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文檔簡介

1、 緒緒 論論一、臨床檢驗根底的現(xiàn)狀和特點一、臨床檢驗根底的現(xiàn)狀和特點古代古代:感官檢查如:尿液中世紀(jì)感官檢查如:尿液中世紀(jì)17世紀(jì)世紀(jì):荷蘭荷蘭Leeuwenhoek發(fā)明顯微鏡發(fā)明顯微鏡 2020世紀(jì)末以來世紀(jì)末以來: :自然科學(xué)根底學(xué)科與醫(yī)學(xué)自然科學(xué)根底學(xué)科與醫(yī)學(xué)根底學(xué)科結(jié)合電腦化、自動化、微量根底學(xué)科結(jié)合電腦化、自動化、微量化化2121世紀(jì):現(xiàn)代信息網(wǎng)絡(luò)技術(shù)遠(yuǎn)程診斷世紀(jì):現(xiàn)代信息網(wǎng)絡(luò)技術(shù)遠(yuǎn)程診斷與系統(tǒng)生物工程包括分子生物學(xué)、與系統(tǒng)生物工程包括分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)結(jié)合。臨床醫(yī)學(xué)結(jié)合。最常用的臨床檢驗,借助先進的檢測技最常用的臨床檢驗,借助先進的檢測技術(shù),對來自離體的血液、尿液、糞便以術(shù),對來

2、自離體的血液、尿液、糞便以及分泌物和排泄物等標(biāo)本進展理學(xué)、化及分泌物和排泄物等標(biāo)本進展理學(xué)、化學(xué)、病原學(xué)和顯微鏡形狀學(xué)的檢查,以學(xué)、病原學(xué)和顯微鏡形狀學(xué)的檢查,以簡便、快速的檢測結(jié)果,根本滿足臨床簡便、快速的檢測結(jié)果,根本滿足臨床醫(yī)學(xué)檢驗篩檢疾病的需求。醫(yī)學(xué)檢驗篩檢疾病的需求。臨床檢驗現(xiàn)代特征:臨床檢驗現(xiàn)代特征:1 1從手工從手工 自動化、電腦化檢測自動化、電腦化檢測 2床邊檢測床邊檢測point of care test, POCT 3試劑批量、配套、專業(yè)和多樣化試劑批量、配套、專業(yè)和多樣化 4. 4. 檢驗方法規(guī)范化檢驗方法規(guī)范化如:如:19661966年,成立國際血液學(xué)規(guī)范化委員年,成立

3、國際血液學(xué)規(guī)范化委員會會ICSHICSH,源自,源自19631963年歐洲血液學(xué)協(xié)會年歐洲血液學(xué)協(xié)會規(guī)范化委員會規(guī)范化委員會5 5全面質(zhì)量保證全面質(zhì)量保證 人員和物質(zhì)人員和物質(zhì) 檢驗分析前:檢驗分析前:標(biāo)本的采集、儲存和轉(zhuǎn)運過程尤為重要。標(biāo)本的采集、儲存和轉(zhuǎn)運過程尤為重要?,F(xiàn)以為,管理好這兩個環(huán)節(jié),可降低現(xiàn)以為,管理好這兩個環(huán)節(jié),可降低70%70%的檢驗過失率。的檢驗過失率。(1)(1)標(biāo)本采集原那么堅持離體標(biāo)本質(zhì)和量標(biāo)本采集原那么堅持離體標(biāo)本質(zhì)和量的完好性的完好性2 2防止非疾病要素的干擾防止非疾病要素的干擾生理變異:生理變異:第一類:不能控制的生理變異年齡和性第一類:不能控制的生理變異年齡

4、和性別對檢驗影響為長期效應(yīng)別對檢驗影響為長期效應(yīng)第二類:相對能控制的生理變異,如食物、第二類:相對能控制的生理變異,如食物、藥物、心情、形狀、體位和標(biāo)本采集時間藥物、心情、形狀、體位和標(biāo)本采集時間等,對檢驗的影響多為短期效應(yīng)。等,對檢驗的影響多為短期效應(yīng)。1 1飲食要素:剛進食、禁食、飲酒、吸煙飲食要素:剛進食、禁食、飲酒、吸煙2 2藥物要素:方式、濃度藥物要素:方式、濃度 二、臨床檢驗根底的運用目的二、臨床檢驗根底的運用目的 1為疾病診斷和鑒別診斷提供實驗室為疾病診斷和鑒別診斷提供實驗室檢測客觀根據(jù)檢測客觀根據(jù) 2.為疾病療效監(jiān)測和預(yù)后判別提供動態(tài)為疾病療效監(jiān)測和預(yù)后判別提供動態(tài)變化根據(jù)變化

