《藥物毒理學》復習要點

1、【精品文檔】如有侵權(quán)，請聯(lián)系網(wǎng)站刪除，僅供學習與交流藥物毒理學復習要點.精品文檔.許老師復習重點一、名詞解釋：1、藥物毒理學：研究藥物對機體的毒性反應、中毒機制及其防治方法的一門獨立的學科，它也是藥理學研究不可缺少的內(nèi)容之一。 是研究藥物對生命有機體有害作用的科學 是毒理學的分支學科之一 是一門與藥學、藥理學、臨床藥物治療學密切相關(guān)和交叉的藥學邊緣學科。2、毒物：指在一定條件下，以較小劑量進入機體就能干擾正常的生化過程或生理功能，引起暫時或永久性的病理改變，甚至危及生命的化學物質(zhì)。3、終毒物：是指與內(nèi)源性靶分子反應或嚴重地改變生物學環(huán)境、啟動結(jié)構(gòu)和功能而表現(xiàn)出毒性的物質(zhì)4、治療指數(shù)：藥物的LD

2、50和 ED50的比值稱為治療指數(shù) (therapeutic index,TI），用以表示藥物的安全性。TI= LD50/ ED50 此值越大越安全。但僅僅用TI來判斷兩個藥物的安全性并完全可靠（參見P4）5、毒性反應：在劑量過大、用藥時間過長或體內(nèi)藥物蓄積過多時對機體的危害性的反應。如異煙肼肝損傷；氯霉素灰嬰綜合征等. 6、毒代動力學（TK）：運用藥代動力學的原理和方法，定量地研究毒性劑量下藥物在動物體內(nèi)的吸收、分布、代謝、排泄過程及其特點, 進而探討藥物毒性發(fā)生和發(fā)展規(guī)律性的一門學科。7、半數(shù)致死量（LD50)：指化學物質(zhì)能引起50%動物死亡的劑量。8、安全范圍（MOS）：LD5和ED95

3、 的比值，稱作安全范圍。 MOS=LD5/ED95 越大越安全9、最大耐受量(MTD)：又稱最大耐受濃度，指藥物在除急性毒性動物實驗外的實驗（短期重復實驗、亞慢性毒性試驗、慢性毒性實驗）中不引起實驗動物死亡的最大劑量或濃度。10、停藥反應：長期用藥因減量太快或突然停藥時引起的不良反應，包括“反跳現(xiàn)象”（原病復發(fā)或加重）及“停藥癥狀”(病人出現(xiàn)一些原來疾病沒有的癥狀)。11、鎮(zhèn)痛劑腎?。悍晴摅w抗炎藥物能抑制腎臟前列腺素合成，降低腎血流量，影響腎功能，嚴重時導致不可逆的腎毒性，稱為“鎮(zhèn)痛劑腎病”。 二、簡答題1. 藥物毒理學的基本目的是什么？q 指導臨床合理用藥q 指導藥物合成q 降低藥物的毒副作

4、用q 減少因毒性導致的新藥研發(fā)失敗2、藥物(毒物)在組織中的儲存部位有哪些？舉例說明。1、血漿蛋白作為貯存庫：甲苯磺丁脲、華法林 2、肝和腎作為貯存庫：金屬離子鎘、鉛，有機酸類3、脂肪組織作為貯存庫：如硫噴妥、DDT 4、骨骼組織作為貯存庫：如四環(huán)素、氟喹諾酮類等3. 簡述藥物導致毒性作用的四個作用步驟（一）藥物到達靶組織 (二)與靶器官相互作用 （三）細胞功能失調(diào)導致的毒性(見教材) (四) 修復不全或錯誤修復 (見教材)5、簡述藥物/毒物引起肝細胞壞死的機制有哪些？舉例藥物。（1）肝細胞膜脂質(zhì)過氧化：如CCl4、對乙酰氨基酚氧自由基與生物膜多不飽和脂肪酸的側(cè)鏈及核酸等大分子物質(zhì)起脂質(zhì)過氧化

5、反應，使細胞膜的流動性和通透性發(fā)生改變，最終導致細胞結(jié)構(gòu)和功能的改變。如CCl4等化學毒物的細胞色素P-450系統(tǒng)作用下，產(chǎn)生三氯甲烷自由基，后者可使細胞膜或亞細胞膜脂質(zhì)發(fā)生過氧化，引起膜通透性增加，最終導致細胞死亡。（2）與生物大分子結(jié)合：如抗腫瘤藥、，可與生物大分子如蛋白質(zhì)、核酸、不飽和脂質(zhì)發(fā)生共價結(jié)合，使生物大分子功能喪失，導致細胞死亡。（3)免疫反應：如氟烷引發(fā)的肝炎樣綜合征，系氟烷在P450作用下形成三氟乙酰基，三氟乙?；透蝺?nèi)蛋白結(jié)果，形成新抗原，激發(fā)機體產(chǎn)生抗體，激發(fā)免疫反應所致。（4）鈣內(nèi)環(huán)境平衡失調(diào)：鉛、鎘等重金屬1）細胞內(nèi)Ca2+持續(xù)升高對細胞能量平衡產(chǎn)生不良的影響2)高C

6、a2+水平可激活降解蛋白質(zhì)、磷脂和核酸的水解酶3)高Ca2+ 引發(fā)活性氧（ROS）的過度產(chǎn)生（5)影響肝細胞呼吸鏈中酶蛋白的合成：如化學毒物肝臟線粒體DNA（mtDNA）編碼電子傳遞鏈所需的酶蛋白；某些化學毒物可插入mtDNA 鏈中，使其錯誤編碼呼吸鏈中酶蛋白，或終止其酶蛋白合成，導致肝細胞呼吸鏈中酶蛋白的合成發(fā)生障礙，肝細胞內(nèi)呼吸停止，細胞死亡。6、常見的藥源性血液病類型哪些？（一）再生障礙性貧血再生障礙性貧血(簡稱再障)，是由多種原因引起的骨髓干細胞、造血微環(huán)境損傷以及免疫機制改變，導致骨髓造血功能衰竭，出現(xiàn)以全血細胞減少為主要表現(xiàn)的疾病。癥狀：全血細胞(紅細胞、粒細胞、血小板)減少為主要

7、臨床表現(xiàn)。其病理變化主要為紅骨髓的脂肪化，即原來有造血功能的紅骨髓被脂肪所取代。兩種類型1、和劑量有關(guān)系藥物毒性作用，達到一定劑量就會引起骨髓抑制，一般是可逆的。如阿糖胞苷、甲氨蝶呤、白消安、亞硝脲類、苯妥英鈉、吩噻嗪、硫尿嘧啶及氯霉素 等，均也可以引起與劑量有關(guān)的骨髓抑制。2、和劑量關(guān)系不大 多系藥物的過敏反應，常導致持續(xù)性再障。常見的有氯霉素、阿的平、三甲雙酮、保泰松、氨基比林、炎痛喜康、磺胺、甲砜霉素、甲亢平、他巴唑、氯磺丙脲等。藥源性血細胞減少的機制：可逆性血細胞減少藥物可呈劑量依賴性地抑制骨髓線粒體蛋白質(zhì)的合成，降低鐵螯合酶活性，阻礙血紅蛋白的合成以及幼紅細胞生成、抑制粒細胞、血小板

