血培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)操作與結(jié)果解釋

1、血培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)操作與結(jié)果解釋血培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)操作與結(jié)果解釋無錫市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科胡錫池主要內(nèi)容n血流感染定義及血培養(yǎng)的意義血流感染定義及血培養(yǎng)的意義n血培養(yǎng)送檢指征血培養(yǎng)送檢指征n樣本采集和運(yùn)送樣本采集和運(yùn)送n特殊類型的血培養(yǎng)特殊類型的血培養(yǎng)n結(jié)果報(bào)告結(jié)果報(bào)告血流感染定義及血培養(yǎng)的意義血流感染定義及血培養(yǎng)的意義n血流感染定義血流感染定義 ：是指各種病原微生物侵入血循環(huán)，在血液中繁殖，釋放毒素和代謝產(chǎn)物，并誘導(dǎo)細(xì)胞因子釋放，引起全身感染、中毒和全身炎癥反應(yīng)（SIRS），進(jìn)一步導(dǎo)致血壓下降、凝血和纖溶系統(tǒng)的改變，引起全身多器官功能障礙綜合征（MODS），是一種嚴(yán)重的全身感染性疾病。n血培養(yǎng)的意義：血培

2、養(yǎng)的意義：u證實(shí)感染性病原體證實(shí)感染性病原體u指導(dǎo)正確的抗菌藥物使用指導(dǎo)正確的抗菌藥物使用 血培養(yǎng)送檢指征血培養(yǎng)送檢指征當(dāng)病人出現(xiàn)下列系統(tǒng)炎癥反應(yīng)的臨床或?qū)嶒?yàn)室特征時(shí)應(yīng)當(dāng)采血送血培養(yǎng)：體溫38或36；心率90次/分鐘；呼吸頻率20次/分鐘或PaCO232mmHg；白細(xì)胞計(jì)數(shù)12*109/L或4*109/Ln發(fā) 熱： 高熱（39C以上），伴有明顯的 毒血癥狀，以間歇遲張熱多見。n皮 疹： 革蘭陰性菌瘀點(diǎn) 傷寒玫瑰疹 斑疹傷寒暗紅色斑丘疹n肝脾腫大：革蘭陰性菌敗血癥n關(guān)節(jié)疼痛：革蘭陽性菌敗血癥n神志昏迷或休克：革蘭陰性菌毒血癥狀n 化膿性病灶或損傷化膿性病灶或損傷n 粘膜損傷性疾病粘膜損傷性疾病n

3、 肝臟疾病肝臟疾病n 糖尿病糖尿病n 血液疾病及惡性腫瘤血液疾病及惡性腫瘤n 呼吸道感染或呼吸衰竭：吸入或血源呼吸道感染或呼吸衰竭：吸入或血源n 長期輸液或?qū)Ч芙槿爰膊￠L期輸液或?qū)Ч芙槿爰膊 血液透析患者血液透析患者血培養(yǎng)送檢指征血培養(yǎng)送檢指征樣本采集和運(yùn)送樣本采集和運(yùn)送n采血時(shí)機(jī)采血時(shí)機(jī)n血培養(yǎng)的次數(shù)血培養(yǎng)的次數(shù)n采血量采血量n血液標(biāo)本在需氧瓶和厭氧瓶中的分配血液標(biāo)本在需氧瓶和厭氧瓶中的分配n采血要求采血要求n標(biāo)本的運(yùn)送要求和拒收標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)本的運(yùn)送要求和拒收標(biāo)準(zhǔn)樣本采集和運(yùn)送采血時(shí)機(jī)樣本采集和運(yùn)送采血時(shí)機(jī) n只要懷疑患者有菌血癥、真菌血癥的可能，在考慮使用抗菌藥物之前，應(yīng)立即采集血培養(yǎng)標(biāo)本。樣

