血漿蛋白質(zhì)及非蛋白含氮化合物的代謝紊亂本科

1、會計學(xué)1血漿蛋白質(zhì)及非蛋白含氮化合物的代謝血漿蛋白質(zhì)及非蛋白含氮化合物的代謝紊亂本科紊亂本科GENES!DISEASES? ？PROTEINS血漿蛋白質(zhì)及非蛋白含血漿蛋白質(zhì)及非蛋白含氮化合物的代謝紊亂氮化合物的代謝紊亂硫酸銨鹽析沉淀蛋白功能功能分類：載體蛋白免疫球蛋白酶等 蛋白質(zhì)分類蛋白質(zhì)分類電泳法（主要的分類方法） 蛋白質(zhì)分類蛋白質(zhì)分類白蛋白1-球蛋白2 -球蛋白 -球蛋白 -球蛋白+CAM電泳電泳區(qū)帶電泳區(qū)帶蛋白質(zhì)種類蛋白質(zhì)種類功能功能前白蛋白前白蛋白前白蛋白前白蛋白營養(yǎng)、運載營養(yǎng)、運載白蛋白白蛋白白蛋白白蛋白營養(yǎng)、運載、維持膠營養(yǎng)、運載、維持膠壓等壓等1-球蛋白球蛋白1-抗胰蛋白酶抗胰蛋

2、白酶蛋白酶抑制劑蛋白酶抑制劑酸性糖蛋白酸性糖蛋白免疫應(yīng)答修飾劑免疫應(yīng)答修飾劑甲胎蛋白甲胎蛋白胎兒期蛋白胎兒期蛋白高密度脂蛋白高密度脂蛋白膽固醇逆轉(zhuǎn)運膽固醇逆轉(zhuǎn)運2-球蛋白球蛋白結(jié)合珠蛋白結(jié)合珠蛋白結(jié)合血紅蛋白結(jié)合血紅蛋白2-巨球蛋白巨球蛋白蛋白酶抑制劑蛋白酶抑制劑銅藍(lán)蛋白銅藍(lán)蛋白鐵氧化酶鐵氧化酶血漿蛋白質(zhì)的功能及其在電泳區(qū)帶的關(guān)系血漿蛋白質(zhì)的功能及其在電泳區(qū)帶的關(guān)系電泳區(qū)帶電泳區(qū)帶蛋白質(zhì)種類蛋白質(zhì)種類功能功能-球蛋白球蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白運鐵到細(xì)胞內(nèi)運鐵到細(xì)胞內(nèi)低密度脂蛋白低密度脂蛋白運膽固醇到組織運膽固醇到組織C3補體成分補體成分C4補體成分補體成分纖維蛋白原纖維蛋白原凝血因子凝血因子2-微

3、球蛋白微球蛋白用于監(jiān)測腎小管功能用于監(jiān)測腎小管功能-球蛋白球蛋白IgA免疫球蛋白免疫球蛋白IgG免疫球蛋白免疫球蛋白IgM免疫球蛋白免疫球蛋白C-反應(yīng)蛋白反應(yīng)蛋白炎癥介質(zhì)炎癥介質(zhì)血漿蛋白質(zhì)的功能及其在電泳區(qū)帶的關(guān)系血漿蛋白質(zhì)的功能及其在電泳區(qū)帶的關(guān)系轉(zhuǎn)鐵蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)(TRF)C-C-反應(yīng)蛋白質(zhì)反應(yīng)蛋白質(zhì)(CRP)(CRP)2微球蛋白微球蛋白(BMG)前白蛋白（前白蛋白（prealbumin,PA)白蛋白白蛋白(albumin，ALB） Day 1 Day 8 Day 15 Day 22Serum Albumin 17.3 3.7 21.0 4.6 26.6 4.1 32.4 3.6

4、(g/L) Serum Prealbumin 63.7 18.9 130.6 37.5 194.6 53.6 223.1 34.6 (mg/L)Plasma Albumin and Prealbumin Changes During Nutritional Therapy1-抗胰蛋白酶(1-antitrypsin， 1-AT，AAT）a1-Antitrypsin DeficiencyAAT具有遺傳多態(tài)性，以M型為主，S和Z型次之。與肺氣腫和肝臟損傷有關(guān)胎兒低血漿AAT可致呼吸窘迫綜合癥1-酸性糖蛋白（ 1-acid glycoprotein，AAG）甲胎蛋白（alpha fetal prote