8、的生成。特異質(zhì)性或過敏性反應表現(xiàn)為與劑量無關(guān)的不可逆的全血細胞減少，可能與DNA合成障礙或造血干細胞受損有關(guān)。存在遺傳性體質(zhì)異常，以致骨髓造血多能干細胞出現(xiàn)某種代謝缺陷。（二）白細胞減少或粒細胞缺乏癥 外周血白細胞總數(shù)持續(xù)低于4109L，稱為白細胞減少癥。白細胞減少癥最常見是由中性粒細胞減少所致。當中性粒細胞低于1.8-2.0109/L時，稱粒細胞減少癥。減少至低于0.5-1.0109/L時，稱粒細胞缺乏癥，常伴有嚴重的難以控制的感染。 藥源性白細胞減少的機制：發(fā)生與劑量有關(guān),系細胞毒性所致。藥物直接損傷造血干細胞或阻礙幼粒細胞DNA的合成，抑制幼粒細胞的分裂、增殖，引起粒細胞成熟障礙。當達到

9、一定劑量就可以造成骨髓抑制。 其發(fā)生與劑量無明顯關(guān)系，屬于免疫反應。藥物作為半抗原與粒細胞蛋白質(zhì)結(jié)合變?yōu)橥耆乖?，并刺激抗體產(chǎn)生，進而使粒細胞凝集而致病。（三）藥源性血小板減少癥 臨床上,藥物引起病人血小板的改變較為常見,輕者表現(xiàn)為皮膚黏膜出血,重者可引起腦出血,甚至死亡。藥源性血小板減少的機制：由免疫機制所致藥物作為半抗原與機體蛋白結(jié)合為全抗原，接觸一段時間后產(chǎn)生變態(tài)反應，使外周血小板破壞增加。由于骨髓巨噬細胞中毒引起血小板減少 通常在用藥一段時間的數(shù)日至數(shù)月后發(fā)生，少數(shù)患者藥物能在人體內(nèi)長期滯留，因此可以在末次用藥后數(shù)周或數(shù)月才發(fā)病。（四）藥源性溶血性貧血藥源性溶血性貧血系指由于藥物的作用

10、使紅細胞破壞加速，而導致的貧血。 藥物毒性多為免疫反應所致。藥源性溶血性貧血的機制：免疫復合物型： 藥物(奎寧、奎尼丁、非那西丁、對氨基水楊酸等 )作為半抗原，與血清蛋白質(zhì)結(jié)合形成抗原，刺激抗體(IgM或IgG)產(chǎn)生，藥物與抗體牢固地形成免疫復合物，并吸附在紅細胞膜表面上，激活補體引起溶血，稱免疫復合物型。半抗原細胞型 藥物(如青霉素類)作為一種半抗原，與紅細胞膜及血清內(nèi)蛋白形成完全抗原，所產(chǎn)生的抗體與吸附在紅細胞上的藥物發(fā)生反應，不需補體參與下，即可導致紅細胞破壞。 自身免疫型： 又稱甲基多巴型溶血性貧血。主要由于服用甲基多巴后引起溶血性貧血，其發(fā)病機理并不明確，一般在用藥3-6月后發(fā)生溶血

11、表現(xiàn)。遺傳缺陷型（圖示） 紅細胞中葡萄糖磷酸脫氫酶（G6PD）的缺乏，紅細胞中GSH降低導致高鐵血紅蛋白癥，引發(fā)溶血。如蠶豆病、伯氨喹。 氧化溶血硫化血紅蛋白（(sulfhemoglobin）的產(chǎn)生是該類藥物毒性的共性。正常人血液中不含有硫化血紅蛋白，也不存在于紅細胞中。血紅蛋白被氧化后 還可進一步硫化成硫化血紅蛋白，有些人服用磺胺類或非那西丁等藥物后，血液中可出現(xiàn)一種呈綠棕色的硫化血紅蛋白，并可能伴有溶血。（五）其它藥物性血液病有些藥物可通過抑制DNA合成而致病，如通過抑制二氫葉酸還原酶抑制葉酸代謝、抑制對維生素B12的吸收利用或直接抑制核酸合成，引起巨細胞性貧血。一些抗腫瘤藥物或放射性同位

12、素可引起白血病。7、肝毒物按照其毒性機制可為哪幾類？舉例藥物。1、體質(zhì)依賴性肝毒物：多見于藥物，如磺胺、異煙肼。2、真性肝毒物：多見化學物，個別藥物。直接肝毒物：如對乙酰氨基酚、異煙肼等如乙酰氨基酚、異煙肼等，可通過肝臟細胞色素P450酶系代謝產(chǎn)生親電子基、自由基、氧自由基等產(chǎn)物，與肝細胞大分子蛋白質(zhì)形成共價結(jié)合，使細胞結(jié)構(gòu)和功能破壞，導致肝細胞膜脂質(zhì)過氧化、膜蛋白變形、膜結(jié)構(gòu)破壞，細胞死亡。間接肝毒物：如抗腫瘤藥等如四環(huán)素、甲氨喋呤、巰嘌呤等，可干擾細胞酶活性從而導致細胞內(nèi)物質(zhì)代謝紊亂的化學物，或其代謝產(chǎn)物能與細胞內(nèi)生物大分子結(jié)合，使細胞功能發(fā)生變化的化學物。8、藥物性肝損傷類型有哪些？一、

13、肝細胞死亡(hepatocyte death )1、細胞壞死 (necrosis) ：細胞的被動病死，稱作“細胞他殺”。細胞形態(tài)學表現(xiàn)為核與線粒體腫脹，細胞的質(zhì)膜崩解（細胞膜、細胞器膜、核膜等），結(jié)構(gòu)自溶，并引發(fā)急性炎癥反應。藥/毒物引起肝細胞壞死的機制：2、肝細胞凋亡(apoptosis)：一種由基因控制的細胞自主性死亡方式“細胞自殺”。表現(xiàn)為分散的單個細胞壞死或小灶狀壞死。某些藥物作用下可出現(xiàn)肝細胞的凋亡，如抗腫瘤藥。但藥物毒性和凋亡的關(guān)系研究的較少。二、脂肪變性（steatosis)正常肝脂質(zhì)含量小于肝重量的5%。當肝臟脂質(zhì)代謝紊亂，表現(xiàn)為脂肪肝(fatty liver)。肝脂肪變時脂肪

