第七章_三萜及其苷類-2

1、第七章三萜及其苷類Li Shoujian第一節(jié) 概述College of Chemistry SCU真第七章三萜及其苷類第一節(jié) 概述 三萜（Triterpenoids）？是由30個(gè)碳原子組成的萜類化合 三萜類化合物廣泛存在于植物界中，少數(shù)存在于動(dòng) 物 體（如羊毛脂、鯊魚肝臟）海洋生物 （如海參、軟珊瑚）中，甚至菌 （如靈芝）中。 它們?cè)谏矬w內(nèi)以游離型（苷元）和糖苷的形式存在。第一節(jié)概述 三萜皂苷（ Triterpenoids Saponins）與糖結(jié)合的三萜苷。與糖結(jié)合的三萜苷。 顯著的生理活性: 抗炎，抗腫瘤，抗菌和抗病毒，降低膽固醇，殺軟體動(dòng)物，抗生育等活性。使三萜皂苷在三萜化合物中占踞

2、最重要的地位。主要存在形式：四環(huán)三萜 和 五環(huán)三萜。 三萜的種類很多，三萜皂苷所占比例并不多，但因顯著的生理活性，卻是這類化合物中最重要的。第一節(jié)概述何謂皂苷？皂苷苷元為三萜或螺旋甾烷類化合物的一類糖苷 通常難以結(jié)晶，呈白色粉末，易吸水，極性很大 用力振蕩可產(chǎn)生持久性的泡沫 大多數(shù)皂苷的水溶液能破壞紅細(xì)胞產(chǎn)生溶血作用，對(duì)蛙、魚等一些冷血?jiǎng)游镉袠O強(qiáng)的毒性第一節(jié)概述一基本骨架由 30 個(gè)碳原子 6個(gè)異戊二烯單位連接組成。 三萜類化合物生物合成的研究表明，三萜是由鯊烯（squalene）經(jīng)過(guò)不同的途徑環(huán)合而成。 鯊烯是由倍半萜金合歡醇的焦磷酸酯尾尾縮合而成。二分類1. 無(wú)環(huán)三萜（如鯊烯）圖7-1-1

3、圖7-1-1 無(wú)環(huán)三萜 鯊烯H3CCH3CH3CH3H3CH3CCH3CH3鯊烯也稱角鯊烯，取自深海CH3H3C鯊魚的肝臟中，主要功能是補(bǔ)給氧氣, 活化細(xì)胞，可迅速提高機(jī)體耐缺氧的能力，還能幫H3CCH3鯊烯（無(wú)環(huán)三萜）CH3CH3助軟化皮膚，使之光澤潤(rùn)滑，減少皺紋。多用于肝病、糖尿病、腎臟病、高膽固醇、高血壓、胃潰瘍?nèi)菀灼诩敖?jīng)常工作體力透支者，改善體質(zhì)，增強(qiáng)低抗力。第一節(jié)概述二. 分類COOH2. 二環(huán)三萜（如榔色酸）H3CCH2CH3H2CCH3圖7-1-2COOHCH3三萜類化合物H2CCH3榔 色 酸（二環(huán)三萜）示例 23. 三環(huán)三萜（如龍涎香醇）龍涎香具有清靈而溫雅的動(dòng)物香氣,既有

4、麝香氣息,又微帶壤香，特殊甜CH3HOHH2CCH3HCH3CH3氣和極其持久的留香底韻。龍誕香有很長(zhǎng)的留香時(shí)間,比麝香長(zhǎng)20-30倍.可達(dá)數(shù)月之久。H3CCH3龍涎香醇（三環(huán)三萜）第一節(jié)概述二. 分類圖7-1-3 三萜類化合物示例 3-aH3CHCH34. 四環(huán)三萜 （羊毛甾烷型）CH3HHCH3CH3HCH3羊毛甾烷常見(jiàn)的中藥100多種四環(huán)三萜化合物H3CHCH3黃芪皂苷（四環(huán)三萜）茯苓酸172129a. 齊墩果烷型192021齊墩果酸別名土當(dāng)歸酸,Oleanol,Caryophyllin. 白色針晶, 不溶于水,可溶于乙醇,乙醚,1125 9101226818131427 1529第一節(jié)

