第1部分臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)(師級)高頻考點(diǎn)教學(xué)_第1頁
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文檔簡介

1、第 1 部分 臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)第 1 單元 血液樣本采集和血涂片制備高頻考點(diǎn) 1 血液組成血液由血細(xì)胞( 紅細(xì)胞、白細(xì)胞 、血小板 )和血漿組成。離體自然凝固,分離的淡黃色 透明液體稱為血清。血液加抗凝劑后分離出來的淡黃色液體稱為血漿。血清與血漿相比,血 清缺少某些 凝血因子 ,如凝血因子(纖維蛋白原) 、(凝血酶原) 、等。典型試題 1(A1 型題)血清和血漿的主要區(qū)別是( A )A 血清中無纖維蛋白原B血清中無鈣離子C血清中無鎂離子D 血清是全血經(jīng)抗凝后而得 E血清中鈉離子水平低高頻考點(diǎn) 2 血液理化性質(zhì)1血量 正常成人血量約 45L ,占體重的 6%8%,其中血漿占 55%,血細(xì)胞占 45%

2、。 女性妊娠期間血量可增加 23% 25%。2酸堿度 pH7.35 7.45 。3比密 正常男性 1.055 1.063 ,女性 1.05l 1.060 ,相對黏度為 45;血漿比密 1.025 1.030;血細(xì)胞比密 1.090。4血漿滲透量 正常人 290 310mOsm/kg·H2O。高頻考點(diǎn) 3 血液特性和生理功能血液特性包括紅細(xì)胞的懸浮穩(wěn)定性、粘滯性和凝固性。正常人血液中紅細(xì)胞呈均勻混懸 狀態(tài),全血粘度約為生理鹽水粘度的4 5倍;血漿粘度為生理鹽水的 1.6 倍。血液粘度與血細(xì)胞比容和血漿粘度有關(guān),血漿中纖維蛋白原、球蛋白等大分子蛋白質(zhì)的濃度越高,血漿粘 度越高。由于凝血因

3、子 的作用,血液離開血管后,數(shù)分鐘內(nèi)便自行凝固。血液的主要生理功能有運(yùn)輸功能、協(xié)調(diào)功能、維護(hù)機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定和防御功能。高頻考點(diǎn) 4 采血方法1靜脈采血法 靜脈采血以 肘部靜脈 、手背靜脈 、內(nèi)踝靜脈或股靜脈為多。小兒可從 頸外靜脈 采血。2皮膚采血法 通常選擇耳垂或手指部位,手指采血比耳垂采血檢測結(jié)果穩(wěn)定 。WHO推薦采集 左手無名指指端內(nèi)側(cè) 血液,嬰幼兒可采集大拇趾或足跟內(nèi)外側(cè)緣血液,嚴(yán)重?zé)齻?者,可選擇皮膚完整處采血。3真空采血法 又稱負(fù)壓采血法 。真空采血裝置有 套筒式 、頭皮靜脈式 兩種。這種封 閉式采血方法能 減少 溶血、保護(hù)血液有形成分,提高檢測結(jié)果的可靠性。還能有效避免醫(yī)護(hù) 人

4、員和患者間 交叉感染 。不同檢驗(yàn)項(xiàng)目選用不同色碼的真空定量采血容器。4方法學(xué)評價(jià) 皮膚采血易于溶血、凝血、混入組織液,影響檢查結(jié)果。開放式靜脈 采血法的操作環(huán)節(jié)多、難于規(guī)范統(tǒng)一,在移液和丟棄注射器時(shí)可能造成 血液污染 。封閉式靜 脈采血法操作規(guī)范,有利于樣本收集運(yùn)送和保存,防止院內(nèi)血源性傳染病。典型試題 2(A1 型題)關(guān)于采血的敘述正確的是( A )A皮膚采血缺點(diǎn)是易于溶血、凝血、混入組織液B開放式采血法的操作環(huán)節(jié)少C 采血時(shí)患者情況不會影響結(jié)果D容器不潔不會引起溶血E樣本保存不當(dāng)不影響結(jié)果高頻考點(diǎn) 5 抗凝劑選擇抗凝是用物理或化學(xué)方法除去或抑制血液中某些凝血因子的活性,阻止血液凝固。常用

5、的抗凝劑: 乙二胺四乙酸 ( EDTA )鹽:與血液中 Ca2+形成螯合物, 使 Ca2+失去凝血作用。 不適于 凝血檢查 和血小板功能試驗(yàn)。草酸鹽:草酸根離子與樣本中Ca2+形成草酸鈣沉淀,使 Ca2+失去凝血作用。草酸鹽與血液比例為 1: 9。不適于 凝血檢查 。雙草酸鹽抗凝劑:適 用于 血細(xì)胞比容 、全血細(xì)胞計(jì)數(shù)( CBC )、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)等檢查,不適于 血小板計(jì)數(shù) 和白 細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。肝素:阻止 凝血酶 的形成和 血小板聚集 ,是 紅細(xì)胞透滲脆性試驗(yàn) 的理想抗 凝劑,不適于 CBC 和細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查。枸櫞酸鹽:與血中Ca2+結(jié)合形成螯合物,阻止血液凝固。適用于紅細(xì)胞沉降率、凝血檢查,

6、是輸血保養(yǎng)液的成分。典型試題 3( X 型題)與鈣離子結(jié)合的抗凝劑是( ABCE )A枸櫞酸鈉B EDTA Na2CEDTA K2D肝素 E草酸鈉高頻考點(diǎn) 6 載玻片的清潔和血涂片的制備新載玻片常帶有 游離堿質(zhì) ,須用 1mol/L HCl 清洗。血涂片的制備: 好的血片應(yīng)厚薄適宜、 頭體尾明顯、細(xì)胞分布均勻、血膜邊緣整齊、留有空隙。手工推片法: 血滴大小 、推片與 載玻片間夾角、 推片速度 、血細(xì)胞比容與涂片厚薄有關(guān)。載玻片壓拉法:適用于 血細(xì)胞活 體染色 。棕黃層涂片法:用于白細(xì)胞減低者的白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)、紅斑狼瘡細(xì)胞檢查等。 高頻考點(diǎn) 7 血液細(xì)胞染色1瑞氏染色法 染色原理包括物理吸附和化

7、學(xué)親和作用。瑞氏染料由 酸性染料 伊紅和 堿性染料 亞甲藍(lán)(又名美藍(lán)) 組成。血紅蛋白、嗜酸性顆粒與伊紅結(jié)合,呈粉紅色;細(xì)胞核 蛋白、淋巴細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞胞質(zhì)與美藍(lán)或天青(美藍(lán)的氧化形式)結(jié)合,呈紫藍(lán)色或藍(lán) 色;中性顆粒與伊紅和美藍(lán)結(jié)合, 呈淡紫紅色。 染色深淺與染液 pH 值(最適 pH 為 6.4 6.8)、 細(xì)胞數(shù)量、血膜厚度、染色時(shí)間、染液濃度有關(guān)。2吉姆薩染色 染色原理和結(jié)果與瑞氏染色基本相同。吉姆薩染液由天青、伊紅 組成。吉姆薩染液由吉姆薩染料、甘油和甲醇組成。典型試題 4(A1 型題)下列關(guān)于瑞氏染色的敘述,正確的是(E)A瑞氏染色的最適 pH 值為 6 7B染液配制后可立即使