14、以脂滴的形式在細胞質(zhì)中。藥/毒物引起肝細胞脂肪變性的機制：運脂蛋白合成減少，以致不能將脂肪運輸出去，造成脂肪在肝細胞內(nèi)堆積。如四環(huán)素、止痛藥、抗生素或抗結(jié)核藥等，可破壞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)或抑制某些酶的活性，使脂蛋白及組成脂蛋白的磷脂、蛋白質(zhì)等的合成發(fā)生障礙所致。脂肪酸的氧化障礙 如丙戊酸鈉等損傷線粒體，使脂肪酸的氧化降低，未被氧化的脂肪酸可酯化未甘油三酯，以脂質(zhì)小滴的形式堆積在細胞質(zhì)中。甘油三酯合成過多：如乙醇誘發(fā)甘油三酯合成酶，使甘油三酯合成過多。脂質(zhì)氧化損害三、膽汁瘀積（cholestasis) 肝對化合物的一種急性毒性反應，可表現(xiàn)為膽汁形成減少，膽汁分泌與排泄受阻，膽鹽和膽紅素在血清中含量增加。

15、如紅霉素、氯霉素、磺胺類、硝酸呋類、對氨基水楊酸類、灰黃霉素藥物/毒物引起肝臟膽汁瘀積的機制：1、藥/毒物損傷肝細胞膜的功能。2、藥/毒物在膽管內(nèi)沉淀，阻塞膽管。 3、藥/毒物影響使得膽管壁上皮細胞通透性降低。四、肝纖維化與肝硬變肝硬化：是慢性肝損傷的最后階段，主要表現(xiàn)為肝臟全面性的纖維化合并節(jié)結(jié)形成。如甲氨蝶呤、異煙肼、-甲基多巴、甲苯磺丁脲、乙胺碘呋酮等，可導致藥物性肝炎，最后發(fā)展為肝硬化。藥物/毒物引起肝纖維化的機制：肝細胞壞死后，細胞被分解、吸收，成纖維細胞增生，合成膠原增多，膠原沉積形成纖維化；肝細胞受損后，激活I(lǐng)to細胞，變成肌成纖維細胞（myofibroblast），最后成為纖維

16、細胞，膠原合成增多；或Ito細胞DNA復制和增殖功能增強，細胞數(shù)量增加，肝內(nèi)纖維增生，導致肝纖維化。藥物或炎癥反應反復刺激下，纖維組織逐漸增多，纖維組織形成獨立的細胞墻。 五、肝血管損傷抗腫瘤藥達卡巴嗪、口服避孕藥等，可損傷肝臟內(nèi)的血管內(nèi)皮細胞，導致血流受阻，組織缺氧、壞死。六、腫瘤 肝良性或惡性腫瘤，少見。如雄性激素藥物、甾體類避孕藥、合成抗氧化劑、藥酶誘導劑如苯巴比妥等。9、藥物腎損害機制主要有哪幾方面？（一）細胞毒作用腎毒性藥物可通過不同的機制，直接如影響線粒體功能，或影響溶酶體膜等，導致腎小管細胞膜的直接損傷而造成腎損害。這種損害通常與藥物劑量有關(guān)。（二）免疫損害藥物（半抗原）腎組織蛋

17、白全抗原變態(tài)反應（型變態(tài)反應或型變態(tài)反應）腎小球或腎小管的損害（三）降低腎血流量非甾體抗炎藥物能抑制腎臟前列腺素合成，降低腎血流量，影響腎功能，嚴重時導致不可逆的腎毒性，稱為“鎮(zhèn)痛劑腎病”。 如該類藥物引起的腎乳頭壞死，可能和乳頭部位慢性缺血繼發(fā)腎血管收縮有關(guān)。1953-年（歐美）非那西汀腎2000多人腎功能衰竭（四）機械性損害難溶解的藥物結(jié)晶，沉著在腎小管，引起腎損害。如磺胺結(jié)晶引起的血尿。10、簡述終毒物是否與靶分子反應產(chǎn)生毒性取決哪些因素？1)終毒物與靶分子反應的類型：(見教材)非共價鍵結(jié)合：藥物通過非極性交互作用或氫鍵與離子鍵的形成與靶分子作用。如毒物與膜受體、細胞內(nèi)受體、離子通道以及

18、酶等靶分子的交互作用。因為鍵能相對低，通常是可逆的或可解救。例如：筒箭毒堿和N2受體結(jié)合，中毒時可用新斯的明解救。共價鍵結(jié)合：抗腫瘤藥物烷化劑如氮芥類、亞硝脲類、乙烯亞胺類等，一般以共價鍵與癌細胞中的生物大分子（DNA，RNA，酶等）發(fā)生共價結(jié)合，使其喪失活性或使DNA分子發(fā)生斷裂，導致腫瘤細胞死亡，或?qū)ζ渌毎l(fā)生毒性。特點： 根本上改變生物大分子 具有不可逆性 發(fā)揮高效和持續(xù)的治療/毒性作用去氫反應：如對乙酰氨基酚的中間代謝物N-乙酰對位苯醌亞胺可通過從脂肪酸去氫而產(chǎn)生膜脂質(zhì)過氧化降解，導致肝細胞膜的破壞。電子轉(zhuǎn)移：非那西丁使血紅蛋白氧化產(chǎn)生高鐵血紅蛋白。酶促反應：蓖麻蛋白導致和核蛋白體水

19、解破壞；蛇毒含的水解酶可以造成組織損傷。 2)靶分子的屬性 (見教材)所用內(nèi)源性分子均是終毒物（如藥物及其活性代謝物）的潛在作用靶點。如酶、受體、蛋白、DNA等。 靶分子的反應性/空間構(gòu)型終毒物是否容易和靶分子結(jié)合，如黃曲霉素容易與DNA形成加成物，導致基因突變而產(chǎn)生致癌性。靶分子的易感性靶分子是否容易被終毒物所影響，某些線粒體酶如丙酮酸脫氫酶、細胞色素C氧化酶等極易成為腎毒物的巰基結(jié)合靶點。靶分子的關(guān)鍵功能靶分子的關(guān)鍵功能決定其毒性大小，如甲氨喋呤與二氫葉酸還原酶作用，發(fā)揮抗腫瘤作用，同時引起骨髓、毛發(fā)、胃腸道等毒性。3)毒物/藥物對靶分子的效應(見教材)(1)功能紊亂:如阿托品：M型膽堿受