5、 概述 二. 分類圖7-1-3 三萜類化合物示例 3-c30b. 烏蘇烷型 主要結(jié)構(gòu)25262728積雪草23含有積雪草苷24272324第一節(jié) 概述 二. 分類圖7-1-3 三萜類化合物示例 3-d30c. 羽扇豆烷型2912201921222526141817162810常見(jiàn)的含羽扇豆烷型的天然藥物：羽扇豆、白頭翁等 結(jié)構(gòu)特點(diǎn)R=COOH 白樺酸R=CHO白樺醛R=CH2OH 白樺醇R=CH3 羽扇豆醇第一節(jié)概述三三萜皂苷的構(gòu)造1組成組成苷元 + 糖 or 糖醛酸三萜皂糖主要有：葡萄糖（glucose, glc）、半乳糖（）、半乳糖（galactose, gal）、）、木糖（xylose，

6、xyl）、鼠李糖（rhamnose, rha）、）、阿拉伯糖（arabinose, ara）等）等糖醛酸主要有 葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸等第一節(jié) 概述 三三萜皂苷的構(gòu)造2結(jié)合特點(diǎn)：結(jié)合特點(diǎn)：1）糖基部分）糖基部分？a. 多數(shù)先連接成糖鏈（寡糖或低聚糖），再與苷元結(jié)合 ；b. 少數(shù)以單糖與苷元結(jié)合注：寡糖 二至十個(gè)單糖單位通過(guò)糖苷鍵連接起形成直鏈或支鏈的糖。HO第一節(jié)概述三三萜皂苷的構(gòu)造2結(jié)合特點(diǎn)2）結(jié)合方式）結(jié)合方式 寡糖（或單糖）- O -苷元（多為苷元（多為HO-C3）氧苷鍵皂苷例：COOHOHOOOH齊墩果酸 2-乙酰氨基-去氧-D-葡萄糖苷NHAc圖7-2 三萜皂苷的氧鍵苷示第一節(jié) 概述

7、三三萜皂苷的構(gòu)造2結(jié)合特點(diǎn) 寡糖（或單糖）- OOC - 苷元（與皂苷元中的-COOH連接）酯苷鍵酯皂苷，例：OCOHOOHO O CH2CHOHCHOHCH2OHOHOHCHOHCH2OH3glc-fuc-O柴胡皂苷 u R=glc2RCH2OH柴胡皂苷 v R=H圖7-3 三萜皂苷的酯鍵苷示例第一節(jié)概述三三萜皂苷的構(gòu)造2結(jié)合特點(diǎn) 以結(jié)合的糖鏈數(shù)又分為：?jiǎn)翁擎溤碥针p糖鏈皂苷（近年發(fā)現(xiàn)三糖鏈皂苷，但很少）例 圖7-4-1，圖7-4-2第一節(jié)概述三三萜皂苷的構(gòu)造2結(jié)合特點(diǎn)圖7-4-1 雙（糖鏈）三萜皂苷示例xyl46ara(p) glc OOH12CH320HCH3CH3glc OOH12CH3

8、20HCH3CH33CH3CH3CH33CH3CH3CH32glc glc OH3CHCH3HOH3CCH3 O glc 2 Rha20（S）- protopanaxadiol Ra1（20（S）- 原人參二醇 Ra1）20（S）- protopanaxatriol Re（20（S）- 原人參三醇 Re）圖7-4-2獨(dú)特的土貝母苷甲結(jié)構(gòu)H3CCH3HOH3CCH3COOHOOOCH3HOOHOH3CO H3COHOH OOHOHOOHOHOOCH3O OOO OOH土貝母甲OH（環(huán)狀三萜雙皂苷）OHOH第一節(jié)概述三三萜皂苷的構(gòu)造3次皂苷（次級(jí)苷）原生苷 + 酶 / 酸 / 堿 等 ？a. 將單

