腫瘤的過繼性細胞免疫治療及單克隆抗體與腫瘤分子靶向治療

1、腫瘤的過繼性細胞免疫治療腫瘤的過繼性細胞免疫治療學(xué)習(xí)內(nèi)容與要求學(xué)習(xí)內(nèi)容與要求 掌握腫瘤的過繼性細胞免疫治療的定義及原理。 熟悉LAK、TIL、CD3AK、CIK、CTL 細胞的制備方法及研究進展。概概 述述 腫瘤的過繼性細胞免疫治療(Adoptive cellular immunotherapy，ACI或AIT)是指向腫瘤患者轉(zhuǎn)輸具有抗腫瘤活性的免疫細胞(特異性的和相對特異性的)直接殺傷腫瘤或激發(fā)機體免疫反應(yīng)殺傷腫瘤細胞，達到治療腫瘤的目的。 簡要歷史回顧簡要歷史回顧 20世紀60年代：發(fā)現(xiàn)細胞免疫引起組織器官移植排斥啟發(fā)人們應(yīng)用過繼性細胞免疫治療腫瘤。 20世紀80年代：85年，Rosenb

2、erg報道LAK/IL-2治療晚期惡性腫瘤具有療效。86年，報道TIL。 1991年，斯坦福大學(xué)的 Schmidt Wolf等報道了 CIK細胞 。一）淋巴因子激活的殺傷細胞一）淋巴因子激活的殺傷細胞 (Lymphokine activated killer cells, LAK)病人外周淋巴細胞病人外周淋巴細胞（體外）（體外）IL-2激活激活回輸回輸病人病人LAK治療方法優(yōu)點 只對腫瘤細胞產(chǎn)生細胞毒性； 基本無毒副作用； 不依賴荷瘤者免疫功能； 可與其他療法聯(lián)合使用； 無免疫抑制作用。 LAK細胞殺傷腫瘤細胞的作用機制 LAK細胞的異質(zhì)性 LAK細胞表面存在多種與腫瘤識別相關(guān)的特異性分子。

3、LAK殺傷腫瘤細胞不受MHC限制LAK細胞殺傷腫瘤細胞的作用機制 效靶細胞結(jié)合后，通過分泌細胞毒顆粒，在Ca2+存在時，釋放其中的穿孔素、絲氨酸酯酶、TNF樣分子等殺傷介質(zhì)，直接殺傷靶細胞。 通過LAK細胞表面的殺傷分子(如m-LT)直接殺傷靶細胞。 通過分泌其他細胞因子間接殺傷靶細胞。 同種異體LAK細胞 (Allo-LAK) Allo-LAK細胞的有效性 Allo-LAK細胞的安全性 LAK細胞分布特點和臨床療效一致，即對肺、肝、腎等器官腫瘤療效較好，而對其他器官的腫瘤療效不明顯。 LAK細胞體內(nèi)回輸后組織器官分布LAKLAK細胞的制備細胞的制備 LAK細胞的來源 : 患者自體外周血、67

4、個月齡的胎兒胸腺和脾臟細胞、同種異體外周血、臍帶血。 細胞因子對LAK的誘導(dǎo) IL-2/IL-15/IL-7（二）腫瘤浸潤性淋巴細胞腫瘤浸潤性淋巴細胞(tumor infiltrating lymphocyte, TIL)1 1）腫瘤浸潤淋巴細胞（）腫瘤浸潤淋巴細胞（TILTIL）激活激活病人病人Tumor分離分離淋巴淋巴細胞細胞IL-2回輸回輸TIL細胞的特征 TIL 細胞的異質(zhì)性 CD3、CD4、CD8 T細胞 TIL的作用機理 誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡機制 ：TIL分泌細胞因子誘導(dǎo)調(diào)亡；釋放穿孔素引起凋亡。 影響影響TILTIL擴增和轉(zhuǎn)化的因素擴增和轉(zhuǎn)化的因素 影響因素 作用 抗原抗原 輻射滅活