4、本采集和運(yùn)送樣本采集和運(yùn)送 血培養(yǎng)的次數(shù)血培養(yǎng)的次數(shù) n對(duì)懷疑菌血癥的成人患者，推薦同時(shí)采集23套(不同部位)血培養(yǎng)標(biāo)本（即雙側(cè)雙瓶雙側(cè)雙瓶同時(shí)采集血培養(yǎng)標(biāo)本）。n嬰幼兒患者，推薦同時(shí)采集2次(不同部位)血培養(yǎng)標(biāo)本。與臨床癥狀不相符的單次血培養(yǎng)陽性結(jié)果難以向臨床解釋（常常為皮膚表面的寄生菌）。樣本采集和運(yùn)送樣本采集和運(yùn)送 采血量采血量 n成年患者推薦的采血量為每套不少于10m，每瓶不少于5m，n嬰幼兒患者推薦的采血量，每瓶不少于2mJ（少于病人總血量的1%）。樣本采集和運(yùn)送樣本采集和運(yùn)送 血液標(biāo)本在需氧瓶和厭血液標(biāo)本在需氧瓶和厭氧瓶中的分配氧瓶中的分配n推薦以一個(gè)需氧瓶和一個(gè)厭氧瓶為一套血培養(yǎng)

5、，作為常規(guī)血培養(yǎng)的組合。u采用一對(duì)需氧瓶/厭氧瓶組合，比采用二個(gè)需氧瓶的組合可檢出更多的葡萄球菌、腸桿菌科細(xì)菌和厭氧菌。u當(dāng)采血量不能滿足推薦的采血量時(shí)，應(yīng)首先滿足需氧瓶的培養(yǎng)的需要。報(bào)告時(shí)間提前報(bào)告時(shí)間提前n出現(xiàn)陽性時(shí)間：出現(xiàn)陽性時(shí)間： 需氧瓶有需氧瓶有9%9%比厭氧瓶早比厭氧瓶早1 1天報(bào)告結(jié)果天報(bào)告結(jié)果 厭氧瓶有厭氧瓶有5%5%比需氧瓶早比需氧瓶早1 1天報(bào)告結(jié)果天報(bào)告結(jié)果n因此因此, ,只做需氧菌不做厭氧菌培養(yǎng)只做需氧菌不做厭氧菌培養(yǎng), ,將有將有19%19%的的菌株不能發(fā)現(xiàn)菌株不能發(fā)現(xiàn), ,另有另有5%5%的血培養(yǎng)延遲的血培養(yǎng)延遲1 1天報(bào)告天報(bào)告陽性結(jié)果陽性結(jié)果血培養(yǎng)采集套數(shù)及血量

6、血培養(yǎng)采集套數(shù)及血量Khanna P, Collignon P. Anaerobic bottles are still important in blood culture Khanna P, Collignon P. Anaerobic bottles are still important in blood culture sets. Eur J ClinMicrobiol InfectDis, 2001, 20: 217-219sets. Eur J ClinMicrobiol InfectDis, 2001, 20: 217-219樣本采集和運(yùn)送樣本采集和運(yùn)送 血液標(biāo)本在需氧瓶和厭血

7、液標(biāo)本在需氧瓶和厭氧瓶中的分配氧瓶中的分配總結(jié)：總結(jié)： 如果血培養(yǎng)只做需氧瓶培養(yǎng)，漏檢的不僅如果血培養(yǎng)只做需氧瓶培養(yǎng)，漏檢的不僅是嚴(yán)格厭氧菌是嚴(yán)格厭氧菌, ,也會(huì)影響兼性厭氧菌的分離也會(huì)影響兼性厭氧菌的分離率及報(bào)告陽性結(jié)果的時(shí)間率及報(bào)告陽性結(jié)果的時(shí)間血培養(yǎng)采集套數(shù)及血量血培養(yǎng)采集套數(shù)及血量樣本采集和運(yùn)送樣本采集和運(yùn)送 血液標(biāo)本在需氧瓶和厭血液標(biāo)本在需氧瓶和厭氧瓶中的分配氧瓶中的分配樣本采集和運(yùn)送樣本采集和運(yùn)送 采血要求采血要求 皮膚消毒：推薦使用碘酊、次氯酸和洗必 泰或碘伏作為皮膚消毒劑采集部位：推薦從外周靜脈采集血液標(biāo)本。樣本采集和運(yùn)送樣本采集和運(yùn)送 采血要求采血要求 血培養(yǎng)瓶的接種順序n如