5、根據(jù) 3.為預(yù)防疾病提供檢測根據(jù)為預(yù)防疾病提供檢測根據(jù) 4.為科學(xué)研討提供醫(yī)學(xué)檢驗根本數(shù)據(jù)、為科學(xué)研討提供醫(yī)學(xué)檢驗根本數(shù)據(jù)、根本檢驗方法和操作技藝。根本檢驗方法和操作技藝。三、學(xué)好臨床根底檢驗的根本要求三、學(xué)好臨床根底檢驗的根本要求1 掌握檢驗根底實際掌握檢驗根底實際2掌握檢驗實驗技藝掌握檢驗實驗技藝3熟習(xí)檢驗方法學(xué)評價熟習(xí)檢驗方法學(xué)評價4了解檢驗工程參考值了解檢驗工程參考值 紅細(xì)胞計數(shù)紅細(xì)胞計數(shù)(RBC)參考值參考值 男性:男性:(4.05.5)1012/ L 女性:女性:(3.55.0 )1012/ L 5 5熟習(xí)檢驗工程臨床意義熟習(xí)檢驗工程臨床意義尿蛋白定性臨床意義尿蛋白定性臨床意義 陽

6、性有生理陽性有生理性,也有病理性。糖尿病患者尿性,也有病理性。糖尿病患者尿中繼續(xù)出現(xiàn)尿蛋白陽性,需除外中繼續(xù)出現(xiàn)尿蛋白陽性,需除外泌尿系感染、原發(fā)性腎病外,應(yīng)泌尿系感染、原發(fā)性腎病外,應(yīng)思索糖尿病腎病的診斷思索糖尿病腎病的診斷 血液標(biāo)本采集和血涂片制備血液標(biāo)本采集和血涂片制備血液標(biāo)本采集和抗凝劑選擇血液標(biāo)本采集和抗凝劑選擇 全血:臨床血液學(xué)檢查:血細(xì)胞計數(shù)、分類全血:臨床血液學(xué)檢查:血細(xì)胞計數(shù)、分類血漿:臨床生化檢查內(nèi)分泌激素測定等;血血漿:臨床生化檢查內(nèi)分泌激素測定等;血栓與止血的檢查栓與止血的檢查血清:除纖維蛋白原等凝血血清:除纖維蛋白原等凝血因子外,其他成分與血漿因子外,其他成分與血漿根

7、本一樣,多數(shù)臨床化學(xué)和根本一樣,多數(shù)臨床化學(xué)和臨床免疫學(xué)檢查。臨床免疫學(xué)檢查。一、采血方法一、采血方法靜脈采血法靜脈采血法 (venipuncture for blood (venipuncture for blood collection) collection) 皮膚采血法皮膚采血法(skin puncture for blood (skin puncture for blood collection )collection )真空采血法真空采血法 (vacuum tube for blood (vacuum tube for blood collectioncollection,負(fù)壓采血

8、法,負(fù)壓采血法) )。 定量、平安、轉(zhuǎn)運方便定量、平安、轉(zhuǎn)運方便. . 封鎖式采血封鎖式采血, ,無需容器轉(zhuǎn)移,減少溶血。無需容器轉(zhuǎn)移,減少溶血。 真空定量儲存試管適于不同的檢驗工程真空定量儲存試管適于不同的檢驗工程 真空采血容器色澤及運用范圍真空采血容器色澤及運用范圍顏顏 色色 抗抗 凝凝 劑劑應(yīng)應(yīng) 用用 范范 圍圍灰灰草酸鹽、氟化鈉草酸鹽、氟化鈉 全血、血漿,血葡全血、血漿,血葡萄糖萄糖 黃黃血培養(yǎng)血培養(yǎng) 綠綠肝素肝素全血、血漿:血氣全血、血漿:血氣紅紅血清:生化、免疫血清:生化、免疫 藍(lán)藍(lán)枸櫞酸鹽枸櫞酸鹽 全血、血漿:凝血全血、血漿:凝血檢查檢查 紫紫乙二胺四乙酸鹽乙二胺四乙酸鹽 全血、

