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文檔簡介
1、分子診斷學(xué)習(xí)題Lucas Gu基因組概論一、A型題:1. 一個典型的基因不包括()A.增強子B. 5非編碼區(qū)C. 3非編碼區(qū)D.啟始密碼子E.終止密碼子2.基因序列中保守性最局的序列()A.內(nèi)含子B.外顯子C.整個基因D. 5非編碼區(qū)E. 3非編碼區(qū)3 .基因組最大的生物()A.人B.某些藻類C.某些細(xì)菌D.某些顯花植物和兩棲類動物E.某些哺乳動物4 .基因總數(shù)最多的生物()A.人B.藻類C.水稻D.顯花植物和兩棲類動物E.某些哺乳動物5 .HGP研究的主要內(nèi)容不包括()A.物理圖B. SNP圖C.連鎖圖D.序列圖E.遺傳圖6 .模式生物基因組計劃不包括()A.秀麗線蟲B.釀酒酵母C.黑腹果蠅
2、D.小鼠E.大鼠7 .后基因組計劃的主要目標(biāo)()A.基因功能比較B.基因功能鑒定C.基因組測序D.基因數(shù)據(jù)分析E.基因結(jié)構(gòu)二、X型題:8 .基因編碼的功能產(chǎn)物()A.多肽B.蛋白質(zhì)C. tRNAD. rRNAE.某些小分子RNA2.基因組學(xué)(Genomics)研究的內(nèi)容包括()A.基因組作圖B.核音酸序列分析C.基因定位D.基因功能分析E.疾病基因定位3.功能基因組學(xué)的主要特征。()A.高精度B.高通量C.大規(guī)模D.計算機分析E.高分辯率三、名詞解釋:1 .開放閱讀框2 .密碼子偏愛3 .C值矛盾4 .基因組學(xué)四、問答題:1 .簡述基因的特點和鑒別標(biāo)準(zhǔn)。2 .簡述基因組學(xué)研究對醫(yī)學(xué)的影響。參考
3、答案一、A型題:1.A2.B3.D4.C5.B6.E7.B二、X型題:1.ABCDE2.ABCD3.BCD三、名詞解釋:1. 開放閱讀框(openreadingframe,ORF)是由始于起始密碼子并終于終止密碼子的一串密碼子組成的核昔酸序列。2. 在不同物種的基因中經(jīng)常為某種氨基酸編碼的只是其中的某一特定的密碼子,這種現(xiàn)象稱密碼子偏愛(codonbias)。3. 生物體的進(jìn)化程度與基因組大小之間不完全成比例的現(xiàn)象稱為C值矛盾。4. 基因組學(xué)(Genomics)指對所有基因進(jìn)行基因組作圖(包括遺傳圖譜、物理圖譜、轉(zhuǎn)錄圖譜),核音酸序列分析,基因定位和基因功能分析的一門科學(xué)。五、問答題:1 .對
4、于數(shù)量很少的編碼tRNA、rRNA和某些小分子RNA的基因,我們較易通過核酸序列加以判斷。而對于數(shù)量極大的蛋白質(zhì)編碼基因,目前可根據(jù)其特點使用五項標(biāo)準(zhǔn)來鑒別:開放閱讀框(openreadingframe,ORF);序列特征和密碼子偏愛;序列保守性;轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物;基因失活。但這些標(biāo)準(zhǔn)使用起來卻往往會遇到一些困難。2 .基因組學(xué)研究成果惠澤最多的莫過于醫(yī)學(xué),基因組學(xué)將改變整個醫(yī)學(xué)是必然的趨勢。人類基因組中所有基因及其表達(dá)產(chǎn)物種類的確認(rèn)和功能解析,野生型基因或突變型基因及其表達(dá)產(chǎn)物與疾病的關(guān)系的研究,將會大大加快加深人們對疾病分子機理的認(rèn)識,并描繪出能準(zhǔn)確用于每一種疾病的預(yù)測、診斷及預(yù)后的基因或蛋白質(zhì)指
5、紋圖譜,將為藥物的研究提供更多更有效的作用靶點。人類個體之間DNA序列差異的研究,基因芯片與蛋白質(zhì)芯片技術(shù)及快速測序技術(shù)等的發(fā)展和普及,將使基因組和蛋白質(zhì)組范圍內(nèi)的快速、準(zhǔn)確的分子診斷成為現(xiàn)實,人們將因此最大限度地了解自身對環(huán)境和疾病的易感性,增進(jìn)健康,延長壽命。醫(yī)生將根據(jù)每個人的“基因特點”開出最優(yōu)化的個體化處方。另外,基因組學(xué)的成就將使基因治療更為切實可行。隨著更安全更有效的載體的研制(這只是時間問題),基因治療終究會被人們接受并得到普及。蛋白質(zhì)組學(xué)與基因組學(xué)相輔相成,優(yōu)勢互補。原核生物基因組五、A型題:1.下列敘述哪項是錯誤的()A.原核生物基因組具有操縱子結(jié)構(gòu)B.原核生物結(jié)構(gòu)基因是斷裂
6、基因C.原核生物基因組中含有插入序列D.原核生物基因組中含有重復(fù)順序E.原核生物結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為多順反子型mRNA2 .可以自我轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒,其分子量一般在()A. 1.5X107以上B. 1.5X107以下C. 1.5X107與2.5X107之間D. 2.5X107以下E. 2.5X107以上3 .下列哪項不符合轉(zhuǎn)位因子的含義()A.轉(zhuǎn)位因子是DNA重組的一種形式B.可在質(zhì)粒與染色體之間移動的DNA片段C.轉(zhuǎn)座子是轉(zhuǎn)位因子的一個類型D.可移動的基因成分E.能在一個DNA分子內(nèi)部或兩個DNA分子之間移動的DNA片段4 .質(zhì)粒的主要成分是()A.多糖B.蛋白質(zhì)C.氨基酸衍生物D.DNA分子E.
