量（ug/mL）,然后計(jì)算樣

17、品中脯氨酸含量的百分?jǐn)?shù)。計(jì)算公式如下：一，*一5Xx單位鮮重樣品的脯氨酸含量=2-Xl00%106x樣重實(shí)驗(yàn)8-12丙二醛的測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理植物器官在逆境條件下或衰老時(shí)，往往發(fā)生膜脂過(guò)氧化作用，丙二醛（MDA）是其產(chǎn)物之一，通常將其作為脂質(zhì)過(guò)氧化指標(biāo)，用于表示細(xì)胞膜脂過(guò)氧化程度和植物對(duì)逆境條件反應(yīng)的強(qiáng)弱。在酸性和高溫的條件下，丙二醛可與硫代巴比妥酸（TBA）反應(yīng)生成紅棕色的3,5,5-三甲基嗯陛-2,4-二酮，在532nm處有最大吸收波長(zhǎng)。但該反應(yīng)會(huì)受到可溶性糖的極大干擾，糖與TBA的反應(yīng)產(chǎn)物在532am處也有吸收，但其最大吸收波長(zhǎng)在450nm處。植物在經(jīng)受逆境脅迫時(shí)可溶性糖增加，因此測(cè)定中需排除

18、可溶性糖的干擾，通常加人低濃度Fe+（使其終濃度為0.5nmol/L.植物組織中鐵的含量一般為100300ug/g干重），以顯著增加TBA與糖的顯色反應(yīng)產(chǎn)物在450am處的吸收。采用雙組分分光光度法可分別求出MD母口可溶性糖的含量。該法針對(duì)混合液中的兩個(gè)組分，它們的光譜吸收峰雖有明顯的差異，但吸收曲線彼此又有些重疊，可根據(jù)Lambert-Beer定律，通過(guò)代數(shù)方法，計(jì)算出一種組分由于另一種組分存在時(shí)對(duì)OD值的影響，最后分別得到兩種組分的含量。器材與試劑1 .實(shí)驗(yàn)儀器分光光度計(jì)，離心機(jī)，研磨器，恒溫水浴鍋，具塞試管。2 .實(shí)驗(yàn)試劑三氯乙酸，石英砂，硫代巴比妥酸（TBA）溶液（用10%TCAS已制

19、0.6%的TBA溶液）。3 .實(shí)驗(yàn)材料盆栽小麥。實(shí)驗(yàn)步驟1 .MDA的提取盆栽小麥在抽德期停止?jié)菜?，進(jìn)行干旱處理，取葉片1g將其剪碎，加入10%三氯乙酸（TCA）2mL和少量石英砂，研磨；進(jìn)一步加人8mLTCA充分研磨，勻漿液以4000g離心10min,上清液即為樣品提取液。2 .顯色反應(yīng)及測(cè)定吸取2mL提取液，加人2mL0.6%TBA液，混勻，在試管上加蓋塞，置于沸水浴中沸煮15min,迅速冷卻，離心。取上清液測(cè)定332mnf口450nm處的OD直。對(duì)照管以2ml水代替提取液。3 .計(jì)算MDAWTBA反應(yīng)產(chǎn)物的最大吸收峰在532nm.TBA與可溶性糖（以蔗糖為例）的反應(yīng)產(chǎn)物的最大吸收峰在45

20、0nm吸收曲線彼此又有重疊。得到方程：?=6.45x10-6x?32-0.56X10-6X?癡根據(jù)公式即可計(jì)算樣品提取液中MDA勺含量，然后再計(jì)算每克樣品中MDA勺含量。實(shí)驗(yàn)3-3葉綠素a、葉綠素b含量測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】如果混合液中的兩個(gè)組分，它們的光譜吸收峰雖然有明顯的差異，但吸收曲線彼此有些重疊，在這種情況下要分別測(cè)定兩個(gè)組分，可根據(jù)Lambert-Beer定律，通過(guò)代數(shù)方法，計(jì)算一種組分由于另一種組分存在時(shí)對(duì)OD值的影響，最后分別得到兩種組分的含量。葉綠素a的最大吸收峰在663nm,葉綠素b在645nm,吸收曲線彼此又有重疊。根據(jù)Lambert-Beer定律，最大吸收光譜峰不同的兩個(gè)組分的

21、混合液，它們的質(zhì)量濃度p與光密度OD（A）之間有如下的關(guān)系：P?=12.7?63-2.69?&5P?=22.9?45-4.68?融P?=P?+P?=8.02?63+20.21?“式中P?若總?cè)~綠素質(zhì)量濃度，單位是mg/Lo利用上面公式，即可計(jì)算出葉綠素a和葉綠素b及總?cè)~綠素的質(zhì)量濃度（mg/L）?！酒鞑呐c試劑】1 .實(shí)驗(yàn)儀器高級(jí)型分光光度計(jì)，離心機(jī)，臺(tái)天平，剪刀，研缽，漏斗，移液管。2 .實(shí)驗(yàn)試劑丙酮，CaCOso3 .實(shí)驗(yàn)材料植物葉片?！緦?shí)驗(yàn)步驟】1 .色素的提取取新鮮葉片，剪去粗大的葉脈并剪成碎塊，稱取0.5g放人研缽中加純丙酮5mL少許CaCOF口石英砂，研磨成勻漿，再加80%W酮5mL

