實驗細(xì)菌的染色

1、實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康?實驗原理實驗原理實驗材料實驗材料 涂片涂片干燥干燥 固定固定染色染色水洗水洗干燥干燥鏡檢鏡檢操作步驟操作步驟 操作步驟操作步驟（continued） 革蘭氏染色（革蘭氏染色（Gram stain） 1984年，丹麥醫(yī)生年，丹麥醫(yī)生Gram采用革蘭氏染色法細(xì)采用革蘭氏染色法細(xì)菌細(xì)胞壁區(qū)分為兩種類型：革蘭氏陰性（菌細(xì)胞壁區(qū)分為兩種類型：革蘭氏陰性（G+）和革蘭氏陽性（和革蘭氏陽性（G-）革蘭氏染色步驟革蘭氏染色步驟: 1）結(jié)晶紫初染；）結(jié)晶紫初染；2）碘液媒染；）碘液媒染； 3）酒精脫色；）酒精脫色； 4）番紅復(fù)染）番紅復(fù)染 G G菌：細(xì)胞壁厚，肽聚糖網(wǎng)菌：細(xì)胞壁厚，肽聚糖網(wǎng)狀分

2、子形成一種透性屏障，當(dāng)狀分子形成一種透性屏障，當(dāng)乙醇脫色時，肽聚糖脫水而孔乙醇脫色時，肽聚糖脫水而孔障縮小，故保留結(jié)晶紫障縮小，故保留結(jié)晶紫- -碘復(fù)碘復(fù)合物在細(xì)胞膜上。呈紫色。合物在細(xì)胞膜上。呈紫色。G菌：肽聚糖層薄，交聯(lián)松菌：肽聚糖層薄，交聯(lián)松散，乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)收散，乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)收縮，其脂含量高縮，其脂含量高, ,乙醇將脂溶乙醇將脂溶解，縫隙加大，結(jié)晶紫解，縫隙加大，結(jié)晶紫- -碘復(fù)碘復(fù)合物溶出細(xì)胞壁，番紅復(fù)染后合物溶出細(xì)胞壁，番紅復(fù)染后呈紅色。呈紅色。本實驗安排本實驗安排簡單染色：枯草芽孢（簡單染色：枯草芽孢（1d1d）。）。革蘭氏染色：大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、本人革蘭氏

3、染色：大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、本人斜面菌株。斜面菌株。莢膜染色：膠質(zhì)芽孢桿菌。莢膜染色：膠質(zhì)芽孢桿菌。芽孢染色：枯草芽孢（芽孢染色：枯草芽孢（2d2d）另外，每大組選兩人從斜面挑取枯草芽孢（另外，每大組選兩人從斜面挑取枯草芽孢（2d2d）于離心管，水浴鍋中煮沸。于離心管，水浴鍋中煮沸。思考題思考題簡單染色簡單染色: :(1) (1) 你認(rèn)為制備細(xì)菌染色標(biāo)本時，尤其應(yīng)該注意哪些環(huán)節(jié)你認(rèn)為制備細(xì)菌染色標(biāo)本時，尤其應(yīng)該注意哪些環(huán)節(jié)? ?(2) (2) 如果你的涂片未經(jīng)熱固定，將會出現(xiàn)什么問題？如果加熱溫度過高、如果你的涂片未經(jīng)熱固定，將會出現(xiàn)什么問題？如果加熱溫度過高、時間太長，又會怎樣呢？時間太

4、長，又會怎樣呢？革蘭氏染色革蘭氏染色: :(1) (1) 你認(rèn)為哪些環(huán)節(jié)會影響革蘭氏染色結(jié)果的正確性你認(rèn)為哪些環(huán)節(jié)會影響革蘭氏染色結(jié)果的正確性? ?其中最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)其中最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)是什么是什么? ?(2) (2) 現(xiàn)有一株細(xì)菌寬度明顯大于大腸桿茵的粗壯桿菌，請你鑒定其革蘭現(xiàn)有一株細(xì)菌寬度明顯大于大腸桿茵的粗壯桿菌，請你鑒定其革蘭氏染色反應(yīng)。你怎樣運用大揚桿菌和金黃色葡萄球菌為對照菌株進氏染色反應(yīng)。你怎樣運用大揚桿菌和金黃色葡萄球菌為對照菌株進行涂片染色，以證明你的染色結(jié)果正確性。行涂片染色，以證明你的染色結(jié)果正確性。(3) (3) 進行革蘭氏染色時，為什么特別強調(diào)菌齡不能太老，用老齡細(xì)菌染進行革蘭氏染色時，為什么特別強調(diào)菌齡不能太老，用老齡細(xì)菌染色會出現(xiàn)什么問題？色會出現(xiàn)什么問題？思考題思考題莢膜染色法莢膜染色法:(1) 通過莢膜染色法染色后，為什么被包在莢膜里面的菌體著通過莢膜染色法染色后，為什么被包在莢膜里面的菌體著色而莢膜不著色？色而莢膜不著色？芽孢染色法芽孢染色法:(1) 說明芽孢染色法的原理。用簡單染色法能否觀察到細(xì)菌的說明芽孢染色法的原理。用簡單染色法能否觀察到細(xì)菌的芽孢芽孢?思考題思考題芽孢染色法芽孢染色法(1) 說明芽孢染色法的原理。用簡單染色法能說明芽孢染色法的原理。用簡單染色法能否觀察到細(xì)菌的芽孢否觀察到細(xì)菌的芽孢?(2) 若涂