7、脂類5 .下列哪項不能被列入可移動基因的范疇()A.插入序列B.質(zhì)粒C.染色體DNAD.轉(zhuǎn)座子E.可轉(zhuǎn)座噬菌體6 .大腸桿菌類核結(jié)構(gòu)的組成是()A.雙鏈DNAB.RNAC.蛋白質(zhì)+DNAD.支架蛋白E.RNA+支架蛋白+雙鏈DNA7.以下哪項描述是錯誤的()A.細(xì)菌是單細(xì)胞生物B.細(xì)菌是原核生物C.細(xì)菌生長快個體小D.細(xì)菌以有絲分裂的方式增殖E.細(xì)菌無細(xì)胞核結(jié)構(gòu)8 .操縱子結(jié)構(gòu)不存在()A.細(xì)菌基因組中B.病毒基因組中C.真核生物基因組中D.大腸桿菌基因組中E.原核生物基因組中9 .下列哪項敘述不正確()A. F質(zhì)粒的主要特征是帶有耐藥性基因B. R質(zhì)粒又稱抗藥性質(zhì)粒C. Col質(zhì)??僧a(chǎn)生大腸
8、桿菌素D. F質(zhì)粒是一種游離基因E. R質(zhì)粒在基因克隆中應(yīng)用最多10 .下列說法正確的是()A.質(zhì)粒的主要成分是RNAB.質(zhì)粒的復(fù)制依賴于宿主細(xì)胞C.宿主細(xì)胞離開了質(zhì)粒就不能生存D.質(zhì)粒的存在對宿主細(xì)胞沒有任何影響E.不同類群的質(zhì)粒不能共存于同一菌株六、B型題:A.基因重疊現(xiàn)象B.類核結(jié)構(gòu)C.斷裂基因D.質(zhì)粒E.可移動基因成分1 .原核生物具有()2 .真核生物基因是()3 .病毒基因組存在()4 .轉(zhuǎn)座因子是()5 .染色體以外的遺傳物質(zhì)是()七、X型題:1 .下列哪些屬于染色體以外的遺傳因子(A.轉(zhuǎn)座子B.病毒核酸C.細(xì)菌的質(zhì)粒D.高等植物的葉綠體E.轉(zhuǎn)位因子F.插入序列G.真核生物的線粒
9、體2 .原核生物基因組的特征包括()A.具有類核結(jié)構(gòu)B.只有一個DNA復(fù)制起點C.有大量的基因重疊現(xiàn)象D.存在可移動基因成分E.基因組中有重復(fù)序列存在F.結(jié)構(gòu)基因多數(shù)是多拷貝的G.廣泛存在操縱子結(jié)構(gòu)3 .原核生物基因組與真核生物基因組的區(qū)別有(A.編碼序列所占的比例B.操縱子結(jié)構(gòu)C.重復(fù)序列D.內(nèi)含子E.細(xì)胞核結(jié)構(gòu)G.復(fù)制起點的個數(shù)4 .質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)特點有()A.以環(huán)狀雙鏈DNA分子存在B.質(zhì)粒DNA有超螺旋結(jié)構(gòu)C.以環(huán)狀單鏈DNA分子存在D.質(zhì)粒DNA有半開環(huán)結(jié)構(gòu)E.以環(huán)狀雙鏈RNA分子存在F.質(zhì)粒DNA有線性結(jié)構(gòu)G.以線性雙鏈DNA分子存在5 .質(zhì)粒按功能分類主要有()A.接合型質(zhì)粒B.F型
10、質(zhì)粒C.松弛型質(zhì)粒D.可移動型質(zhì)粒E.R型質(zhì)粒G.Col質(zhì)粒6.有關(guān)R質(zhì)粒敘述正確的是()A. R質(zhì)粒帶有抗性轉(zhuǎn)移因子B. R質(zhì)粒又稱耐藥性質(zhì)粒C. R質(zhì)粒帶有抗性決定因子D. R質(zhì)粒能決定細(xì)菌的性別E. R質(zhì)粒具有自我轉(zhuǎn)移能力G.R質(zhì)粒能進(jìn)行自我復(fù)制7.質(zhì)粒的生物學(xué)性質(zhì)有()A.質(zhì)粒攜帶的遺傳性狀也能被轉(zhuǎn)移B.質(zhì)粒的復(fù)制可獨立于宿主細(xì)胞C.質(zhì)粒對宿主細(xì)胞的生存是必需的D.質(zhì)粒帶有選擇性標(biāo)志E.質(zhì)粒有不相容性G.質(zhì)??梢耘c染色體發(fā)生整合8.細(xì)菌基因轉(zhuǎn)移的方式有()A.接合B.轉(zhuǎn)化C.轉(zhuǎn)染D.轉(zhuǎn)導(dǎo)E.轉(zhuǎn)座八、名詞解釋:1 .質(zhì)粒2 .類核3 .轉(zhuǎn)座4 .基因組5 .基因重疊6 .質(zhì)粒的不相容性九
11、、問答題:1 .敘述原核生物基因組的結(jié)構(gòu)特征。2 .簡述原核生物的類核組成。3 .描述質(zhì)粒DNA的結(jié)構(gòu)特點。4 .試述質(zhì)粒的類型有哪些?5 .簡述原核生物轉(zhuǎn)座子的類型及特點6 .通過轉(zhuǎn)座可引起哪些遺傳效應(yīng)?參考答案一、A型題:1.B2.E3.A4.D5.C6.E7.D8.C9.A10.B二、B型題:1.B2.C3.A4.E5.D三、X型題:1.ACDEFG2.ABDEG3.ABDF4.CDEF5.BEG6.ABCEG7.ADEG8.ABDE四、名詞解釋:1 .質(zhì)粒:細(xì)菌染色體以外,能獨立復(fù)制并穩(wěn)定遺傳的共價閉合環(huán)狀DNA(covalentlyclosedcircularDNA,cccDNA)分
12、子稱為質(zhì)粒(plasmid)。2 .類核:原核生物基因組DNA通常位于菌細(xì)胞的中央,與支架蛋白和RNA結(jié)合在一起,以復(fù)合體的形式存在,經(jīng)高度盤旋聚集形成一個較為致密的區(qū)域,稱為類核(nucleoid)。3 .轉(zhuǎn)座:轉(zhuǎn)座(transposition)是指遺傳物質(zhì)被轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象。這種轉(zhuǎn)移可以發(fā)生在同一染色體中也可以發(fā)生在不同染色體之間,被轉(zhuǎn)移的DNA片段稱為轉(zhuǎn)座因子(或轉(zhuǎn)座元件)。4 .基因組:基因組(genome)是一個細(xì)胞或一個生物體中的全套遺傳物質(zhì)。5 .基因重疊:(geneoverlapping),指基因組DNA中某些序列被兩個或兩個以上的基因所共用。6 .質(zhì)粒的不相容性:同一類群的不同質(zhì)粒