22、,將勻漿轉(zhuǎn)人離心管，并用適量80碗酮洗滌研缽，并轉(zhuǎn)入離心管，離心后棄沉淀，上清液用80斷酮定容至20mL。2 .測(cè)定OD直取上述色素提取液1mL,加80%f酮4mL稀釋后轉(zhuǎn)入比色杯中，以80哂酮為對(duì)照，分別測(cè)定663nm、645nm處的OD值。3 .計(jì)算按公式分別計(jì)算色素提取液中葉綠素a、葉綠素b及葉綠素a+b的濃度。再根據(jù)稀釋倍數(shù)分別計(jì)算每克鮮重葉片中色素的含量?！咀⒁馐马?xiàng)】1 .由于植物葉子中含有水分，故先用純丙酮進(jìn)行提取，以使色素提取液中丙酮的最終濃度近似80%2 .由于葉綠素a、b的吸收峰很陡，儀器波長(zhǎng)稍有偏差，就會(huì)使結(jié)果產(chǎn)生很大的誤差，因此最好能用波長(zhǎng)較正確的高級(jí)型分光光度計(jì)。過(guò)氧化

23、氫酶(CAT)活性測(cè)定過(guò)氧化氫酶普遍存在于植物的所有組織中，其活性與植物的代謝強(qiáng)度及抗寒、抗病能力有一定關(guān)系，故常加以測(cè)定。(1)試劑配制:0.2mol/L磷酸緩沖液(pH7.0):取A母液(Na2HPO61.0mL和B母液(NaHPO)39.0mL混合后至100mL(力口1gPVP)(2)反應(yīng)液配制：吸取5.68mL30%勺HkQ(原液)稀釋至1000mL,搖勻即可。(3)樣品測(cè)定：1 .酶液提取：稱取新鮮小麥葉片或其它植物組織0.5g置研缽中，加入23m14c下預(yù)冷的pH7.0磷酸緩沖液和少量石英砂研磨成勻漿后，轉(zhuǎn)入25ml容量瓶中，并用緩沖液沖洗研缽數(shù)次，合并沖洗液，并定容到刻度。混合均

24、勻?qū)⑷萘科恐?c冰箱中靜置10min,取上部澄清液在4000rpm下離心15min,上清液即為過(guò)氧化氫酶粗提液。4c下保存?zhèn)溆?2.測(cè)定：取10ml試管3支，其中2支為樣品測(cè)定管，1支為空白管（加入酶液后在沸水中煮沸5-10min,冷卻之后加入H2Q測(cè)定吸光值），按表40-2順序加入試劑。表40-2紫外吸收法測(cè)定樣品液配置表2口呂勺粗酶液（ml）pH7.8磷酸(ml)蒸儲(chǔ)水（ml）S10.21.51.0S20.21.51.0S30.21.51.025c預(yù)熱后，逐管加入0.3ml0.1mol/L的HQ,每加完一管立即記時(shí)，并迅速倒入石英比色杯中，240nm下測(cè)定吸光度，每隔1min讀數(shù)1次，共測(cè)

25、4min,待3支管全部測(cè)定完后，按下式計(jì)算酶活性。調(diào)零用磷酸緩沖液（pH=7.8）3.結(jié)果計(jì)算：以1min內(nèi)Amo減少0.1的酶量為1個(gè)酶活單位（u）。過(guò)氧化氫酶活性（u/g/min尸A240xVt/0.1xV1xtxFW式中Amo=Aso-（AS1+AS2）/2；Aso一加入煮死酶液的對(duì)照管吸光值；Asi,As2一樣品管吸光值；V一粗酶提取液總體積（ml）;M測(cè)定用粗酶液體積（ml）;FW-樣品鮮重（g）;0.1A240每下降0.1為1個(gè)酶活單位（u）;t加過(guò)氧化氫到最后一次讀數(shù)時(shí)間（min）植物抗逆性的測(cè)定（電導(dǎo)儀法）一、原理植物細(xì)胞膜對(duì)維持細(xì)胞的微環(huán)境和正常的代謝起著重要的作用。在正常情況下，組胞膜對(duì)物質(zhì)具有選擇透性能力。當(dāng)植物受到逆境影響時(shí)，如高溫或低溫，干旱、鹽漬、病原菌侵染后，細(xì)胞膜遭到破壞，膜透性增大，從而使細(xì)胞內(nèi)的電解質(zhì)外滲