20、體 阻斷-口干、尿潴留等 筒箭毒：N型膽堿受體阻斷-呼吸抑制 長春堿：微管蛋白防礙聚合-骨髓毒性(2)結(jié)構(gòu)破壞:如阿霉素：嵌入腫瘤細胞DNA雙螺旋結(jié)構(gòu),與DNA分子形成加成物,破壞了DNA結(jié)構(gòu)。又如氮芥：能與細胞骨架蛋白、DNA或DNA與蛋白形成交叉聯(lián)接,通過交叉聯(lián)結(jié)等使靶分子結(jié)構(gòu)破壞。 (3)新抗原生成:氟烷：在肝藥酶作用下轉(zhuǎn)為三氟乙?；?+ 蛋白全抗原肝炎樣綜合征11、藥物特異質(zhì)反應和變態(tài)反應的區(qū)別（特點）？ 變態(tài)反應(allergic reaction)：某些作為半抗原(hapten) 的化學物質(zhì)與機體接觸后，與內(nèi)源性蛋白結(jié)合為抗原并激發(fā)抗體產(chǎn)生(稱為致敏)。當再度與該化學物質(zhì)或結(jié)構(gòu)類似

21、物質(zhì)接觸時，引發(fā)抗原抗體反應，產(chǎn)生過敏反應癥狀。過敏反應損害表現(xiàn)多種多樣，輕者僅有皮膚癥狀，重者休克，甚至死亡。如青霉素過敏反應.特異質(zhì)反應（idiosyncrasy）：指由遺傳所決定的特異性體質(zhì)對某種毒物的異常反應性。 如遺傳性膽堿酯酶缺陷者：琥珀酰膽堿毒性，持續(xù)的肌肉松弛和呼吸暫停 遺傳性葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）缺陷者：伯氨喹、蠶豆馬、磺胺、VitK等藥物引發(fā)溶血型貧血 乙酰化快、慢代謝型：乙?；D(zhuǎn)移酶的差異異煙肼快代謝型外周神經(jīng)炎、肝毒性12、肺臟對藥物易感性的原因1、藥物的肺動力學特征所致：肺泡膜總面積大、肺泡壁薄、肺循環(huán)血流緩慢，藥物和肺組織接觸機會多。2、藥物在肺臟的積聚

22、和代謝所致：藥物在肺組織的高濃度攝取及它的活性代謝產(chǎn)物都可導致肺局藥部的毒性反應。3、藥物在肺組織沉積所致：攔截、碰撞、沉降、擴散13、生物藥物的特殊性包括哪幾方面?1、結(jié)構(gòu)確證不完全性 生物技術(shù)藥物的活性主要取決于其氨基酸序列和空間結(jié)構(gòu)，但由于其一般分子量較大，空間結(jié)構(gòu)復雜，現(xiàn)有的分析方法和手段并不能完全地確認其化學結(jié)構(gòu)。合成多肽結(jié)構(gòu)確認的內(nèi)容：p 氨基酸序列研究：說明氨基酸連接順序是否正確，常常用Edman降解（即測定N端氨基酸）、質(zhì)譜、核磁共振譜等方法。p 空間結(jié)構(gòu)研究：生物藥物原則要求空間結(jié)構(gòu)研究，特別是長肽。如文獻或研究顯示，某多肽需要維持一定空間才有活性，則必須開展相應的空間結(jié)構(gòu)研

23、究。2、種屬特異性包括不同人種之間的差異、人與動物之間的差異。不同種屬的動物的同類受體在結(jié)構(gòu)或功能上可能存在差異。因此生物藥物在不同種屬動物，存在生物活性的差異，甚至不同的反應。3、多功能性在同一生物體內(nèi)，生物技術(shù)藥物的受體可能廣泛分布，或者針對的是特定的細胞信號通路，從而可以產(chǎn)生廣泛的藥理活性和毒性作用。因此，應用中應考慮與其藥理學效應相關(guān)的潛在危害。 例如某些生長因子EGF、VEGF和NGF，除了促進表皮、血管、神經(jīng)組織的生長外，也是胚胎正常發(fā)育必不可少的。阻斷這些通路（如FGFR拮抗劑）即使未發(fā)現(xiàn)發(fā)育毒性，在理論上存在風險。4、免疫原性和免疫毒性 免疫原性：指藥物刺激機體形成特異性抗體或

24、致敏淋巴細胞的性質(zhì)。免疫原性是藥物本身具有的性質(zhì),有免疫原性不一定導致毒性，但可以影響對藥物毒性、毒代或藥效的客觀評價。 免疫毒性：指受試品引起免疫抑制（感染，腫瘤）或增強（過敏反應）或自身免疫反應?？赡芘c藥理活性相關(guān)(如抗排斥藥物) 或不相關(guān)(如部分抗腫瘤藥物)。（1） 免疫原性的強弱是生物技術(shù)藥物開發(fā)的決定因素之一。治療用生物制品：評價其免疫原性，在于考察藥物的免疫原性對藥效和安全性評價可能的影響。 例如，抗藥物抗體可能會中和藥物的活性、影響藥物的清除、血漿半衰期和組織分布，改變藥效/藥動學，使在非臨床研究中觀察到的效應可能并非藥物真正的藥理和/或毒性反應。預防用生物制品：評價其免疫原性，

25、在于考察藥物的免疫原性強弱及其免疫保護作用的關(guān)系。（2）免疫原性檢測對生物藥物至關(guān)重要。在非臨床研究中評價免疫原性，主要目的在于考察生物藥物的免疫原性強弱和免疫原性對安全性評價可能的影響。 三、論述題： 1、藥物毒性作用包括哪些？舉例藥物。毒性作用（toxic reaction）：指外源化學物/藥物作用下，機體表現(xiàn)的不良或有害的生物學改變。毒性反應 (toxic reaction )：在劑量過大、用藥時間過長或體內(nèi)藥物蓄積過多時對機體的危害性的反應。如異煙肼肝損傷；氯霉素灰嬰綜合征等. 變態(tài)反應(allergic reaction)：某些作為半抗原(hapten) 的化學物質(zhì)與機體接觸后，與內(nèi)

26、源性蛋白結(jié)合為抗原并激發(fā)抗體產(chǎn)生(稱為致敏)。當再度與該化學物質(zhì)或結(jié)構(gòu)類似物質(zhì)接觸時，引發(fā)抗原抗體反應，產(chǎn)生過敏反應癥狀。過敏反應損害表現(xiàn)多種多樣，輕者僅有皮膚癥狀，重者休克，甚至死亡。如青霉素過敏反應.特異質(zhì)反應 （idiosyncrasy）指由遺傳所決定的特異性體質(zhì)對某種毒物的異常反應性。 l 如遺傳性膽堿酯酶缺陷者：琥珀酰膽堿毒性，持續(xù)的肌肉松弛和呼吸暫停l 遺傳性葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）缺陷者：伯氨喹、蠶豆馬、磺胺、VitK等藥物引發(fā)溶血型貧血l 乙?；?、慢代謝型：乙酰基轉(zhuǎn)移酶的差異異煙肼快代謝型外周神經(jīng)炎、肝毒性致癌性（carcinogenesis）：屬于長期用藥產(chǎn)生的毒