9、血漿,鉀鹽全血、血漿,鉀鹽用于血細(xì)胞、血小用于血細(xì)胞、血小板和血液學(xué)檢查板和血液學(xué)檢查 【方法學(xué)評價】【方法學(xué)評價】皮膚采血:易溶血、凝血和能夠混入組織皮膚采血:易溶血、凝血和能夠混入組織液,反復(fù)性差。液,反復(fù)性差。開放式采血:操作環(huán)節(jié)多、不規(guī)范,易污開放式采血:操作環(huán)節(jié)多、不規(guī)范,易污染。染。封鎖式采血:操作規(guī)范,平安性、反復(fù)性封鎖式采血:操作規(guī)范,平安性、反復(fù)性好。好?!举|(zhì)量控制】【質(zhì)量控制】 血標(biāo)本采集是分析前質(zhì)量控制重要環(huán)節(jié)。血標(biāo)本采集是分析前質(zhì)量控制重要環(huán)節(jié)。1 1患者患者 2 2采血采血 靜脈采血:止血帶壓迫時間宜小靜脈采血:止血帶壓迫時間宜小于于1min 1min 3 3溶血溶血

10、 4 4血標(biāo)本處置原那么血標(biāo)本處置原那么及時運送檢測及時運送檢測保管:溫度和有效時間保管:溫度和有效時間5 5實驗結(jié)果分析實驗結(jié)果分析 采樣時:年齡、性別、飲食、藥物、時間采樣時:年齡、性別、飲食、藥物、時間二、抗凝劑選擇二、抗凝劑選擇1. 1. 乙二胺四乙酸乙二胺四乙酸 ethylenediamine ethylenediamine tetraacetic acid, EDTA tetraacetic acid, EDTA 鹽鹽 Na2C10H14O8N2+Ca2+ aC10H12O8N2+2Na+2H+Na2C10H14O8N2+Ca2+ aC10H12O8N2+2Na+2H+特點:對血細(xì)

11、胞形狀、血小板計數(shù)影響很小但特點:對血細(xì)胞形狀、血小板計數(shù)影響很小但影響血小板聚集。影響血小板聚集。根據(jù)國際血液學(xué)規(guī)范化委員會根據(jù)國際血液學(xué)規(guī)范化委員會(International (International Committee for Standardization of Committee for Standardization of hematology , ICSH ) 1993hematology , ICSH ) 1993年文件建議,血年文件建議,血細(xì)胞計數(shù)用細(xì)胞計數(shù)用EDTA-K2EDTA-K2作抗凝劑作抗凝劑EDTA-K2-2H2O EDTA-K2-2H2O 1.51.52.

12、2mg/ml2.2mg/ml血液。血液。 2草酸鹽草酸鹽sodium oxalate:對凝:對凝血血V因子維護功能差,影響凝血酶原時間因子維護功能差,影響凝血酶原時間測定;草酸鹽與凝血酶鈣結(jié)合后構(gòu)成的測定;草酸鹽與凝血酶鈣結(jié)合后構(gòu)成的沉淀物,影響自動凝血儀的運用;高濃沉淀物,影響自動凝血儀的運用;高濃度鉀或鈉離子易使血細(xì)胞脫水伸展,草度鉀或鈉離子易使血細(xì)胞脫水伸展,草酸銨使血細(xì)胞膨脹。酸銨使血細(xì)胞膨脹。 3肝素肝素(heparin) 加強抗凝血酶加強抗凝血酶IIIantithrombin III,AT-III滅活絲氨酸滅活絲氨酸蛋白酶的作用,從而阻止凝血酶構(gòu)成,蛋白酶的作用,從而阻止凝血酶構(gòu)成

13、,阻止血小板聚集等作用,抗凝力強。用阻止血小板聚集等作用,抗凝力強。用量量152.5U/ml血液。但??梢鸢籽?。但??梢鸢准?xì)胞聚集,并使血涂片在羅氏染色細(xì)胞聚集,并使血涂片在羅氏染色Romanowskys staining時產(chǎn)生藍(lán)時產(chǎn)生藍(lán)色背景。色背景。 4 4 枸 櫞 酸 鹽 枸 櫞 酸 鹽 枸 櫞 酸 鈉枸 櫞 酸 鈉 ( t r i s o d i u m ( t r i s o d i u m citrate)citrate),能與血液中的鈣離子結(jié)合構(gòu)成,能與血液中的鈣離子結(jié)合構(gòu)成螯合物,從而阻止血液凝固。螯合物,從而阻止血液凝固。 2Na3C6H5O7+2Ca2+ 2CaC6H