8、果用注射器及針采血，應(yīng)先接種厭氧瓶避免空氣進(jìn)入。n如果用蝶形針采血，應(yīng)先接種需氧瓶，以免裝置里的空氣傳送到厭氧瓶中。n如果抽取的血液量少于推薦量，血液應(yīng)先足量接種需氧瓶，剩余的血液應(yīng)該接種到厭氧瓶中。 樣本采集和運(yùn)送樣本采集和運(yùn)送 采血要求采血要求 如何減少污染如何減少污染 ？n在皮膚消毒前，血培養(yǎng)瓶的橡皮塞需使用70異丙醇酒精消毒并干燥，然后再進(jìn)行穿刺部位的皮膚消毒。n嚴(yán)格按照皮膚消毒步驟操作(酒精、碘酊、酒精)，并等待足夠的消毒時(shí)間n嚴(yán)格無菌操作，不允許在消毒后按壓靜脈，除非帶有無菌手套。n不要換針頭，采用真空采血裝置能降低污染率。 血培養(yǎng)可接受的污染率是3%。樣本采集和運(yùn)送樣本采集和運(yùn)送

9、 標(biāo)本的運(yùn)送要求和拒收標(biāo)本的運(yùn)送要求和拒收標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)n運(yùn)送要求運(yùn)送要求u采集后的血培養(yǎng)瓶應(yīng)在1小時(shí)內(nèi)送往實(shí)驗(yàn)室。u接種前后的血培養(yǎng)瓶均不得冷藏或冷凍。n拒收標(biāo)準(zhǔn)拒收標(biāo)準(zhǔn)：u標(biāo)簽錯(cuò)誤或未貼標(biāo)簽u血培養(yǎng)瓶破損或滲漏u血液凝固 特殊類型的血培養(yǎng)n真菌血培養(yǎng)：真菌血培養(yǎng)：懷疑真菌菌血癥的患者采用需氧血培養(yǎng)瓶采集標(biāo)本n分枝桿菌血培養(yǎng)分枝桿菌血培養(yǎng)：分枝桿菌血培養(yǎng)必須用特殊的商品化分枝桿菌血培養(yǎng)瓶，所有培養(yǎng)必須孵育至少4周，培養(yǎng)溫度為25-30n導(dǎo)管相關(guān)的血流感染（導(dǎo)管相關(guān)的血流感染（CRBSI）n細(xì)菌性心內(nèi)膜炎細(xì)菌性心內(nèi)膜炎 特殊類型的血培養(yǎng)-導(dǎo)管相關(guān)的血流感染導(dǎo)管相關(guān)的血流感染（CRBSI）n短期外周導(dǎo)

10、管短期外周導(dǎo)管 n中心靜脈導(dǎo)管及靜脈留置口中心靜脈導(dǎo)管及靜脈留置口 特殊類型的血培養(yǎng)-導(dǎo)管相關(guān)的血流感染導(dǎo)管相關(guān)的血流感染（CRBSI） 中心靜脈導(dǎo)管及靜脈留置口：中心靜脈導(dǎo)管及靜脈留置口： 方法一： 至少采取2套血培養(yǎng)，其中至少一套來自外周靜脈，并做好標(biāo)記，另外的一套應(yīng)該從中心導(dǎo)管口或VAP隔膜無菌采取，兩個(gè)來源的采血時(shí)間必須接近，各自做好標(biāo)記。 短期外周導(dǎo)管短期外周導(dǎo)管：通過靜脈穿刺獲得病人的2套外周血培養(yǎng)（雙側(cè)雙瓶），同時(shí)在無菌狀態(tài)下拔除導(dǎo)管，并進(jìn)行Maki半定量培養(yǎng)。 結(jié)果解釋如下：結(jié)果解釋如下：n如果一套或多套血培養(yǎng)陽性，同時(shí)導(dǎo)管片段培養(yǎng)為陽性(半定量15個(gè)菌落)，而且兩種培養(yǎng)為同一