13、通常不能在同一菌株內(nèi)穩(wěn)定共存,當(dāng)細(xì)胞分裂時就會分別進(jìn)入不同的子代細(xì)胞,這種現(xiàn)象叫做質(zhì)粒的不相容性(incompatibility)。五、問答題:1 .在原核生物基因組中只有一個DNA復(fù)制起點?;蚪MDNA通常是由一條環(huán)狀雙鏈DNA(doublestrandedDNA,dsDNA)分子組成?;蚪MDNA與支架蛋白和RNA結(jié)合在一起,以復(fù)合體的形式存在。廣泛存在操縱子結(jié)構(gòu)。操縱子結(jié)構(gòu)是原核生物基因組的功能單位,在原核基因調(diào)控中具有普遍的意義。原核生物的結(jié)構(gòu)基因多數(shù)是單拷貝的并且結(jié)構(gòu)基因中沒有內(nèi)含子成分。編碼順序一般不重疊。具有編碼同工酶的不同基因?;蚪M中編碼區(qū)所占比例為50%,不編碼區(qū)中常常含有
14、基因表達(dá)調(diào)控的序列?;蚪MDNA分子中存在多種功能的識別區(qū)域,這些區(qū)域經(jīng)常有反向重復(fù)序列存在,并能形成特殊的結(jié)構(gòu)。原核生物基因組存在著可移動的DNA序列,這些可移動的DNA序列,通過不同的轉(zhuǎn)移方式發(fā)生基因重組,使生物體更適應(yīng)環(huán)境的變化。2 .原核生物與真核生物的主要區(qū)別在細(xì)胞核上。原核生物沒有典型的細(xì)胞核結(jié)構(gòu),基因組DNA位于細(xì)胞中央的核區(qū),沒有核膜將其與細(xì)胞質(zhì)隔開,但能在蛋白質(zhì)的協(xié)助下,以一定的組織形式盤曲、折疊包裝起來,形成類核(nucleoid)也稱擬核。類核的中央部分由RNA和支架蛋白(scaffoldingprotein)組成,外圍是雙鏈閉環(huán)的超螺旋DNAo在超螺旋結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上,DN
15、A分子再扭結(jié)成許多活結(jié)樣或花瓣樣的放射狀結(jié)構(gòu)的DNA環(huán)。每個環(huán)形的活結(jié)狀結(jié)構(gòu)代表一個結(jié)構(gòu)域,在各結(jié)構(gòu)域中DNA呈負(fù)超螺旋狀態(tài)。每個DNA環(huán)是一個相對獨立的功能區(qū),可以獨立完成不同區(qū)域的基因表達(dá)與調(diào)控。在類核中80%為DNA,其余為RNA和蛋白質(zhì)。如果用DNA酶處理后可使基因組DNA鏈斷裂;如果用RNA酶或蛋白酶處理類核,則類核變得松散,不能維持DNA鏈的折疊結(jié)構(gòu),這表明RNA和蛋白質(zhì)對維持類核分子的折疊以及形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)是必不可少的。3 .多數(shù)細(xì)菌來源的質(zhì)粒核酸是環(huán)狀雙鏈DNA分子,沒有游離的末端,每條鏈上的核昔酸通過共價鍵頭尾相連。質(zhì)粒DNA分子通常具有三種不同的構(gòu)型。當(dāng)其兩條核昔酸鏈均保持完
16、整環(huán)形結(jié)構(gòu)時,為共價閉合環(huán)狀DNA分子,這樣的DNA常以超螺旋狀態(tài)存在;如果兩條鏈中只有一條鏈保持完整環(huán)形結(jié)構(gòu),另一條鏈出現(xiàn)一至數(shù)個缺口時,為半開環(huán)DNA;若兩條鏈均有缺口并發(fā)生斷裂則成為線性DNA分子。4 .根據(jù)細(xì)菌染色體對質(zhì)粒復(fù)制的控制程度是否嚴(yán)格可將質(zhì)粒分為:嚴(yán)緊型質(zhì)粒和松弛型質(zhì)粒。按轉(zhuǎn)移方式分為:接合型質(zhì)粒、可移動型質(zhì)粒、自傳遞型質(zhì)粒。按質(zhì)粒大小分為:小型質(zhì)粒、大型質(zhì)粒。按質(zhì)粒的宿主范圍分為:窄宿主譜型質(zhì)粒、廣宿主譜型質(zhì)粒。按質(zhì)粒的功能分為:F質(zhì)粒、R質(zhì)粒、Col質(zhì)粒。5 .插入序列(insertionsequence,IS)長度約700bpt2000bp,由一個轉(zhuǎn)位酶基因及兩側(cè)的反向
17、重復(fù)序列(16bp41bp)組成。反向重復(fù)序列的對稱結(jié)構(gòu)使IS可以雙向插入(正向插入或反向插入)靶位點。并在插入后于兩側(cè)形成一定長度(3bp11bp)的順向重復(fù)序列稱靶序列(targetsequence)IS的轉(zhuǎn)位頻率為10-7/拷貝,即在一個世代的107細(xì)菌中有1次插入。轉(zhuǎn)座子(transposon,Tn)是一類復(fù)雜的轉(zhuǎn)位因子。Tn比IS大,約450020000bp,除了攜帶有關(guān)轉(zhuǎn)座的必需基因外,還含有能決定宿主菌遺傳性狀的基因,主要是抗生素和某些藥物的抗性基因,轉(zhuǎn)座子中的轉(zhuǎn)位酶稱為轉(zhuǎn)座酶(transposase),其功能是介導(dǎo)轉(zhuǎn)座子從一個位點轉(zhuǎn)座到另一個位點,或從一個復(fù)制子轉(zhuǎn)座到另一個復(fù)制
18、子,其轉(zhuǎn)座過程與IS相似。Mu噬菌體是一類具有轉(zhuǎn)座功能的溫和性噬菌體。溫和性噬菌體有多種,如大腸桿菌入噬菌體、大腸桿菌Mu-1、P1和P2噬菌體等。這類噬菌體具有整合能力,可以整合到細(xì)菌染色體中去,也稱可轉(zhuǎn)座的噬菌體(transposablephage)。當(dāng)它們感染細(xì)菌后,其溶源性整合和裂解周期的復(fù)制均以轉(zhuǎn)座方式進(jìn)行,但轉(zhuǎn)座位點是隨機的。6 .引起突變轉(zhuǎn)位可能引起多種基因突變。當(dāng)轉(zhuǎn)位因子插入一個基因內(nèi)部,會引起這個基因的插入失活;當(dāng)插入多順反子前端的基因中時,可引起下游的所有基因停止轉(zhuǎn)錄,因為轉(zhuǎn)位因子中含p依賴的轉(zhuǎn)錄終止信號;當(dāng)插入染色體或質(zhì)粒中時,常引起缺失和倒位突變。引入新的基因在插入位點
19、上引入新的基因,如含有抗藥基因R質(zhì)粒的轉(zhuǎn)位因子,轉(zhuǎn)位到染色體中時,可在該部位出現(xiàn)抗藥性基因。若將帶有Amp+R質(zhì)粒的細(xì)菌與不含R質(zhì)粒的帶有Kan+轉(zhuǎn)座子的細(xì)菌進(jìn)行接合,結(jié)果產(chǎn)生了Amp+Kan+的細(xì)菌,并且能夠在含有氨葦青霉素及卡那霉素的培養(yǎng)板上生長。經(jīng)過轉(zhuǎn)位作用,在這種細(xì)菌內(nèi)產(chǎn)生Amp+及Kan+的質(zhì)粒,經(jīng)過再次接合作用,即可產(chǎn)生含Amp+Kan+R質(zhì)粒細(xì)菌。引起生物進(jìn)化基因重排經(jīng)常發(fā)生,轉(zhuǎn)座作用是基因重排的重要機理之一,如通過轉(zhuǎn)座,可將兩個本來相隔遙遠(yuǎn)的基因靠攏,從而進(jìn)行協(xié)調(diào)的控制作用,這兩段基因順序經(jīng)過轉(zhuǎn)座作用連接在一起有可能在進(jìn)化過程中產(chǎn)生新的蛋白質(zhì)。真核生物基因組一、選擇題:1 .下