5、in，AFP）結(jié)合珠蛋白（haptoglobin，Hp）與紅細(xì)胞中釋出自由Hb結(jié)合，防止Hb從尿中丟失保存鐵，急性溶血后下降，但一周再生恢復(fù)。APRP；連續(xù)觀察溶血是否處于進(jìn)行；嚴(yán)重肝病時合成降低。2-巨球蛋白（ 2-macroglobulin，2-MG，AMG）轉(zhuǎn)鐵蛋白（transferrin，TRF)轉(zhuǎn)鐵蛋白（transferrin，TRF)銅藍(lán)蛋白（ceruloplasmin，Cp)急性時相反應(yīng)蛋白acute phase reaction protein,APRP機體處于急性炎癥性疾病如手術(shù)、創(chuàng)傷、心肌梗死、感染和腫瘤時，稱為急性時機體處于急性炎癥性疾病如手術(shù)、創(chuàng)傷、心肌梗死、感染和腫瘤

6、時，稱為急性時相，發(fā)生的機體反應(yīng)為急性時相反應(yīng)相，發(fā)生的機體反應(yīng)為急性時相反應(yīng)在急性時相反應(yīng)中出現(xiàn)的濃度升高或降低的蛋白，可稱為急性時相反應(yīng)蛋白在急性時相反應(yīng)中出現(xiàn)的濃度升高或降低的蛋白，可稱為急性時相反應(yīng)蛋白多數(shù)為升高，多數(shù)為升高，PA、ALB、TRF降低降低APRP的機制未明朗，推測是機體防御的一部分。的機制未明朗，推測是機體防御的一部分。2-微球蛋白(2- microglobulin ， 2- m)C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP）血漿蛋白血漿蛋白個體內(nèi)不同時間的變異個體內(nèi)不同時間的變異 （CV%）不現(xiàn)個體間的變異不現(xiàn)個體間的變異（CV%）結(jié)合珠蛋白結(jié)合珠蛋白9

7、.01-酸性糖蛋白酸性糖蛋白.0.0轉(zhuǎn)鐵蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白.01-抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶.0.01-巨球蛋白巨球蛋白.0.0乙型肝炎乙型肝炎肝硬化肝硬化選擇性蛋白丟失選擇性蛋白丟失妊娠與高雌激素妊娠與高雌激素血癥血癥前白蛋白前白蛋白白蛋白白蛋白N或或-脂蛋白脂蛋白1-酸性糖蛋白酸性糖蛋白1-抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶2-巨球蛋白巨球蛋白銅藍(lán)蛋白銅藍(lán)蛋白N結(jié)合珠蛋白結(jié)合珠蛋白NN轉(zhuǎn)鐵蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白C3NN纖維蛋白原纖維蛋白原NIgGIgANIgMNNC-反應(yīng)蛋白反應(yīng)蛋白N電泳圖譜特征電泳圖譜特征PA帶帶Alb略略不規(guī)不規(guī)則則寬寬帶（有時可與帶（有時可與融成一片）融成一片）PA明顯明顯Alb明明顯顯 橋橋Alb明

8、顯明顯 2Alb略略 2 參考值：參考值：Alb:57%-68%1:1.0%-5.7%2:4.9%-11.2%:7%-13%:9.8%-18.2%各組分構(gòu)成：各組分構(gòu)成：Alb：白蛋白：白蛋白(前白蛋白前白蛋白)1：1酸性糖蛋白；酸性糖蛋白；1抗胰蛋白酶；抗胰蛋白酶；AFP;HDL2：HP；CRP；2巨球蛋白；巨球蛋白；脂蛋白；銅藍(lán)脂蛋白；銅藍(lán)蛋白蛋白：轉(zhuǎn)鐵蛋白；補體系統(tǒng)；：轉(zhuǎn)鐵蛋白；補體系統(tǒng)；脂蛋白脂蛋白：IgG；IgM；IgA；IgD；IgE腎病綜合癥腎病綜合癥Alb、PA、1AG、 AT 、TRF降低降低2MG、Hp增加增加免疫球蛋白免疫球蛋白IgG降低、降低、IgM可增加可增加原因是在

