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文檔簡介

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上 中國藥科大學(xué) 生物制藥工藝學(xué) 期末試卷(B 卷) 一、填空題(每空 0.5 分,共 30 分)1多糖構(gòu)效關(guān)系研究還不夠完善,但目前的研究已表明,多糖的活性與其高級結(jié)構(gòu)、分支度及其側(cè)鏈、分子量以及多糖中的取代基有關(guān)。 2、利用產(chǎn)氨短桿菌發(fā)酵法生產(chǎn)肌苷酸,第一步是用誘變育種的方法篩選 缺乏 SAMP 合成酶的腺嘌呤缺陷型菌株,在發(fā)酵培養(yǎng)基中提供亞適量的 腺嘌呤;另外,改變細胞膜對5 -IMP 的透性,選育Mn2+ 不敏感的變異株。 3、溶質(zhì)通過色譜柱時造成的峰加寬效應(yīng)包括分子擴散 、渦流擴散 、 流動相中 傳質(zhì)阻力 、 固定相中傳質(zhì)阻力。 4、在采用多緩沖陰離子交換劑作

2、固定相的離子交換聚焦色譜過程中,當(dāng)柱中某位點之 pH 值下降到蛋白質(zhì)組分PI(等電點) 值以下時,它因帶正電荷而下移,如果柱中有兩種蛋白組分,pI 值較大(高)者會超過另一組分,移動至柱下部 pH 較 高的位點進行聚焦(交換)。 5、親和層析洗脫方法有非專一性洗脫,特殊洗脫,專一性洗脫。 6、晶體的質(zhì)量主要是指晶體的大小、形狀和純度,其中影響晶體大小的主要因素有 過飽和度,溫度,攪拌速度,晶種 。 7、常用的吸附劑有活性炭、 硅膠和白陶土等。 8、在萃取過程中被提取的溶液稱為料液,其中欲提取的物質(zhì)稱溶質(zhì),而用以進行萃取的溶劑稱為萃取劑。達到萃取平衡后,大部分溶質(zhì)轉(zhuǎn)移到萃取劑中,這種含有溶 質(zhì)的

3、萃取劑溶液稱為萃取液,而被萃取出溶質(zhì)以后的料液稱為萃余液。 9、從細胞培養(yǎng)液中提取有效組分時,往往需要除去細胞及蛋白質(zhì),常用的除去細胞及蛋白質(zhì)的方法有加入凝聚劑,加入絮凝劑,變性沉淀,等電點沉淀等。 10、影響絮凝效果的主要因素有絮凝劑的分子量,絮凝劑的用量,溶液pH值,攪拌速度和時間。 11、色譜介質(zhì)按分離機理分為反相色譜、正相色譜 、離子交換色譜 、凝膠過濾色譜,親和色譜。 12、基因治療中常用的非病毒載體有裸露DNA 、基因縫合線法、脂質(zhì)體載體 和 哺乳動物人工染色體。 13、四環(huán)類抗生素是一類以四并苯(萘并萘)為母核的一族抗生素;鏈霉素是氨基糖苷類抗生素;紅霉素是分子內(nèi)含有 14元環(huán)大

4、環(huán)內(nèi)酯類抗生素; 寫出青霉素的化學(xué)結(jié)構(gòu)通式 。 14、請列舉應(yīng)用基因藥物來治療腫瘤的幾種方案:導(dǎo)入抑癌基因或細胞因子、自殺基因、抑制血管生成、反義藥物 、導(dǎo)入 MHCI 類抗原基因、 導(dǎo)入 MDRI基因等方法。二、名詞解釋(每小題 3 分,共 30 分)1、酶促半合成人胰島素: 以豬胰島素為原料,利用胰蛋白酶的轉(zhuǎn)酰胺作用(1 分)將豬胰島素B 鏈之 30 位丙 氨酸轉(zhuǎn)化(1 分)為蘇氨酸即得人胰島素(1 分)。 2、親和膜: 結(jié)合親和技術(shù)和膜分離技術(shù)的優(yōu)點,利用親和配基修飾的微濾膜(2 分)為親和吸 附介質(zhì),純化目標(biāo)蛋白質(zhì)(1 分)。 3、全排阻: 當(dāng)具有一定分子量分布的高聚物溶液從柱中通過時

