臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)課復(fù)習(xí)

1、基本儀器1、 毛細(xì)吸管：10l、20l2、 改進(jìn)牛鮑Neubauer計(jì)數(shù)盤：1個(gè)計(jì)數(shù)池3x3x0.1mm=9個(gè)大方格中央1個(gè)大方格1x1x0.1mm=25個(gè)中方格=400個(gè)小方格=1l四角1個(gè)大方格，平分為16個(gè)中方格3、采血管：紫色：EDTA-K2 血常規(guī)檢查 黑色：3.2%枸櫞酸鈉與血比例1:4 血沉檢查血液檢驗(yàn)一、血涂片染色1、 血涂片：玻片不潔角度速度血滴推片邊緣缺口推片邊緣弧形空泡過大：厚過?。罕】欤汉穸搪罕￠L堆積尾部不勻：厚薄相間過大：厚?。罕l樣缺損中央薄兩頭厚尾尖2、 瑞士染色瑞氏染料：伊紅堿、亞甲藍(lán)酸緩沖液：磷酸鹽緩沖液pH6.4-6.8時(shí)間：染料I液：5d左右，0.5-1

2、min 緩沖劑II液：等量或稍多，5-10min2、 末梢采血1、 消毒：75%酒精2、 第一滴血因混有組織液，擦掉不用3、 靜脈采血1、 消毒：30g/L碘酒，75%酒精2、 有抗凝劑或其他添加劑的混勻四、血細(xì)胞計(jì)數(shù)WBC計(jì)數(shù)嗜酸粒計(jì)數(shù)RBC計(jì)數(shù)PLT計(jì)數(shù)稀釋液2%冰乙酸丙酮-伊紅Hayem液或枸櫞酸鈉甲醛鹽水或生理鹽水1%草酸銨稀釋液作用稀釋及破壞成熟RBC，固定WBC稀釋，破壞RBC、其他WBC，使E著色稀釋稀釋，破壞RBC稀釋液量0.38ml0.38ml2ml0.38ml血量20l20l10l20l稀釋倍數(shù)202020020計(jì)數(shù)區(qū)域四角大方格上下兩池四角及中央五個(gè)大方格中央大方格的五個(gè)

3、中方格中央大方格的五個(gè)中方格沉淀時(shí)間2-3min3-5min2-3min10-15min公式N/410x20x106/LN20x106/LN5x10x200x106/LN5x10x20x106/L參考值成人：4-10109/L新生兒：15-20x109/L兒童：15-20x109/L0.05-0.5109/L成年男：4.0-5.5109/L成年女：3.5-5.0109/L新生兒：6.0-7.0109/L100-300109/L校正存在有核紅時(shí)：100/100+有核紅 xN4、 白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)1、 血涂片，瑞士染色2、 體尾交界處，“弓”形檢查3、 比值中桿中葉嗜酸嗜堿淋巴單核比例%1-550-

4、700.5-50-120-403-84、 核左移：桿狀核增多，出現(xiàn)幼稚中性粒 核右移：5葉以上中性粒3%5、 MCV、MCH、MCHC1、 測(cè)定項(xiàng)目：RBC計(jì)數(shù)、Hb測(cè)定、Hct測(cè)定2、 Hb測(cè)定：血紅蛋白儀法試劑預(yù)熱配制參考值文齊液HiCN轉(zhuǎn)換液水或文齊液預(yù)熱30min20lEDTA-K2血+5ml文齊液混勻靜置5min成年男：120-160g/L成年女：110-150g/L新生兒：170-200g/L3、 Hct測(cè)定：溫氏法試劑器材讀數(shù)參考值EDTA-K2血水平離心機(jī)2264g以上，離心30min，溫氏管RBC柱層毫米數(shù)x0.01成年男：0.42-0.49成年女：0.37-0,48新生兒：

