第十二章臨床血液檢驗

1、2022-6-261學(xué)習(xí)情境十三學(xué)習(xí)情境十三 血液常規(guī)檢查血液常規(guī)檢查n實驗室檢驗就是運用物理學(xué)、化學(xué)和生物學(xué)等實驗技術(shù)和方法，對病畜的血液、尿液、糞便、體液（如胃液、 腦脊髓液、 胸腹腔穿刺液）、組織細胞及病理產(chǎn)物，在實驗室特定的設(shè)備和條件下，測定其物理性狀，分析其化學(xué)成分，或借助于顯微鏡觀察其有形成分的方法，以獲取反映機體功能狀態(tài)，病理變化或病因等客觀資料，配合臨床資料進行綜合分析。n實驗室檢驗是一種復(fù)雜而細致的工作，為了得到正確的結(jié)果，必須遵守嚴格的操作規(guī)程和次序。采取的樣本必須有代表性，檢驗所用的試劑與器材，應(yīng)符合要求，并定期進行檢查和校正。要注意消毒工作，污染的器皿應(yīng)先消毒后洗滌，以

2、防傳染性物質(zhì)的擴散。n血液檢驗血液檢驗n尿液檢驗?zāi)蛞簷z驗n糞便檢驗糞便檢驗n瘤胃液的檢驗瘤胃液的檢驗n穿刺液的檢驗穿刺液的檢驗n常見毒物的檢驗常見毒物的檢驗第一節(jié) 血液檢驗n血液檢驗是臨床醫(yī)學(xué)檢驗中應(yīng)用最廣，對輔助診斷最有價值，最常用的基本內(nèi)容之一。n血液是由血漿和血細胞兩部分組成，是通過循環(huán)系統(tǒng)與全身各個組織器官密切聯(lián)系，參與機體呼吸、運輸、防御，調(diào)節(jié)生理，維持正常新陳代謝和內(nèi)外環(huán)境平衡的。血液全血血漿血清血液學(xué)檢查血細胞計數(shù)分類與形態(tài)檢查血漿生理和病理檢驗內(nèi)分泌激素生化與免疫學(xué)檢查臨床血液學(xué)檢查內(nèi)容n物理學(xué)檢查：借助物理學(xué)方法測定其物理特性，如凝血時間、紅細胞脆性、紅細胞沉降率、紅細胞壓積

3、。n化學(xué)檢驗：即用定性或定量的化學(xué)分析方法，檢測被檢標本各種化學(xué)成分方面的變化，如血紅蛋白的檢查。n顯微鏡檢查：檢查其血細胞的形態(tài)及數(shù)量的變化，如紅細胞，白細胞，血小板等。一、血液的采集與血涂片的制作血液樣本的采取與抗凝血液樣本的采取與抗凝血液樣本的采取血液樣本的采取 采血的部位和方法，根據(jù)檢驗的項目、采血的部位和方法，根據(jù)檢驗的項目、所需血量和動物種類的不同，可分為毛所需血量和動物種類的不同，可分為毛細血管采血、靜脈采血和心臟采血。細血管采血、靜脈采血和心臟采血。毛細血管采血法毛細血管采血法 適用于采血量少，血液適用于采血量少，血液不加抗凝劑而且直接在現(xiàn)場檢驗的項目。不加抗凝劑而且直接在現(xiàn)場

4、檢驗的項目。如涂血片，血紅蛋白測定、血細胞計數(shù)如涂血片，血紅蛋白測定、血細胞計數(shù)等。馬、?？稍诙獠?，豬，羊，兔等等。馬、?？稍诙獠?，豬，羊，兔等在耳背邊緣小靜脈，雞則在冠或肉髯。在耳背邊緣小靜脈，雞則在冠或肉髯。 采血前先剪毛，酒精棉球消毒，待酒精采血前先剪毛，酒精棉球消毒，待酒精揮發(fā)后，用消毒的干燥的針頭迅速刺入揮發(fā)后，用消毒的干燥的針頭迅速刺入2-3mm2-3mm深，讓血液自然流出，且勿擠壓以深，讓血液自然流出，且勿擠壓以免混入過多組織液。免混入過多組織液。流出的第一滴血，可用于制作血片，然后用干流出的第一滴血，可用于制作血片，然后用干棉球擦去局部的剩余血液，用流出的第二滴血棉球擦去局