5、的自身腫瘤抗原 刺激TIL生長 高水平表達HLA-1抗原的腫瘤細胞 誘導(dǎo)TIL中CD4CTL細胞產(chǎn)生 缺乏HLA-1抗原的腫瘤細胞 誘導(dǎo)TIL中CD4細胞產(chǎn)生細胞因子細胞因子 低濃度IL-2(10-20 U/ml) 誘導(dǎo)對自身腫瘤細胞的特異性殺傷 IL-2+IL-4 促進TIL細胞的增殖 GM-CSF+IL-2 促進CTL細胞的增殖 IL-6 促進腎癌來源的TIL增殖和特異性與非 特異性的CTL的產(chǎn)生 IL-7 促進TIL的增殖 GM-CSF+IL-2 擴增TIL和提高TIL的殺傷活性抑制因子抑制因子 IL-10+TGF- 抑制TIL生長和殺傷活性 前列腺素 抑制TIL的轉(zhuǎn)化細胞毒藥物對TIL

6、的影響 化療藥物對TIL毒性大于對腫瘤細胞的殺傷性，因而在應(yīng)用TIL過繼免疫治療時不宜同時使用化療藥物. TILTIL細胞的制備方法細胞的制備方法 TIL來源：手術(shù)切除或活檢的瘤體組織；癌性胸水、腹水中淋巴細胞；轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)。 TIL 體外激活：(1)白介素系統(tǒng) ； (2) TNF-與IL-2的協(xié)同作用；(3) TIL與自身瘤細胞、自身淋巴細胞共同培養(yǎng)； (4) 淋巴因子基因轉(zhuǎn)導(dǎo)TIL ；(5) 雙功能抗體導(dǎo)向TIL 。 TIL的臨床應(yīng)用及展望 TIL細胞的臨床應(yīng)用受到許多因素制約 發(fā)展方向：增強TIL細胞增殖力以及特異性殺傷腫瘤細胞活性；與其它細胞因子聯(lián)合治療，提高療效；改變TIL細胞的輸注途

7、徑，縮短距離，使TIL細胞能更有效地達到并聚集瘤體處；提高T細胞分泌Th1型細胞因子的能力，抑制分泌Th2型細胞因子?？箍笴D3 McAb激活的殺傷細胞激活的殺傷細胞(CD3AK) CD3AK細胞是指用特定的抗CD3 McAb激發(fā)免疫活性細胞的增殖并誘導(dǎo)相關(guān)細胞因子的表達和分泌，從而產(chǎn)生的可有效攻擊腫瘤的殺傷細胞，故稱之為抗CD3 McAb激活的殺傷細胞(anti-CD3 McAb activated killer cells, CD3AK)。 CD3AKCD3AK細胞的免疫學(xué)特征細胞的免疫學(xué)特征 CD3AK細胞中含有高比例的CD3細胞和CD56或CD57細胞。 通過自體輔佐細胞(單核或巨噬細

8、胞)提呈處理過的抗原作用于TCR可激活T細胞。作用于TCR-CD3復(fù)合物的抗CD3 McAb可模擬這種效應(yīng)。 CD3AKCD3AK細胞制備細胞制備 人外周血 單個核細胞(淋巴細胞) 加入CD3 McAb 再加入低劑量的IL-2CD3AK細胞治療腫瘤的優(yōu)點 CD3AK細胞選擇性地殺傷腫瘤細胞 CD3AK細胞具有更為廣譜的殺傷腫瘤作用 CD3AK細胞增殖能力大大優(yōu)于LAK細胞 CD3AK細胞的增殖和維持可以不依賴或少依賴外源的IL-2 多種細胞因子誘導(dǎo)的殺傷細胞多種細胞因子誘導(dǎo)的殺傷細胞 (cytokines induced killers, CIK)(cytokines induced kill