9、糖鏈皂苷上連接的寡糖鏈打斷（縮短），或b. 使雙糖鏈皂苷分解為單糖鏈皂苷次級(jí)苷（次皂苷）注：尤其是酯苷鍵易為酶分解。 第二節(jié) 理化性質(zhì)第二節(jié) 理化性質(zhì)一皂苷的呈色反應(yīng)三萜類化合物在無(wú)水條件下，與強(qiáng)酸 如硫酸、磷酸、高氯酸等中強(qiáng)酸 如三氯乙酸等Lewis酸酸 如氯化鋁、氯化鋅、氯化銻等作用會(huì)發(fā)生顏色變化或熒光。第二節(jié) 理化性質(zhì) 一皂苷的呈色反應(yīng)1. 醋酐濃硫酸反應(yīng)（Liebermann-Burchard 反應(yīng)）樣品溶于醋酐 加醋酐-濃硫酸（20 1）數(shù)滴 ，則三萜皂苷黃紅紫蘭甾體皂苷黃紅紫綠 最常用的方法，可用于區(qū)別兩種皂苷。第二節(jié) 理化性質(zhì)一皂苷的呈色反應(yīng)2. 三氯乙酸反應(yīng)樣品液 d 于濾紙上

10、滴 / 噴三氯乙酸：三萜皂苷 100紅轉(zhuǎn)紫紅轉(zhuǎn)紫甾體皂苷 60 紅轉(zhuǎn)紫 可用于紙色層顯色3. 氯仿濃硫酸反應(yīng)試樣氯仿液 + 濃H2SO4氯仿層 紅或蘭硫酸層 綠色熒光第二節(jié) 理化性質(zhì)一皂苷的呈色反應(yīng)說(shuō)明：i）所有反應(yīng)均適用于三萜皂苷和甾體皂苷，但前者因脂）所有反應(yīng)均適用于三萜皂苷和甾體皂苷，但前者因脂環(huán)上甲基取代多，顯色較后者慢。ii）上三反應(yīng)并非對(duì)所有皂苷都能顯色，而與）上三反應(yīng)并非對(duì)所有皂苷都能顯色，而與脂環(huán)上的雙鍵和羥基的多少有關(guān)：a. 有或能生成共軛雙鍵體系的顯色快b. 只有孤立雙鍵的顯色慢c. 完全飽和且羥基少或無(wú)的不顯色第二節(jié) 理化性質(zhì)二皂苷的特征1性狀性狀多為無(wú)定形粉末，味苦且辛

11、辣，其粉末對(duì)生物多為無(wú)定形粉末，味苦且辛辣，其粉末對(duì)生物粘膜有強(qiáng)制刺激。2溶解性溶解性a. 在含水丁醇 / 戊醇中溶解度較大，常用于提?。籦. 有助溶性可促進(jìn)其它成分在水中溶解。第二節(jié) 理化性質(zhì)二皂苷的特征3表面活性可降低水溶液表面張力，多數(shù)皂苷振搖后產(chǎn)生持久性泡沫，可用作清潔或乳化劑。1）皂苷的表面活性與分子內(nèi)親水部分（多糖部分）和親脂部分（苷元部分）的比例有關(guān)：a. 兩者相當(dāng)，達(dá)平衡陽(yáng)性b. 親水部分 親脂部分 or 反之親脂部分 親水部分 弱陽(yáng)性或陰性。第二節(jié) 理化性質(zhì)二皂苷的特征3表面活性2）發(fā)泡實(shí)驗(yàn)試驗(yàn) 試樣粉 + 水至沸，10min 過(guò)濾濾液強(qiáng)烈搖振起泡 觀察 ：a. 泡很快消失蛋