5、部的剩余血液，用流出的第二滴血液作紅、白細胞計數(shù)和血紅蛋白測定，若利用液作紅、白細胞計數(shù)和血紅蛋白測定，若利用第三滴血時，仍要將第二滴血擦干，否則流出第三滴血時，仍要將第二滴血擦干，否則流出的血不能形成滴狀，不易吸取。的血不能形成滴狀，不易吸取。靜脈采血法靜脈采血法 馬、牛、羊可由頸靜脈采血。豬可選用前腔馬、牛、羊可由頸靜脈采血。豬可選用前腔靜脈采血；雞可由翼下靜脈采血，即用細針頭刺入翼下靜靜脈采血；雞可由翼下靜脈采血，即用細針頭刺入翼下靜脈后，任血液自行流出并接入試管中。犬、貓可于小腿外脈后，任血液自行流出并接入試管中。犬、貓可于小腿外側(cè)跖背外側(cè)靜脈或前臂內(nèi)側(cè)皮下靜脈采血。局部剪毛消毒，側(cè)跖

6、背外側(cè)靜脈或前臂內(nèi)側(cè)皮下靜脈采血。局部剪毛消毒，用止血帶扎住采血部上端，使靜脈怒張，用消毒、干燥的用止血帶扎住采血部上端，使靜脈怒張，用消毒、干燥的注射器接上針頭，針頭斜上面刺入靜脈采血，待抽至所需注射器接上針頭，針頭斜上面刺入靜脈采血，待抽至所需量后，先放松止血帶，再用消毒棉球按住傷口，拔出針頭。量后，先放松止血帶，再用消毒棉球按住傷口，拔出針頭。除去針頭，將血液緩緩注入清潔的試管內(nèi)。需抗凝血液時，除去針頭，將血液緩緩注入清潔的試管內(nèi)。需抗凝血液時，試管內(nèi)加抗凝劑，并立即混勻，以免凝固。試管內(nèi)加抗凝劑，并立即混勻，以免凝固。心臟采血法心臟采血法 多用于兔、雞及實驗動物需多量多用于兔、雞及實驗

7、動物需多量血液時，雞可由胸腔入口處向心臟刺入由于心血液時，雞可由胸腔入口處向心臟刺入由于心腔壓力較靜脈高，血液自然涌入注射器，兔及腔壓力較靜脈高，血液自然涌入注射器，兔及雞亦可在左側(cè)胸部第雞亦可在左側(cè)胸部第1 1、2 2肋間，心搏動明顯處，肋間，心搏動明顯處，針頭與胸壁呈垂直方向緩緩刺入。針頭與胸壁呈垂直方向緩緩刺入。 豬的前腔靜脈采血 馬的頸靜脈采血兔的耳靜脈采血血液的抗凝血液的抗凝草酸鹽草酸鹽 是常用的抗凝劑，每是常用的抗凝劑，每1.5-2.0mg1.5-2.0mg可抗凝可抗凝1.0ml1.0ml血液，可用于血液常規(guī)檢驗。因?qū)t細胞血液，可用于血液常規(guī)檢驗。因?qū)t細胞大小有影響，故不能用紅

8、細胞壓積測定，如測大小有影響，故不能用紅細胞壓積測定，如測定紅細胞壓積時，可用雙草酸鹽抗凝劑或乙二定紅細胞壓積時，可用雙草酸鹽抗凝劑或乙二胺四乙酸二鈉。胺四乙酸二鈉。雙草酸鹽抗凝劑雙草酸鹽抗凝劑 草酸鉀草酸鉀 0.8g0.8g草酸銨草酸銨 1.2g1.2g蒸餾水蒸餾水 加至加至100ml 100ml 溶解后吸取溶解后吸取0.5ml0.5ml，加入供采血試管或小瓶中，加入供采血試管或小瓶中，置干燥箱內(nèi)（溫度不超過置干燥箱內(nèi)（溫度不超過8080）烘干備用，可）烘干備用，可供供5ml5ml全血抗凝。全血抗凝。血液檢驗血液檢驗乙二胺四乙酸（乙二胺四乙酸（ EDTAEDTA ）鹽）鹽 可適用于一般的可適

9、用于一般的血液學(xué)檢查，特別是血小板計數(shù)，但因為影響血液學(xué)檢查，特別是血小板計數(shù)，但因為影響血小板聚集和白細胞吞噬功能，不適合于血象血小板聚集和白細胞吞噬功能，不適合于血象及血小板功能檢查。及血小板功能檢查。（EDTAEDTANaNa2 2H2O O）每）每10mg10mg可使可使5ml5ml全血抗凝；全血抗凝；或配成或配成10%10%的溶液，每的溶液，每2 2滴可使滴可使5ml5ml全血抗凝。全血抗凝。（EDTAEDTAK K2 22H2H2 2O O）1%1%溶液溶液0.1ml0.1ml可使可使5 5ml血液不血液不凝固。全血細胞分析及血細胞比容測定。凝固。全血細胞分析及血細胞比容測定。3.