8、用C瑞氏染料中含酸性染料美藍(lán)和堿性染料伊紅D染色時(shí)間不受室溫影響E緩沖液 pH 偏高,血涂片顏色會偏藍(lán)高頻考點(diǎn) 8 血涂片制備和血液細(xì)胞染色的方法學(xué)評價(jià)和質(zhì)量控制手工推片法應(yīng)用最廣泛,棕黃層涂片法可提高異常情況的陽性檢出率。瘧原蟲、微絲蚴 等檢查可采用 厚血涂片 法。瑞氏染色法最常用,對細(xì)胞質(zhì)成分、中性顆粒染色效果好。吉姆 薩染液對細(xì)胞核和寄生蟲的著色好, 是觀察 細(xì)胞核 和寄生蟲的首選染色方法。 瑞氏 -吉姆薩復(fù) 合染液可獲得滿意的細(xì)胞胞質(zhì)、顆粒、胞核等的染色效果。制備涂片時(shí),血細(xì)胞比容增高、血液粘度較高時(shí),應(yīng)采用 小血滴 、小角度、 慢推 ;而血 細(xì)胞比容減低、血液較稀時(shí),應(yīng)采用大血滴、大

9、角度、快推。 (周衛(wèi)平)第 2 單元 紅細(xì)胞檢查高頻考點(diǎn) 1 紅細(xì)胞生理1紅細(xì)胞的生成 紅細(xì)胞是血液中數(shù)量最多的有形成分。起源于 骨髓造血干細(xì)胞 。 從造血干細(xì)胞分化發(fā)育到網(wǎng)織紅細(xì)胞在骨髓中進(jìn)行,約需72h。在骨髓或血液中,網(wǎng)織紅細(xì)胞到成熟紅細(xì)胞約需 48h。紅細(xì)胞平均壽命約 120d 。衰老紅細(xì)胞主要在 脾破壞,分 解為鐵、珠蛋白和膽紅素。2紅細(xì)胞生理功能 通過血紅蛋白實(shí)現(xiàn)交換和攜帶氣體功能。高頻考點(diǎn) 2 血紅蛋白分子結(jié)構(gòu)和特點(diǎn)1結(jié)構(gòu) 血紅蛋白( Hb)由兩對 珠蛋白肽鏈 和 4 個(gè)亞鐵血紅素 構(gòu)成。珠蛋白: 4 條肽 鏈( 、 鏈)。亞鐵血紅素:原卟啉、鐵。2 2特點(diǎn) 正常情況下, 99%

10、Hb 為還原 Hb(HbA ),1%為高鐵 Hb(HbF)。只有 Fe2 狀態(tài)的 Hb 才能與氧結(jié)合,稱為氧合血紅蛋白。人體生長各期,Hb 的種類與比例不同。血紅蛋白合成受紅細(xì)胞生成素、雄激素調(diào)節(jié)。血紅蛋白相對分子質(zhì)量為64458。血紅蛋白降解產(chǎn)物為 珠蛋白 、血紅素 。高頻考點(diǎn) 3 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的檢測原理、方法學(xué)評價(jià)和質(zhì)量控制1手工顯微鏡法 在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù),經(jīng)換算求出每升血液中紅 細(xì)胞數(shù)量。不需要特殊設(shè)備,但操作復(fù)雜、費(fèi)時(shí)。誤差可源自樣本、操作、器材和固有誤差。2血液分析儀法 用電阻抗和(或)光散射原理。比手工法精確(如電阻抗計(jì)數(shù)法的 變異系數(shù)為 2% ,手工法則 >

11、11% )。當(dāng)白細(xì)胞數(shù)量明顯增高會干擾紅細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果。應(yīng)嚴(yán)格 按規(guī)程操作,并定期進(jìn)行室內(nèi)和室間質(zhì)控。高頻考點(diǎn) 4 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的參考值和臨床意義1參考值 成年男性(45.5)×1012/L;成年女性 (3.55.0)×1012/L;新生兒(6.0 7.0 )×1012/L。12 12 122醫(yī)學(xué)決定水平 >6.8 ×1012/L 需治療; <3.5 ×1012/L 診斷為貧血; <1.5 ×1012/L 考慮輸血。3臨床意義 ( 1)生理性變化 年齡、性別;精神因素;劇烈體力運(yùn)動(dòng)和勞動(dòng); 氣壓減低; 妊娠 。(2)各種

12、原因的貧血 急性、慢性紅細(xì)胞丟失過多;紅細(xì)胞壽命 縮短;造血原料不足;骨髓造血功能減退。 ( 3)紅細(xì)胞增多。高頻考點(diǎn) 5 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的操作方法高倍鏡下,計(jì)數(shù) 5 個(gè)中方格內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)。25 6 12 N 12 紅細(xì)胞 N 10 106 200 N 101210125 100高頻考點(diǎn) 6 血紅蛋白測定的檢測原理1氰化高鐵血紅蛋白( HiCN )法 HiCN 法是目前國際推薦測定血紅蛋白的方法 。血液 中除硫化血紅蛋白( SHb)外的各種 Hb 均可被高鐵氰化鉀氧化為高鐵血紅蛋白,再和CN 結(jié)合生成穩(wěn)定的棕紅色復(fù)合物 - 氰化高鐵血紅蛋白,其在 540nm 處有一吸收峰,用分光光度 計(jì)測定該處的

13、吸光度,可計(jì)算出每升血液中的血紅蛋白濃度。2十二烷基硫酸鈉血紅蛋白( SDS-Hb)法 血液中的 Hb 均可與低濃度 SDS 作用,生 成 SDS-Hb 棕紅色化合物,用分光光度計(jì)測定波峰 538mm 處吸光度,可得到每升血液中的 血紅蛋白濃度。高頻考點(diǎn) 7 血紅蛋白測定的方法學(xué)評價(jià)1 HiCN 法 操作簡單、顯色快、結(jié)果穩(wěn)定可靠、讀取吸光度后可直接定值。缺點(diǎn)是 氰 化鉀 (KCN )試劑有劇毒。2SDS-Hb 法 操作簡單、呈色 穩(wěn)定、準(zhǔn)確性和精確性符合要求、無 公害 。但不能直接 用吸光度計(jì)算 Hb 濃度。3疊氮高鐵血紅蛋白( HiN 3)法 優(yōu)點(diǎn)與 HiCN 測定法相似。最大吸收峰在 5

14、42nm,試 劑毒性小于氰化鉀。4堿羥血紅蛋白( AHD 575 )法 試劑簡單、呈色穩(wěn)定、無公害、吸收峰在 575nm、可 用氯化血紅素作為標(biāo)準(zhǔn)品。5溴代十六烷基三甲胺( CTAB )血紅蛋白法 試劑溶血性強(qiáng)又不破壞白細(xì)胞,適用于 儀器上自動(dòng)檢測 Hb 和白細(xì)胞。缺點(diǎn)是測定結(jié)果的準(zhǔn)確度和精密度不佳。6沙利( Sahli)酸化血紅蛋白法 簡單易行,但重復(fù)性差、誤差較大,基本淘汰。 7血細(xì)胞分析儀 操作簡單、快速、 同時(shí)可獲得多項(xiàng)紅細(xì)胞參數(shù)。儀器須經(jīng) HiCN 標(biāo)準(zhǔn) 液校正后才能使用。儀器法測定精度( CV )約為 1%。高頻考點(diǎn) 8 血紅蛋白測定的質(zhì)量控制異常血漿蛋白質(zhì)、高脂血癥、白細(xì)胞數(shù) &