27、性,包括損傷遺傳物質(zhì)產(chǎn)生腫瘤及非遺傳物質(zhì)損傷途徑產(chǎn)生腫瘤。如化療藥物；還可以是遲發(fā)效應產(chǎn)生腫瘤如己烯雌酚。生殖毒性和發(fā)育毒性 (reproductive and developmental toxicity） 生殖毒性：對育齡人群用藥后產(chǎn)生的對生殖系統(tǒng)及與生育相關(guān)的神經(jīng)或內(nèi)分泌系統(tǒng)產(chǎn)生的毒性。如精子卵子異常、不育不孕、流產(chǎn)等。 發(fā)育毒性：指藥物對胚胎的直接影響（胚胎器官形成器及其他發(fā)育階段）所導致的胎兒毒性。如胎兒畸形、發(fā)育遲緩、功能異常、死亡。如反應停、抗癲癇藥物、抗過敏藥、抗凝藥等，可致胎兒畸形、流產(chǎn)、死亡。致突變與遺傳毒性 (mutagenesis and genetic toxicit

28、y)：藥物損傷遺傳物質(zhì)而發(fā)生突變作用，產(chǎn)生對人類本身（致癌毒性）及后代的影響（致畸毒性）。如抗腫瘤藥物。2、終毒物是否與靶分子反應產(chǎn)生毒性取決哪些因素？舉例藥物說明。3、藥物毒代動力學的概念和研究目的是什么？毒物代謝動力學（Toxicokinetics，TK）：運用藥代動力學的原理和方法，定量地研究毒性劑量下藥物在動物體內(nèi)的吸收、分布、代謝、排泄過程及其特點, 進而探討藥物毒性發(fā)生和發(fā)展規(guī)律性的一門學科。毒代動力學有別于的藥代動力學和毒理學是：所用劑量遠遠高于臨床所用劑量；多為重復多次給藥；側(cè)重點是闡明藥物毒性發(fā)生和發(fā)展的動態(tài)變化規(guī)律性。毒代動力學研究目的：1、闡述機體與藥物（在毒性劑量條件下

29、）接觸的強度和時間與藥物毒性發(fā)生發(fā)展的內(nèi)在關(guān)系,明確引起毒性反應的量效關(guān)系和時效關(guān)系。2、預測藥物毒性作用的靶器官（組織），并解釋中毒機制。3、明確是原形藥物還是某種特定產(chǎn)物引起的毒性反應，以及毒性反應種屬間的差異的關(guān)系。4、探索毒性反應種屬之間的差異，明確動物毒性劑量與臨床劑量之間的關(guān)系，為臨床安全用藥提供依據(jù)。5、為臨床前毒性研究的實驗設(shè)計（如動物種屬,試驗劑量和用藥方案的設(shè)計）提供依據(jù)。4、藥物導致毒性作用的四個作用步驟是什么？（一）藥物到達靶組織 直接毒性作用 如磺胺尿道結(jié)晶 藥物毒性的強度主要取決于終毒物在作用部位的濃度及其持續(xù)時間。(二)與靶器官相互作用 毒物/藥物與靶分子作用后產(chǎn)

30、生毒性。 是否激發(fā)毒性，取決以下因素：1)終毒物與靶分子反應的類型：(見教材)2)靶分子的屬性 (見教材)3)毒物/藥物對靶分子的效應(見教材)（三）細胞功能失調(diào)導致的毒性(見教材)1、基因表達失調(diào)（1）轉(zhuǎn)錄失調(diào) 如藥物可作為外源性配基，引起轉(zhuǎn)錄因子介導的毒性,如致畸性、致癌性。P15 表1-1（2）信號轉(zhuǎn)導失調(diào) 藥物影響轉(zhuǎn)錄因子（磷酸化或脫磷酸化），影響基因的表達。如烷化劑引起胸腺細胞凋亡、肝毒物引起肝細胞凋亡等。（3）信號產(chǎn)生失調(diào)：如巴比妥的甲狀腺毒性2、細胞活動失調(diào)（1）電興奮細胞活動失調(diào)藥物可影響神經(jīng)細胞、骨骼肌、心肌、平滑肌的正常功能，導致毒性。通過影響一下環(huán)節(jié)： 藥物-神經(jīng)遞質(zhì)水平

31、改變 藥物-神經(jīng)遞質(zhì)受體相互作用 藥物-信號傳導相互作用（2）非電興奮細胞活動失調(diào)：外分泌腺細胞、內(nèi)分泌腺細胞 (四) 修復不全或錯誤修復 (見教材)不適當?shù)男迯?、分子（層面）修復：蛋白、脂質(zhì)、DNA2、細胞組織（層面）修復：調(diào)亡、增生4靶分子的毒物效應有那些？舉例說明(1)功能紊亂:如阿托品：M型膽堿受體 阻斷-口干、尿潴留等 筒箭毒：N型膽堿受體阻斷-呼吸抑制 長春堿：微管蛋白防礙聚合-骨髓毒性(2)結(jié)構(gòu)破壞:如阿霉素：嵌入腫瘤細胞DNA雙螺旋結(jié)構(gòu),與DNA分子形成加成物,破壞了DNA結(jié)構(gòu)。又如氮芥：能與細胞骨架蛋白、DNA或DNA與蛋白形成交叉聯(lián)接,通過交叉聯(lián)結(jié)等使靶分子結(jié)構(gòu)破壞。 (

32、3)新抗原生成:氟烷：在肝藥酶作用下轉(zhuǎn)為三氟乙?；?+ 蛋白全抗原肝炎樣綜合征5、敘述腎臟對藥物毒性的易感性的原因有哪些?6、理解下圖，敘述治療指數(shù)（TI ）評價藥物安全性的可靠性如何。如何更全面評價兩種不同藥物的毒性大??？李老師復習重點一、名詞解釋：前致癌物：致癌物必須經(jīng)過代謝活化才具有致癌活性，這些致癌物稱為前致癌物。直接致癌物：有些致癌物可以不經(jīng)過代謝活化就具有活性，稱為直接致癌物。終致癌物：直接致癌物和間接致癌物形成的具有致癌作用的衍生物，稱為終致癌物。癌基因：指具有致癌能力或致癌潛能的基因的總稱，包括病毒癌基因和細胞癌基因。 在自然或?qū)嶒灄l件下具有誘發(fā)惡性轉(zhuǎn)化的潛在基因 是化學致癌物

33、作用的主要靶分子，在細胞癌變過程中起著關(guān)鍵作用。抑癌基因：是正常細胞分裂生長的負性調(diào)節(jié)因子，其編碼的蛋白質(zhì)能夠降低或抑制過度生長、增殖從而遏制腫瘤形成。如野生型P53基因。胚胎毒性：指藥物等造成的孕體著床前后直到器官形成期（大、小鼠615天,兔為810天）結(jié)束的所有毒性。胎兒毒性：指器官形成期結(jié)束后的因素引發(fā)的任何毒性表現(xiàn)，包括死亡、體重降低、骨化遲緩、功能缺陷以及結(jié)構(gòu)異常。致畸指數(shù)：指藥物等對母體的半數(shù)致死劑量（LD50）和最小致畸劑量之比。（100強致畸）藥物耐受性：人體反復用藥后，人體對藥物的反應性降低的狀態(tài)。特點：有選擇性、可逆性、交叉耐受性交叉依賴性：人體對一種藥物產(chǎn)生生理依賴性時，