14、507-+6Na+ 2Na3C6H5O7+2Ca2+ 2CaC6H507-+6Na+ 抗凝力較弱??鼓壤鼓^弱??鼓壤?919。多用于臨。多用于臨床血液學(xué)檢查、血液保養(yǎng)毒性小。床血液學(xué)檢查、血液保養(yǎng)毒性小。第二節(jié)第二節(jié) 血液涂片制備和細(xì)胞染色血液涂片制備和細(xì)胞染色 一、血液涂片制備一、血液涂片制備厚薄適宜與血量多少、推片速度有關(guān),厚薄適宜與血量多少、推片速度有關(guān),頭體尾明顯:細(xì)胞分布要均勻頭體尾明顯:細(xì)胞分布要均勻血膜邊緣整齊留一定空隙血膜邊緣整齊留一定空隙血涂片分血涂片分布 不 均布 不 均主 要 緣主 要 緣由:由: 推 片 邊推 片 邊緣不齊、緣不齊、用 力 不用 力 不均 勻

15、、均 勻 、載 片 不載 片 不清潔清潔 二、血液細(xì)胞染色二、血液細(xì)胞染色一瑞氏染色法一瑞氏染色法 (Wright (Wrights stain)s stain)1 1瑞氏染料瑞氏染料 酸性染料伊紅酸性染料伊紅eosin, E-eosin, E-堿性染料亞甲藍(lán)堿性染料亞甲藍(lán)methylene blue, M+methylene blue, M+;又名美藍(lán)組成復(fù)合染料。又名美藍(lán)組成復(fù)合染料。甲醇:溶解美藍(lán)和伊紅甲醇:溶解美藍(lán)和伊紅MEME;固定細(xì)胞的形;固定細(xì)胞的形狀;提高對染料的吸附作用。狀;提高對染料的吸附作用。2 2染色原理染色原理 物理吸附、化學(xué)親和物理吸附、化學(xué)親和3 3pHpH值的影

16、響值的影響 細(xì)胞各種成分多屬蛋白質(zhì),由于蛋白質(zhì)系兩性電細(xì)胞各種成分多屬蛋白質(zhì),由于蛋白質(zhì)系兩性電解質(zhì),所帶電荷隨溶液解質(zhì),所帶電荷隨溶液pHpH而定。而定。在偏酸時正電荷在偏酸時正電荷H H增多,易與伊紅結(jié)合,增多,易與伊紅結(jié)合,染色偏紅。染色偏紅。在偏堿時負(fù)電荷增多,易與美藍(lán)或天青結(jié)合,染在偏堿時負(fù)電荷增多,易與美藍(lán)或天青結(jié)合,染色偏藍(lán)。色偏藍(lán)。染料儲存時間愈久,染色效果愈好。染料儲存時間愈久,染色效果愈好。染液儲存,必需加塞,以防止甲醇揮發(fā)和被氧化染液儲存,必需加塞,以防止甲醇揮發(fā)和被氧化成甲酸。成甲酸。參與甘油參與甘油, ,防止甲醇揮發(fā),染色明晰。防止甲醇揮發(fā),染色明晰。二姬姆薩染色法二

17、姬姆薩染色法姬姆薩染液:由天青、伊紅組成。姬姆薩染液:由天青、伊紅組成?!痉椒▽W(xué)評價】【方法學(xué)評價】 1.1.血涂片制備血涂片制備 手工推片法手工推片法: :血量少、操作簡單、反復(fù)差。血量少、操作簡單、反復(fù)差。2.血液細(xì)胞染色血液細(xì)胞染色 瑞氏染色法:最經(jīng)典、最常用瑞氏染色法:最經(jīng)典、最常用 瑞氏瑞氏-姬姆薩復(fù)合染液:取長補短姬姆薩復(fù)合染液:取長補短 第二章第二章 血液普通檢驗血液普通檢驗第一節(jié)第一節(jié) 紅細(xì)胞檢驗紅細(xì)胞檢驗紅細(xì)胞紅細(xì)胞red blood cell ;erythrocyte來源于骨髓造血干細(xì)胞來源于骨髓造血干細(xì)胞colony forming unit-spleen,CFU-S紅細(xì)

18、胞的主要生理功能:經(jīng)過胞內(nèi)的血紅紅細(xì)胞的主要生理功能:經(jīng)過胞內(nèi)的血紅蛋白來實現(xiàn)的。蛋白來實現(xiàn)的。一、紅細(xì)胞計數(shù)一、紅細(xì)胞計數(shù)(red blood cell count(red blood cell count,RBC)RBC)【檢測原理】【檢測原理】 1 1手工顯微鏡法手工顯微鏡法2 2血液分析儀法血液分析儀法 利用電阻抗和或光散射原理利用電阻抗和或光散射原理 紅細(xì)胞計數(shù)紅細(xì)胞計數(shù)2ml稀釋液稀釋液 充分混勻充分混勻 10ul血液血液 充池、靜止充池、靜止 鏡下計數(shù)鏡下計數(shù) 計算:計算:RBC/L=N510106200Neubauer計數(shù)盤 3mm WBC WBC WBC WBC 1mm【方法