10、8%3.8%枸櫞酸鈉溶液枸櫞酸鈉溶液 每每1ml1ml可使可使4ml4ml全血抗凝。全血抗凝。常用于血沉、凝血因子和血小板功能檢查。因常用于血沉、凝血因子和血小板功能檢查。因其毒性小又可作為血液保養(yǎng)液。但不適用于血其毒性小又可作為血液保養(yǎng)液。但不適用于血液化學(xué)檢驗。由于抗凝劑溶解緩慢，故只能配液化學(xué)檢驗。由于抗凝劑溶解緩慢，故只能配成溶液，不能用粉劑。成溶液，不能用粉劑。血液檢驗血液檢驗肝素肝素 肝素價格最貴，其優(yōu)點是抗凝作用強，不影響肝素價格最貴，其優(yōu)點是抗凝作用強，不影響血細胞的體積，不致溶血等，可用于多種血液生物化血細胞的體積，不致溶血等，可用于多種血液生物化學(xué)分析和紅細胞壓積測定。但過

11、量的肝素可引起白細學(xué)分析和紅細胞壓積測定。但過量的肝素可引起白細胞聚集和血小板減少，故不適用于白細胞和血小板計胞聚集和血小板減少，故不適用于白細胞和血小板計數(shù)，也不適用于血涂片檢查，因其在瑞氏染色時會出數(shù)，也不適用于血涂片檢查，因其在瑞氏染色時會出現(xiàn)藍色背景，更不能用于血液學(xué)一般檢查?，F(xiàn)藍色背景，更不能用于血液學(xué)一般檢查。肝素是生理性抗凝劑肝素是生理性抗凝劑, ,廣泛存在于肺、肝、脾等幾乎所有廣泛存在于肺、肝、脾等幾乎所有的組織和細胞周圍，肥大細胞和嗜堿性粒細胞的顆粒中。的組織和細胞周圍，肥大細胞和嗜堿性粒細胞的顆粒中。它是一種含硫酸基團的黏多糖。它是一種含硫酸基團的黏多糖?？鼓龣C制較為復(fù)雜，

12、主要是加強抗凝血酶抗凝機制較為復(fù)雜，主要是加強抗凝血酶滅活絲氨酸滅活絲氨酸蛋白酶的作用，從而阻止凝血酶的形成，并有阻止血小蛋白酶的作用，從而阻止凝血酶的形成，并有阻止血小板聚集等多種抗凝作用。板聚集等多種抗凝作用。通常用肝素粉劑配成通常用肝素粉劑配成1g/L1g/L水溶液。取水溶液。取0.5ml0.5ml置小瓶內(nèi)，放置小瓶內(nèi)，放于于37375050中烘干后貯于冰箱內(nèi)保存。能使中烘干后貯于冰箱內(nèi)保存。能使5ml5ml血液不凝血液不凝固，肝素抗凝劑應(yīng)及時使用，放置過久易失效。固，肝素抗凝劑應(yīng)及時使用，放置過久易失效。 如分離血清，應(yīng)將全血采集在試管中（不加抗凝劑），在室溫下或如分離血清，應(yīng)將全血采

13、集在試管中（不加抗凝劑），在室溫下或25-3725-37溫水中斜置，血清析出后即可分離。血漿應(yīng)在抗凝血采集后溫水中斜置，血清析出后即可分離。血漿應(yīng)在抗凝血采集后離心分離。血液采集后應(yīng)盡快送檢和檢測。不能立即送檢的血樣，離心分離。血液采集后應(yīng)盡快送檢和檢測。不能立即送檢的血樣，血片應(yīng)固定，抗凝血、血漿和血清應(yīng)冷藏。送檢血樣應(yīng)編號，并避血片應(yīng)固定，抗凝血、血漿和血清應(yīng)冷藏。送檢血樣應(yīng)編號，并避免劇烈振搖。血液學(xué)檢查項目與血樣保存的期限見下表免劇烈振搖。血液學(xué)檢查項目與血樣保存的期限見下表 血樣的處理血樣的處理檢查項目檢查項目保存時間（保存時間（h h）檢查項目檢查項目保存時間（保存時間（h h）白

14、細胞計數(shù)白細胞計數(shù)2-32-3血紅蛋白含量血紅蛋白含量4848紅細胞計數(shù)紅細胞計數(shù)2424紅細胞壓積容量紅細胞壓積容量2424血小板計數(shù)血小板計數(shù)1 1紅細胞沉降速率紅細胞沉降速率2-32-3網(wǎng)織紅細胞計數(shù)網(wǎng)織紅細胞計數(shù)2-32-3白細胞分類計數(shù)白細胞分類計數(shù)1-21-2注意注意:懷疑傳染病時，采血應(yīng)防止到處流散，檢后殘余血液及所用器懷疑傳染病時，采血應(yīng)防止到處流散，檢后殘余血液及所用器皿應(yīng)進行消毒處理。皿應(yīng)進行消毒處理。紅細胞背景知識 紅細胞也稱紅血球，是血液中數(shù)量最多的一種血細胞，同時也是脊椎動物體內(nèi)通過血液運送氧氣的最主要的媒介 。在所有的脊椎動物及若干無脊椎動物，其血紅素包含在特定的細