12、白質(zhì)，粘液質(zhì)b. 持續(xù)15 min 皂苷（三萜/甾體皂苷）第二節(jié) 理化性質(zhì)二皂苷的特征3表面活性H泡沫高度泡沫高度試驗(yàn) T持續(xù)時(shí)間持續(xù)時(shí)間5ml0.1M HCl 液5ml0.1M NaOH 液滴加樣品水提液強(qiáng) 搖H(T)堿泡H(T)酸泡H(T)堿泡H(T)酸泡含三萜皂苷含甾體皂苷 大多甾體皂苷呈中性，在堿液中可形成穩(wěn)定的泡沫。三萜皂苷多呈酸性。第二節(jié) 理化性質(zhì)二皂苷的特征4溶血作用1）定義）定義: 使紅細(xì)胞、（紅血球）破裂的作用。2）機(jī)理）機(jī)理（多數(shù)）皂苷 + 紅細(xì)胞壁上的膽甾醇分子復(fù)合物阻滯破壞血紅細(xì)胞的正常滲透胞內(nèi)滲透壓增加細(xì)胞崩裂溶血作用。3）溶血指數(shù)）溶血指數(shù).定義皂苷對(duì)同一動(dòng)物來(lái)源的

13、紅血球稀懸浮液，在同一的等滲透條件、緩沖條件及恒溫下使試液中紅血球完全溶解所需的最低濃度。第二節(jié) 理化性質(zhì)二皂苷的特征4溶血作用. 應(yīng)用a. 比較各類皂苷溶血作用的強(qiáng)弱不同，可用溶血指數(shù)表示。例如，（1g 稀釋倍數(shù)）薯蕷皂苷的溶血指數(shù)為：1 400，000甘草皂苷的溶血指數(shù)為：1 4000洋菝葜皂苷的溶血指數(shù)為：1 125，000第二節(jié) 理化性質(zhì)二皂苷的特征4溶血作用. 應(yīng)用b. 常用作皂苷定量的粗略指標(biāo)。即，從某一藥物粗提液及其提純?cè)碥盏娜苎笖?shù)，可推算出樣品中所含皂苷的粗略含量。例如，由藥物 A 粗提液測(cè)得的溶血指數(shù)為1M（或1 1M）,而其提純?cè)碥眨?biāo)準(zhǔn)皂苷）的溶血指數(shù)為100M（或1

14、100M）,則藥物A中皂苷的含量約為1 %。第二節(jié) 理化性質(zhì)二皂苷的特征4溶血作用4）溶血試驗(yàn)在濾紙上滴加 1% 的皂苷水溶液1滴，干燥后，噴霧血球試液，數(shù)分鐘后，能觀察到紅色的背底中出現(xiàn)白色或蛋黃色斑點(diǎn)（皂苷原點(diǎn)處）。說(shuō)明皂苷破壞了紅血球使其失色。 血球試液的制備：取羊或兔血一份，用玻棒攪和，除去凝集的血蛋白，加pH 7.4 的磷酸鹽緩沖液稀釋而得。第二節(jié) 理化性質(zhì)二皂苷的特征4溶血作用5）毒性皂苷水溶液a. 用于靜脈或肌肉注射均有較大毒性，b. 在高等動(dòng)物的消化道中不吸收，故口服無(wú)溶血毒性，c. 魚類對(duì)皂苷很敏感，0.01%濃度的皂苷即可致其中毒，可能由于麻痹鰓等呼吸器官的緣故。第二節(jié) 理

15、化性質(zhì)二皂苷的特征4溶血作用說(shuō)明：i）并非所有的皂苷都有溶血作用）并非所有的皂苷都有溶血作用例：人參總皂苷本無(wú)溶血的現(xiàn)象，但從其中分離出的以人參三醇為苷元的人參皂苷則有顯著的溶血作用，而以人參二醇為苷元的人參皂苷則有抗溶血作用。ii）溶血作用與皂苷分子結(jié)構(gòu)密切相關(guān)）溶血作用與皂苷分子結(jié)構(gòu)密切相關(guān)a. 有無(wú)溶血作用與皂苷元有關(guān)：例：有溶血作用的皂苷完全降解成不溶于水的苷元后，若結(jié)合上非糖物質(zhì)溶于水后，同樣有溶血作用。第二節(jié) 理化性質(zhì)二皂苷的特征4溶血作用b. 溶血作用的強(qiáng)弱與糖基有關(guān)：?jiǎn)翁擎溤碥?作用明顯雙糖鏈皂苷 作用較弱/無(wú)，尤以中性三萜皂苷為甚例：某些雙糖鏈皂苷無(wú)溶血作用但經(jīng)酶解為單皂苷后