9、腎病中小分子量的蛋白丟失而致，但嚴(yán)原因是在腎病中小分子量的蛋白丟失而致，但嚴(yán)重則可有全低蛋白質(zhì)圖譜出現(xiàn)。重則可有全低蛋白質(zhì)圖譜出現(xiàn)。肝硬化肝硬化(-橋橋)PA及及Alb降低，降低，IgA彌散彌散性增多，致出現(xiàn)典型的性增多，致出現(xiàn)典型的-橋橋原因多因肝功能損害原因多因肝功能損害蛋白合成減少，而免蛋白合成減少，而免疫球蛋白反應(yīng)性增加疫球蛋白反應(yīng)性增加多發(fā)性骨髓瘤多發(fā)性骨髓瘤（漿細(xì)胞?。{細(xì)胞?。┏霈F(xiàn)出現(xiàn)M蛋白，又叫異常蛋白，又叫異常免疫球蛋白，其區(qū)帶寬免疫球蛋白，其區(qū)帶寬度與度與Alb帶大致相等或帶大致相等或較其狹窄，常分布在較其狹窄，常分布在2至慢至慢-G部位。部位。M蛋白是由某一細(xì)胞株分泌大

10、量結(jié)構(gòu)相同、電泳遷移率一致的蛋白是由某一細(xì)胞株分泌大量結(jié)構(gòu)相同、電泳遷移率一致的蛋白。蛋白。 M蛋白以外的其他免疫球蛋白明顯降低，其可能是由蛋白以外的其他免疫球蛋白明顯降低，其可能是由于于M蛋白大量消耗氨基酸，致使其他免疫球蛋白相對合成不足，蛋白大量消耗氨基酸，致使其他免疫球蛋白相對合成不足，以及以及M蛋白代謝亢進(jìn)，其他免疫球蛋白的分解代謝也隨之增加，蛋白代謝亢進(jìn)，其他免疫球蛋白的分解代謝也隨之增加，故而含量降低故而含量降低先天性無白蛋白缺陷先天性無白蛋白缺陷主要特征：白蛋白顯著主要特征：白蛋白顯著降低，總蛋白降降低，總蛋白降 低，低，1、2球蛋白明顯增高，球蛋白明顯增高，球球蛋白也增高。蛋白

11、也增高。 嚴(yán)重?zé)o白嚴(yán)重?zé)o白蛋白血癥時，白蛋白有蛋白血癥時，白蛋白有時可降為零。時可降為零。產(chǎn)生原因：本病是極少見的先天性疾病，可能由于肝產(chǎn)生原因：本病是極少見的先天性疾病，可能由于肝細(xì)胞內(nèi)白蛋白合成功能遺傳性缺陷或明顯低下所致。細(xì)胞內(nèi)白蛋白合成功能遺傳性缺陷或明顯低下所致。主要特征：主要特征：1球蛋白明球蛋白明顯降低，有時可接近零，顯降低，有時可接近零，血清總蛋白及其它各組血清總蛋白及其它各組分的蛋白通常沒有明顯分的蛋白通常沒有明顯變化。變化。產(chǎn)生原因：此病通常認(rèn)為是先天性或家族性的，系由于產(chǎn)生原因：此病通常認(rèn)為是先天性或家族性的，系由于1抗胰蛋白酶合成低下所致。因為血中抗胰蛋白酶合成低下所致

12、。因為血中1抗胰蛋白酶減少或抗胰蛋白酶減少或缺乏，致使血中或組織中的胰蛋白酶活性相對增加，肺結(jié)締缺乏，致使血中或組織中的胰蛋白酶活性相對增加，肺結(jié)締組織破壞亢進(jìn)，對青年可以發(fā)生肺氣腫組織破壞亢進(jìn)，對青年可以發(fā)生肺氣腫 ，當(dāng)合并感染時，當(dāng)合并感染時，可見白蛋白減低，但由于可見白蛋白減低，但由于1抗胰蛋白酶減少，即使有炎性抗胰蛋白酶減少，即使有炎性病灶，病灶，1區(qū)帶也不增加。區(qū)帶也不增加。1球蛋白缺陷產(chǎn)生原因：在此區(qū)帶出現(xiàn)缺陷的主要有結(jié)合珠蛋白、血漿銅產(chǎn)生原因：在此區(qū)帶出現(xiàn)缺陷的主要有結(jié)合珠蛋白、血漿銅藍(lán)蛋白，分別稱無結(jié)合珠蛋白血癥和銅藍(lán)蛋白缺乏癥。前者藍(lán)蛋白，分別稱無結(jié)合珠蛋白血癥和銅藍(lán)蛋白缺乏