5、0.47-0.676、 血沉魏氏測(cè)定方法試劑器材時(shí)間讀數(shù)參考值109mmol/L枸櫞酸鈉抗凝血魏氏血沉管，血沉架1hRBC下降暴露的血漿長度mm成年男：15mm/h成年女：20mm/h七、尿液常規(guī)檢測(cè)1、外觀：顏色淡黃、深黃、淡紅、紅色、乳白、濃茶、咖啡 透明度透明、微渾、渾濁2、 尿蛋白定性磺基水楊酸法加熱乙酸法原理磺酸根陰離子與尿蛋白氨基酸陽離子結(jié)合生成不溶性蛋白鹽沉淀，沉淀程度與尿蛋白量成正比加熱煮沸使蛋白質(zhì)變性，加入乙酸加速蛋白質(zhì)沉淀試劑200g/L磺基水楊酸溶液5%乙酸溶液方法1ml尿液+2d試劑混勻，黑色背景下1min內(nèi)觀察有空白對(duì)照加熱黑觀察5%乙酸2-4d加熱黑觀察結(jié)果肉眼可見

6、微渾云霧狀+顆粒+絮狀+大量絮狀或凝塊+同左方法學(xué)評(píng)論靈明度高，應(yīng)用于干化學(xué)法測(cè)尿蛋白，但假設(shè)尿中存在高濃度尿酸鹽、草酸鹽等干擾因素或混入生殖系統(tǒng)分泌物時(shí)易造成假陽性結(jié)果。對(duì)白蛋白敏感而球蛋白不敏感。操作略復(fù)雜，同樣受生殖道分泌物的干擾成假陽性。對(duì)白蛋白和球蛋白都敏感5、 尿糖檢測(cè)對(duì)象尿中的葡萄糖原理高熱、堿性環(huán)境中尿液中葡萄糖或其他復(fù)原性糖的醛基能將藍(lán)色的硫酸銅復(fù)原為氧化亞銅，出現(xiàn)黃色至磚紅色沉淀試劑班氏試劑改進(jìn)班氏定性試劑方法尿離心取上清2ml試劑煮沸1min觀察試劑是否合格加入0.2ml尿上清混勻煮沸1-2min尿液：班氏=1:10結(jié)果藍(lán)，色未變 藍(lán)中綠無沉淀液綠，黃綠沉淀少量+ 較多偏

7、黃沉淀+液土黃，大量沉淀+ 大量紅沉淀+方法學(xué)評(píng)價(jià)靈敏度較低，易受尿液中其他復(fù)原物質(zhì)的影響而出現(xiàn)假陽性6、 尿酮體環(huán)狀法Lange法原理尿液中乙酰乙酸和丙酮與亞硝基鐵氰化鈉作用，與氨液接觸后生成紫紅色物質(zhì)試劑亞硝基鐵氰化鈉、冰乙酸、25-28%濃氨水方法5ml尿+約250mg亞硝基鐵氰化鈉混勻+0.5ml冰乙酸混勻+2ml濃氨水緩慢沿管壁注入結(jié)果看液面交界處顏色變化：10min無紫環(huán) 10min內(nèi)淺紫紅環(huán)10min漸出現(xiàn)紫環(huán)+ 較快出現(xiàn)紫環(huán)+立刻出現(xiàn)紫環(huán)+或+7、 尿膽紅素Harrison法原理尿中膽紅素被氯化鋇吸附形成膽紅素鋇鹽沉淀，與Fe3+反應(yīng)，被氧化成藍(lán)色的膽青素，綠色膽綠素和黃色膽黃