34、停用該藥所引發(fā)的戒斷綜合癥可能為另一性質(zhì)相似的藥物所抑制，并維持已形成的依賴狀態(tài)，稱交叉依賴性。（兩藥藥理作用可相互替代，亦可為部分藥理作用的交叉依賴。）藥物濫用： 指的是與醫(yī)療、預防和保健目的無關(guān)的反復大量使用有依賴性特性（或稱依賴潛能）的藥物，用藥者采用自身給藥的方式，導致精神依賴性和生理依賴性，造成精神紊亂和出現(xiàn)一系列異常行為。遺傳結(jié)構(gòu)：種群中占主導地位的交配方式和基因的遺傳特性。種群中的基因多樣性取決于基因突變、基因重組和外界種群的基因流入。遺傳毒理學：研究理化因素（化學性物質(zhì)、放射性物質(zhì)）的致突變作用以及人類接觸致突變物可能引起的有害效應。二、簡答題1. 簡述化學致癌作用的分子機制？

35、（一）DNA加合物：遺傳毒性物質(zhì)與DNA發(fā)生作用，形成DNA加和物（2） DNA修復與致癌過程：DNA損傷修復突變腫瘤（三）癌基因、原癌基因和抑癌基因： 1、癌基因（oncogene）和原癌基因（proto-oncogene）：2、抑癌基因（anti-oncogene）（四）基因表達調(diào)控異常與腫瘤的發(fā)生2. 簡述化學致癌過程3. 簡述藥物藥物誘發(fā)突變的類型。(1) 基因突變 基因突變即遺傳物質(zhì)在分子水平上的改變，有堿基置換、移碼和大段損傷。 1.堿基置換：堿基置換是某一堿基配對性能改變或脫落而引起的突變。此時首先在DNA復制時會使互補鏈的相應位點配上一個錯誤的堿基，即發(fā)生錯誤配對。這一錯誤配上

36、的堿基在下一次DNA復制時卻能按正常規(guī)律配對，于是一對錯誤的堿基置換了原來的堿基對，亦即最終產(chǎn)生堿基對置換。2.移碼: 移碼是DNA中增加或減少了一對或幾對不等于3的倍數(shù)的堿基對所造成的突變。結(jié)果產(chǎn)生一個無功能的肽鏈片段，移碼較易成為致死性突變。 3.大段損傷：大段損傷是DNA鏈大段缺失或插入。這種損傷有時可跨越兩個或數(shù)個基因，涉及數(shù)以千計的核苷酸， 它往往是DNA斷裂的結(jié)果。游離出來的DNA片段可整合到另一染色體某一位置而形成插入。每次整合都可發(fā)生突變。(二)染色體畸變 1.染色體結(jié)構(gòu)異常：是染色體或染色體單體受損而發(fā)生斷裂，且斷端不發(fā)生重接或雖重接卻不在原處。 2.染色體數(shù)目異常：各種生物

37、都有其固定的染色體數(shù)目和核型。染色體數(shù)目異?？赡鼙憩F(xiàn)為整倍性畸變和非整倍性畸變。整倍性畸變可能出現(xiàn)單倍體、三倍體或四倍體。非整倍性畸變系指比二倍體多或少一條或多條染色體。 4、簡述藥物致突變的機制？(一)直接以DNA為靶的誘變 1.堿基類似物取代 ：有些化學物的結(jié)構(gòu)與堿基非常相似，它們能與天然堿基競爭，并取代其位置，取代后堿基類似物造成錯誤配對。2. 烷化劑的影響：烷化劑是對DNA和蛋白質(zhì)都有強烈烷化作用的物質(zhì)。烷化劑能夠提供甲基或乙基與DNA共價結(jié)合。3.平面大分子嵌入DNA鏈：有些大分子能以靜電吸附形式插入DNA單鏈的堿基之間或DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的相鄰多核苷酸鏈之間，如果插入到新合成的互補鏈

38、上，就會使之缺失一個堿基；如果嵌入到模板鏈的兩堿基之間，就會使互補鏈插入一個堿基。無論多或少一個堿基都造成移碼突變。4. 致突變物改變或破壞堿基的化學結(jié)構(gòu)：有些化學物可對堿基產(chǎn)生氧化作用，從而破壞或改變堿基的結(jié)構(gòu)，有時還引起鏈斷裂。(二)不以DNA 為靶的間接誘變1.紡錘體抑制：一些化學物能作用于紡錘體，中心粒或其他核內(nèi)細胞器，從而干擾有絲分裂過程。2.對酶促過程的作用：對DNA合成和復制有關(guān)的酶系統(tǒng)作用也可間接影響遺傳物質(zhì)。例如，一些氨基酸類似物可使與DNA合成有關(guān)的酶系統(tǒng)遭受破壞從而誘發(fā)突變. 5、簡述經(jīng)典的三代兩窩生殖危險度評價的方案。 大鼠斷奶或出生8周后，與受試物接觸，共進行812周

39、，直到性發(fā)育成熟，相當出生后4個月左右。每周至少稱體重一次，記錄進食量并觀察有無中毒癥狀或死亡。將雌雄親代動物（F0）同籠交配，雌雄比例為1：1或2：1，直到受孕或進行3周為止。雌鼠受孕后即單籠飼養(yǎng)，繼續(xù)接觸受試物。交配3周后，如仍未受孕，則停止交配，并進行生殖器官病理學檢查。 確定是否受孕的方法是每日清晨進行雌性動物陰道涂片，檢查有無精子；亦可檢查陰道有無陰栓出現(xiàn)，以確定受精日期?，F(xiàn)陰栓或檢出精子，即為受孕0日，也有作為受孕第1日。 親代動物（F0）所生仔鼠為第一代(F1)。出生后第4天和第21天逐個稱取重量，仔鼠斷奶后，母鼠休息10天，再與雄鼠交配一次，并生出第二窩仔鼠，親代共生出仔鼠兩窩

40、，分別為F1a和F1b。 F1b出生后，將雄性親鼠淘汰，雌性親鼠繼續(xù)喂受試物，直至F1b出生后21天斷奶為止。F1a斷奶后觀察其發(fā)育情況，不再喂受試物。F1b斷奶后，繼續(xù)接觸受試物812周，直到性發(fā)育成熟，選出雌雄各1620只，按前法進行交配。F1b所產(chǎn)第一窩幼仔為F2a，F(xiàn)2a斷奶后，其母鼠F1b休息10天，再次交配，所生幼仔為F2b，F(xiàn)2b斷奶后，將F1b淘汰。F2b交配處理方法與F1b相同。但F2b也可只交配一次，所產(chǎn)仔鼠為F3a，不再進行第二次交配，試驗結(jié)束。6、 簡述發(fā)育毒性的具體表現(xiàn)方式。 1.生長遲緩：即胚胎與胎兒的發(fā)育過程在外來化合物影響下，較正常的發(fā)育過程緩慢。 2.致畸作用