15、胞中來進行其機能活動，這種血球稱為紅細胞。其它的血細胞，如白血球，則是免疫細胞。n紅細胞中含有血紅蛋白，因而使血液呈紅色。血紅蛋紅細胞中含有血紅蛋白，因而使血液呈紅色。血紅蛋白能和空氣中的氧結(jié)合，因此紅細胞能通過血紅蛋白白能和空氣中的氧結(jié)合，因此紅細胞能通過血紅蛋白將吸入肺泡中的氧運送給組織，而組織中新陳代謝產(chǎn)將吸入肺泡中的氧運送給組織，而組織中新陳代謝產(chǎn)生的二氧化碳也通過紅細胞運到肺部并被排出體外。生的二氧化碳也通過紅細胞運到肺部并被排出體外。血紅蛋白更易和一氧化碳相合，當空氣中一氧化碳含血紅蛋白更易和一氧化碳相合，當空氣中一氧化碳含量增高時，可引起一氧化碳中毒。量增高時，可引起一氧化碳中毒

16、。n紅細胞和血紅蛋白的數(shù)量減少到一定程度時，稱為貧紅細胞和血紅蛋白的數(shù)量減少到一定程度時，稱為貧血。紅細胞大量被破壞可引起溶血性黃疸。血。紅細胞大量被破壞可引起溶血性黃疸。n紅細胞描述：多，小而圓，中央著色較淺，無核。禽紅細胞描述：多，小而圓，中央著色較淺，無核。禽類稱為凝血細胞，一般為卵圓形，有細胞核，比哺乳類稱為凝血細胞，一般為卵圓形，有細胞核，比哺乳動物的大得多，數(shù)量少動物的大得多，數(shù)量少 。血液涂片的制備和細胞染色、涂片的制作 選取一張邊緣平滑的載玻選取一張邊緣平滑的載玻片作為推片片作為推片(最好此載玻片稍窄最好此載玻片稍窄或磨去兩角或磨去兩角),用左手的拇指與用左手的拇指與中指夾持一

17、張載玻片，取被檢中指夾持一張載玻片，取被檢血液一滴血液一滴(最好是未加抗凝劑的最好是未加抗凝劑的新鮮血新鮮血)置載玻片的一端，然后置載玻片的一端，然后右手持推片傾斜右手持推片傾斜30-40角，角，由血滴的前方向后接觸血滴，由血滴的前方向后接觸血滴，待血液擴散成線狀后，立即以待血液擴散成線狀后，立即以均等的速度輕而平穩(wěn)地向前推均等的速度輕而平穩(wěn)地向前推進，即形成血膜。進，即形成血膜。n涂片時，血滴越大，角度越大，推片速度越快，則血膜越厚，涂片時，血滴越大，角度越大，推片速度越快，則血膜越厚，反之則血膜越薄。反之則血膜越薄。n白細胞分類計數(shù)的血片宜稍厚，進行紅細胞形態(tài)及血原蟲檢查白細胞分類計數(shù)的血

18、片宜稍厚，進行紅細胞形態(tài)及血原蟲檢查的血片宜稍薄。的血片宜稍薄。n一張良好的血片，要求厚薄適宜，血液分布均勻，對光觀察呈一張良好的血片，要求厚薄適宜，血液分布均勻，對光觀察呈霓虹色，邊緣整齊，能明顯分出頭，體，尾三部分，兩側(cè)留有霓虹色，邊緣整齊，能明顯分出頭，體，尾三部分，兩側(cè)留有空隙空隙( (以寫明畜別，編號、日期以寫明畜別，編號、日期) )。n血膜分布不勻，主要是由于推片不齊，用力不勻，玻片不潔所血膜分布不勻，主要是由于推片不齊，用力不勻，玻片不潔所致。致。n推好的血片可在空氣中揮動，使其迅速干燥，以防細胞皺縮變推好的血片可在空氣中揮動，使其迅速干燥，以防細胞皺縮變形，并盡快固定染色。形，

19、并盡快固定染色。為了觀察細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，識別各種細胞及其異常變化，血涂片必須進行染色。原原理理染色是染料透入被染物并留存其內(nèi)部的一種過程，此過程既有物理的吸附作用，又有化學(xué)的親和作用。各種細胞成分化學(xué)性質(zhì)不同，對染料的親和力也不一樣。例如血紅蛋白、嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì)，與酸性染料伊紅結(jié)合，染成紅色，稱為嗜酸性物質(zhì)；細胞核蛋白和淋巴細胞胞質(zhì)為酸性，與堿性染料美藍或天青結(jié)合，染成紫藍色或藍色，稱為嗜堿性物質(zhì)；中性顆粒呈等電狀態(tài)，與伊紅和美藍均可結(jié)合，染成紫紅色，稱為中性物質(zhì)。、細胞染色n瑞氏染色法瑞氏染色法n姬姆薩氏染色法姬姆薩氏染色法n瑞姬氏復(fù)合染色法瑞姬氏復(fù)合染色法（）瑞氏染色法瑞氏染料：酸性