19、學(xué)評價】【方法學(xué)評價】 1 1手工顯微鏡法手工顯微鏡法 2 2血液分析儀法血液分析儀法 為目前主要臨床檢驗細(xì)胞計數(shù)方法為目前主要臨床檢驗細(xì)胞計數(shù)方法變異系數(shù)變異系數(shù)coefficient of variation, coefficient of variation, CV CV 小。小。【質(zhì)量控制】【質(zhì)量控制】1 1手工法手工法 誤差來源包括:標(biāo)本、操作、誤差來源包括:標(biāo)本、操作、器材、固有誤差計數(shù)域誤差器材、固有誤差計數(shù)域誤差2 2儀器法儀器法 嚴(yán)厲按操作規(guī)程;定期作室內(nèi)和室間質(zhì)嚴(yán)厲按操作規(guī)程;定期作室內(nèi)和室間質(zhì)控??亍?【參考值】【參考值】 成年:男性成年:男性 (4 (45.5)5.5)

20、1012/L1012/L女性女性 (3.5 (3.55.0)5.0)1012/L1012/L新生兒新生兒 (6.0 (6.07.0)7.0)1012/L1012/L。 【臨床意義】【臨床意義】 1 1生理性變化生理性變化 (1)(1)年齡與性別的差別年齡與性別的差別(2)(2)精神要素精神要素(3)(3)猛烈膂力運動和勞動猛烈膂力運動和勞動(4)(4)氣壓降低氣壓降低(5)(5)妊娠中、后期妊娠中、后期2 2病理性變化病理性變化1 1紅細(xì)胞和血紅蛋白量減少:在臨床紅細(xì)胞和血紅蛋白量減少:在臨床最常見于各種緣由的貧血。最常見于各種緣由的貧血。1 1急性、慢性紅細(xì)胞喪失過多:如各種急性、慢性紅細(xì)胞

21、喪失過多:如各種緣由的出血。緣由的出血。2 2紅細(xì)胞壽命縮短:如各種緣由的溶血紅細(xì)胞壽命縮短:如各種緣由的溶血 3 3造血原料缺乏造血原料缺乏4 4骨髓造血功能減退骨髓造血功能減退2 2紅細(xì)胞增多紅細(xì)胞增多 1 1原發(fā)性紅細(xì)胞增多:見于真性紅細(xì)胞增原發(fā)性紅細(xì)胞增多:見于真性紅細(xì)胞增多癥、良性家族性紅細(xì)胞增多癥等。多癥、良性家族性紅細(xì)胞增多癥等。2 2繼發(fā)性紅細(xì)胞增多:常見于可以引起低繼發(fā)性紅細(xì)胞增多:常見于可以引起低氧血癥的疾?。盒难懿 ⒎渭膊?、異氧血癥的疾病:心血管病、肺疾病、異常血紅蛋白病。常血紅蛋白病。腎上腺皮質(zhì)功能亢進庫欣病,能夠與腎上腺皮質(zhì)功能亢進庫欣病,能夠與皮質(zhì)激素刺激骨髓使紅

22、細(xì)胞生成偏高有皮質(zhì)激素刺激骨髓使紅細(xì)胞生成偏高有關(guān)關(guān) 藥物腎上腺素、糖皮質(zhì)激素、雄激素等。藥物腎上腺素、糖皮質(zhì)激素、雄激素等。(3(3相對性紅細(xì)胞增多相對性紅細(xì)胞增多二、血紅蛋白二、血紅蛋白(hemoglobin, Hb(hemoglobin, Hb或或HGB)HGB)測測定定一血紅蛋白分子構(gòu)造及成分一血紅蛋白分子構(gòu)造及成分 色素:亞鐵血紅素色素:亞鐵血紅素蛋白質(zhì):珠蛋白蛋白質(zhì):珠蛋白血紅素:原卟啉和鐵原子組成的一種結(jié)血紅素:原卟啉和鐵原子組成的一種結(jié)合物,合成受合物,合成受-氨基氨基-酮戊酸合成酶酮戊酸合成酶 - a m i n o l e v u l i n i c a c i d - a