20、列哪一個調(diào)控序列在斷裂基因側(cè)翼序列上不存在A. 啟動子B. 增強子C. 終止子D. 外顯子2 .下列不屬于真核生物染色體基因組一般特征的是A. 基因組龐大B. 線狀雙鏈DNA和二倍體C. 編碼區(qū)遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于非編碼區(qū)D. 重復(fù)序列3 .組蛋白家族中核小體組蛋白組蛋白包括A. H1、H2A、H2B、H3B. H1、H2A、H2B、H3AC. H2A、H2B、H3、H4D. H2A、H2B、H3A、H44 .線粒體DNA(mtDNA)與核DNA主要不同之處有A. 非孟德爾的母系遺傳B. 低突變率C. 異質(zhì)性和復(fù)制分離D. 閾值效應(yīng)5 .能夠引起遺傳性視神經(jīng)病的線粒體病遺傳學(xué)分類類型是A. 點突變B. m
21、tDNA的大規(guī)模缺失C. mtDNA的大規(guī)模插入D. 源于核DNA缺陷引起mtDNA缺失6 .下列哪項與短串聯(lián)重復(fù)序列(STR)位點的不穩(wěn)定性相關(guān)A. 脆性X綜合癥、重癥肌無力和Huntington舞蹈癥B. 脆性X綜合癥、重癥肌無力和Kearns-sayre綜合癥C. Kearns-sayre綜合癥、慢性進(jìn)行性眼外肌癱瘓和Huntington舞蹈癥D. Kearns-sayre綜合癥、慢性進(jìn)行性眼外肌癱瘓和Kearns-sayre綜合癥二、名詞解釋:1 .外顯子與內(nèi)含子2 .單拷貝基因3 .單順反子mRNA4 .微衛(wèi)星DNA5 .斷裂基因6 .基因家族7 .假基因8 .端粒酶9 .后基因組研
22、究10 .遺傳圖譜11 .單核昔酸多態(tài)性12 .甲基特異性PCR三、問答題:1 .真核生物染色體基因組的一般特點?2 .真核生物基因組含有的重復(fù)序列有哪些?3 .線粒體DNA與核DNA有哪些不同之處?4 .何謂線粒體???簡述線粒體病的遺傳學(xué)分類。5 .假基因的分類及其發(fā)生機理。6 .簡述CpG島與DNA甲基化調(diào)控。7 .作為一種遺傳標(biāo)記,人類短串聯(lián)重復(fù)序列(STR)的主要用途有哪幾個方面?8 .人類單核昔酸的多態(tài)性(SNP)的特點及主要用途有哪幾個方面?9 .人類基因組研究的主要內(nèi)容是什么?答案一、問答題1.D2.C3.C4.B5.A6.A二、名詞解釋1 .外顯子與內(nèi)含子:斷裂基因的內(nèi)部非編碼
23、序列稱為內(nèi)含子,編碼序列稱為外顯子。2 .單拷貝基因:在基因組中僅出現(xiàn)一次的基因稱單拷貝基因,多為編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。3 .單順反子mRNA:真核生物中每一個基因單獨構(gòu)成一個轉(zhuǎn)錄單位轉(zhuǎn)錄而產(chǎn)生的mRNA,僅編碼一種蛋白質(zhì)。4 .微衛(wèi)星DNA:存在于常染色體由26個核昔酸長的重復(fù)序列組成,又稱簡單串聯(lián)重復(fù)序列,以(CA)n、(GT)n、(CAG)n較常見,重復(fù)次數(shù)多為1560次,總長度一般在400bp以下。5 .斷裂基因:細(xì)胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)基因并非全由編碼序列組成,而是在編碼序列中插入了非編碼序列,這類基因被稱為斷裂基因。6 .基因家族:一組功能相似且核音酸序列具有同源性的基因,可能由某一共同祖先基
24、因經(jīng)重復(fù)和突變產(chǎn)生,這一組基因就稱為基因家族。7 .假基因:基因家族中一類與具正常功能的基因序列相似,但無轉(zhuǎn)錄功能或轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物無功能的基因稱為假基因。8 .端粒酶:一種由蛋白質(zhì)和RNA兩部分組成的以自身的RNA為模板,可合成端粒重復(fù)序列而延長端粒的特殊逆轉(zhuǎn)錄酶。9 .后基因組研究:以全基因組測序為目標(biāo)的結(jié)構(gòu)基因組學(xué)和以基因功能鑒定為目標(biāo)的功能基因組學(xué),又稱后基因組研究。10 .遺傳圖譜:是指通過計算連鎖遺傳標(biāo)志之間的重組頻率,得到基因線性排列從而確定相對距離的圖譜,又稱連鎖圖。11 .單核昔酸多態(tài)性:因單個堿基的變異(主要是置換,也有缺失和插入)引起的DNA序列多態(tài)性,在特定核昔酸位置上存在兩種
25、不同的堿基,其中最少一種在群體中的頻率不小于1%o12 .甲基特異性PCR:DNA經(jīng)亞硫酸鈉處理后,非甲基化的C轉(zhuǎn)變?yōu)閁,而甲基化的胞口密噬保持不變,利用兩套不同的引物擴增可判斷甲基化是否發(fā)生的一種特異性PCR。三、問答題1答案:真核生物基因組遠(yuǎn)大于原核生物基因組,結(jié)構(gòu)復(fù)雜,基因數(shù)龐大,具有多個復(fù)制起點;真核細(xì)胞的基因組DNA都是線狀雙鏈DNA,而不是環(huán)狀雙鏈分子;基因組中非編碼區(qū)多于編碼區(qū);真核基因多為不連續(xù)的斷裂基因,由外顯子和內(nèi)含子鑲嵌而成;存在大量重復(fù)序列。2答案:(一)高度重復(fù)序列重復(fù)頻度1050根據(jù)衛(wèi)星DNA的長度,又可分成3種:衛(wèi)星DNA、小衛(wèi)星DNA、微衛(wèi)星DNA。(二)中度重
26、復(fù)序列這類重復(fù)序列主要由比較大的片段(由100bp到幾千bp)串聯(lián)重復(fù)組成,分散在整個基因組中,重復(fù)頻度不等,如Alu家族、rRNA、tRNA和組蛋白等。3答案:(一)非孟德爾的母系遺傳mtDNA因位于細(xì)胞質(zhì)中,表現(xiàn)為嚴(yán)格的母性遺傳,不服從孟德爾遺傳,絕大部分mtDNA是通過卵細(xì)胞遺傳。(二)高突變率mtDNA突變率約為nDNA的10100倍,此外mtDNA與有毒物質(zhì)的結(jié)合頻率比核DNA高數(shù)倍至數(shù)十倍。(三)異質(zhì)性和復(fù)制分離異質(zhì)性即突變mtDNA與野生型mtDNA以不同的比例共存于一個細(xì)胞內(nèi)的現(xiàn)象。復(fù)制分離即在細(xì)胞分裂的復(fù)制過程中,突變的和野生型的mtDNA隨機進(jìn)入子細(xì)胞的過程,復(fù)制分離的結(jié)果