15、gt;30×109/L 、脂滴等可產(chǎn)生濁度,干擾 Hb 測定。靜脈血的 Hb 比毛細(xì)血管血低 10% 15% 。稀釋倍數(shù)不準(zhǔn)、紅細(xì)胞溶解不當(dāng)、血漿中脂質(zhì)或 蛋白質(zhì)量增加會導(dǎo)致測定值假性增高。高頻考點(diǎn) 9 血紅蛋白測定的參考值及臨床意義1參考值 成年:男性 120 160g/L ;女性: 110150g/L 。新生兒: 170 200g/L 。 老年人( 70 歲以上):男性 94.2122.2g/L ;女性 86.5111.8g/L。2臨床意義 (1)生理性變化:隨年齡而變化;紅細(xì)胞和血紅蛋白量有天內(nèi)波動(dòng),上 午 7 時(shí)達(dá)高峰。( 2)病理性變化:血紅蛋白在判斷貧血程度方面優(yōu)于紅細(xì)胞

16、計(jì)數(shù) 。高頻考點(diǎn) 10 氰化高鐵血紅蛋白測定法操作在 5ml HiCN 轉(zhuǎn)化液中,加血 20 l ,充分混合,靜置 5min 后,倒入光徑 1cm 比色皿, 在其最大吸收峰波長 540nm 處,HiCN 轉(zhuǎn)化液或蒸餾水調(diào)零,測定吸光度 ( A)。根據(jù)公式直 540接計(jì)算: Hb(g/L ) AHiCN 64458 251 A 367.7 。采用 HiCN 參考液(50g/L 、100g/L 、 44 1000150g/L 、 200g/L ),在分光光度計(jì)上,波長 540nm 處,測定各種參考液的吸光度,以參考液 Hb 血紅蛋白含量為橫坐標(biāo), 吸光度為縱坐標(biāo), 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線, 或求出換算常數(shù)

17、( K)K。A 然后,根據(jù)樣本吸光度 (A)在標(biāo)準(zhǔn)曲線查出血紅蛋白濃度, 或用 K 值計(jì)算:Hb(g/L )K×A。 高頻考點(diǎn) 11 紅細(xì)胞形態(tài)檢查原理和參考值 將細(xì)胞分布均勻的血涂片進(jìn)行染色(常用瑞氏染色)后,根據(jù)各種細(xì)胞的呈色特點(diǎn),在 顯微鏡下進(jìn)行觀察和識別。瑞氏染色血涂片可見成熟紅細(xì)胞呈 雙凹圓盤形 、細(xì)胞大小一致、平均直徑 7.2 m(范圍 69.5 m)、淡粉紅色、中央 1/3 為生理性淡染區(qū)、胞質(zhì)內(nèi)無異常結(jié)構(gòu)。高頻考點(diǎn) 12 紅細(xì)胞形態(tài)檢查的臨床意義1大小改變 小紅細(xì)胞: 直徑 <6 m,見于缺鐵性貧血、 珠蛋白生成障礙性貧血和遺 傳性球形細(xì)胞增多癥。大紅細(xì)胞:直徑

18、 > 10 m,見于巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血和惡 性貧血等。巨紅細(xì)胞:直徑 > 15 m,見于巨幼細(xì)胞性貧血。紅細(xì)胞大小不均:見于嚴(yán) 重的增生性貧血(如巨幼細(xì)胞性貧血) 。2血紅蛋白含量改變正常色素性:正常人、 急性失血 、再生障礙性貧血和白血病等。低色素性: 缺鐵性貧血 、珠蛋白生成障礙性貧血、鐵幼粒細(xì)胞性貧血、某些血紅蛋白 病。高色素性: 巨幼細(xì)胞性貧血 。多色性:正常人(約占 1% )、骨髓造紅細(xì)胞功能活躍 (如溶血性或急性失血性貧血) 。細(xì)胞著色不一:同時(shí)出現(xiàn)低色素、正常色素性兩種細(xì)胞, 見于鐵粒幼紅細(xì)胞性貧血。3形狀改變 包括球形紅細(xì)胞、橢圓形紅細(xì)胞、 靶形紅細(xì)胞 、口

19、形紅細(xì)胞、 鐮形紅細(xì) 胞、 棘紅細(xì)胞 、裂紅細(xì)胞、有核紅細(xì)胞、淚滴形紅細(xì)胞及紅細(xì)胞形態(tài)不整。4異常結(jié)構(gòu) 包括嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞、豪焦小體( Howell- Jolly ' s b、od染y 色質(zhì)小體) 、 卡波環(huán)和寄生蟲。高頻考點(diǎn) 13 血細(xì)胞比容測定的檢測原理和方法學(xué)評價(jià)血細(xì)胞比容( Hct 或 PCV)是指在一定條件下,經(jīng)離心沉淀壓緊的紅細(xì)胞在全血樣本中 所占比值。1手工法 有折射計(jì)法、粘度法、比密測定法、離心法和放射性核素法。溫氏法( Wintrobe 法):采用中速離心, 不能完全排除紅細(xì)胞問殘留血漿, 測定結(jié)果偏高。 微量法: 采用高速離心使殘留血漿比溫氏法少,樣本用量小、操作

20、簡便、殘留血漿1%3% 。2血液分析儀法 儀器法 CV 為 1%,手工法 CV 為 2% ,儀器法應(yīng)注意紅細(xì)胞增多癥或 血漿滲透壓異常時(shí)會出現(xiàn)誤差。高頻考點(diǎn) 14 血細(xì)胞比容測定的參考值及臨床意義1參考值 溫氏法:男性 0.400.54;女性 0.37 0.47。微量法:男性 0.47 ±0.04; 女性 0.42 ±0.05。2臨床意義 增高:大量嘔吐、大手術(shù)后、腹瀉、失血、大面積燒傷、真性紅細(xì)胞 增多癥、繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥等。減低:各種貧血 。輸液評估:是臨床輸血、輸液治療療效觀察的指標(biāo)。計(jì)算平均值:作為紅細(xì)胞平均體積、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度計(jì)算的基 礎(chǔ)數(shù)據(jù)。高頻考點(diǎn)

21、15 紅細(xì)胞平均指數(shù)的檢測原理紅細(xì)胞平均指數(shù)包括 紅細(xì)胞平均容積 (MCV ),紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量 ( MCH )和 紅 細(xì)胞平均血紅蛋白濃度 (MCHC )。1手工法 通過紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白量和血細(xì)胞比容值計(jì)算紅細(xì)胞平均指數(shù)。(1)紅細(xì)胞平均容積: MCV 每升血液中紅細(xì)胞體積 Hct (fl )。每升血液中紅細(xì)胞個(gè)數(shù) RBC(2)紅細(xì)胞血平均紅蛋白含量: MCH 每升血液中血紅蛋白含 量 Hb ( pg)。每升血液中紅細(xì)胞個(gè)數(shù) RBC(3)紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度: MCHC 每升血液中血紅蛋白含 量 Hb ( g/L )。MCHC 每升血液中血細(xì)胞比容 Hct2血液分析儀 能直接導(dǎo)出

22、 MCV 值,再結(jié)合直接測定的 RBC 和 Hb,計(jì)算出 MCH( Hb/RBC )和 MCHC ( MCH× MCV )。高頻考點(diǎn) 16 紅細(xì)胞平均指數(shù)的參考值和臨床意義1參考值 新生兒: MCV91 112 fl ,MCH29 36 pg, MCHC280 360 g/L。成人: MCV 80100 fl ,MCH 2734 pg, MCHC 320 360 g/L。2臨床意義 主要用于貧血形態(tài)學(xué)分類(見表 1-1)。A大細(xì)胞性貧血B正常細(xì)胞性貧血C 單純小細(xì)胞性貧血表 1-1 貧血的紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)分類貧血分類MCVMCHMCHC貧血正細(xì)胞貧血正常正常正常再生障礙性、急性失血性貧血