11、種細(xì)菌，提示可能為CRBSI。n如果一套或多套血培養(yǎng)陽性，同時(shí)導(dǎo)管片段培養(yǎng)為陰性：不可以下定論；如培養(yǎng)結(jié)果為金黃色葡萄球菌或念珠菌屬，而且排除其他任何可鑒別來源的感染，則提示可能為CRBSI。n如果兩套血培養(yǎng)均為陰性而導(dǎo)管片段培養(yǎng)為陽性，不管菌落計(jì)數(shù)如何，提示為導(dǎo)管定植，而不是CRBSI。n如果兩套血培養(yǎng)均為陰性，導(dǎo)管片段培養(yǎng)也為陰性，則不是CRBSI。特殊類型的血培養(yǎng)-導(dǎo)管相關(guān)的血流感染導(dǎo)管相關(guān)的血流感染（CRBSI）特殊類型的血培養(yǎng)-導(dǎo)管相關(guān)的血流感染導(dǎo)管相關(guān)的血流感染（CRBSI） 結(jié)果解釋如下：結(jié)果解釋如下：n如果兩套血培養(yǎng)陽性且為同一種細(xì)菌，如果缺乏其它感染證據(jù)，提示可能為CBBSI

12、n如果兩套血培養(yǎng)陽性且為同一種細(xì)菌，而且來自導(dǎo)管的血培養(yǎng)報(bào)陽時(shí)間比外周靜脈血培養(yǎng)早120分鐘，提示為CRBSI。如果報(bào)陽差異時(shí)間小于120分鐘，而兩套血培養(yǎng)陽性為同一種細(xì)菌且耐藥譜一致，同時(shí)缺乏其它感染證據(jù)，也提示可能為CBBSIn如果兩套血培養(yǎng)陽性，而且來自導(dǎo)管血培養(yǎng)的細(xì)菌數(shù)量為至少5倍于外周靜脈血培養(yǎng)的CFUsml，如果缺乏其它感染證據(jù)，提示可能為CRBSI,(適用于手工定量血培養(yǎng)系統(tǒng))n如果僅是來自導(dǎo)管的血培養(yǎng)為陽性，不能定為CRBSI，可能為寄生菌或采集時(shí)污染n如果僅來自外周靜脈的血培養(yǎng)為陽性，不能定為CRBSI，但如培養(yǎng)結(jié)果為金黃色葡萄球菌或念珠菌屬，在缺乏其它感染證據(jù)時(shí)則提示可能為

13、CRBSIn如果兩套血培養(yǎng)均為陰性，不是CRBSI特殊類型的血培養(yǎng)-導(dǎo)管相關(guān)的血流感染導(dǎo)管相關(guān)的血流感染（CRBSI） 中心靜脈導(dǎo)管及靜脈留置口：中心靜脈導(dǎo)管及靜脈留置口： 方法二：從獨(dú)立的外周靜脈無菌采集2套血培養(yǎng)。無菌狀態(tài)下取出導(dǎo)管并剪下5cm導(dǎo)管末梢交付實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行Maki半定量平板滾動(dòng)培養(yǎng)特殊類型的血培養(yǎng)-導(dǎo)管相關(guān)的血流感染（CRBSI） 結(jié)果解釋如下：結(jié)果解釋如下：n如果一套或多套血培養(yǎng)陽性，同時(shí)導(dǎo)管末梢培養(yǎng)為陽性，而且根據(jù)鑒定結(jié)果和藥敏譜兩種培養(yǎng)為同一種細(xì)菌，提示可能為CRBSIn如果一套或多套血培養(yǎng)陽性，同時(shí)導(dǎo)管末梢培養(yǎng)為陰性，不能定為CRBSI ：如培養(yǎng)結(jié)果為金黃色葡萄球菌或念珠