27、使突變mtDNA雜合體向突變純合或野生純合方向轉(zhuǎn)變,但因突變復(fù)制具有優(yōu)勢,故易產(chǎn)生突變積累,突變積累的程度不同,突變mtDNA在群體中的多態(tài)性程度也不同。(四)閾值效應(yīng)每個細(xì)胞的mtDNA有多種拷貝,而一個細(xì)胞mtDNA編碼基因的表現(xiàn)型依賴于一個細(xì)胞內(nèi)突變型mtDNA和野生型mtDNA的相對比例,mtDNA突變導(dǎo)致氧化磷酸化水平降低當(dāng)能量降低到維持組織正常功能所需能量的最低值時即達(dá)到了mtDNA表達(dá)的能量閾值,可引起某組織或器官的功能異常而出現(xiàn)臨床癥狀,這就是閾值效應(yīng)。(五)半自主復(fù)制與協(xié)同作用mtDNA雖有自我復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和編碼功能,但該過程還需要數(shù)十種nDNA編碼的酶參加,因此mtDNA基因
28、的表達(dá)同時也受nDNA的制約,兩者具有協(xié)同作用。4答案:線粒體?。╩itochondriopathy)是指由于線粒體呼吸鏈功能不良所導(dǎo)致的臨床表現(xiàn)多樣化的一組疾病。臨床表現(xiàn)常見為眼瞼下垂、外眼肌麻痹、視神經(jīng)萎縮、神經(jīng)性耳聾、痙攣或驚厥、癡呆、偏頭痛、類卒中樣發(fā)作等。從核基因缺陷和線粒體基因缺陷的角度對線粒體病進(jìn)行遺傳學(xué)分類可分為三種類型:點突變,mtDNA的大規(guī)模缺失或插入和源于核DNA缺陷引起mtDNA缺失。5答案:與正常功能的基因序列相似,但無轉(zhuǎn)錄功能或轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物無功能的基因稱假基因(pseudogene)。根據(jù)是否保留相應(yīng)功能基因的間隔序列(如內(nèi)含子),假基因分兩大類:一類保留了間隔序列,
29、稱為非力口工假基因(non-processedpseudogene),通常因基因的復(fù)制修飾,如點突變、插入、缺失和移碼突變而導(dǎo)致復(fù)制后的基因在轉(zhuǎn)錄和翻譯時出現(xiàn)異常,喪失正常功能,它與功能基因一般在同一染色體上,也稱復(fù)制型假基因(duplicatedpseudogene)。假基因中大多數(shù)則缺少間隔序列的稱為已加工假基因(processedpseudogene),主要是轉(zhuǎn)錄過程中mRNA以cDNA的方式重新整合進(jìn)入基因組(很可能發(fā)生在生殖細(xì)胞中),在長期進(jìn)化選擇過程中因為隨機突變積累而喪失功能,通常這種假基因無內(nèi)含子,兩邊有小的側(cè)翼定向重復(fù)序列(flankingdirectrepeat),3端多具
30、多聚腺昔酸尾。6答案:大約有一半的人類基因富含CpG的順序,稱為CpG島(CpGisland),CpG島常位于轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)或其附近,主要存在于看家基因和一些組織特異性表達(dá)基因。在正常組織,除印記基因和失5端活的X染色體外,包括啟動子區(qū)在內(nèi)的基因CpG島大部分是非甲基化的。DNA甲基化與基因表達(dá)呈負(fù)相關(guān),DNA甲基化調(diào)控基因表達(dá)直接的機制可能是因為甲基從DNA分子的大溝中突出,阻止了轉(zhuǎn)錄因子與基因相互作用,還可能直接抑制RNA聚合酶活性而抑制基因的表達(dá)。間接的機制包括兩種類型:與甲基化DNA結(jié)合蛋白結(jié)合;改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu),這都間接阻礙轉(zhuǎn)錄因子與DNA結(jié)合而抑制轉(zhuǎn)錄。DNA甲基化對胚胎發(fā)育非常重要,與
31、X染色體失活,基因組印記,特別是腫瘤密切相關(guān)。7答案:主要用途人類基因遺傳圖譜的制作。目的基因篩選和基因診斷。通常目的基因若與STR位點有連鎖關(guān)系,則其位置與STR位點鄰近,故通過對STR附近區(qū)域克隆測序,就可能發(fā)現(xiàn)目的基因。通過家系和對照研究,運用連鎖和相關(guān)分析,可以找到與疾病高度相關(guān)的STR位點。法醫(yī)學(xué)個體識別和親權(quán)鑒定。法醫(yī)案例中,對于量極少和降解嚴(yán)重的生物檢材,通過PCR進(jìn)行STR位點擴增并將幾個STR位點聯(lián)合起來分析,可得到相當(dāng)高的累積個體識別率和父權(quán)排除率。因而STR用于法醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有著廣闊的前景,為司法偵案、破案提供有利的科學(xué)依據(jù)。8答案:疾病的連鎖分析與基因的定位:包括復(fù)雜疾?。?/p>
32、如骨質(zhì)疏松癥、糖尿病、心血管疾病、精神性紊亂、各種腫瘤等)的基因定位、關(guān)聯(lián)分析,并可用于遺傳病的單倍型診斷。指導(dǎo)用藥和藥物設(shè)計:SNP多態(tài)性能充分反映個體間的遺傳差異。通過研究遺傳多態(tài)性與個體對藥物敏感性或耐受性的相關(guān)性,可以闡明遺傳因素對藥物效用的影響,從而對醫(yī)生針對性的用藥和藥物的開發(fā)提供指導(dǎo)和依據(jù)。用于進(jìn)化和種群多樣性的研究:生物界的進(jìn)化及進(jìn)化過程中物種多樣性的形成與基因組的突變和突變的選擇密切相關(guān),構(gòu)建整個基因組的SNP圖譜對于直接研究人類的起源、進(jìn)化具極大意義。對比人群之間SNP圖譜的異同情況可以對人類的起源、遷移等作出估計,從而理清人類進(jìn)化過程中源與流的問題。9答案:人類基因組研究