23、,某些溶血性貧血大細(xì)胞貧血增高增高正常各種造血物質(zhì)缺乏或利用不良的貧血單純小細(xì)胞貧血減低減低正常慢性感染、慢性肝腎疾病性貧血小細(xì)胞低血素貧血減低減低減低缺鐵性貧血及鐵利用不良貧血,慢性失血性貧血典型試題 1(A1 型題)某貧血患者的 MCV 增高、 MCH 增高、 MCHC 正常,屬于( A )D抗酸染色E墨汁染色D 小細(xì)胞低色素性貧血E小細(xì)胞高色素性貧血高頻考點(diǎn) 17 紅細(xì)胞體積分布寬度紅細(xì)胞體積分布寬度 (RDW )反映樣本中紅細(xì)胞 體積大小的異質(zhì) 程度, 是評價(jià)紅細(xì)胞體 積的客觀指標(biāo),常用 變異系數(shù) (CV )表示。由血液分析儀的紅細(xì)胞體積直方圖導(dǎo)出。RDW比血涂片紅細(xì)胞形態(tài)大小的觀察更

24、為準(zhǔn)確。 RDW 受樣本中紅細(xì)胞碎片、紅細(xì)胞凝集、雙相 性紅細(xì)胞的影響。IDA )篩選診斷和療效觀RDW 的臨床意義:貧血形態(tài)學(xué)分類的指標(biāo);缺鐵性貧血( 察的指標(biāo);鑒別缺鐵性貧血和-珠蛋白生成障礙性貧血。高頻考點(diǎn) 18 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的檢測原理網(wǎng)織紅細(xì)胞 (Ret)是晚幼紅細(xì)胞脫核后到完全成熟紅細(xì)胞間的過渡細(xì)胞,屬于 未完全成熟的紅細(xì)胞,經(jīng)活體染色(新亞甲藍(lán)、煌焦油藍(lán)、中性紅等染料)后,呈深染的顆粒狀或網(wǎng) 狀結(jié)構(gòu)。凡含兩個(gè)以上的 深染顆粒 或具有 線網(wǎng)狀 結(jié)構(gòu)的無核紅細(xì)胞,即為網(wǎng)織紅細(xì)胞。 。 普通光學(xué)顯微鏡法:在鏡下計(jì)數(shù) 1000 個(gè)紅細(xì)胞中網(wǎng)織紅細(xì)胞的百分比或分?jǐn)?shù)。網(wǎng)織細(xì)胞 計(jì)數(shù)儀法和血液

25、分析儀法: 用熒光染料(如吖啶橙、派若寧 -Y、噻唑橙)使網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi) RNA 著色,用流式細(xì)胞術(shù)( FCM )得到網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)。典型試題 2(A1 型題)網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的染色方法是( C)A 瑞氏染色B堿性美藍(lán)染液C煌焦油藍(lán)染液高頻考點(diǎn) 19 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法學(xué)評價(jià)和質(zhì)量控制1普通光學(xué)顯微鏡法試管法操作簡便、重復(fù)性較好。玻片法取血量少、染色時(shí)水分易蒸發(fā),導(dǎo)致結(jié)果偏低。顯微鏡法受主觀因素影響較多,且耗時(shí)費(fèi)力。影響因素包括操作人 員對 網(wǎng)織紅細(xì)胞 的認(rèn)識、 血涂片質(zhì)量 、計(jì)數(shù)紅細(xì)胞的數(shù)量 、計(jì)數(shù)方法 等。 Miller 窺盤法計(jì)數(shù) 網(wǎng)織紅細(xì)胞可減少誤差。2網(wǎng)織細(xì)胞計(jì)數(shù)儀法將 Ret 分成高熒

26、光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞( HFR)、中熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞( MFR )、低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞( LFR)3 類,有助于化療、放療、移植患者的監(jiān)測。3血液分析儀法 網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟指數(shù)( RMI )=(MFRHFR)/LFR ×100)。測量細(xì) 胞多、避免主觀因素、方法易于標(biāo)準(zhǔn)化。高頻考點(diǎn) 20 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的參考值顯微鏡計(jì)數(shù)法:成人 0.008 0.02 或(2575)×109/L,新生兒 0.02 0.06 。 儀器法:男性 RMI 9.1% 32.2%,女性 12.8%33.7%。高頻考點(diǎn) 21 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的臨床意義正常情況下,骨髓中網(wǎng)織紅細(xì)胞均值為 150×1

27、012/L,血液中為 65×109/L 。 1判斷骨髓紅細(xì)胞造血情況增多:見于 溶血性貧血 、放療和化療后;減少:見于 再生障礙性貧血 和溶血性貧血再障危象。2骨髓移植效果監(jiān)測骨髓移植后第 21天, Ret>15 ×109/L,表示無移植并發(fā)癥;<15×109/L,伴嗜中性粒細(xì)胞和血小板增高,可能為骨髓移植失敗。3網(wǎng)織紅細(xì)胞生成指數(shù)( RPI) RPI 是網(wǎng)織紅細(xì)胞生成相當(dāng)于正常人的倍數(shù)。 Ret 生 存期限一般約 2d,若未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞提前釋放入血, Ret 生存期限將延長,為了糾正網(wǎng)織 紅細(xì)胞提前釋放引起的偏差,用網(wǎng)織 RPI 來反映 Ret 生

28、成速率。高頻考點(diǎn) 22 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的操作方法在 2 滴 10g/L 煌焦油藍(lán)生理鹽水溶液中加血 2 滴,混勻, 37放置 1520min ,制片后, 在油鏡下計(jì)數(shù)至少 1000 個(gè)紅細(xì)胞中網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù), 計(jì)算網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù) (%)和網(wǎng)織紅細(xì) 胞絕對值( ×109/L)(紅細(xì)胞數(shù) ×網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)) 。 WHO 推薦使用的網(wǎng)織紅細(xì)胞活體染 液為 新亞甲藍(lán) 。典型試題 3(A1 型題)網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)采用的染色方法是(C)A 瑞氏染色B 吉姆薩染色C煌焦油藍(lán)染色D HE 染色 E堿性亞甲藍(lán)染色高頻考點(diǎn) 23 點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的原理和參考值變性 RNA ,點(diǎn)彩紅細(xì)胞是尚未完全

29、成熟的紅細(xì)胞在發(fā)育過程中受到損害,其胞質(zhì)中殘存染色后出現(xiàn)大小、形狀不同的藍(lán)色顆粒。經(jīng)堿性亞甲基藍(lán)染色后,顆粒呈藍(lán)色顆粒;瑞氏染 色后,顆粒呈藍(lán)黑色。在油鏡下計(jì)數(shù)點(diǎn)彩紅細(xì)胞數(shù)百分率。參考值:0.03%。高頻考點(diǎn) 24 點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的臨床意義和操作方法1臨床意義 增高見于 中毒 ,如鉛、汞、銀、鉍、硝基苯、苯胺等;各類貧血: 如溶血性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血、惡性貧血、惡性腫瘤等。2操作方法 取新鮮血 1滴制片,用甲醇固定 3min,以50g/L堿性亞甲藍(lán)液 染色 12min, 然后在油鏡下計(jì)數(shù) 1000 個(gè)紅細(xì)胞中點(diǎn)彩紅細(xì)胞數(shù),最后計(jì)算點(diǎn)彩紅細(xì)胞數(shù)百分率。高頻考點(diǎn) 25 紅細(xì)胞沉降率測定的原理和方