16、，可有溶血作用。c. 苷元3 位有-OH，16位有-OH 或C=O時(shí)，溶血指數(shù)最高。第二節(jié) 理化性質(zhì)二皂苷的特征4溶血作用）樹脂、脂肪酸、胺類、揮發(fā)油等也有溶血作用問(wèn)題：如何與皂苷類區(qū)別？ 判斷方法：a）進(jìn)一步純化，再檢查）進(jìn)一步純化，再檢查;b）膽甾醇沉淀法。圖）膽甾醇沉淀法。圖7-5圖7-5 膽甾醇沉淀法粗提液膽甾醇沉淀，過(guò)濾濾液溶血試驗(yàn)有溶血活性沉淀（分子復(fù)合物）乙醚，回流乙醚溶液不溶物樹脂、脂肪酸揮發(fā)油等（溶解膽甾醇）溶血試驗(yàn)有溶血活性皂苷第二節(jié) 理化性質(zhì)二皂苷的特征5. 重金屬鹽沉淀作用酸性皂苷（通常指三萜皂苷）+ (NH4)2SO4 / Pb(AC)2等中性鹽中性皂苷（通常指甾體皂

17、苷）+ Ba(OH)2 / Pb (OH)Ac等等堿性鹽第二節(jié) 理化性質(zhì)二皂苷的特征6. 苷鍵的裂解1）目的：）目的：了解皂苷化學(xué)結(jié)構(gòu)：a. 苷元結(jié)構(gòu)b. 糖的組成c. 苷元 - 糖基間以及多糖鏈中糖 - 糖間連接方式第二節(jié) 理化性質(zhì)二皂苷的特征 6. 苷鍵的裂解2）方法和原則）方法和原則（1）裂解方式：a. 徹底裂解 生成苷元和糖b. 分步裂解 部分糖先被切斷次級(jí)苷 + 糖裂解苷元 + 糖第二節(jié) 理化性質(zhì)二皂苷的特征 6. 苷鍵的裂解對(duì)于含兩個(gè)以上糖殘基的皂苷， 各個(gè)苷鍵對(duì)酸的穩(wěn)定性不同， 有可能通過(guò)改變酸的濃度或水解反應(yīng)的溫度和時(shí)間得到不同的次級(jí)苷。 比較原皂苷和各次級(jí)苷中所含的糖，可以推

18、測(cè)出各個(gè)糖的連接次序。第二節(jié) 理化性質(zhì) 二皂苷的特征 6. 苷鍵的裂解 2）方法和原則例：從威靈仙根中分得的皂苷 CP9（1），用 0.05M H2SO4在75% EtOH中回流中回流1h，得到四個(gè)依次失去一個(gè)糖殘基，得到四個(gè)依次失去一個(gè)糖殘基的次級(jí)苷（2）-（5），糖部分的結(jié)構(gòu)也由此而確定。見(jiàn) 圖7-6（2）方法分類化學(xué)方法 酸/堿催化水解、過(guò)碘酸鈉氧化裂解生物方法 酶解，微生物作用物理方法 光分解CH3圖7-6 皂苷CP9（1）中糖基部分結(jié)構(gòu)的分步裂解測(cè)定CH3CH3H3CCH3COOHCH3OH3Cglc(1-5) glc(1-4) rib(1-3) rha(1-2) ara54321威