13、癥。前者極少見，沒有特別癥狀，有時可伴有輕度貧血。銅藍(lán)蛋白缺極少見，沒有特別癥狀，有時可伴有輕度貧血。銅藍(lán)蛋白缺陷已知有陷已知有Willson氏病，特別在肝、腦和角膜較多。氏病，特別在肝、腦和角膜較多。2球蛋白缺陷球蛋白缺陷主要特征：主要特征：2球蛋白帶有時可輕度減低，其它組分多正常。球蛋白帶有時可輕度減低，其它組分多正常。 NADP+NADPH + H+二氫蝶呤還原酶二氫蝶呤還原酶BH4BH2PHAO2苯丙氨酸苯丙氨酸酪氨酸酪氨酸PHA：苯丙氨酸苯丙氨酸4羥化酶羥化酶BH4：四氫生物蝶呤四氫生物蝶呤苯丙氨酸代謝苯丙氨酸代謝繼發(fā)性氨基酸代謝紊亂繼發(fā)性氨基酸代謝紊亂血清總蛋白測定血清總蛋白測定雙

14、縮脲法 原理：重復(fù)肽鍵，堿性、Cu+ 此法操作簡便，準(zhǔn)確，重復(fù)性好， 推薦臨床常規(guī)方法不適合用于微量蛋白檢測(2.0g/L) 血清總蛋白測定血清總蛋白測定酚試劑法酚試劑法依據(jù)蛋白質(zhì)分子中的酪氨酸、色氨酸殘基依據(jù)蛋白質(zhì)分子中的酪氨酸、色氨酸殘基能夠與酚試劑中的磷鎢酸能夠與酚試劑中的磷鎢酸-磷鉬酸反應(yīng)生磷鉬酸反應(yīng)生成藍(lán)色化合物，改良法加入成藍(lán)色化合物，改良法加入Cu+本法靈敏度高本法靈敏度高(0.01g/L0.06g/L)殘基比例不同，方法的重復(fù)性較差殘基比例不同，方法的重復(fù)性較差血清總蛋白測定血清總蛋白測定比濁法比濁法酸類可沉淀血清蛋白質(zhì)，產(chǎn)生濁度酸類可沉淀血清蛋白質(zhì)，產(chǎn)生濁度本法簡便，但影響因

15、素多。本法簡便，但影響因素多。血清總蛋白測定血清總蛋白測定染料結(jié)合法染料結(jié)合法在一定的緩沖環(huán)境中，蛋白質(zhì)可與某些染料在一定的緩沖環(huán)境中，蛋白質(zhì)可與某些染料(氨基黑、考馬期亮藍(lán)等氨基黑、考馬期亮藍(lán)等)結(jié)合而顯不同顏色結(jié)合而顯不同顏色本法操作簡單，重復(fù)性好，靈敏度高，干擾本法操作簡單，重復(fù)性好，靈敏度高，干擾少，但特異性差少，但特異性差(多肽干擾多肽干擾)，無統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，無統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)物。物。血清總蛋白測定血清總蛋白測定紫外分光光度法紫外分光光度法色氨酸、酪氨酸等在色氨酸、酪氨酸等在280nm下有吸收下有吸收峰，依此進(jìn)行定量。峰，依此進(jìn)行定量。本法干擾多，需紫外分光光度計本法干擾多，需紫外分光光度計

16、血清總蛋白測定血清總蛋白測定折光測定法折光測定法利用溶解在溶液中的固體可增加光折射率，利用溶解在溶液中的固體可增加光折射率，且不同的固體有不同的折光性來測定。且不同的固體有不同的折光性來測定。本法簡便，快速，適應(yīng)于急診，但準(zhǔn)確性本法簡便，快速，適應(yīng)于急診，但準(zhǔn)確性差，基質(zhì)效應(yīng)較大，易受脂血、溶血、黃差，基質(zhì)效應(yīng)較大，易受脂血、溶血、黃疸等影響?zhàn)愕扔绊懷灏椎鞍诇y定血清白蛋白測定鹽析法鹽析法在蛋白質(zhì)溶液中加入大量中性鹽，蛋白在蛋白質(zhì)溶液中加入大量中性鹽，蛋白質(zhì)表面的電荷被大量中和，水化膜被破質(zhì)表面的電荷被大量中和，水化膜被破壞，蛋白質(zhì)分子相互聚積而沉淀析出，壞，蛋白質(zhì)分子相互聚積而沉淀析出，此現(xiàn)