9、ers, CIK) 將人外周血或骨髓單個核細胞在體外用多種細胞因子與CD3 McAb共同培養(yǎng)一段時間后獲得的殺傷細胞，即細胞因子誘導(dǎo)的殺傷細胞 (cytokines-induced killercells,CIK細胞)CIKCIK細胞的制備細胞的制備分離獲取外周血單個核細胞分離獲取外周血單個核細胞 誘導(dǎo)活化誘導(dǎo)活化(IL-2,Anti-CD 3McAb,IFN-,PHA)高效擴增高效擴增（IL-2, Anti-CD3McAb,IFN-,PHA）外周血外周血收集收集CIK/TIL，全，全身身/局部回輸局部回輸細胞毒性細胞毒性T T淋巴細胞淋巴細胞(cytotoxic T (cytotoxic T

10、 lymphocyte CTL)lymphocyte CTL) T淋巴細胞通過TCR-CD3復(fù)合物、MHC分子、抗原肽及協(xié)同刺激分子共同刺激，增強T淋巴細胞增殖及效應(yīng)。 CTLCTL細胞的制備細胞的制備 分離腫瘤細胞；調(diào)變腫瘤細胞：用直接導(dǎo)入方法或逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)移方法向腫瘤細胞導(dǎo)入B7基因，并檢測腫瘤細胞表達B7分子的情況；誘導(dǎo)CTL：用調(diào)變修飾后的腫瘤細胞與效應(yīng)細胞共同培養(yǎng)，誘導(dǎo)高活性的CTL；分離CTL用于臨床治療。 過繼性免疫療法存在的問題過繼性免疫療法存在的問題由于腫瘤細胞的不均一性及效應(yīng)細胞的異質(zhì)性造成由于腫瘤細胞的不均一性及效應(yīng)細胞的異質(zhì)性造成療效的不確定性療效的不確定性; ;

11、體外大量擴增過繼免疫細胞技術(shù)有待開發(fā)；體外大量擴增過繼免疫細胞技術(shù)有待開發(fā)；輸注的細胞向腫瘤組織的聚集性弱輸注的細胞向腫瘤組織的聚集性弱; ;體內(nèi)過繼免疫機制的進一步明確；體內(nèi)過繼免疫機制的進一步明確；與其它腫瘤治療方法的有機整合需要進一步完善；與其它腫瘤治療方法的有機整合需要進一步完善；缺乏統(tǒng)一的能指示臨床轉(zhuǎn)歸的的免疫檢測指標；缺乏統(tǒng)一的能指示臨床轉(zhuǎn)歸的的免疫檢測指標；單克隆抗體與腫瘤分子靶向治療單克隆抗體與腫瘤分子靶向治療概概 述述 腫瘤分子靶向治療：利用腫瘤組織或細胞所具有的特異性(或相對特異的)結(jié)構(gòu)分子作為靶點，使用某些能與這些靶分子特異結(jié)合的抗體、配體等達到直接治療或?qū)蛑委熌康牡囊?/p>

12、大類治療方法。 分子靶向治療的靶點分子靶向治療的靶點 細胞受體 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細胞周期 血管生成單克隆抗體在腫瘤分子靶向治療中的地位單克隆抗體在腫瘤分子靶向治療中的地位 腫瘤抗體靶向治療的發(fā)展歷史腫瘤抗體靶向治療的發(fā)展歷史 腫瘤單克隆抗體靶向治療的作用機制腫瘤單克隆抗體靶向治療的作用機制腫瘤抗體靶向治療的發(fā)展歷史腫瘤抗體靶向治療的發(fā)展歷史 鼠源性多克隆抗血清是最早被用于治療腫鼠源性多克隆抗血清是最早被用于治療腫瘤的抗體分子瘤的抗體分子 19751975年利用雜交瘤技術(shù)成功地制備年利用雜交瘤技術(shù)成功地制備McAbMcAb，大大推動了腫瘤生物靶向治療的進展大大推動了腫瘤生物靶向治療的進展 近十年來已研