8、素，出現(xiàn)綠色或黃綠色反應(yīng)試劑酸性三氯化鐵試劑Fouchet試劑、100g/L氯化鋇溶液方法5ml尿+2.5ml氯化鋇混勻，3000rx3-5min，棄上清+2滴Fouchet試劑結(jié)果長時(shí)間不變色 沉淀物漸淺綠+沉淀物綠+ 沉淀物立刻藍(lán)綠+假陽尿中大量藥物如：牛黃、熊膽粉、水楊酸鹽、阿司匹林等假陰Fouchet試劑加入過量8、 尿膽原改進(jìn)Ehrlich法原理酸性溶液中尿膽原的吡咯環(huán)能與對(duì)二甲苯氨基苯甲醛Ehrlich試劑作用后成櫻桃紅色反映，其顏色變化與尿膽原含量成正比試劑Ehrlich試劑方法2ml無膽紅素尿液+0.2mlEhrlich試劑混勻，靜置10min觀察方法白色背景，從試管口垂直從上

9、往下看結(jié)果長時(shí)間不變色 10min后淺紅+10min后櫻桃紅+ 立刻櫻桃紅+假陽尿中含吡啶、酮體等加入戊醇保持紅真陽，變淺綠假陽假陰尿膽原易被氧化為尿膽素所以標(biāo)本應(yīng)新鮮送檢尿中含維生素C、甲醛、烏洛托品等抑制反應(yīng)9、 尿有形成分參考范圍：細(xì)胞： RBC：0-3/HPF WBC：0-5/HPF 扁平上皮細(xì)胞：少許女可為多見/HPF 移行上皮細(xì)胞：偶見/HPF管型： 透明管型：0-1/HPF結(jié)晶： 尿酸鹽、碳酸鹽、磷酸鹽：少許/HPL8、 糞便常規(guī)1、 外觀： 顏色：黃褐色，黃色，金黃色，鮮紅色，暗紅色，柏油樣，灰白色，綠色 形狀：軟，硬，糊狀，粘液狀，胨狀，泡沫樣，水樣，血樣，米泔樣，柏油樣等

10、寄生蟲：查見與否2、 鏡檢細(xì)胞，脂肪球，寄生蟲等3、 便隱血免疫法單克隆抗體膠體金法原理：雙抗體夾心免疫層析單抗抗人血紅蛋白-人血紅蛋白-多抗抗人血紅蛋白特點(diǎn)：靈敏性特別高九、生殖系統(tǒng)分泌物檢查1、精液精子計(jì)數(shù)試劑標(biāo)本配制計(jì)數(shù)計(jì)算精子稀釋液：碳酸氫鈉破壞精液粘稠性甲醛固定精子，定量稀釋1h以上已經(jīng)液化的精液0.38ml稀釋液+20l精液稀釋20倍同RBC計(jì)數(shù)Nx5x10x20x106/L=Nx109/L2、 陰道分泌物清潔度：第104頁線索細(xì)胞加德納菌陰道毛滴蟲真菌染色：革蘭染色10、 腦脊液，漿膜腔積液1、外觀：顏色，透明度，凝固性有無凝塊，薄膜2、細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)直接計(jì)數(shù)，也可以用紅細(xì)胞稀釋液稀釋后計(jì)數(shù)10個(gè)大方格3、白細(xì)胞計(jì)數(shù)冰乙酸破壞RBC4、腦脊液蛋白質(zhì)定性潘氏試驗(yàn)Pendy test：原理苯酚與腦脊液中的蛋白質(zhì)球蛋白為主結(jié)合形成不溶性蛋白鹽沉淀，沉淀量與蛋白量成正比試劑5%苯酚溶液方法2-3ml苯酚+垂直滴入1-2d腦脊液+立即黑背景觀察結(jié)果清晰透明 微白霧狀灰白云霧+ 白色渾濁+白色絮狀或沉淀+ 立即白色沉淀+假陽苯酚試劑不純，器材不干凈5、 漿膜腔積液蛋白質(zhì)定性原理黏蛋白是酸性糖蛋白，在稀乙酸中可凝結(jié)出現(xiàn)白色沉淀試劑冰乙酸方法100ml水+2-3d冰乙酸混勻+黑色背景直接垂直滴加2-3滴漿膜腔積液假陰冰乙酸過量County continuation recor