17、象稱為鹽析。此現(xiàn)象稱為鹽析。測定時依據(jù)球蛋白水化膜比白蛋白少而測定時依據(jù)球蛋白水化膜比白蛋白少而先被沉淀先被沉淀染料結(jié)合法染料結(jié)合法在酸性環(huán)境下，帶正電的蛋白質(zhì)與帶負(fù)電在酸性環(huán)境下，帶正電的蛋白質(zhì)與帶負(fù)電的陰離子產(chǎn)生顏色反應(yīng)，可比色測定。的陰離子產(chǎn)生顏色反應(yīng)，可比色測定。操作簡便，快速，重復(fù)性好，靈敏度高操作簡便，快速，重復(fù)性好，靈敏度高BCG法：主要問題是非特異性干擾（存在法：主要問題是非特異性干擾（存在慢反應(yīng)物質(zhì)）慢反應(yīng)物質(zhì)）BCP法：無非特異性干擾，但標(biāo)準(zhǔn)品不能法：無非特異性干擾，但標(biāo)準(zhǔn)品不能用動物血清用動物血清血清白蛋白測定血清白蛋白測定血清白蛋白測定血清白蛋白測定電泳法電泳法CAM或

18、瓊脂糖電泳分出不同蛋白條帶，再行或瓊脂糖電泳分出不同蛋白條帶，再行檢測檢測特異性好，但不易自動化特異性好，但不易自動化免疫化學(xué)法免疫化學(xué)法依抗原抗體反應(yīng)原理依抗原抗體反應(yīng)原理特異性好，準(zhǔn)確，但成本較高特異性好，準(zhǔn)確，但成本較高血清球蛋白測定血清球蛋白測定乙醛酸法乙醛酸法色氨酸殘基色氨酸殘基(球球:2%3%,白白:0.2%）在酸性）在酸性溶液中可以與乙醛酸反應(yīng)產(chǎn)生紫色化合物。溶液中可以與乙醛酸反應(yīng)產(chǎn)生紫色化合物。臨床上常不單獨測定，用總蛋白減去白蛋臨床上常不單獨測定，用總蛋白減去白蛋白所得為球蛋白量白所得為球蛋白量血漿纖維蛋白原測定血漿纖維蛋白原測定纖維蛋白原凝塊法纖維蛋白原凝塊法比濁法比濁法鹽

19、析法鹽析法免疫化學(xué)法免疫化學(xué)法尿總蛋白、微量蛋白質(zhì)測定尿總蛋白、微量蛋白質(zhì)測定尿蛋白相對量較低，需用靈敏度尿蛋白相對量較低，需用靈敏度較高的方法（酚試劑法）進(jìn)行檢較高的方法（酚試劑法）進(jìn)行檢測。測。CSF蛋白測定蛋白測定CSF是血漿的超濾液，僅含有分子量是血漿的超濾液，僅含有分子量低的蛋白質(zhì)，且量微低的蛋白質(zhì)，且量微濁度法濁度法(磺基水楊酸磺基水楊酸-硫酸鈉硫酸鈉)染料結(jié)合法染料結(jié)合法(考馬期亮藍(lán)考馬期亮藍(lán)G-250染料結(jié)染料結(jié)合法，鄰苯三酚紅鉬絡(luò)合顯色法合法，鄰苯三酚紅鉬絡(luò)合顯色法)THE ENDTHE ENDTHANK YOUTHANK YOU Day 1 Day 8 Day 15 Day 22Serum Albumin 17.3 3.7 21.0 4.6 26.6 4.1 32.4 3.6 (g/L) Serum Prealbumin 63.7 18.9 130.6 37.5 194.6 53.6 223.1 34.6 (mg/L)Plasma Albumin and Prealbumin Changes During Nutritiona