20、染料伊紅、堿性染料亞甲藍瑞氏染液：瑞氏染粉0.1g,甲醇60.0ml。將染色粉置于研缽中，加少量甲醇研磨，使其溶解，將已溶解的染液倒入潔凈的棕色玻璃瓶中，剩下未溶解的染料再加少量甲醇研磨，如此繼續(xù)操作，直至全部染料溶解并用完甲醇為止。在室溫中保存7日，每日震搖一次，過濾后即可應(yīng)用。新配的染液偏堿性，放置后可呈酸性。保存時間愈久，染色能力愈佳。涂片滴加染色液置min加磷酸鹽緩沖液混合均勻5min水沖洗自然干燥鏡檢(所得血片呈櫻紅色者為佳)（）姬姆薩氏染色法姬姆薩氏染料：酸性染料伊紅、堿性染料天青姬姆薩氏染液：姬姆薩氏染粉0.5g，中性甘油33ml，中性甲醇33ml。將染色粉置于研缽中，加少量甘油

21、，充分研磨；加入所余甘油，在5060水溶液中保溫12h，并用玻棒攪拌，使染粉溶解；最后加入甲醇，混合后裝入棕色瓶中，保存7日后過濾即成原液染色時取原液0.51ml，加pH6.8磷酸鹽緩沖液10ml，即成應(yīng)用液。涂片甲醇固定min置于染色液中染min水洗吸干鏡檢(玫瑰紫為佳)對細胞核與寄生蟲效果好（）瑞姬氏復(fù)合染色法瑞姬氏復(fù)合染液：瑞氏染粉5.0g，姬姆薩氏染粉0.5g，甲醇500ml。將兩種染粉置于研缽中，加少量甲醇研磨，傾入棕色瓶中，用剩余甲醇再研磨，最后一并裝入瓶中保存7日后過濾即成。涂片滴加染液0.5 min后加等量緩沖液 min吸干鏡檢。n磷酸鹽緩沖液(PH6.4-6.8)：磷酸二氫鉀

22、0.3g加磷酸氫二鈉0.2g再加蒸餾水至1000ml,配制成磷酸鹽緩沖液調(diào)整pH,如無緩沖液可用新鮮蒸餾水代替。 二、血液常規(guī)檢驗n紅細胞沉降率的測定n紅細胞壓積容量測定n紅細胞滲透脆性的測定n血液凝固時間測定n血紅蛋白(Hb)含量測定 n血細胞檢驗 n血小板計數(shù)紅細胞計數(shù)白細胞計數(shù)白細胞分類計數(shù)內(nèi)容內(nèi)容n定義:血液加入抗凝劑后，一定時間內(nèi)紅細胞向下沉降的毫米數(shù)，叫做紅細胞沉降速度，簡稱血沉（ESP）。紅細胞沉降率測定紅細胞沉降率測定血液檢驗血液檢驗魏氏法魏氏法先向先向10ml10ml刻度試管中加入刻度試管中加入3.8%3.8%枸櫞酸枸櫞酸1ml1ml，再，再自靜脈采血自靜脈采血4ml4ml，

23、顛倒混合數(shù)次，然后用魏氏，顛倒混合數(shù)次，然后用魏氏血沉管吸取抗凝劑至刻度血沉管吸取抗凝劑至刻度0 0處，擦去管外血液，處，擦去管外血液，在室溫條件下，垂直放于血沉管架上，經(jīng)在室溫條件下，垂直放于血沉管架上，經(jīng)1515、3030、4545、60min60min，分別觀察并記錄細胞沉降數(shù)，分別觀察并記錄細胞沉降數(shù)值。值。方方法法 1魏氏血沉管長魏氏血沉管長30cm30cm，內(nèi)徑，內(nèi)徑2.5mm2.5mm管上有管上有02000200的刻度，每一刻度的刻度，每一刻度的距離為的距離為1mm1mm，其溶積為，其溶積為1ml1ml。血液檢驗血液檢驗“六五六五”型血沉管法型血沉管法于血沉管中加入抗凝劑（草酸鈉

24、于血沉管中加入抗凝劑（草酸鈉0.0150.02g0.0150.02g，枸櫞酸鈉粉末枸櫞酸鈉粉末0.040.05g0.040.05g）, ,自頸靜脈直接采自頸靜脈直接采血至刻度血至刻度“0 0”處，立即充分混合，于室溫垂直處，立即充分混合，于室溫垂直立于試管架上，鏡立于試管架上，鏡1515、3030、4545、60min60min各觀察各觀察一次，并記錄紅細胞沉降的數(shù)值。一次，并記錄紅細胞沉降的數(shù)值。方方法法 2“六五六五”型血沉管法內(nèi)徑型血沉管法內(nèi)徑0.9cm0.9cm，全長全長1720cm1720cm，管上有，管上有100100個個刻度容積為刻度容積為10ml10ml。血液檢驗血液檢驗各種動