5、,較大的分子完全不能進入 顆粒內(nèi)部,只能從顆粒間隙流過,稱“全排阻” (2分)。其流經(jīng)體積最小,等于外水 體積V0 (1分)。 4、類分離: 將分子量極為懸殊的兩類物質(zhì)分開(2 分),如蛋白質(zhì)與鹽類(1 分),稱作類分 離或組分離.選擇凝膠時,應(yīng)使樣品中大分子組的分子量大于其排阻限,而小分子組 的分子量小于滲入限。大分子的分配系數(shù)K =0,小分子的K =1。 5、 基因藥物: 基因藥物 genetic medicine,核酸類藥物,以遺傳物質(zhì)DNA、RNA 為治療物質(zhì)基礎(chǔ)的藥物(2 分),如核酸疫苗、反義藥物(1 分)。6、容量因子: 在色譜過程中,溶質(zhì)在固定相中的總摩爾數(shù)與流動相中總摩爾數(shù)之

6、比(2 分),容量因子越大該組分的保留能力越強,越難洗脫。(1 分) 7、等密度離心法: 在離心力作用下,不同密度的多組分顆粒在梯度介質(zhì)中“向上”或“向下”移動,(1 分)當(dāng)移動至其密度與介質(zhì)密度相等的位置便不再移動,形成靜止區(qū)帶,即 “達到”離心平衡,各組分根據(jù)密度不同而分離。(2 分) 8、超濾技術(shù): 超過濾(簡稱超濾)是一項分子級膜分離手段,(1 分)以具有一定孔徑的膜為分離介質(zhì),(1 分)以壓力差為推動力將不同分子量的物質(zhì)進行選擇性分離的方法。(1分) 9、超臨界流體萃取: 超臨界流體(supercritical fluid ,簡稱 SCF)萃取技術(shù),又稱壓力流體萃取、超臨界氣體萃取、

7、臨界溶劑萃取等,是利用處于臨界壓力和臨界溫度以上(2分)的一些溶劑流體所具有特異增加物質(zhì)溶解能力來進行分離純化的技術(shù)。(1 分) 10、生物制品: 生物制品(biological product )是應(yīng)用普通的或以基因工程、細胞工程、蛋白質(zhì)工程、發(fā)酵工程等生物技術(shù)獲得的微生物、細胞及各種動物和人源的組織和液體等生物材料制備(2 分),用于人類疾病預(yù)防、治療和診斷的藥品(1 分)。三、單項選擇題(每小題 1 分,共 20 分)(從 A、B、C、D 四個選項中選擇一個正確答案填入空格中)1、下面表達系統(tǒng)為原核表達系統(tǒng)的是( A ) A. E.coli B.畢赤酵母 C.昆蟲細胞 D.動物細胞 、2

8、、下列藥物哪些是基因藥物( B ) A.基因工程藥物 B.遺傳物質(zhì) DNA 為物質(zhì)基礎(chǔ)制造的藥物 C.天然生物藥物 D.半合成生物藥物 3、肽合成中,由于順序合成的需要,必須對暫不參加反應(yīng)的基團加以保護。在多肽的固相合成中,常用的氨保護基是( A ) A.Fmoc B.Bz C.Tos D.甲醇 4、蛋白質(zhì)類物質(zhì)分離純化往往是多步驟的,其前期處理手段多采用下列哪類的方法。( B ) A.分辨率高 B.負載量大 C.操作簡便 D.價廉 5、當(dāng)向蛋白質(zhì)純?nèi)芤褐屑尤胫行喳}時,蛋白質(zhì)溶解度 ( C ) A增大 B. 減小 C. 先增大,后減小 D. 先減小,后增大 6、鹽析常數(shù) Ks 是生物大分子的特