33、主要包括兩方面的內(nèi)容:以全基因組測序為目標(biāo)的結(jié)構(gòu)基因組學(xué)和以基因功能鑒定為目標(biāo)的功能基因組學(xué),又稱后基因組研究。結(jié)構(gòu)基因組學(xué)代表基因組分析的早期階段,通過基因作圖、核在酸序列分析確定基因組成、基因定位的科學(xué),包括規(guī)?;販y定蛋白質(zhì)、RNA及其它生物大分子的三維結(jié)構(gòu)等內(nèi)容,以獲得一幅完整的、能夠在細(xì)胞中定位以及在各種生物學(xué)代謝途徑、生理途徑、信號傳導(dǎo)途徑中全部蛋白質(zhì)在原子水平的三維結(jié)構(gòu)全息圖。功能基因組學(xué)代表基因分析的新階段,是利用結(jié)構(gòu)基因組學(xué)提供的信息研究基因功能,使人們有可能在基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子細(xì)胞生物學(xué)以致生物體整體水平上理解生命的原理。對疾病的防治和機理的闡明有重要應(yīng)用意義。病毒
34、基因組十、A型題:1.只含小分子量RNA而不含蛋白質(zhì)的病毒稱()A.類病毒(Viroids)B.衛(wèi)星(Satellites)C.類病毒(viroid)D.骯病毒(Prions)E.擬病毒(virusoid)2.只含蛋白質(zhì)而不含核酸的的病毒稱()A.類病毒(Viroids)B.衛(wèi)星(Satellites)C.類病毒(viroid)D.骯病毒(Prions)E.擬病毒(virusoid)3. RNA病毒基因組的帽子結(jié)構(gòu)與第二個核昔酸相連的化學(xué)鍵()A. 5/,5/-三磷酸二酯鍵B. 3/,3/-三磷酸二酯鍵C. 5/,5/-磷酸二酯鍵D. 3/,5,-磷酸二酯鍵E.以上都不是4. HBV基因組是(
35、)A.完全雙鏈DNA分子B.不完全雙鏈DNA分子C.完全雙鏈RNA分子D.不完全雙鏈RNA分子E.單鏈DNA分子5.具mRNA模板活性的病毒基因組是()A.正鏈DNA病毒B.負(fù)鏈DNA病毒C.負(fù)鏈RNA病毒D.逆轉(zhuǎn)錄科的正鏈RNA病毒E.正鏈RNA病毒(逆轉(zhuǎn)錄科的正鏈RNA病毒除外)6 .關(guān)于逆轉(zhuǎn)錄病毒敘述不正確的是()A.迄今發(fā)現(xiàn)的RNA腫瘤病毒均屬RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒B.嗜肝DNA病毒科屬DNA逆轉(zhuǎn)錄病毒。C.逆轉(zhuǎn)錄病毒RNA為正鏈D.病毒顆粒均攜帶逆轉(zhuǎn)錄酶E.前病毒DNA可以整合到宿主細(xì)胞染色體DNA中7 .逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組的結(jié)構(gòu)特點不包括()A. 5/端帽子結(jié)構(gòu)B. 3/端poly(A)尾
36、C.兩端各有一個長末端重復(fù)序列(LTR)D.編碼逆轉(zhuǎn)錄酶E.神經(jīng)酰胺酶8 .分段基因組(segmentedgenome)是指病毒基因組(A.由數(shù)條不同的核酸分子組成B.由數(shù)條相同的核酸分子組成C.由數(shù)條互補的核酸分子組成D.由可分成不同功能區(qū)段的一個核酸分子組成E.以上都不對9 .HBV基因組序列的利用率(編碼基因效率)達(dá)()A. 90%100%B. 100%150%C. 150%200%D. 200%250%E. 250%300%10 .SARS-CoV的分子診斷主要是()A.根據(jù)基因組序列設(shè)計特異性引物作PCRB.根據(jù)基因組序列設(shè)計特異性引物作RT-PCRC.根據(jù)病毒膜蛋白作ELISAD.
37、根據(jù)病毒核衣殼蛋白作ELISAE.根據(jù)病毒滴度H一、B型題:A.雙鏈DNAB.單鏈DNAC.雙鏈RNAD.正鏈RNAE.負(fù)鏈RNA1 .HBV基因組是()2 .流感病毒基因組是()3 .人類免疫缺陷病毒的基因組(十二、X型題:1.C2.D3.A4.B5.E6.D7.E8.A9.C10.B1 .述一個病毒基因組,應(yīng)涉及到()A.核酸(DNA或RNA)的性質(zhì)B.核酸鏈的數(shù)量和核音酸序列C.鏈末端的結(jié)構(gòu)D.編碼基因E.調(diào)控元件2 .病毒基因組末端重復(fù)序列結(jié)構(gòu)有()A.粘性末端B.末端插入序列C.末端反向重復(fù)序列D.末端正向重復(fù)序列E.長末端重復(fù)序列3 .甲型流感病毒亞型的分型依據(jù)()A.核衣殼蛋白(
38、nucleocapsidprotein,NP)B.基質(zhì)蛋白(matrixprotein,M)C.血凝素(hemagglutinin,HA)的抗原性D.神經(jīng)酰胺酶(neuraminidase,NA)的抗原性E.宿主種屬1.A三、B型題:2.E3.DX型題:1.ABCDE2.ACDE3.CD4.ABE5.ABCDE四、名詞解釋:5.6.7.8.許多病毒基因組的一段6.ABCDDNA序列有兩個或兩個以上的開放讀碼框架,可以編碼兩種或兩種以上的多肽鏈,稱為重疊基因(overlappinggene)分段基因組(segmented條不同的核酸分子組成。genome)是指病毒基因組由數(shù)分段基因組多見于正鏈R
39、NA病毒、負(fù)鏈RNA病毒及雙鏈RNA病毒。當(dāng)宿主細(xì)胞同時感染兩種不同亞型的病毒時,毒株之間會發(fā)生基因重配現(xiàn)象,子代病毒可獲得兩個親代病毒的基因片段,導(dǎo)致子代病毒表面抗原發(fā)生變化,從而逃避機體免疫系統(tǒng)的攻擊,這種現(xiàn)象又稱為抗原漂移(antigenshift當(dāng)逆轉(zhuǎn)錄病毒感染敏感細(xì)胞后,首先以其自身的板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下合成DNA中間體,子稱原病毒或前病毒DNA(provirusDNA)。RNA為模這種DNA分4 .逆轉(zhuǎn)錄病毒編碼的基本結(jié)構(gòu)基因()A. gag(編碼核心蛋白)。B. pol(編碼逆轉(zhuǎn)錄酶等)C. rex(編碼rex調(diào)節(jié)蛋白)D. tax(編碼tax調(diào)節(jié)蛋白)E. env基因(編碼包