23、 m i n o l e v u l i n i c a c i d synthetasesynthetase、血紅素本身和、血紅素本身和Fe2+Fe2+的調(diào)的調(diào)理。理。在正常形狀,機體有在正常形狀,機體有99% Hb99% Hb的鐵原子呈的鐵原子呈Fe2+Fe2+形狀,稱為復(fù)原形狀,稱為復(fù)原Hb ,1%Hb ,1%的的 Fe3+Fe3+為高為高鐵血紅蛋白,只需亞鐵形狀的鐵血紅蛋白,只需亞鐵形狀的HbHb才干與才干與氧結(jié)合,此時稱氧合血紅蛋白。氧結(jié)合,此時稱氧合血紅蛋白。血紅蛋白的構(gòu)造construction of hemoglobin 卟啉 卟啉 Fe 卟啉 卟啉 珠蛋白血紅蛋白的構(gòu)造血紅蛋

24、白的構(gòu)造( (二二) )血紅蛋白的合成血紅蛋白的合成血紅蛋白的合成受激素的調(diào)理。血紅蛋白的合成受激素的調(diào)理。紅細(xì)胞生成素:促紅細(xì)胞生成素:促-氨基氨基-酮戊酸酮戊酸-aminolevulinic acidaminolevulinic acid,ALAALA生成與鐵生成與鐵的利用,促血紅素和的利用,促血紅素和HbHb的合成;的合成;雄激素:雄激素:在人體不同生長時期。在人體不同生長時期。HbHb種類與比例不同。種類與比例不同?!緳z測原理】【檢測原理】血紅蛋白方式:血紅蛋白方式:氧合血紅蛋白氧合血紅蛋白oxyhemoglobinoxyhemoglobin碳氧血紅蛋白碳氧血紅蛋白carboxyhem

25、oglobincarboxyhemoglobin高鐵血紅蛋白高鐵血紅蛋白hemiglobinhemiglobin,HiHi其他衍生物其他衍生物1 1氰化高鐵血紅蛋白氰化高鐵血紅蛋白hemiglobincyanide, HiCN hemiglobincyanide, HiCN 測定法測定法 吸收波峰:吸收波峰:540nm540nm 2 2其他測定法:其他測定法: 疊氮高鐵血紅蛋白法疊氮高鐵血紅蛋白法hemiglobin hemiglobin azide,HiN3azide,HiN3堿羥血紅蛋白測定法堿羥血紅蛋白測定法沙利沙利SahliSahli,曾經(jīng)淘汰血紅蛋白測定法,曾經(jīng)淘汰血紅蛋白測定法等等

26、【方法學(xué)評價】【方法學(xué)評價】19661966年,國際血液學(xué)規(guī)范化委員會引薦氰化高鐵年,國際血液學(xué)規(guī)范化委員會引薦氰化高鐵血紅蛋白測定法作為國際規(guī)范參考方法。血紅蛋白測定法作為國際規(guī)范參考方法。 HiCNHiCN法簡便、顯色快而穩(wěn)定??蓹z測除硫化血法簡便、顯色快而穩(wěn)定??蓹z測除硫化血紅蛋白紅蛋白sulphon hemoglobin, SHb sulphon hemoglobin, SHb 外的各外的各種血紅蛋白。種血紅蛋白。氰化鉀氰化鉀potassium cyanidepotassium cyanide,KCNKCN有劇毒有劇毒十二烷基硫酸鈉血紅蛋白十二烷基硫酸鈉血紅蛋白sodium dodec

27、yl sodium dodecyl sulfate, SDSsulfate, SDS測定法:除測定法:除SHbSHb外,血液中各外,血液中各種種HbHb均可與低濃度均可與低濃度SDSSDS作用,生成作用,生成SDS-HbSDS-Hb棕紅棕紅色化合物。吸收曲線波峰在色化合物。吸收曲線波峰在538nm538nm,波谷在,波谷在500nm500nm,肩峰在,肩峰在560nm560nm。無公害。破壞白細(xì)胞,。無公害。破壞白細(xì)胞,不適于同時用于有白細(xì)胞計數(shù)和不適于同時用于有白細(xì)胞計數(shù)和HbHb測定的血細(xì)測定的血細(xì)胞分析儀上運用。胞分析儀上運用。 疊氮高鐵血紅蛋白疊氮高鐵血紅蛋白HiN3測定法:具測定法:

28、具有與有與HiCN測定法類似的優(yōu)點,試劑有毒測定法類似的優(yōu)點,試劑有毒性。性。堿羥血紅蛋白堿羥血紅蛋白(AHD 575)測定法測定法沙利法為傳統(tǒng)血紅蛋白測定法,已淘汰。沙利法為傳統(tǒng)血紅蛋白測定法,已淘汰?!举|(zhì)量控制】【質(zhì)量控制】血標(biāo)本、方法、器材、采血部位血標(biāo)本、方法、器材、采血部位 【參考值】【參考值】 成年:男性成年:男性120120160g /L160g /L女性:女性:110110150g/L150g/L新生兒:新生兒:170170200g/L200g/L老年老年7070歲以上:歲以上:男性:男性:94.294.2122.2g/L122.2g/L女性:女性:86.586.5111.8g

29、/L111.8g/L【臨床意義】【臨床意義】 與紅細(xì)胞計數(shù)類似,但對貧血程與紅細(xì)胞計數(shù)類似,但對貧血程度判別的準(zhǔn)確性優(yōu)于紅細(xì)胞計數(shù)。度判別的準(zhǔn)確性優(yōu)于紅細(xì)胞計數(shù)。三、紅細(xì)胞形狀檢查三、紅細(xì)胞形狀檢查 【方法學(xué)評價】【方法學(xué)評價】 雖然血細(xì)胞分析儀廣泛用于全血細(xì)胞計雖然血細(xì)胞分析儀廣泛用于全血細(xì)胞計數(shù),但察看血涂片可用于估計相應(yīng)血細(xì)數(shù),但察看血涂片可用于估計相應(yīng)血細(xì)胞數(shù)量,因此顯微鏡細(xì)胞數(shù)量和形狀的胞數(shù)量,因此顯微鏡細(xì)胞數(shù)量和形狀的察看現(xiàn)常作為對儀器分析質(zhì)控的參考對察看現(xiàn)常作為對儀器分析質(zhì)控的參考對照。照。留意:假設(shè)血片制造不良和染色不佳,留意:假設(shè)血片制造不良和染色不佳,常使細(xì)胞鑒別發(fā)生困難,

30、甚至導(dǎo)致錯誤常使細(xì)胞鑒別發(fā)生困難,甚至導(dǎo)致錯誤結(jié)論。結(jié)論?!举|(zhì)量控制】【質(zhì)量控制】 選擇細(xì)胞分布均勻的區(qū)域:選擇細(xì)胞分布均勻的區(qū)域:紅細(xì)胞堆積棒狀穿錢狀:細(xì)胞過于密集。但紅細(xì)胞堆積棒狀穿錢狀:細(xì)胞過于密集。但假設(shè)在血涂片較薄的區(qū)域出現(xiàn),能夠是紅假設(shè)在血涂片較薄的區(qū)域出現(xiàn),能夠是紅細(xì)胞外附有異型球蛋白細(xì)胞外附有異型球蛋白留意完好的檢查留意完好的檢查順序順序【臨床意義】【臨床意義】 1.1.紅細(xì)胞大小不一紅細(xì)胞大小不一 1 1 小紅細(xì)胞小紅細(xì)胞(microcyte)(microcyte):6m6m2 2 大紅細(xì)胞大紅細(xì)胞(macrocyte)(macrocyte):10m10m。常見于巨幼細(xì)胞性貧

31、血、溶血性貧血、常見于巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、惡性貧血等。惡性貧血等。3 3 巨紅細(xì)胞巨紅細(xì)胞(megalocyte)(megalocyte):15m15m4紅細(xì)胞大小紅細(xì)胞大小不均不均(anisocytosis):同一患者紅細(xì)胞同一患者紅細(xì)胞之間直徑相差一之間直徑相差一倍以上。如大達(dá)倍以上。如大達(dá)12m,小僅,小僅2.5m。常見于。常見于嚴(yán)重的增生性貧嚴(yán)重的增生性貧血,巨幼細(xì)胞性血,巨幼細(xì)胞性貧血時尤為明顯。貧血時尤為明顯。 2. 2.紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白含量改動紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白含量改動1 1正常色素性正常色素性(normochromic)(normochromic):見于急性失:見于急性失

32、血、再生妨礙性貧血、白血病等。血、再生妨礙性貧血、白血病等。2 2低色素性低色素性(hypochromic)(hypochromic):見于缺鐵性貧血、:見于缺鐵性貧血、珠蛋白生成妨礙性貧血、鐵幼粒細(xì)胞性貧血,珠蛋白生成妨礙性貧血、鐵幼粒細(xì)胞性貧血,某些血紅蛋白病。某些血紅蛋白病。3 3高色素性高色素性(hyperchromic)(hyperchromic): 最常見于巨幼最常見于巨幼細(xì)胞性貧血。細(xì)胞性貧血。4 4多色性多色性(polychromatic)(polychromatic):剛脫核而尚未完:剛脫核而尚未完全成熟的紅細(xì)胞,體積較大。正常人外周血占全成熟的紅細(xì)胞,體積較大。正常人外周血