30、法學(xué)評價(jià)1原理 紅細(xì)胞沉降率( ESR,血沉)指離體抗凝血靜置后,紅細(xì)胞在 單位時(shí)間內(nèi)沉降 的速度。分為緡錢狀紅細(xì)胞形成期、快速沉降期和細(xì)胞堆積期(緩慢沉積期) 。2方法學(xué)評價(jià) 手工法:有魏氏法、潘氏法等。魏氏法為 ICSH 推薦方法 。潘氏法與 魏氏法相關(guān)性好、用血量少,適于兒童。血沉儀法:儀器測量時(shí)間短、重復(fù)性好、不受環(huán) 境溫度影響。血沉率( ZSR):不受年齡、性別、貧血、試驗(yàn)條件的影響,但需特殊離心儀 器。高頻考點(diǎn) 26 紅細(xì)胞沉降率測定的質(zhì)量控制1影響紅細(xì)胞緡錢狀形成的主要因素血漿蛋白質(zhì)比例:小分子蛋白如清蛋白、卵磷脂等使血沉 減緩 ,大分子蛋白如急性反應(yīng)蛋白、免疫球蛋白、巨球蛋白、

31、膽固醇、甘油三 酯等使血沉 加快 。紅細(xì)胞數(shù)量和形狀:數(shù)量增多則血沉減慢,直徑越大血沉越快。血沉 管:血沉管傾斜,沉降率增加。血樣本抗凝劑:濃度增加、血液凝固。溫度:室溫過高 ( 25)血沉加快;室溫過低( 18 )血沉減慢。92操作方法和注意事項(xiàng)取 109mmol/L 枸櫞酸鈉 0.4ml ,加靜脈血 1.6ml ,混勻,用血沉管吸入混勻全血,并直立于血沉架上,1h 末準(zhǔn)確讀取紅細(xì)胞下沉后的血漿段高度,即紅細(xì)胞沉降率。血沉管內(nèi)徑應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)( 2.5mm )。血沉架應(yīng)避免直接光照、移動(dòng)和振動(dòng)。典型試題 4(A1 型題)關(guān)于血沉意義的敘述,正確的是(C)A 正常情況下紅細(xì)胞下沉較快B紅細(xì)胞越少,下沉

32、越慢C球蛋白增加可使血沉加快D卵磷脂可使血沉加快E血沉管傾斜使血沉減慢高頻考點(diǎn) 27 紅細(xì)胞沉降率測定的參考值1魏氏法 50 歲:男性 0 15mm/h ,女性 020mm/h 。 50歲:男性 020mm/h , 女性 0 30mm/h。 85 歲:男性 0 30mm/h,女性 0 42mm/h 。兒童: 0 10mm/h 。2潘氏法 成人:男性 0 10mm/h,女性 0 12mm/h。高頻考點(diǎn) 28 紅細(xì)胞沉降率測定的臨床意義1血沉增快 生理性:女性 高于 男性。老年人血沉增快。病理性:見于各種炎癥、 組織損傷及壞死、惡性腫瘤、高球蛋白血癥、貧血、高膽固醇血癥。2血沉減慢 真性或相對性紅

33、細(xì)胞增多癥、 DIC 消耗性低凝血期、 繼發(fā)性纖溶期、 肝病、 腫瘤、其他嚴(yán)重疾病因未產(chǎn)生急性反應(yīng)蛋白等使血沉減慢。 (周衛(wèi)平)第 3 單元 白細(xì)胞檢查高頻考點(diǎn) 1 粒細(xì)胞概要粒細(xì)胞發(fā)育階段分為:分裂池:包括原粒、早幼粒和中幼粒細(xì)胞,具有 分裂 能力; 成熟池: 包括晚幼粒和桿狀核粒細(xì)胞, 失去分裂能力; 貯備池: 包括桿狀核粒和分葉核粒, 成熟粒細(xì)胞貯存于骨髓,當(dāng)機(jī)體感染或應(yīng)激時(shí),可釋放入循環(huán)血液;循環(huán)池:成熟粒細(xì)胞 有一半隨血液而循環(huán),白細(xì)胞計(jì)數(shù)值就是 循環(huán)池 的粒細(xì)胞數(shù);邊緣池:進(jìn)入外周血的另一 半成熟粒細(xì)胞,粘附于微靜脈血管壁,邊緣池和循環(huán)池粒細(xì)胞保持動(dòng)態(tài)平衡。中性粒細(xì)胞具有 趨化、變

34、形 、粘附、吞噬和殺菌功能。嗜酸性粒細(xì)胞對組胺、抗原抗體 復(fù)合物、肥大細(xì)胞有趨化性,分泌組胺酶滅活組胺,限制過敏反應(yīng);參與對蠕蟲的免疫。嗜 堿性粒細(xì)胞對血清因子、細(xì)菌、補(bǔ)體和激肽釋放酶等物質(zhì)有趨化作用。典型試題 1(A1 型題)關(guān)于粒細(xì)胞動(dòng)力學(xué)的敘述,錯(cuò)誤的是(C)A根據(jù)粒細(xì)胞的發(fā)育階段而劃分B劃分為分裂池、成熟池、邊緣池、貯備池、循環(huán)池C白細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)所得的白細(xì)胞值是循環(huán)池和邊緣池的粒細(xì)胞數(shù)D總血液粒細(xì)胞池包括循環(huán)池和邊緣池E邊緣池及循環(huán)池的粒細(xì)胞之間可以互相換位,并經(jīng)常保持著動(dòng)態(tài)平衡高頻考點(diǎn) 2 單核細(xì)胞概要外周血中單核細(xì)胞,大部分粘附于血管壁,少數(shù)隨血液循環(huán),轉(zhuǎn)變?yōu)橛淄淌杉?xì)胞,再成 熟為

35、吞噬細(xì)胞 。單核-巨噬細(xì)胞具有 吞噬病原體 功能、 吞噬和清理 功能、吞噬抗原傳遞免疫信 息 功能,還參與殺菌、免疫和 抗腫瘤 。高頻考點(diǎn) 3 淋巴細(xì)胞概要淋巴細(xì)胞是人體主要免疫活性細(xì)胞, 約占白細(xì)胞總數(shù)的 1/4。B 淋巴細(xì)胞在 骨髓 、脾、淋 巴結(jié)、其他淋巴組織生發(fā)中心發(fā)育成熟,占20%30%,參與體液免疫; T 淋巴細(xì)胞在胸腺、脾、淋巴結(jié) 和其他淋巴組織,依賴胸腺素發(fā)育成熟,占60%70%,參與細(xì)胞免疫。還有少數(shù) NK 細(xì)胞(殺傷細(xì)胞) 、N 細(xì)胞(裸細(xì)胞) 、 D 細(xì)胞(雙標(biāo)志細(xì)胞) 。高頻考點(diǎn) 4 白細(xì)胞計(jì)數(shù)的檢測原理及方法學(xué)評價(jià)1原理 白細(xì)胞計(jì)數(shù) 是測定單位體積血液中各種白細(xì)胞總數(shù)