25、物的正常血沉值各種動物的正常血沉值動物種類動物種類15min15min30min30min45min45min60min60min測定方法測定方法馬馬驢驢黃牛黃牛水牛水牛奶牛奶牛山羊山羊豬豬313132329.89.80.30.33 34949757530.830.80.70.78 8535396.796.765650.750.7520205555110.7110.70.80.891.691.61.21.20.60.63030六五型法六五型法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法六五型法六五型法測定血沉?xí)r必須用新配制的抗凝血；測定血沉?xí)r必須用新配制的抗凝血；血液與抗凝劑混

26、合要充分，柱面上不血液與抗凝劑混合要充分，柱面上不應(yīng)有氣泡，它可使血沉變慢；用魏氏應(yīng)有氣泡，它可使血沉變慢；用魏氏法測定時，事先應(yīng)檢查血沉架是否好用，法測定時，事先應(yīng)檢查血沉架是否好用，以防漏液；測定時室溫以以防漏液；測定時室溫以2020左右為左右為宜，溫度過低可以減慢血沉。宜，溫度過低可以減慢血沉。血沉值沒有獨立的診斷意義。血沉值沒有獨立的診斷意義。血沉加快血沉加快，見于馬傳染性貧血、梨形蟲病、結(jié)核、鼻疽、豬，見于馬傳染性貧血、梨形蟲病、結(jié)核、鼻疽、豬瘟、化膿性炎癥、風(fēng)濕癥等。瘟、化膿性炎癥、風(fēng)濕癥等。血沉減慢血沉減慢，見于大出汗、多尿、劇烈腹瀉、馬流行性腦脊髓，見于大出汗、多尿、劇烈腹瀉、

27、馬流行性腦脊髓炎、破傷風(fēng)、牛瓣胃阻塞、腹痛癥等。炎、破傷風(fēng)、牛瓣胃阻塞、腹痛癥等。臨床臨床意義意義n定義:是指壓緊的紅細胞在全血中所占的百分率,是鑒別貧血的一項不可缺少的指標,簡稱比容。紅細胞壓積容量測定紅細胞壓積容量測定紅細胞壓積容量測定管（溫氏測定紅細胞壓積容量測定管（溫氏測定管）長約管）長約11cm,內(nèi)徑約內(nèi)徑約2.5mm，管，管壁刻有壁刻有0-10cm刻度，分度刻度刻度，分度刻度1mm。用毛細玻璃吸管或長針頭吸滿抗凝全血，將血用毛細玻璃吸管或長針頭吸滿抗凝全血，將血液自上而下擠入溫氏測定管內(nèi)，至刻度液自上而下擠入溫氏測定管內(nèi)，至刻度1010處；處；3000rpm3000rpm離心離心3

28、0-40min30-40min。讀取紅細胞柱層的刻。讀取紅細胞柱層的刻度數(shù)，即為紅細胞壓積容量數(shù)值，數(shù)值用百分度數(shù)，即為紅細胞壓積容量數(shù)值，數(shù)值用百分率表示。率表示。方法方法1、壓積升高2、壓積降低各種貧血生理性升高病理性升高各種脫水每超出高限一個小格（mm)一天的補液量毫升臨床臨床意義意義n定義:是指紅細胞在低滲氯化鈉溶液中的抵抗力，故又稱為紅細胞抵抗。紅細胞滲透脆性的測定紅細胞滲透脆性的測定取取10ml10ml刻度試管刻度試管2222支，分別標明管號，每管分別加入個濃支，分別標明管號，每管分別加入個濃度低滲氯化鈉溶液度低滲氯化鈉溶液5ml5ml，再加入，再加入10%10%紅細胞生理鹽水懸浮

29、液紅細胞生理鹽水懸浮液 2 2滴，混勻。室溫下放置滴，混勻。室溫下放置10-15min10-15min，離心，離心5min5min并觀察結(jié)果。并觀察結(jié)果?？鼓鼓? 1份，先用生理鹽水將紅細胞洗份，先用生理鹽水將紅細胞洗滌滌1 1次，然后做成次，然后做成10%10%紅細胞生理鹽水懸紅細胞生理鹽水懸浮液備用。浮液備用。配制配制1%NaCl1%NaCl溶液，以溶液，以0.02%0.02%為濃度梯度配制從為濃度梯度配制從0.76%-0.34%0.76%-0.34%共共2222份濃度的低滲溶液。分別裝入份濃度的低滲溶液。分別裝入100ml100ml細口瓶中備用，每細口瓶中備用，每6-86-8周更換