33、占1%1%左右。尤見于溶血性或急性失血性貧血。左右。尤見于溶血性或急性失血性貧血。 5 5細(xì)胞著色不一細(xì)胞著色不一anisochromiaanisochromia:雙:雙形性貧血形性貧血dimorphic anemiadimorphic anemia, ,多見于鐵粒多見于鐵粒幼紅細(xì)胞性貧血。幼紅細(xì)胞性貧血。 5 5紅細(xì)胞外形改紅細(xì)胞外形改動動1 1 球形紅細(xì)球形紅細(xì)胞胞(spherocyte)(spherocyte):見于遺傳性和獲見于遺傳性和獲得性球形細(xì)胞增得性球形細(xì)胞增多癥如本身免多癥如本身免疫溶血性貧血或疫溶血性貧血或直接理化損傷如直接理化損傷如燒傷等。燒傷等。2 2 橢圓形紅細(xì)胞橢圓形

34、紅細(xì)胞(elliptocyte)(elliptocyte):見:見于遺傳性橢圓形細(xì)胞增多癥、大細(xì)胞性于遺傳性橢圓形細(xì)胞增多癥、大細(xì)胞性貧血;偶見于缺鐵性貧血、骨髓纖維化、貧血;偶見于缺鐵性貧血、骨髓纖維化、巨幼細(xì)胞貧血、鐮形細(xì)胞性貧血。正常巨幼細(xì)胞貧血、鐮形細(xì)胞性貧血。正常人血液約占人血液約占1%1%。3 3 靶形細(xì)靶形細(xì)胞胞(target (target cell)cell):常見于:常見于各種低色素性各種低色素性貧血、尤見于貧血、尤見于珠蛋白生成妨珠蛋白生成妨礙性貧血、礙性貧血、HbCHbC病,及阻塞性病,及阻塞性黃疸、脾切除黃疸、脾切除后。后。4 4 口形紅細(xì)胞口形紅細(xì)胞(stomato

35、cyte)(stomatocyte):常見于口形紅細(xì)常見于口形紅細(xì)胞增多癥,小兒胞增多癥,小兒消化系統(tǒng)疾患引消化系統(tǒng)疾患引起的貧血及酒清起的貧血及酒清中毒、某些溶血中毒、某些溶血性貧血、肝病。性貧血、肝病。5 5 鐮形紅鐮形紅細(xì)胞細(xì)胞(sickle (sickle cell)cell):鐮狀細(xì):鐮狀細(xì)胞貧血胞貧血HbS-SHbS-S,HbS-CHbS-C,在缺,在缺氧的條件下,氧的條件下,可有大量鐮狀可有大量鐮狀紅細(xì)胞。紅細(xì)胞。 6 6 棘 紅 細(xì) 胞棘 紅 細(xì) 胞(acanthocyte)(acanthocyte):見于遺傳性或獲得見于遺傳性或獲得性性-脂蛋白缺乏脂蛋白缺乏癥;于脾切除后、癥

36、;于脾切除后、酒精中毒性肝臟疾酒精中毒性肝臟疾病、尿毒癥。病、尿毒癥。棘紅細(xì)胞應(yīng)與伸展紅棘紅細(xì)胞應(yīng)與伸展紅細(xì)胞也稱鋸齒狀細(xì)胞也稱鋸齒狀紅 細(xì) 胞 區(qū) 別紅 細(xì) 胞 區(qū) 別crenated cell, crenated cell, echinocyteechinocyte。7 新月形紅細(xì)胞meniscocyte:見于某些溶血性貧血如陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥,其意義不明。正常人無。8 8 淚滴形淚滴形紅細(xì)胞紅細(xì)胞tear tear drop celldrop cell:能夠是細(xì)胞內(nèi)能夠是細(xì)胞內(nèi)含有含有HeinzHeinz小小體或包涵體所體或包涵體所致。見于貧血、致。見于貧血、骨髓纖維化癥,骨髓纖維化癥,偶見正常人。偶見正常人。9 9 緡錢狀紅細(xì)胞緡錢狀紅細(xì)胞(rouleaux formation)(rouleaux formation):見于血漿中纖維蛋白原和免疫球蛋白增高性等見于血漿中纖維蛋白原和免疫球蛋白增高性等疾病。疾病。1010裂紅細(xì)胞裂紅

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