13、究制備出人鼠嵌合抗體、人近十年來已研究制備出人鼠嵌合抗體、人源化抗體和完全人源抗體源化抗體和完全人源抗體抗體的結(jié)構(gòu)和功能抗體作為腫瘤的靶向治療得益于抗體兩個關(guān)鍵性技術(shù)的突破： 人鼠嵌合抗體、人源化抗體和完全人源抗人鼠嵌合抗體、人源化抗體和完全人源抗體技術(shù)及制備技術(shù)的成熟，基本上可以克體技術(shù)及制備技術(shù)的成熟，基本上可以克服鼠源性抗體用于人體產(chǎn)生抗抗體的問題服鼠源性抗體用于人體產(chǎn)生抗抗體的問題 抗體庫的建立和篩選以及多價重組抗體制抗體庫的建立和篩選以及多價重組抗體制備技術(shù)的發(fā)展，使人們能夠直接獲得特異備技術(shù)的發(fā)展，使人們能夠直接獲得特異性強和親和力高的單克隆抗體性強和親和力高的單克隆抗體。嵌合抗體

14、嵌合抗體鼠源鼠源V區(qū)區(qū)人源人源C區(qū)區(qū)小鼠雜交瘤細胞小鼠雜交瘤細胞人人B細胞細胞V區(qū)基因區(qū)基因C區(qū)基因區(qū)基因鼠源鼠源V區(qū)區(qū)鼠源鼠源C區(qū)區(qū) 人源化抗體人源化抗體小鼠雜交瘤細胞小鼠雜交瘤細胞人人B細胞細胞CDR區(qū)基因區(qū)基因V支架區(qū)支架區(qū)C區(qū)基因區(qū)基因完全人源化抗體完全人源化抗體小鼠小鼠B細胞細胞敲除小鼠敲除小鼠Ig基因基因人人Ig基基因因Ag骨髓瘤細胞骨髓瘤細胞雜交瘤細胞雜交瘤細胞 由于抗體技術(shù)的發(fā)展，至今全球已報道的由于抗體技術(shù)的發(fā)展，至今全球已報道的抗體有多萬種，其中基因工程抗體有抗體有多萬種，其中基因工程抗體有多種，人源化抗體多種。目前國際多種，人源化抗體多種。目前國際上已有多種抗體用于診斷和

15、治療，上已有多種抗體用于診斷和治療，至今已批準種抗體上市，其中種是用至今已批準種抗體上市，其中種是用于治療腫瘤的靶向抗體。于治療腫瘤的靶向抗體。 單克隆抗體靶向治療單克隆抗體靶向治療 20032003年治療用單抗的銷售總額已超過年治療用單抗的銷售總額已超過5252億美元億美元; ; 20062006年預(yù)計年預(yù)計50605060個治療性單抗上市個治療性單抗上市; ; 20102010年預(yù)計單抗銷售額年預(yù)計單抗銷售額200200億美元億美元; ; 美國已占全球單抗市場美國已占全球單抗市場90%90%一支獨秀一支獨秀; ; 完全人源化單抗現(xiàn)有多個處于臨床前階段完全人源化單抗現(xiàn)有多個處于臨床前階段。腫

16、瘤單克隆抗體靶向治療的作用機制腫瘤單克隆抗體靶向治療的作用機制 直接作用直接作用 ADCC作用：(antibody-dependent cell-antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCCmediated cytotoxicity,ADCC) CDC作用（complement-dependent cytoxicity,CDC） 通過通過McAbMcAb的主動免疫的主動免疫 2、ADCC CDC作用：抗體的Fc段與補體成分C1q結(jié)合，通過經(jīng)典途徑激活補體，導(dǎo)致腫瘤細胞溶解死亡。間接作用：間接作用：抗體結(jié)合同位素、化療藥物或細胞毒抗體結(jié)合同

17、位素、化療藥物或細胞毒素，通過攜帶抗腫瘤制劑，直接抵達素，通過攜帶抗腫瘤制劑，直接抵達腫瘤局部，提高抗腫瘤制劑的療效。腫瘤局部，提高抗腫瘤制劑的療效?？谷税准毎只乖目贵w治療抗人白細胞分化抗原的抗體治療 白細胞分化抗原（CD分子）是白細胞在正常分化成熟不同譜系和不同階段以及活化過程中，出現(xiàn)或消失的細胞表面標記。 多種抗人白細胞分化抗原已用于腫瘤的治療靶點?？箍笴D20抗體抗體 85%-90%的淋巴瘤屬于B細胞來源。 CD20存在于超過90% B淋巴細胞。 造血干細胞、漿細胞、淋巴祖細胞以及其它組織均無表達，人體血清中亦無游離CD20的存在。CD20不會輕易從細胞膜上脫落。 抗抗CD20CD