40、膜蛋白)5 .HIV基因組編碼的附加基因和調(diào)節(jié)基因()A.vif五、2.問答題:毒沒有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu),由四種基本結(jié)構(gòu)成份組成:由一種核酸(DNA或RNA)組成的病毒基因組。由病毒基因組編碼的衣殼蛋白組成的衣殼。來源于宿主細(xì)胞質(zhì)膜系統(tǒng)(細(xì)胞膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜或高爾基體膜)的包膜。病毒顆粒中的其它內(nèi)容物,包括酶、核酸結(jié)合蛋白及金屬離子等。2.國際病毒分類委員會(ICTV)制定了國際病毒分類與命名原則。根據(jù)病毒的基因組組成及復(fù)制方式,可將病毒分為如下B. vprC. nefD. tatE. rev6. HIV-1()A.引起AIDSB.主要攻擊輔助性T淋巴細(xì)胞C.導(dǎo)致免疫系統(tǒng)紊亂和免疫缺陷D.屬逆轉(zhuǎn)錄病毒
41、E.使被感染的細(xì)胞喪失功能但不會死亡十三、名詞解釋:1 .重疊基因2 .分段基因組3 .抗原漂移4 .前病毒DNA十四、問答題:1 .病毒的基本結(jié)構(gòu)成份主要有哪些?2 .國際病毒分類委員會(ICTV)將病毒分成哪幾類?3 .簡述長病毒末端重復(fù)序列的特點和作用。參考答案一、A型題:幾類:DNA病毒(DNAViruses第一組:第二組:RNA病毒(第三組:第四組:第五組:雙鏈DNA單鏈DNARNAviruses雙鏈正鏈負(fù)鏈RNARNARNA病毒(GroupI:dsDNAViruses病毒(GroupII:ssDNAViruses病毒(GroupIII:dsRNAViruses病毒(GroupIV:
42、(+)ssRNAViruses病毒(GroupV:(-)ssRNAVirusesDNA與RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒(DNATranscribingViruses第六組:RNATranscribingViruses第七組:DNATranscribingViruses逆轉(zhuǎn)錄病毒(逆轉(zhuǎn)錄病毒(亞病毒因子(SubviralAgents)衛(wèi)星(Satellites類病毒(Viroids骯病毒(Prions)3.逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組端有長末端重復(fù)序列(andRNAReverseGroupVI:GroupVII:RNA在逆轉(zhuǎn)錄后生成的雙鏈longterminalrepeat在結(jié)構(gòu)與功能上與上述重復(fù)序列不同。RNADNAD
43、NAReverseReverse中,兩LTR)結(jié)構(gòu)。LTRLTR中的重復(fù)序列只占部分,另外還包括單一序列。5/端的LTR包含許多特定的基因表達(dá)調(diào)控區(qū)域,是一組真核生物增強子和啟動子單位,而3/端的LTR具有轉(zhuǎn)錄終止的作用。另外,逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組利用LTR中的重復(fù)序列形成環(huán)狀結(jié)構(gòu),在整合酶作用下整合入宿主細(xì)胞基因組內(nèi)。蛋白質(zhì)組學(xué)選擇題1 .目前研究蛋白質(zhì)間相互作用最常采用的方法是。A質(zhì)譜分析B二維凝膠電泳C酵母雙雜交技術(shù)DDNaseI足紋分析2 .目前進(jìn)行蛋白質(zhì)分離最有效的方法是。A質(zhì)譜分析B二維凝膠電泳C酵母雙雜交技術(shù)DDNaseI足紋分析3 .二維凝膠電泳是根據(jù)蛋白質(zhì)的來進(jìn)行分離的。A分子量
44、和分子構(gòu)像B分子量和電荷C電荷和分子構(gòu)像D分子量4 .質(zhì)譜分析技術(shù)主要是用來檢測蛋白質(zhì)的。A分子量B分子組成C分子構(gòu)像D分子大小5 .下列技術(shù)中,不能用來檢測溶液中蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)是A核磁共振B圓二色譜法C氫同位素交換法D小角中子衍射法6 .DNaseI足紋分析技術(shù)中,DNaseI水解的是DNA分子中的。A氫鍵B磷酸二酯鍵C疏水鍵D肽鍵7 .蛋白質(zhì)之間相互作用的形式主要包括。A分子和亞基的聚合B分子識別C分子自我裝配D多酶復(fù)合體E分子雜交名詞解釋1 .蛋白質(zhì)組2 .蛋白質(zhì)組學(xué)3 .二維凝膠電泳4 .質(zhì)譜技術(shù)5 .凝膠滯后實驗問答題1 .蛋白質(zhì)組學(xué)的研究特點有哪些?2 .蛋白質(zhì)組學(xué)的研究內(nèi)容有哪
45、些?3 .目前在蛋白質(zhì)組學(xué)的研究中主要采用了哪些技術(shù)?4 .等電聚焦凝膠電泳的原理是什么?5 .簡述酵母雙雜交系統(tǒng)的優(yōu)缺點。答案:選擇題:名詞解釋:1. 蛋白質(zhì)組是指特定細(xì)胞、組織乃至機體作為一個生命單元中所擁有蛋白質(zhì)的集合,即生命體中攜帶的基因信息在某一時段所表達(dá)的全部蛋白質(zhì)。2. 蛋白質(zhì)組學(xué)是指對在特定的時間和環(huán)境下所表達(dá)的群體蛋白質(zhì)研究的一門學(xué)問。主要在蛋白質(zhì)水平上探索蛋白質(zhì)的表達(dá)模式、作用模式、功能機制、調(diào)節(jié)控制以及蛋白質(zhì)群體內(nèi)的相互作用。是在生物體或其細(xì)胞的整體蛋白質(zhì)水平上進(jìn)行的,并從一個機體或一個細(xì)胞的蛋白質(zhì)整體活動來揭示生命的規(guī)律。3. 二維凝膠電泳是目前蛋白質(zhì)組研究中最有效的分
46、離技術(shù)。它由兩向電泳組成,第一向以蛋白質(zhì)電荷差異為基礎(chǔ)進(jìn)行分離的等電聚焦凝膠電泳,第二向是以蛋白質(zhì)分子量差異為基礎(chǔ)的SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳。4. 質(zhì)譜技術(shù)是樣品分子離子化后,根據(jù)不同離子間的質(zhì)量、電荷比值(質(zhì)荷比,m/z)差異來確定分子量的技術(shù)。5. 凝膠滯后實驗是近年來發(fā)展起來的用聚丙烯酰胺凝膠電泳直接分析核酸與蛋白質(zhì)結(jié)合的簡單、快速、敏感方法。通過蛋白質(zhì)與末端標(biāo)記的核酸探針特異性結(jié)合,電泳時這種復(fù)合物較無蛋白結(jié)合的探針在凝膠中的泳動速度要慢,即表現(xiàn)為相對滯后。問答題:1 .整體性揭示生命的動態(tài)性過程體現(xiàn)生命現(xiàn)象的復(fù)雜性2 .蛋白質(zhì)組學(xué)的研究包括兩個方面:一是針對蛋白質(zhì)表達(dá)模式的研究,一