30、一次。周更換一次。溶液變?yōu)闇\桃紅色，管底有大量紅細胞沉淀，即開始溶血，溶液變?yōu)闇\桃紅色，管底有大量紅細胞沉淀，即開始溶血，此管的鹽水濃度代表紅細胞的最小抵抗；此管的鹽水濃度代表紅細胞的最小抵抗；溶液呈深紅色，管底無紅細胞沉淀，即完全溶血，此管的溶液呈深紅色，管底無紅細胞沉淀，即完全溶血，此管的鹽水濃度代表紅細胞最大抵抗。鹽水濃度代表紅細胞最大抵抗。方法方法增高降低缺鐵性貧血免疫性溶血性貧血臨床臨床意義意義n定義:是指血液自血管流出直到完全凝固所需的時間，用以測定血液的凝固能力。血液凝固時間測定血液凝固時間測定頸靜脈采血，見到出血后立即用秒表記錄時間。取血一滴，頸靜脈采血，見到出血后立即用秒表記

31、錄時間。取血一滴，滴在玻片一端，隨即玻片稍稍傾斜，滴血一端向上。此時滴在玻片一端，隨即玻片稍稍傾斜，滴血一端向上。此時未凝固血液自上而下流動，形成一條血線，放在室溫下的未凝固血液自上而下流動，形成一條血線，放在室溫下的平皿內(nèi)，防止血液中水分蒸發(fā)，靜置平皿內(nèi)，防止血液中水分蒸發(fā)，靜置2min2min，之后每隔，之后每隔30s30s用針尖跳動血線一次，待針頭挑起纖維絲時，即停止秒表，用針尖跳動血線一次，待針頭挑起纖維絲時，即停止秒表，記錄時間，即為血凝時間。記錄時間，即為血凝時間。方法方法玻片法玻片法簡單易行，但不及試管法準確簡單易行，但不及試管法準確試管法試管法采血前準備刻度小試管采血前準備刻度

32、小試管3 3支，并預(yù)先放在支，并預(yù)先放在25-3725-37恒溫水浴恒溫水浴箱內(nèi)。頸靜脈采血，剪刀出血立即開始計時。隨之將血液箱內(nèi)。頸靜脈采血，剪刀出血立即開始計時。隨之將血液分別加入分別加入3 3支試管內(nèi)，每支試管各加支試管內(nèi)，每支試管各加1ml1ml，再將試管放回水，再將試管放回水浴箱。浴箱。放置放置3min3min后，先從第一管做起，每隔后，先從第一管做起，每隔30s30s逐次傾斜試管一逐次傾斜試管一次，直到翻轉(zhuǎn)試管血液不能流出為止，并記錄時間。次，直到翻轉(zhuǎn)試管血液不能流出為止，并記錄時間。3 3支支小試管的平均時間即為血凝時間。小試管的平均時間即為血凝時間。適用于出血性疾病的研究與診斷

33、適用于出血性疾病的研究與診斷延長縮短重度貧血血斑病肝臟病炭疽病偶見于纖維素性肺炎臨床臨床意義意義血液檢驗血液檢驗紅細胞遇酸溶解，游離出血紅蛋白，紅細胞遇酸溶解，游離出血紅蛋白，并被酸化為褐色的酸性血紅素，稀釋并被酸化為褐色的酸性血紅素，稀釋后與標準色柱比色，即可求得血紅蛋后與標準色柱比色，即可求得血紅蛋白的含量。白的含量。血紅蛋白試紙測定法血紅蛋白試紙測定法 器材應(yīng)備有測定血紅蛋白試器材應(yīng)備有測定血紅蛋白試紙和紙和4g%15g%4g%15g%血紅蛋白標準比色板。測定時，取試血紅蛋白標準比色板。測定時，取試紙一條，吸附被檢血液一小滴，待血完全浸透后，紙一條，吸附被檢血液一小滴，待血完全浸透后，立

34、即置于所附標準色板的小孔下，肉眼與色板色澤立即置于所附標準色板的小孔下，肉眼與色板色澤進行比較，選擇顏色相同或近似者，即得進行比較，選擇顏色相同或近似者，即得100ml100ml血液血液所含血紅蛋白的克數(shù)。所含血紅蛋白的克數(shù)。血紅蛋白測定血紅蛋白測定沙利氏血紅蛋白測定法沙利氏血紅蛋白測定法 沙利氏血紅蛋白計由比色架、沙利氏血紅蛋白計由比色架、標準比色柱、血紅蛋白測定管及血紅蛋白吸管組成。標準比色柱、血紅蛋白測定管及血紅蛋白吸管組成。測定管有兩個刻度標志，一側(cè)的測定管有兩個刻度標志，一側(cè)的224224刻度表示刻度表示100ml100ml血液中含有的血紅蛋白克數(shù)；另一側(cè)有血液中含有的血紅蛋白克數(shù)；