36、。顯微鏡計(jì)數(shù)法:用白 細(xì)胞計(jì)數(shù)稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù),并破壞紅細(xì)胞后,滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)盤,在顯微鏡下計(jì) 數(shù)一定范圍內(nèi)白細(xì)胞數(shù),經(jīng)換算求得每升血液中各種白細(xì)胞總數(shù)。血液分析儀計(jì)數(shù)法:電 阻抗法、光散射法。2方法學(xué)評價(jià):顯微鏡計(jì)數(shù)法:簡便易行,但重復(fù)性和準(zhǔn)確性較差,受微量吸管、 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、細(xì)胞分布、人為因素等多種情況影響。血液分析儀計(jì)數(shù)法:計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量 多、速度快、易于標(biāo)準(zhǔn)化、計(jì)數(shù)精確性較高。高頻考點(diǎn) 5 白細(xì)胞計(jì)數(shù)的質(zhì)量控制1經(jīng)驗(yàn)控制 與紅細(xì)胞數(shù)比較: 正常情況下,紅細(xì)胞數(shù) /白細(xì)胞數(shù)約為 (5001000)1。 與血涂片白細(xì)胞分布密度一致性。2計(jì)數(shù)誤差 熟練不操作、儀器未經(jīng)校準(zhǔn)。固有誤差:

37、計(jì)數(shù)室內(nèi)每次血細(xì)胞分布 不可能完全相同所致的誤差,與計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量成反比。 有核紅細(xì)胞 不能被白細(xì)胞稀釋液破 壞,使白細(xì)胞計(jì)數(shù)值假性增高。3質(zhì)量控制常規(guī)考核標(biāo)準(zhǔn) (RCS) 基于白細(xì)胞在計(jì)數(shù)池四大格的分布情況而定。若白 細(xì)胞 4×109/L,RCS 應(yīng)< 30%,白細(xì)胞 4.114.9 ×109/L,RCS 應(yīng)< 20%,白細(xì)胞 15×109/L, RCS 應(yīng)< 15%。超過上述標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)重新充池計(jì)數(shù)。典型試題 2(A1 型題)白細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)描述不正確的是(E)9A充池時(shí)不能有氣泡B白細(xì)胞 4×109/L 時(shí),要求 RCS< 30%9

38、C白細(xì)胞( 4.114.9)×109/L 時(shí),要求 RCS< 20%9D白細(xì)胞 15 ×109/L 時(shí),要求 RCS<15%E白細(xì)胞 15 ×109/L 時(shí),要求 RCS<10%高頻考點(diǎn) 6 白細(xì)胞計(jì)數(shù)的參考值及臨床意義1參考值 成人:(410)×109/L。新生兒:(1520)×109/L。6個(gè)月 2歲:(11 9912) ×109/L 。兒童:(5 12) ×10 9/L 。2臨床意義 白細(xì)胞計(jì)數(shù)與中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)的臨床意義基本相同。化膿性感染、急性 失血、急性溶血可引起白細(xì)胞數(shù)增高,但 病毒性感染 一般

39、不引起白細(xì)胞數(shù)增高。高頻考點(diǎn) 7 白細(xì)胞計(jì)數(shù)的操作方法顯微鏡計(jì)數(shù)法 白細(xì)胞稀釋液 0.38ml 加血 20 l ,充分混勻后充入計(jì)數(shù)池,室溫靜置 2 3min ,在低倍鏡下計(jì)數(shù)四角 4 個(gè)大方格 內(nèi)白細(xì)胞的總數(shù), 最后計(jì)算每升血液中白細(xì)胞計(jì)數(shù)值, 公式為:白細(xì)胞數(shù) = 4個(gè)大方格內(nèi)白細(xì)胞數(shù)( N) 10 20 106 N 109/L。4 20高頻考點(diǎn) 8 白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)的檢測原理、方法學(xué)評價(jià)和質(zhì)量控制白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)( DC )是將血液制成涂片,染色后在油鏡下進(jìn)行分類, 求得各種類型白 細(xì)胞的比值(百分率) 。方法:顯微鏡分類法:耗時(shí)、精確性和重復(fù)性較差。血液分析 儀分類法:有 三分群 和五分類

40、 兩法,速度快、準(zhǔn)確性高、易于標(biāo)準(zhǔn)化、能提示異常結(jié)果、結(jié) 果以數(shù)據(jù)、圖形、文字等多種形式展示,是白細(xì)胞分類和篩檢首選方法,但不能完全代替顯 微鏡檢查法對異常白細(xì)胞進(jìn)行鑒別和分類。影響分類計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性因素: (1)細(xì)胞分布不均; ( 2)形態(tài)識別差異:桿狀核和分葉核 診斷標(biāo)準(zhǔn)差異;單核細(xì)胞和大淋巴細(xì)胞鑒別能力差異;染色較差的涂片,嗜堿性粒細(xì)胞 和中性粒細(xì)胞難以區(qū)分。高頻考點(diǎn) 9 白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)的參考值表 1-2 成人白細(xì)胞分類參考范圍手工法儀器法百分率( %)絕對值 (×109/L )百分率( %)絕對值( ×109/L )中性桿狀核粒細(xì)胞150.040.5中性分葉核粒細(xì)胞50

41、702738681.89 5.32嗜酸粒細(xì)胞0.550.020.50.85.30.05 0.35嗜堿性細(xì)胞01010.21.00.01 0.06淋巴細(xì)胞20400.8422501.39 3.19單核細(xì)胞380.120.8511.40.30 0.75高頻考點(diǎn) 10 白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)的臨床意義1中性粒細(xì)胞(1)生理性增多:中性分葉核粒細(xì)胞 70%,絕對值 7×10 9/L 。常見于年齡變化; 日間變化;運(yùn)動(dòng)、疼痛、情緒變化;妊娠與分娩;其他。(2)反應(yīng)性增多:是機(jī)體的應(yīng)激反應(yīng),見于急性感染或炎癥;廣泛組織損傷或壞 死;急性溶血;急性失血;急性中毒;惡性腫瘤等。( 3)異常增生性增多:白血病

42、(如急性白血病、慢性白血?。?、骨髓增殖性疾?。ㄈ缯嫘约t細(xì)胞增多癥、原發(fā)性血小板增多癥、骨髓纖維化癥) 。(4)中性粒細(xì)胞減低:某些感染;血液??;慢性理化損傷;自身免疫性疾??; 脾功能亢進(jìn)。( 5)中性粒細(xì)胞核象變化:正常時(shí),外周血中性粒細(xì)胞以3 葉核居多,桿狀核與分葉核比值為 113。核左移:外周血中桿狀核粒細(xì)胞增多或(和)出現(xiàn)晚幼粒、中幼粒、早 幼粒等細(xì)胞稱為 核左移 。見于感染(尤其急性化膿性感染) 、急性中毒、急性溶血、急性失血 等。核右移:中性粒細(xì)胞核分葉 5葉以上者 3%稱為核右移 ,常伴白細(xì)胞總數(shù)減低。見于 營養(yǎng)性巨幼細(xì)胞性貧血、惡性貧血、應(yīng)用抗代謝藥物、炎癥恢復(fù)期。2嗜堿性粒細(xì)胞

43、 增多見于過敏性或炎癥性疾??;骨髓增生性疾病;嗜堿性粒 細(xì)胞白血病。減少見于甲狀腺功能亢進(jìn)、妊娠、放療、化療、糖皮質(zhì)激素治療、感染急性期。3淋巴細(xì)胞 生理性增多見于兒童期淋巴細(xì)胞生理性增多。病理性增多見于急性傳染 病、腎移植術(shù)后(如發(fā)生排異反應(yīng)) 、白血病(如淋巴細(xì)胞性白血病、白血性淋巴肉瘤) 、再 生障礙性貧血、粒細(xì)胞缺乏癥。4單核細(xì)胞 (1)生理性增多:出生后 2 周嬰兒可呈生理性單核細(xì)胞增多,可達(dá) 15% 或更多,妊娠時(shí)生理性增高與中性粒細(xì)胞變化相平行。(2)病理性增多:見于某些感染(如亞急性感染性心內(nèi)膜炎、 瘧疾、黑熱病等) 、急性感染恢復(fù)期、活動(dòng)性肺結(jié)核(如嚴(yán)重的浸潤 性和粟粒性結(jié)核