47、是在蛋白質(zhì)功能模式方面的深入分析。3 .蛋白質(zhì)的分離技術(shù):二維凝膠電泳 蛋白質(zhì)的鑒定技術(shù)主要包括:質(zhì)譜技術(shù)、Edman降解分析技術(shù)、蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)分析技術(shù) 蛋白質(zhì)與核酸間相互作用的研究技術(shù):凝膠滯后實驗、DNaseI足紋分析、核酸一蛋白質(zhì)雜交實驗蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)間相互作用的研究技術(shù):酵母雙雜交技術(shù)4 .依據(jù)蛋白質(zhì)分子的凈電荷或等電點進(jìn)行分離的技術(shù)。在等電聚焦過程中,電場所采用的載體兩性電解質(zhì)含有脂肪族多氨基多竣酸,可在電場中形成正極為酸性,負(fù)極為堿性的連續(xù)pH梯度,蛋白質(zhì)分子在一個載體兩性電解質(zhì)(ampholyte)形成的連續(xù)而穩(wěn)定的線性pH梯度中電泳,當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)遷移到其等電點位置時,凈電荷為零,
48、在電場中不再移動,因此可將各種不同等電點性質(zhì)的蛋白質(zhì)分離開來5 .酵母雙雜交系統(tǒng)所具有的優(yōu)點:蛋白質(zhì)作為被研究的對象不用被純化;檢測在活細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行,可以在一定程度上反映體內(nèi)(細(xì)胞內(nèi))的真實情況;由于這一系統(tǒng)可以反映基因表達(dá)產(chǎn)物的累積效應(yīng),因而可檢測存在于蛋白質(zhì)之間微弱或短暫的相互作用;采用不同組織、器官、細(xì)胞類型和分化時期材料構(gòu)建cDNA文庫,可用于分析多種不同功能的蛋白。C、B、B、A、D、B、ABCDE局限性:雙雜交系統(tǒng)分析蛋白間的相互作用定位于細(xì)胞核內(nèi),而許多蛋白間的相互作用依賴于翻譯后加工如糖基化、二硫鍵形成等,這些反應(yīng)在核內(nèi)無法進(jìn)行。由于某些蛋白本身具有激活轉(zhuǎn)錄功能或在酵母中表達(dá)時發(fā)
49、揮轉(zhuǎn)錄激活作用,從而引起報告基因的表達(dá),產(chǎn)生“假陽性”結(jié)果。雙雜交只是反映蛋白質(zhì)間能發(fā)生作用的可能性,這種可能還必須經(jīng)過其他實驗驗證,尤其要與生理功能研究相結(jié)合,否則可能會誤入歧途。核酸的分離與純化一、選擇題1 .真核生物染色體DNA主要以下列哪種形式存在A環(huán)狀單鏈分子B線性單鏈分子C環(huán)狀雙鏈分子D線性雙鏈分子E線性或環(huán)狀雙鏈分子本題答案C2 .DNA在細(xì)胞核內(nèi)通常與下列哪種物質(zhì)結(jié)合A蛋白質(zhì)B糖類C脂類D無機鹽E水本題答案A3 .RNA主要存在于A細(xì)胞質(zhì)B線粒體C細(xì)胞核D溶酶體E內(nèi)質(zhì)網(wǎng)本題答案A4 .人的二倍體細(xì)胞DNA大約由多少堿基對(bp)組成A.1.0X109bpB.2.0X109bpC
50、.3.0X109bpD.4.0X109bpE.5.0X109bp本題答案C5 .紫外分光光度法測定核酸溶液選用的光波波長為A200nmB230nmC260nmD280nmE320nm本題答案C6 .在純化核酸時往往含有少量共沉淀的鹽,常用下列哪種濃度的乙醇洗滌去除A100%B95%C7075%D5060%E3040%本題答案C7 .在核酸的分離與純化過程中,不需去除的污染物是A蛋白質(zhì)B脂類C對后續(xù)實驗有影響的溶液和試劑D不需要的核酸分子E水本題答案E8 .紫外分光光度法對DNA進(jìn)行測定中,下列哪項是正確的ADNA的最大吸收波長為280nmBA260為1的光密度大約相當(dāng)于50.g/ml雙鏈DNA
51、CA260為1的光密度大約相當(dāng)于40.g/ml雙鏈DNADA260為1的光密度大約相當(dāng)于33dg/ml雙鏈DNAEA260/A280大于2.0本題答案B9 .在核酸的提取過程中,將整個操作過程的pH盡可能控制在A23B410C1011D1112E1214本題答案B10 .紫外分光光度法可對核酸純度進(jìn)行鑒定,下列說法是正確的A純DNA的A270/A280比值為2.0B純DNA的A260/A280比值為1.8C純DNA的A260/A280比值為2.0D純DNA的A270/A280比值為1.8E純DNA的A230/A270比值為1.8本題答案B11 .通過凝膠電泳法可對RNA分子完整性進(jìn)行鑒定,提示
52、無RNA的降解時應(yīng)A28SRNA的熒光強度約為18S的2倍B18SRNA的熒光強度約為28S的2倍C5SRNA的熒光強度約為18S的2倍D5SRNA的熒光強度約為28S的2倍E28SRNA的熒光強度約為5S的2倍本題答案A12 .總RNA經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳EB染色后觀察不到的是AmRNAB28SrRNAC18SrRNAD5SrRNAE5.8SrRNA本題答案A13 .以下哪項有利于DNA的保存A溶于TE中DNA在室溫可儲存數(shù)年B加入少量DNaseC溶于pH3.0溶液D加入少量DNase和RNaseE在DNA樣品中加入少量氯仿,可有效避免細(xì)菌污染本題答案E14 .酚抽提法可用于高分子量DNA的分離純化,所用試劑分別有不同的功能,下列正確的是ASDS為陽離子去污劑,主要引起細(xì)胞膜的降解并能乳化脂質(zhì)和蛋白質(zhì)BEDTA為二價金屬離子螯合劑,可促進(jìn)DNase的活性C蛋白酶K只可消化K類蛋白質(zhì)D酚可使蛋白質(zhì)變性沉淀E無RNase的DNase可有效地水解RNA本題答案C15 .下列哪種不是對核酸分子完整性進(jìn)行鑒定的方法A凝膠電泳法BNorthern雜交CELISADWesternblottingE生物芯片技術(shù)本題答案D16 .下列哪種方法不是分離純化高分子量DNA的A酚抽提法B煮沸裂解法C甲酰胺解聚法D玻棒纏繞法E異丙醇沉淀法本題答案B17
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