41、：由于外來化合物干擾，活產(chǎn)胎兒出生時，某種器官表現(xiàn)形態(tài)結(jié)構(gòu)異常。致畸作用所表現(xiàn)的形態(tài)結(jié)構(gòu)異常，在出生后立即可被發(fā)現(xiàn)。 3.功能不全或異常：即胎兒的生化、生理、代謝、免疫、神經(jīng)活動及行為的缺陷或異常。4.胚胎或胎兒致死作用：某些外來化合物在一定劑量范圍內(nèi)，可在胚胎或胎兒發(fā)育期間對胚胎或胎仔具有損害作用，并使其死亡。具體表現(xiàn)為天然流產(chǎn)或死產(chǎn)、死胎率增加。7. 簡述母體毒性作用與致畸作用的關(guān)系1.概念：母體毒性作用是指外來化合物在一定劑量下，對受孕母體產(chǎn)生的損害作用。具體表現(xiàn)包括體重減輕、出現(xiàn)某些臨床癥狀、直至死亡。2.母體毒性作用與致畸作用的關(guān)系：具有致畸作用，但無母體毒性出現(xiàn)；出現(xiàn)致畸作用的同時

42、也表現(xiàn)母體毒性；不具有特定致畸作用機理，但可破壞母體正常生理穩(wěn)態(tài)，以致對胚胎具有非特異性的影響，并造成畸形；僅具有母體毒性，但不具有致畸作用；在一定劑量下，既不呈現(xiàn)母體毒性，也未見致畸作用。此種情況并不能確定受試物確實不具致畸作用?？赡苁莿游锝佑|的劑量未達到致畸作用的最小有作用劑量。 8、藥物依賴性特征有哪些？藥物與機體相互作用所形成的一種特殊精神狀態(tài)和身體狀態(tài)，表現(xiàn)為欲求定期和不間斷地反復用藥，以期體驗用藥后的心理效應和避免由于停藥所引起的嚴重身體不適和痛苦。往往伴有對該藥物的耐受性。分精神依賴性、生理依賴性、交叉依賴性9、簡述影響神經(jīng)毒性作用的因素？1、藥物的分子構(gòu)型和理化性質(zhì) ；藥物的分

43、子構(gòu)型明顯改變對神經(jīng)系統(tǒng)的毒性。例如DA和5-HT是正常腦組織中存在的神經(jīng)介質(zhì)，其類似物6-羥多巴胺和5，6-羥色胺(5，6-DHT)作用恰和DA、5-HT相反。2、人和動物的種屬差異，年齡，生理或病理狀態(tài)； 藥物毒作用存在著動物種屬差異是普遍現(xiàn)象 ，原因是解剖，生理或生化背景。神經(jīng)性毒物對人較敏感，猴、狗、貓次之，兔、大鼠、小鼠又次之。年齡明顯影響神經(jīng)性毒物的毒作用。一般說來對胎兒、嬰幼兒的敏感性較高，與血-腦屏障和血神經(jīng)屏障完整性有關(guān)。3、中毒條件和外環(huán)境的影響。 10、簡述藥物濫用的防治原則？（一）減少供應 （禁種、禁制、禁販、嚴格管理）（二）減少需求 戒毒治療康復(禁吸) 預防教育 藥

44、物濫用監(jiān)測（三）減少危害 美沙酮維持治療 針具交換 推廣安全套 11、簡述神經(jīng)性毒物的作用特點。1. 神經(jīng)細胞再生能力差，神經(jīng)元自身不能增殖，某一神經(jīng)元受藥物損害而死亡，損傷持續(xù)存在，其功能不能由其他神經(jīng)元所代替。2. CNS中受外源性化學物損害的軸突再生效果很差，周圍神經(jīng)系統(tǒng)中軸突再生也十分緩慢，且再生后功能也不完全。3. 長神經(jīng)纖維末梢對某些毒物反應較靈敏，受損后的修復過程需自體細胞體通過軸漿運輸必需物質(zhì)到受損部位，需要較長時間，因此修復十分緩慢。4. 神經(jīng)毒性表現(xiàn)可隨年齡的增長有所不同。如發(fā)育中的神經(jīng)系統(tǒng)由于血腦屏障沒有發(fā)育完全，則在嬰幼兒期接觸鉛，可易發(fā)生中毒性鉛性腦病。而在成人接觸鉛

45、，由于血腦屏障發(fā)育完全，則不易發(fā)生中毒性鉛性腦病，而易損傷周圍神經(jīng)系統(tǒng)。5. 有些神經(jīng)細胞最初是過量存在的，因此對損傷具有一定的緩沖作用，神經(jīng)細胞少量損失不會影響神經(jīng)功能和行為活動。這種細胞過量存在的結(jié)果可能會使毒物的作用呈現(xiàn)一個閾值，或呈現(xiàn)非線性的劑量反應關(guān)系。6. 神經(jīng)毒性反應的表現(xiàn)可能是進行性的，輕微的功能損傷也可能變得異常嚴重。輕微的改變也許成為接觸的標志物，中等強度的變化也可能是疾病發(fā)生前的信號，而較大程度的改變就可能表示疾病的發(fā)生。7. 由于在后半生神經(jīng)細胞的減少和神經(jīng)系統(tǒng)的其他改變，神經(jīng)毒性可以隨著年齡衰老逐步增強。8. 某些物質(zhì)特別是各種藥物在不同劑量下，神經(jīng)系統(tǒng)可產(chǎn)生不同的反

46、應。如抗抑郁藥在低劑量下，產(chǎn)生興奮作用，具有良好的治療作用，但在高劑量下則產(chǎn)生抑制作用，甚至威脅生命。9. 化學物質(zhì)的聯(lián)合接觸會產(chǎn)生相互作用，職業(yè)性和環(huán)境接觸溶劑混合物會產(chǎn)生累積性毒性效應。12、 簡述DNA損傷的修復方式。(1) 復制前的修復1、 光復活2、 適應性反應對DNA的烷化作用可以誘導一種具有專一作用的烷基轉(zhuǎn)移酶的合成，它能將O6-烷基鳥嘌呤的烷基轉(zhuǎn)移至酶本身的半胱氨酸的巰基上，從而恢復鳥嘌呤的原有結(jié)構(gòu)。（2） 復制過程中的修復在復制過程中，Pol 具有校正讀碼功能的外切核酸酶活性，可以識別剛剛錯配的堿基，并切除。（3） SOS修復由DNA損傷或抑制復制的處理所引起的一系列復雜的誘