18、20抗體（美羅華（抗體（美羅華（RituximabRituximab，RituxanRituxan），第一個通過FDA批準應(yīng)用于臨床的人鼠嵌合型單抗。 作用機制作用機制：激活補體介導(dǎo)的溶解及參與抗體依賴細胞介導(dǎo)的細胞毒作用，有效殺滅CD20陽性的B淋巴瘤細胞；增加化療藥物的細胞毒作用并誘導(dǎo)凋亡。同位素結(jié)合性抗體同位素結(jié)合性抗體 同位素免疫結(jié)合可用于抗體攜帶同位素到同位素免疫結(jié)合可用于抗體攜帶同位素到達腫瘤細胞，產(chǎn)生殺腫瘤的局部治療效果；達腫瘤細胞，產(chǎn)生殺腫瘤的局部治療效果；還可作為臨床檢測腫瘤的一種敏感的工具。還可作為臨床檢測腫瘤的一種敏感的工具。 ZevalinZevalin（澤娃靈）釔（澤

19、娃靈）釔（90Y90Y）同位素）同位素標記的標記的鼠源性鼠源性抗抗CD20CD20抗體與癌變的抗體與癌變的B B淋巴淋巴細胞表面的細胞表面的CD-20CD-20抗原結(jié)合，殺死癌細胞?？乖Y(jié)合，殺死癌細胞?？箍笴D33結(jié)合性抗體結(jié)合性抗體 CD33可以在90%的AML原始細胞上被檢出。幾乎在所有的正常早期髓系、紅系前體細胞上均有表達，但在正常造血干細胞或非造血細胞上并不表達。 沒有證據(jù)表明與CD33抗體結(jié)合可以引起凋亡 。 單抗能特異性捕捉腫瘤抗原，用抗體攜帶化療藥物，可提高化療藥物在腫瘤的局部劑量，減少化療藥物的全身毒性反應(yīng)。 2000年FDA批準用于治療急性復(fù)發(fā)性髓性白血病的Mylotarg

20、（麥羅塔）是由抗CD33單抗與抗腫瘤抗生素calicheamicin（卡奇霉素）構(gòu)成的偶聯(lián)物，也是第一個獲批準用于臨床治療的以化療藥物為“彈頭”的抗體藥物。 腫瘤放射免疫靶向治療腫瘤放射免疫靶向治療 利用特異性抗體作載體，與能釋放或射線的放射性核素耦合，注入體內(nèi)與腫瘤細胞特異性結(jié)合，實現(xiàn)對瘤體的內(nèi)照射治療。 一般用于治療白血病及淋巴瘤。鼠源性抗體作載體。阻斷信號傳導(dǎo)通路的靶向治療阻斷信號傳導(dǎo)通路的靶向治療 許多腫瘤中存在EGFR的高表達或異常表達。EGFR與腫瘤細胞的增殖、血管生成、腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移及細胞凋亡的抑制有關(guān)。 腫瘤細胞特別是EGFR+的腫瘤細胞的生長明顯依賴于EGFR信號傳導(dǎo)，其EG

21、FR表達水平可比正常細胞高幾千倍?？箍笶GFREGFR的單抗的單抗（ Erbitux） 作用機制作用機制：特異性與表皮生長因子受體（EGFR,HER1,c-ErbB-1）結(jié)合，競爭性抑制表皮生長因子與該受體的結(jié)合，阻止相應(yīng)酪氨酸激酶磷酸化后的信號傳導(dǎo)過程，從而抑制細胞生長，誘導(dǎo)凋亡。 抑制基質(zhì)金屬蛋白酶和血管內(nèi)皮生長因子的活性。 臨床療效臨床療效：適用轉(zhuǎn)移性大腸癌。HER2具有以下重要特點：體外試驗中HER2+細胞表現(xiàn)致瘤特性；HER2擴增過度表達是腫瘤發(fā)生過程中的早期事件；在各期乳腺癌中，HER2狀態(tài)長時間保持穩(wěn)定；HER2定位于細胞膜，成為易于攻擊的潛在治療靶點 抗抗HER-2HER-2的