44、) 、某些血液?。ㄈ缌<?xì)胞缺乏癥恢復(fù)期、惡性組織細(xì)胞病、淋巴瘤、單核細(xì) 胞白血病、骨髓增生異常綜合征) 。典型試題 3(A1 型題)關(guān)于中性粒細(xì)胞核象的敘述,錯(cuò)誤的是(D)A 可分為核左移和核右移 2 種B反映粒細(xì)胞的成熟程度C核象變化反映某些疾病的病情和預(yù)后D 正常外周血中性粒細(xì)胞核以分 2 葉的居多E桿狀核與分葉核之比約為 1 13典型試題 4( A1 型題)中性粒細(xì)胞減少見于( A)A 電離輻射B 大葉性肺炎C慢性粒細(xì)胞白血病D 急性溶血E急性失血高頻考點(diǎn) 11 嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)的檢測原理、方法學(xué)評價(jià)及參考值用嗜酸性粒細(xì)胞稀釋液破壞紅細(xì)胞和大部分白細(xì)胞,并將嗜酸性粒細(xì)胞著色,滴入細(xì)胞 計(jì)

45、數(shù)盤計(jì)數(shù)。參考值:成人 ( 0.05 0.5) ×109/L。方法學(xué)評價(jià):顯微鏡計(jì)數(shù)法:嗜酸性粒 細(xì)胞絕對值比百分率更有臨床價(jià)值。血液分析儀法:提供嗜酸性粒細(xì)胞百分率、絕對值、 直方圖和散點(diǎn)圖,是目前最有效的嗜酸性粒細(xì)胞篩檢方法。高頻考點(diǎn) 12 嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)的臨床意義1增多 成人外周血嗜酸性粒細(xì)胞 0.5 ×10 9/L 。見于 寄生蟲病 ;變態(tài)反應(yīng)性疾??; 皮膚?。谎翰?;某些惡性腫瘤;某些傳染??;其他疾病:風(fēng)濕性疾病、腦垂體 前葉功能減低癥、 腎上腺皮質(zhì)功能減低癥、 過敏性間質(zhì)性腎炎等; 高嗜酸性粒細(xì)胞綜合征。2減低 見于長期應(yīng)用 腎上腺皮質(zhì)激素 、某些急性傳染病,

46、如 傷寒極期 。高頻考點(diǎn) 13 嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)的操作方法取嗜酸性粒細(xì)胞稀釋液 0.38ml,加血 20 l,混勻后充入計(jì)數(shù)板 2 個(gè)計(jì)數(shù)池中,靜置 3 5min ,然后,在低倍鏡下計(jì)數(shù) 2個(gè)計(jì)數(shù)池共 10個(gè)大方格 內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)量,計(jì)算: 嗜酸性粒細(xì)胞 /L 10個(gè)大方格內(nèi)的嗜酸性粒 細(xì)胞 10 20 106。10高頻考點(diǎn) 14 白細(xì)胞形態(tài)檢查的檢測原理血涂片經(jīng)染色后, 在普通光學(xué)顯微鏡下作白細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察和分析。 常用的染色方法有: 瑞氏染色法、吉姆薩染色法、 May-Grünwald 法、 Jenner法、 Leishman 染色法等。高頻考點(diǎn) 15 白細(xì)胞形態(tài)檢查的臨床意義

47、1中性粒細(xì)胞:在嚴(yán)重傳染病、化膿性感染、中毒、惡性腫瘤、大面積燒傷等情況 下,可見中性粒細(xì)胞大小不均、中毒顆粒、空泡、D?hle 體、退行性變。毒性指數(shù)指中毒顆粒所占中性粒細(xì)胞 ( 100個(gè)或 200個(gè))的百分率。 1為極度, 0.75為重度, 0.5為中度, <0.25 為輕度。巨多分葉核中性粒細(xì)胞:細(xì)胞體積較大,直徑1625 m,核分葉常在 5 葉以上,甚至在 10 葉以上,核染色質(zhì)疏松。見于巨幼細(xì)胞貧血、抗代謝藥物治療后。棒狀小體: 細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)呈紫紅色細(xì)桿狀物質(zhì), 長約 16 m,1條或數(shù)條,見于 急性白血病 。 Pelger-Huet 畸形:細(xì)胞核為桿狀或分 2 葉,呈 腎形或

48、啞鈴形 ,染色質(zhì)聚集成塊或條索網(wǎng)狀。為常染色體 顯性遺傳性異常,也可繼發(fā)于某些嚴(yán)重感染、白血病、骨髓增生異常綜合征、腫瘤轉(zhuǎn)移、某 些藥物(如秋水仙胺、磺基二甲基異嚼唑)治療后。 Chediak-Higashi 畸形:細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有 數(shù)個(gè)數(shù) 10 個(gè)包涵體,直徑約 2 5 m,呈紫藍(lán)、紫紅色。見于 Chediak-Higashi 綜合征,為 常染色體隱性遺傳。 Alder-Reilly 畸形:細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有巨大的、深染的、嗜天青顆粒,染深 紫色。見于脂肪軟骨營養(yǎng)不良、遺傳性粘多糖代謝障礙。 May-Hegglin 畸形:細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含 有淡藍(lán)色包涵體,見于嚴(yán)重感染。2淋巴細(xì)胞:異型淋巴細(xì)胞:在淋巴細(xì)胞性

49、白血病、病毒感染、百日咳、布魯菌病、 梅毒、弓形蟲感染、藥物反應(yīng)等情況下,淋巴細(xì)胞增生,出現(xiàn)某些形態(tài)學(xué)變化,稱為異型淋 巴細(xì)胞。分為 3 型:型:胞體比正常淋巴細(xì)胞稍大,多為圓形、橢圓形、不規(guī)則形。核圓 形、腎形、分葉狀,常偏位。染色質(zhì)粗糙、呈粗網(wǎng)狀或小塊狀、排列不規(guī)則。胞質(zhì)豐富、染 深藍(lán)色、含空泡或呈泡沫狀。型(不規(guī)則型,單核細(xì)胞型) :胞體較大,外形常不規(guī)則, 可有多個(gè)偽足。核形狀及結(jié)構(gòu)與型相同或更不規(guī)則,染色質(zhì)較粗糙致密。胞質(zhì)豐富、染淡 藍(lán)或灰藍(lán)色、有透明感、邊緣處著色較深、一般無空泡、可有少數(shù)嗜天青顆粒。型(幼稚 型):胞體較大,核圓形、卵圓形。染色質(zhì)細(xì)致呈網(wǎng)狀排列、可見 12 個(gè)核仁

50、。胞質(zhì)深藍(lán)色、 可有少數(shù)空泡。放射線損傷后淋巴細(xì)胞形態(tài)變化:核固縮、核破碎、雙核、衛(wèi)星核淋巴細(xì) 胞(胞質(zhì)中主核旁出現(xiàn)小核) 。淋巴細(xì)胞性白血病時(shí)形態(tài)學(xué)變化:在急、慢性淋巴細(xì)胞白 血病,出現(xiàn)各階段原幼細(xì)胞,并有形態(tài)學(xué)變化。3漿細(xì)胞:正常漿細(xì)胞直徑 8 9 m,胞核圓、偏位,染色質(zhì)粗塊狀、呈車輪狀或龜背狀排列;胞質(zhì)灰藍(lán)色、紫漿色、有泡沫狀空泡,無顆粒。外周血出現(xiàn) 漿細(xì)胞 ,見于傳染性單 核細(xì)胞增多癥、流行性出血熱、弓形體病、梅毒、結(jié)核病等。異常形態(tài)漿細(xì)胞有: Mott 細(xì) 胞:漿細(xì)胞內(nèi)充滿大小不等、直徑 2 3 m 藍(lán)紫色球體,呈桑椹樣。見于反應(yīng)性漿細(xì)胞增多 癥、瘧疾、黑熱病、多發(fā)性骨髓瘤。火焰狀