9、征常數(shù),它與下列哪種因素關(guān)系密切。 ( B ) A 鹽濃度 B. 鹽種類 C. 溶質(zhì)濃度 D 介質(zhì) pH 7、網(wǎng)格高聚物吸附劑吸附的弱酸性物質(zhì),一般用下列哪種溶液洗脫。 ( D ) A.水 B.高鹽 C.低pH D. 高pH 8、用鈉型陽離子交換樹脂處理氨基酸時,吸附量很低,這是因為 ( C ) A選錯樹脂 B. 離子競爭 C. 偶極排斥 D. 解離低 9、凝膠層析中,有時小分子溶質(zhì)的 Kd<1,其原因是 ( A) A.水合作用 B.凝膠吸附 C.柱床過長 D.流速過低 10、“類似物容易吸附類似物”的原則, 一般非極性吸附劑適宜于從下列何種溶 劑中吸附非極性物質(zhì)。 ( A ) A.極性

10、溶劑 B.非極性溶劑 C.三氯甲烷 D.溶劑 11、親和層析的洗脫過程中,在流動相中減去配基的洗脫方法稱作 ( D ) A. 陰性洗脫 B. 劇烈洗脫 C. 正洗脫 D. 負洗脫 12、在萃取液用量相同的條件下,下列哪種萃取方式的理論收率最高 ( C ) A.單級萃取 B.三級錯流萃取 C.三級逆流萃取 D.二級逆流萃取 13、超聲波法破碎細胞的主要原理是 ( B ) A. 研磨作用 B. 空穴的形成 C.脫水 D. 機械碰撞 14、在離心分離過程中,若離心機的轉(zhuǎn)速為 4000 轉(zhuǎn)/分種,離心半徑為 10 厘米,則相 對離心力為( A ) A. 1789(g) B. 4000(g) C. 80

11、00(g) D. 2000(g) 15、在超濾過程中,主要的推動力是 ( C ) A. 濃度差 B. 電勢差 C. 壓力 D. 重力 16、環(huán)孢菌素 A 是微生物產(chǎn)生的 ( B ) A.HMG-CoA還原酶抑制劑 B.免疫抑制劑 C.氨基糖苷類抗生素 D.大環(huán)內(nèi)酯類抗生素 17、選用110 樹脂分離純化鏈霉素,交換時 pH 應(yīng)為 ( C ) A.24 B.46 C.68 D.121418、用大腸桿菌作宿主表達重組 DNA 藥物,缺點是 ( C ) A.蛋白質(zhì)表達量低 B.生長慢 C.產(chǎn)物無糖基修飾 D.難以獲得工程菌 19、克拉維酸是微生物產(chǎn)生的 ( B ) A. HMG-CoA 還原酶抑制劑

12、 B.-內(nèi)酰氨酶抑制劑 C.氨基糖苷類抗生素 D.大環(huán)內(nèi)酯類抗生素 20、如果用大腸桿菌作為宿主細胞,蛋白表達部位為周質(zhì),下面哪種細胞破碎的方 法最佳? ( C ) A.勻漿法 B.超聲波法 C. 滲透壓休克法 D. 凍融法 四、論述題(共 20 分)1、由下圖,利用給出的兩種離子交換劑(E1,E2)分離 3 種蛋白質(zhì)(P1、P2、P3),用箭頭流程圖表示(并指出E1,E2的類型)。(6 分)答案:A: 去血紅蛋白(1 分) B: 乙醇(1 分) C: 氯仿(1 分) D:丙酮(1 分 E:熱變性(1 分)F:60-70°C(1分)G洗脫(1 分)3、青霉素為弱酸性抗生素,在水溶液中穩(wěn)定性較差,且其穩(wěn)定性隨溫度上升而下降, 請寫出將該抗生素從發(fā)酵液中分離制備的方法,寫出選擇依據(jù)、主要工藝及操作要點:(7 分) 答: 青霉素游離酸易溶于醇類、醚類和酯類,但在水中溶解度很??;青霉素鉀鹽則

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