22、單抗的單抗（ Herceptin ） 作用機制作用機制：與HER-2受體結(jié)合，抑制細胞生長信號傳遞通路；加速HER-2受體降解，使HER-2受體表達下調(diào)。 對腫瘤細胞株可介導(dǎo)抗體依的細胞毒作用，殺傷靶細胞；抑制血管內(nèi)皮生長因子的生成，阻斷腫瘤內(nèi)血管組織的生長。 臨床療效臨床療效：適用轉(zhuǎn)移性乳腺癌。酪氨酸激酶抑制劑 Glivec (STI 571，Gleevec，格列衛(wèi)）是瑞士諾華公司上市的一種抗白血病藥物。通過抑制生長因子受體酪氨酸激酶信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)而抑制腫瘤細胞生長，已成功用于慢性髓細胞白血病、胃腸基質(zhì)瘤(GIST)、的治療，顯示出良好前景。 ZD1839 (IressaZD1839 (Ire

23、ssa，易瑞沙，易瑞沙) ) 易瑞沙易瑞沙是一種低分子量的合成性苯胺喹唑啉，可逆轉(zhuǎn)的、選擇性EGFR酪氨酸激酶抑制劑，口服有效?？烧T導(dǎo)細胞周期停滯、促進凋亡、抗血管生成。主要用于治療非小細胞性肺癌。采用單藥易瑞沙易瑞沙治療經(jīng)含鉑類化療失敗的晚期NSCLC的臨床期試驗結(jié)果顯示：女性和未吸煙者有更好的療效。 抑制腫瘤血管生成的靶向治療抑制腫瘤血管生成的靶向治療 血管生成對大多數(shù)實體瘤的生長擴張是至關(guān)重要的,一些特殊的細胞產(chǎn)物和因子可以促進血管的生成,抑制血管生成是控制腫瘤生長的一種重要的靶向治療方法。 抗血管生成藥物是由各種不同作用機制組成的一大類藥物,可以破壞或抑制腫瘤的新生血管生成阻止腫瘤的生

24、長和轉(zhuǎn)移腫瘤血管生成理論腫瘤血管生成理論 1971年, Dr.Folkman等提出可通過阻斷腫瘤血管的生成來抑制腫瘤的生長,防止腫瘤的轉(zhuǎn)移?；谀[瘤血管生成機理,抑制腫瘤血管生成的策略包括: 利用小分子藥物和內(nèi)源性血管生成抑制因子直接抑制血管內(nèi)皮細胞增殖!遷移,抑制細胞外基質(zhì)形成,誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細胞凋亡; 利用中和抗體、可溶性受體、受體拮抗劑阻斷血管生成因子傳遞; 利用反義核酸或生物因子抑制血管生成促進因子表達。腫瘤生長與血管生成機制腫瘤生長與血管生成機制(Folkman,J.Ann. Surg., 1972) 第一步：第一步：直徑大于直徑大于12 mm3的腫瘤的腫瘤釋放釋放VEGF及招募及招募

25、 bFGF因子啟動腫因子啟動腫瘤血管生成步驟。瘤血管生成步驟。 第二步：第二步：VEGF及及bFGF刺激毛細血管刺激毛細血管內(nèi)皮細胞增殖及內(nèi)皮細胞遷移腫瘤，形內(nèi)皮細胞增殖及內(nèi)皮細胞遷移腫瘤，形成血管供給腫瘤所需營養(yǎng)物質(zhì)。成血管供給腫瘤所需營養(yǎng)物質(zhì)。 第三步：血管內(nèi)皮抑制素靶向毛細管內(nèi)第三步：血管內(nèi)皮抑制素靶向毛細管內(nèi)皮細胞，抑制正在形成的腫瘤血管。皮細胞，抑制正在形成的腫瘤血管。 第四步：在內(nèi)皮細胞表面可以識第四步：在內(nèi)皮細胞表面可以識別血管內(nèi)皮抑制素的特異性受體誘別血管內(nèi)皮抑制素的特異性受體誘導(dǎo)毛細內(nèi)皮細胞死亡。導(dǎo)毛細內(nèi)皮細胞死亡。 第五步：攜帶營養(yǎng)的新形成的血管第五步：攜帶營養(yǎng)的新形成的血