51、漿細(xì)胞:漿細(xì)胞體積大,胞質(zhì)紅染、邊緣呈火 焰狀。見于 IgA 型骨髓瘤。 Russell 小體:漿細(xì)胞內(nèi)有數(shù)目不等、大小不一、直徑2 3 m紅色小圓球。見于多發(fā)性骨髓瘤、傷寒、瘧疾、黑熱病等。 (周衛(wèi)平)第 4 單元 血液分析儀及其臨床應(yīng)用高頻考點(diǎn) 1 電阻抗法血液分析儀檢測原理1電阻抗法血細(xì)胞計(jì)數(shù)原理(庫爾特原理)容器感應(yīng)區(qū)內(nèi)電阻增高,引起瞬間電壓變化形成脈沖信號, 脈沖振幅 越高,細(xì)胞體積越大; 脈沖數(shù)量 越多,細(xì)胞數(shù)量越多,由此得 出血液中血細(xì)胞數(shù)量和體積值。2白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)原理經(jīng)溶血?jiǎng)┨幚淼摹⒚撍摹⒉煌w積的白細(xì)胞通過小孔時(shí),脈沖大小不同,將體積為 35450fl 白細(xì)胞,分為 25

52、6 個(gè)通道,淋巴細(xì)胞位于 3590fl 的小 細(xì)胞區(qū);粒細(xì)胞( 中性粒細(xì)胞 )位于 160fl 以上的大細(xì)胞區(qū);單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜 堿性粒細(xì)胞、原始細(xì)胞、幼稚細(xì)胞等,位于90 160fl 的單個(gè)核細(xì)胞區(qū),又稱為中間型細(xì)胞。儀器根據(jù)各亞群占總體的比例,計(jì)算出各亞群細(xì)胞的百分率,并同時(shí)計(jì)算各亞群細(xì)胞的絕對 值,顯示白細(xì)胞體積分布直方圖。3血紅蛋白測定原理血紅蛋白與溶血?jiǎng)┲械哪承┏煞纸Y(jié)合形成一種血紅蛋白衍生物,在特定波長( 530550nm)下比色,吸光度與稀釋液中 Hb 含量成正比,最終顯示 Hb 濃度。 氰化鉀的溶血?jiǎng)c血紅蛋白作用后形成氰化血紅蛋白,其最大吸收峰接近540nm。高頻考

53、點(diǎn) 2 光散射法血液分析儀檢測原理1光散射法白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類計(jì)數(shù)激光與細(xì)胞化學(xué)法; 容量、電導(dǎo)、光散射( VCS)法;電阻抗與射頻法;多角度偏振光散射(MAPSS )法。2光散射法紅細(xì)胞檢測原理低角度( 2° 3°)光散射能測量單個(gè)紅細(xì)胞體積,高角度( 5° 15°)光散射能測量單個(gè)紅細(xì)胞血紅蛋白濃度,得出MCV 、MCH 、MCHC 值,并顯示紅細(xì)胞散射圖、單個(gè)紅細(xì)胞體積和血紅蛋白含量直方圖。3光散射法血小板檢測原理高角度( 5°15°)光散射能測量細(xì)胞折射指數(shù)( RI ),低角度( 2° 3°)光散射能測量細(xì)胞

54、大小。在二維散射圖上得出血小板數(shù)量和相關(guān)參數(shù)。4網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)原理利用 新亞甲藍(lán) 使網(wǎng)織紅細(xì)胞 RNA 著色,加入使紅細(xì)胞內(nèi)Hb 溢出的試劑,使其成為 “影細(xì)胞 ”,然后采用 VCS 原理,得出網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)和相關(guān)參數(shù)。 利用堿性槐黃 O等熒光染料與網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)的 RNA 結(jié)合,以波長 488nm 氬氖激光束為激 光源照射網(wǎng)織紅細(xì)胞,得到前向散射光強(qiáng)度(細(xì)胞體積大?。┖蜔晒鈴?qiáng)度(胞質(zhì)內(nèi) RNA 多 少),形成二維顯示散點(diǎn)圖,得出網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)和相關(guān)參數(shù)。高頻考點(diǎn) 3 白細(xì)胞直方圖35 450fl 范圍內(nèi)將白細(xì)胞血液分析儀提供細(xì)胞體積分布圖形。正常白細(xì)胞直方圖,在 分為 3 群,左側(cè)峰又高又陡為 淋

55、巴細(xì)胞峰 ,最右側(cè)峰又低又寬為 中性粒細(xì)胞峰 ,左右兩峰間 的谷區(qū)較平坦為 單個(gè)核細(xì)胞峰 。表 1-3 白細(xì)胞直方圖變化的部分原因白細(xì)胞直方圖變化主要原因淋巴細(xì)胞峰左側(cè)異常有核紅細(xì)胞、血小板聚集、 巨大血小板 、未溶解紅細(xì)胞、瘧原蟲、冷凝集蛋白、脂類顆粒、異形淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞峰右移, 與單個(gè)核細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病、異型淋巴細(xì)胞峰左側(cè)相連并抬高單個(gè)核細(xì)胞峰抬高增寬原始或幼稚細(xì)胞、漿細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞增多、 嗜堿性粒細(xì)胞增多、單核細(xì)胞增多單個(gè)核細(xì)胞峰與中性粒細(xì)胞峰未成熟的中性粒細(xì)胞、異常細(xì)胞亞群、嗜酸性粒細(xì)胞增多之間異常中性粒細(xì)胞峰右移、 抬高、 增寬中性粒細(xì)胞絕對值增多直方

56、圖多區(qū)出現(xiàn)異常以上多種原因引起高頻考點(diǎn) 4 紅細(xì)胞直方圖正常紅細(xì)胞直方圖, 在 36360fl 范圍內(nèi)分布兩個(gè)細(xì)胞群體, 從 50125fl 區(qū)域有一個(gè)兩側(cè) 對稱、較狹窄的曲線,為 正常大小的紅細(xì)胞 ,從 125200fl 區(qū)域有另一個(gè)低而寬的曲線,為 大紅細(xì)胞 、網(wǎng)織紅細(xì)胞 。當(dāng)紅細(xì)胞體積大小發(fā)生變化時(shí),峰左移或右移,或出現(xiàn)雙峰。高頻 考點(diǎn) 5 血小板直方圖正常血小板直方圖,在 2 30fl 范圍內(nèi)分布,呈左偏態(tài)分布,集中分布于215fl 內(nèi)。當(dāng)有 大血小板 或 小紅細(xì)胞 、聚集血小板時(shí),直方圖顯示異常。高頻考點(diǎn) 6 血液分析儀部分檢測參數(shù)臨床意義1紅細(xì)胞血紅蛋白分布寬度( HDW ) 正常參考范圍為 24 34g/L。遺傳性球形紅細(xì)胞 增多癥時(shí) RDW 、HDW 明顯增高,為小細(xì)胞不均一性高色素性貧血。2血小板平均體積( MPV ) 鑒別血小板減低的病因

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