47、導效應，稱為應急反應（SOS） 13、 簡述遺傳毒性實驗的組合原則。1. 應包括5類遺傳學終點 2. 應包括多種進化程度不同的物種3. 體內(nèi)試驗與體外試驗配合4. 體細胞試驗陽性，再進行生殖細胞試驗 5. 驗證陽性結(jié)果在體內(nèi)的真實性，必要時再選用生殖細胞致突變試驗14、簡述外源化合物對免疫系統(tǒng)作用的特點。1 反應的靈敏性: 很多藥物對免疫系統(tǒng)造成不良反應的劑量往往低于它們的一般毒性作用劑量。 2 反應的復雜性:主要表現(xiàn)在免疫反應的雙重性和作用的選擇性。一種藥物對機體可產(chǎn)生免疫增強或免疫抑制兩種效應，它取決于化學物質(zhì)劑量大小、進入機體途徑以及檢測時間。3 免疫系統(tǒng)對外來化學物的易感性：動物試驗中

48、，骨髓、血液和組織中淋巴細胞消失和胸腺重量變化是免疫毒作用的最早、最明顯的信號。4. 存在個體差異 15、簡述適應性免疫（特異性免疫）應答的基本特征1）特異性：針對某種抗原產(chǎn)生的抗體或效應細胞，發(fā)生的免疫應答。2）記憶性：初次接觸某種抗原后，免疫系統(tǒng)可長期保留對該抗原的“記憶性”，發(fā)生再次免疫應答。3）識別“自己”和“非己”：個體發(fā)育過中產(chǎn)生。16、藥源性免疫介導疾病有哪幾種類型。免疫抑制（immunosuppression）：藥物對免疫系統(tǒng)的一個或多個組分損害，引起免疫功能的低下。（主要表現(xiàn)：抗感染能力下降，腫瘤易感性上升）超敏反應（hypersensitivity）自身免疫（autoimm

49、unity）17、 免疫毒性的試驗組合一般要包括哪幾個方面. 免疫器官重量和形態(tài)學改變 淋巴組織、骨髓和外周血白細胞的定量改變 免疫細胞效應和調(diào)節(jié)功能的損害 對病原體和移植瘤的易感性增加三、論述題： 1、試述可以通過哪些實驗方法確定一個藥物是否具有致癌性？（1）致癌物篩檢的試驗1）構(gòu)效關(guān)系分析2）致突變試驗3）細胞惡性試驗4）哺乳動物短期致癌試驗小鼠皮膚瘤誘發(fā)試驗、大鼠肝轉(zhuǎn)變灶試驗、小鼠肺腫瘤誘發(fā)試驗、雌性SD大鼠乳腺癌誘發(fā)試驗5）轉(zhuǎn)基因小鼠在致癌作用研究中的應用（2） 哺乳動物長期致癌試驗1）實驗動物（剛斷乳的大鼠和小鼠幼年動物解毒酶及免疫系統(tǒng)尚未完善，對致癌作用比較敏感），動物數(shù)量（每組至

50、少有雌雄各50只動物，希望在出現(xiàn)第一個腫瘤時，每組還有不少于25只動物）2）劑量選擇高劑量：發(fā)生腫瘤的劑量高劑量選擇根據(jù)：最大耐受劑量;最大可行劑量，受試物在飼料中最高含量為5，限制劑量為1500mg(kg體重d)等。中劑量及低劑量：按高劑量的等比級數(shù)下推，如分別為上一個劑量水平的1/2或1/3。最低劑量最好相當于或低于人類實際可能接觸的劑量。同時應設(shè)陰性對照組，必要時可設(shè)陽性對照組： 陽性致癌物最好與受試物的化學結(jié)構(gòu)相近。3）染毒途徑經(jīng)口染毒：將受試物給予實驗動物的常用途徑，一般把受試物摻人飼料或飲水中連續(xù)給予動物 (57天/周)。經(jīng)皮染毒：涂敷受試物的面積一般不少于動物體表總面積的10。必

51、須保證受試物與皮膚良好接觸，并防止動物舔食。每天涂抹一次，每周37次。吸入染毒：每天染毒4小時，每周57天。染毒柜內(nèi)受試物濃度應定期或連續(xù)監(jiān)測，其分布應均勻、恒定。其他注射途徑可根據(jù)需要采用。4） 試驗期限原則上試驗期限要求長期或終生。一般情況下小鼠最少1.5年，大鼠2年；可能時分別延長至2年和2.5年。當最低劑量組或?qū)φ战M存活的動物只有25時，也可以結(jié)束試驗。5） 結(jié)果的觀察、分析和評定1.一般觀察：每天觀察受試動物一次，主要觀察其外表、活動、攝食、體重變化、有無腫瘤出現(xiàn)、腫瘤出現(xiàn)時間及死亡時間情況等。2病理檢查 包括肉眼和組織切片檢查。組織切片檢查應包括已出現(xiàn)腫瘤或可疑腫瘤的器官和肉眼檢查

52、有明顯病變的器官，應注意觀察癌前病變。通過病理檢查確定腫瘤的性質(zhì)和靶器官。3結(jié)果分析 腫瘤發(fā)生率:多發(fā)性：多發(fā)性是指一個動物出現(xiàn)多個腫瘤或一個器官出現(xiàn)多個腫瘤。潛伏期: 染毒組應與對照組作顯著性檢驗。存在劑量反應關(guān)系，并與對照組差異顯著時，為陽性結(jié)果。（3）致癌物的最終確定人類致癌物的確定主要根據(jù)： 流行病學調(diào)查結(jié)果能夠重復； 有劑量反應關(guān)系； 有動物致癌試驗陽性結(jié)果支持。2、藥物致畸敏感期指什么？致畸作用的毒理學特點是什么？致畸作用的毒理學特點(一)器官發(fā)生期的胚胎對致畸物最為敏感 在致畸作用中，對致畸物最敏感的階段是器官發(fā)生期，一般稱為危險期或關(guān)鍵期。在常用試驗動物中，自受精日計算，大鼠器官發(fā)生期約為917天，小鼠器官發(fā)生期為7.516天，家兔為1120天。 (二)劑量與效應關(guān)系較為復雜 1.劑量效應關(guān)系復雜的表現(xiàn)及原因是： 機體在器官形成期間，與具有發(fā)育毒性的化合物接觸，可以出現(xiàn)畸形，但也可引起胚胎致死。當劑量增加時，毒性作用增強，往往胚胎致死作用增強更較明顯，由于胚胎死亡增加，畸胎數(shù)將因而減少。 某種致畸物可以引起一定的畸形，但在同一條件下，給予更高的劑量，并不出現(xiàn)同一類型畸形。可能由于較高劑量往往造成較為嚴重的畸形，較