19、靈仙根皂苷CP9（1）第二節(jié) 理化性質(zhì) 二皂苷的特征 6. 苷鍵的裂解 2）方法和原則（3）原則無(wú)論采取什么方式、方法裂解的最后結(jié)果都應(yīng)得到真正的皂苷元否則將使研究復(fù)雜化獲得到錯(cuò)誤結(jié)論。例：以前使用劇烈的酸水解試驗(yàn)條件，認(rèn)為具重要生理活性的人參皂苷的原皂苷元是人參二醇和人參三醇，到上世紀(jì)七十年代才經(jīng)溫和酸水解等裂解試驗(yàn)證實(shí)原皂苷元應(yīng)是20（S）-原人參二醇和20（S）-原人參三醇。見(jiàn) 圖7-4-1、7-7R圖7-7 人參皂苷的結(jié)構(gòu)研究酸水解（糖基）ROOHCH320CH3HOCH3H+CH3H3COCH3CH312CH3CH3H+R H3CCH3R H3CRH3CCH3CH3RRH3CCH3R

20、H3CCH320(S)-protopanaxadiol20(S)-protopanaxatriolH3COHH+CH3H3COCH3R H3CCH3H3CR H3CH3CCH320(R)-protopanaxadiolR H3CCH320(R)-protopanaxatriolpanaxadiolpanaxatriol第二節(jié) 理化性質(zhì) 二皂苷的特征 6. 苷鍵的裂解 2）方法和原則（4）推薦方法： 糖醛酸與苷元之間苷鍵的選擇性裂解 某些皂苷中常含有葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸，他們與苷元之間的苷鍵比其它類型的苷鍵對(duì)酸更穩(wěn)定， 故需要更劇烈的條件才能裂解。此時(shí)，苷元更可能發(fā)生變化。 北川勛等人發(fā)現(xiàn)使用

21、光分解、四醋酸鉛氧化、醋酐-吡啶和吡啶來(lái)選擇性的裂解，而不影響分子中的其它部位。 簡(jiǎn)介如 表7-1 :第二節(jié) 理化性質(zhì) 二皂苷的特征 6. 苷鍵的裂解 2）方法和原則表7-1 光分解、四醋酸鉛氧化和醋酐-吡啶裂解法方法應(yīng)用光分解法Pb2（Ac）4 法Ac2O / Py 法苷元直接和葡萄糖醛酸、阿拉伯糖等連接的單/多糖苷葡 萄 糖 醛 酸 皂 苷多聚糖的葡萄糖醛酸皂苷 土壤微生物淘汰培養(yǎng)法篩選菌種皂苷大量培養(yǎng)分離純化原始苷元優(yōu)點(diǎn)：應(yīng)用范圍廣，條件不苛刻，方法簡(jiǎn)便。第二節(jié) 理化性質(zhì) 二皂苷的特征 6. 苷鍵的裂解 2）方法和原則 化學(xué)修飾-水解法即對(duì)水解時(shí)易變異的部位先保護(hù)后再水解。 過(guò)碘酸裂解法

22、（Smith裂解法）對(duì)苷元結(jié)構(gòu)易改變的苷以及C-苷的水解特適宜，不能用于苷元上有1，2 二元醇的苷。常見(jiàn)中藥人參、柴胡、遠(yuǎn)志等的皂苷，有時(shí)用多種水解方法結(jié)果都不同，只有用此法才獲得了保持原來(lái)構(gòu)型的苷元。 酯苷鍵的水解Li I - 二甲基吡啶法 第三節(jié) 提取與分離第三節(jié) 提取與分離一三萜化合物的提取與分離1提取提取 主要有四類方法：1）乙）乙/甲醇提取甲醇提取提取物直接分離提取物直接分離2）醇提液）醇提液依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯分步提依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯分步提（三萜成分在氯仿部位）一三萜化合物的提取與分離3）粗乙醚提）粗乙醚提制作衍生物（甲基化、乙?；龋┲谱餮苌铮谆?、乙?；?/p>