14、菌屬且缺乏其它感染的證據(jù)時(shí)則提示可能為CRBSI，其確認(rèn)可能要求血培養(yǎng)陽性結(jié)果且是同一種細(xì)菌作為結(jié)果支持n如果血培養(yǎng)為陰性而導(dǎo)管末梢培養(yǎng)為陽性，提示為導(dǎo)管寄生菌，不呈CRBSIn如果兩套血培養(yǎng)為陰性，導(dǎo)管末梢培養(yǎng)也為陰性，不是CRBSI特殊類型的血培養(yǎng)-細(xì)菌性心內(nèi)膜炎細(xì)菌性心內(nèi)膜炎n對(duì)于可能的心內(nèi)膜炎患者，起始采集3套血培養(yǎng)，如果在24小時(shí)內(nèi)仍報(bào)告為陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)，全部培養(yǎng)一共為5套。n急性心內(nèi)膜炎感染，必須在經(jīng)驗(yàn)使用抗菌藥物前30分鐘之內(nèi)抽取血培養(yǎng)。n亞急性心內(nèi)膜炎感染，需在30分鐘至1小時(shí)之內(nèi)連續(xù)抽取數(shù)套血培養(yǎng)，可以證明感染的連續(xù)性，并為臨床提供更多有價(jià)值的信息。對(duì)于亞急性心內(nèi)

15、膜炎的評(píng)估，皮膚消毒尤為重要，因?yàn)槠渲饕牟≡鸀槠つw寄生菌如凝固酶陰性的葡萄球菌。因此，血培養(yǎng)必須取自外周靜脈而非留置的靜脈裝置。留置導(dǎo)管的血培養(yǎng)會(huì)伴有很高的污染風(fēng)險(xiǎn)從而導(dǎo)致錯(cuò)誤的心內(nèi)膜炎的結(jié)論。結(jié)果報(bào)告結(jié)果報(bào)告n血培養(yǎng)分階段告之義務(wù)血培養(yǎng)分階段告之義務(wù)n血培養(yǎng)結(jié)果的三級(jí)報(bào)告制度血培養(yǎng)結(jié)果的三級(jí)報(bào)告制度n污染菌和感染菌的確認(rèn)污染菌和感染菌的確認(rèn)n血培養(yǎng)的報(bào)告結(jié)果追蹤血培養(yǎng)的報(bào)告結(jié)果追蹤結(jié)果報(bào)告結(jié)果報(bào)告-血培養(yǎng)分階段告之義務(wù)血培養(yǎng)分階段告之義務(wù) 建議在有條件的醫(yī)院，通過醫(yī)院信息系統(tǒng)，讓臨床醫(yī)生隨時(shí)掌握血培養(yǎng)檢測的進(jìn)展情況，該系統(tǒng)應(yīng)包括：n血培養(yǎng)已開單但未收到n血培養(yǎng)已收到，符合采樣要求n血培養(yǎng)已收到，不符合采樣要求n檢測中，尚無結(jié)果n24小時(shí)無生長n48小時(shí)無生長n陽性報(bào)警，分離培養(yǎng)和藥敏進(jìn)行中，初步涂片染色 結(jié)果n陽性培養(yǎng)結(jié)果(細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)的最終結(jié)果)結(jié)果報(bào)告結(jié)果報(bào)告-三級(jí)報(bào)告制度三級(jí)報(bào)告制度 一級(jí)報(bào)告一級(jí)報(bào)告緊急口頭（電話）報(bào)告緊急口頭（電話）報(bào)告 血培養(yǎng)出現(xiàn)陽性報(bào)警時(shí)，立即進(jìn)行革蘭染色、鏡檢，并在最短時(shí)間內(nèi)將結(jié)果向臨床主管醫(yī)生進(jìn)行緊急口頭（電話）報(bào)告?？陬^報(bào)告包含以下內(nèi)容，并記錄在案：報(bào)告者全名（或工號(hào)）報(bào)告的時(shí)間（無論成功或不成功）所聯(lián)系醫(yī)生的全名（或工號(hào)）報(bào)告鏡檢結(jié)果并強(qiáng)調(diào)其緊急價(jià)