26、管被破壞。被破壞。 第六步：由于缺少營養(yǎng)供給，腫瘤細胞第六步：由于缺少營養(yǎng)供給，腫瘤細胞死亡。死亡。 圖圖 Folkman教授的理論及血管內(nèi)皮抑制素（教授的理論及血管內(nèi)皮抑制素（Endostatin）的作用機理）的作用機理腫腫 瘤瘤 血血 管管 生生 成成腫瘤腫瘤4. 腫瘤新生血管形成腫瘤新生血管形成1. 分泌血管形成因子分泌血管形成因子3. 內(nèi)皮細胞增生遷移內(nèi)皮細胞增生遷移2. 對細胞外基質(zhì)產(chǎn)生對細胞外基質(zhì)產(chǎn)生蛋白降解作用蛋白降解作用毛細血管出芽毛細血管出芽 臨床研究較多的有內(nèi)皮抑素（Endostatin）、血管抑素（Angiostatin）、基底膜金屬蛋白酶（MMP）抑制劑和其他抗VEGF

27、的藥物如抗血管內(nèi)皮生長因子的單克隆抗體Avastin。美國美國FDAFDA在在20042004年已經(jīng)批準用于結(jié)直腸癌的年已經(jīng)批準用于結(jié)直腸癌的一線治療。一線治療。 Avastin Avastin 與與LucentisLucentis 腫瘤單克隆抗體靶向治療的缺點腫瘤單克隆抗體靶向治療的缺點 一是實體腫瘤的細胞被致密的基質(zhì)包裹，抗體一是實體腫瘤的細胞被致密的基質(zhì)包裹，抗體難以穿透這一屏障；大多數(shù)實體腫瘤都存在淋巴難以穿透這一屏障；大多數(shù)實體腫瘤都存在淋巴回流障礙，導(dǎo)致間質(zhì)內(nèi)壓力升高，阻止了抗體進回流障礙，導(dǎo)致間質(zhì)內(nèi)壓力升高，阻止了抗體進入腫瘤實質(zhì)。而小部分進入實體腫瘤內(nèi)部的抗體，入腫瘤實質(zhì)。而小

28、部分進入實體腫瘤內(nèi)部的抗體，首先遇到的是血管周圍的腫瘤細胞而被結(jié)合，使首先遇到的是血管周圍的腫瘤細胞而被結(jié)合，使得抗體無法到達距離血管較遠的腫瘤細胞。因此得抗體無法到達距離血管較遠的腫瘤細胞。因此目前應(yīng)用抗體治療大體積的實體腫瘤的療效仍不目前應(yīng)用抗體治療大體積的實體腫瘤的療效仍不理想。理想。 二是由于治療腫瘤的抗體需要量極多，要求產(chǎn)品二是由于治療腫瘤的抗體需要量極多，要求產(chǎn)品純度極高，目前的生物工程生產(chǎn)比較困難，因此純度極高，目前的生物工程生產(chǎn)比較困難，因此其產(chǎn)品生產(chǎn)成本及價格均非常昂貴，據(jù)其產(chǎn)品生產(chǎn)成本及價格均非常昂貴，據(jù)GenentechGenentech的報告，使用的報告，使用AvastinAvastin治療治療1010個月將花費個月將花費4 44 4萬美萬美元，這使它幾乎成為目前市場上最昂貴的抗腫瘤元，這使它幾乎成為目前市場上最昂貴的抗腫瘤藥物。藥物。 三是腫瘤細胞的異質(zhì)性，目前的抗體治療是針對三是腫瘤細胞的異質(zhì)性，目前的抗體治療是針對腫瘤細胞某個特異性受體，而腫