23、） 分離（對(duì)苷元易變異的適用）4）裂解皂苷）裂解皂苷產(chǎn)物用氯仿萃取產(chǎn)物用氯仿萃取再分離。再分離。注意：裂解時(shí)苷元異構(gòu)化。2分離分離 常用硅膠柱層析，反復(fù)進(jìn)行二三萜皂苷的提取分離1提取通法圖7-8植物試樣甲醇/乙醇醇提液減壓蒸餾此外一些酸殘?jiān)栽碥湛捎脡A渣（另處理）水溶水溶物過(guò)濾水溶液（1%NaOH）溶酸沉淀法。石油醚、苯、乙醚等（脫脂）水相丁醇有機(jī)相（油脂、色素等親脂成分）水相丁醇層（糖等親水性強(qiáng)的雜質(zhì)）減壓蒸干粗制總皂苷2分離和精制1）乙?；品ù衷碥崭煞鄞佐仍噭┮阴；碥找颐衙讶芤核此匆海ㄓH水性雜質(zhì)）醚溶液濃縮殘?jiān)掖細(xì)堅(jiān)既芤海壢ィ﹫D7-9三萜皂苷的乙?；苹钚蕴棵撋駻l2

24、O3/硅膠柱層析乙?；碥諉误wBa（OH）2 水解通CO2 除過(guò)量鋇純?cè)碥斩圃碥盏奶崛》蛛x 2分離和精制 此外也可用其它方法如a. 皂苷結(jié)構(gòu)有 COOH ：可用 CH2N2 甲基化制成甲酯分離。b. 極性較大的皂苷：如人參皂苷用苯甲酰氯處理苯甲酰衍生物硅膠LS-310柱，以HPLC正相層析，正己烷-氯仿-乙腈（15：3：2）洗脫分離。二三萜皂苷的提取分離 2分離和精制2）層析法）層析法其它方法難得單體皂苷（因皂苷親水性大，與雜質(zhì)分離較困難），可用層析法。 分配層析由于皂苷極性較大，用分配層析比吸附層析效果好：支持劑硅膠固定相親水性的皂苷試液流動(dòng)相親脂性的溶劑如 : CHCl3-MeOH-H

25、2O 或CH2Cl2-MeOH-H2O 或 EtOAc-EtOH-H2O等溶劑系統(tǒng)進(jìn)行梯度洗脫。二三萜皂苷的提取分離 2分離和精制 2）層析法例1：用硅膠分配層析法從遠(yuǎn)志根中分離遠(yuǎn)志皂苷。固定相 粗提物的 3% 草酸水溶液；流動(dòng)相 CH2Cl2 MeOH - H2O（26 14 3）分離得到結(jié)構(gòu)相近的四種皂苷單體 遠(yuǎn)志皂苷A、B、C、D。二三萜皂苷的提取分離 2分離和精制 2）層析法例2：近年來(lái)，在分離人參皂苷時(shí)用反相硅膠層析、液滴逆流層析、大孔樹脂等新的分離方法取得了重大進(jìn)展，成功地分離出了大量含量極微的皂苷成分，使人參皂苷的總數(shù)達(dá)到了29 個(gè)。典型例：北川勛等大量采用反相硅膠層析從紅參中分

26、離出15種人參皂苷，其中，有3對(duì)C-20差向異構(gòu)體無(wú)法直接分離，是制成乙酰衍生物后分開的。 流程見(jiàn)圖7-10Fr.3圖7-10Fr.11）ODS反相硅膠層析從紅參中分離人參皂苷SiO2CHCl3 - MeOH =10：1CHCl3-MeOH-H2O =可溶部分 10:3:1，7:3:1（下層）（78g）Fr.2MeOH-H2O=1:1-7:32）離心液相層析CHCl3 -MeOH=10:11）ODSMeOH-H2O=1:1-7:32) Ac2O,人參皂苷 Rh2（0.05g）20R-人參皂苷 Rh1（0.31g）H2O3) PTLC,CH2Cl2-AcOEt = 10:14) MeONa-MeOH1)MeOH1) ODS20S-人參皂苷 Rg3（0.72g）紅參2)BuOU/H2OFr.4MeOH-H2O=7:3-2:1人參皂苷 Rg3（0.66g）（5 Kg）2) Ac2O人參皂苷 Rg2（1.1