35、另一側(cè)有2016020160刻度，刻度，表示表示100ml100ml血液中所含血紅蛋白的百分數(shù)。血液中所含血紅蛋白的百分數(shù)。n在血紅蛋白稀釋管內(nèi)加入0.1mol/L鹽酸溶液至刻度10%處。n用血紅蛋白吸管吸取血液至20mm3刻度處，拭凈管外附著血液，迅速將試管內(nèi)血液緩緩吹入血紅蛋白洗試管內(nèi)的鹽酸溶液中，再吸取上層鹽酸溶液反復(fù)吹洗數(shù)次，勿使產(chǎn)生氣泡。移去血紅蛋白吸管，用小玻璃棒攪拌或輕輕搖振，使血液與鹽酸溶液混合而呈褐色。n將測定管插入比色架內(nèi)，靜置10min。n慢慢分次沿測定管壁滴加蒸餾水，邊加邊混勻，邊比色，直至血紅蛋白測定管液體的顏色與標準比色柱一致為止，讀取測定管液體凹面最低處的刻度數(shù)，

36、即為100ml血液內(nèi)所含血紅蛋白的克數(shù)或百分數(shù)。方法方法血液檢驗血液檢驗動物種類動物種類血紅蛋白值（克血紅蛋白值（克/100/100毫升）毫升）馬、騾馬、騾11.011.0（9.013.09.013.0）牛牛10.010.0（9.011.09.011.0）水牛水牛8.38.3（8.09.08.09.0）羊羊9.89.8（7.811.67.811.6）豬豬10.510.5（9.512.09.512.0）雞雞12.512.5（10.014.510.014.5）血紅蛋白增高血紅蛋白增高 見于各種原因見于各種原因引起的血液濃縮，如腹瀉、嘔引起的血液濃縮，如腹瀉、嘔吐、大汗、多尿及腸梗阻等。吐、大汗、多

37、尿及腸梗阻等。血紅蛋白減少血紅蛋白減少 見于各種貧血，見于各種貧血，如馬鼻疽、牛結(jié)核、牛羊肝片如馬鼻疽、牛結(jié)核、牛羊肝片吸蟲病、仔豬蛔蟲等。吸蟲病、仔豬蛔蟲等。臨床臨床意義意義n紅細胞計數(shù)n白細胞計數(shù)n白細胞分類計數(shù)血細胞檢驗血細胞檢驗血液檢驗血液檢驗紅細胞計數(shù)是將一定量的供檢全血經(jīng)一定倍數(shù)紅細胞計數(shù)是將一定量的供檢全血經(jīng)一定倍數(shù)（200200倍）稀釋后，在血細胞計數(shù)板的計數(shù)室內(nèi)，倍）稀釋后，在血細胞計數(shù)板的計數(shù)室內(nèi)，數(shù)一定體積的紅細胞數(shù)，然后再推算出數(shù)一定體積的紅細胞數(shù)，然后再推算出1mm1mm3 3血液血液內(nèi)的紅細胞數(shù)。內(nèi)的紅細胞數(shù)。紅細胞計數(shù)紅細胞計數(shù)（red blood cell co

38、unt，RBC） 臨床上最常用的是改良紐巴（Neubauer）氏計數(shù)板，它是由一塊特制的玻璃板構(gòu)成，玻璃板中間有橫溝將其分為三個狹窄的平臺，兩邊的平臺較中間的平臺高0.1mm。中央平臺又有一縱溝相隔，其上各刻有一個計數(shù)室。每個計數(shù)室劃分為9個大方格，每一大方格面積為1.0mm2，深度為0.1mm；四角每一大方格劃分為16個中方格，為計數(shù)白細胞用。中央一大方格用雙線劃分為25個中方格，每個中方格又劃分為16個小方格，共計400個小方格，此為紅細胞計數(shù)之用。血細胞計數(shù)板血細胞計數(shù)板 用5ml吸管吸取紅細胞稀釋液3.98ml（或4ml亦可）置于試管中。用沙利氏吸血管吸取全血樣品至20 20mm3刻度

39、處（或吸血至刻度10處，紅細胞稀釋液用2ml）。擦去吸管外壁多余的血液，將此血液吹入試管底部，再吸、吹數(shù)次，以洗出沙利氏管內(nèi)粘附的血細胞，然后試管口加塞，顛倒混合數(shù)次，再用毛細吸管（或玻棒）吸取已稀釋好的血液，放于計數(shù)室與蓋玻片接觸處，即可自然流入計數(shù)室中。注意充液不可過多或過少，過多則溢出而流入兩側(cè)槽內(nèi)，過少則計數(shù)池中形成氣泡，致使無法計數(shù)。 計數(shù)時，先用低倍鏡，光線要稍暗些，找到計數(shù)室的格后，把中央的大方格置于視野之中，然后轉(zhuǎn)用高倍鏡。在此中央大方格內(nèi)選擇四角與最中的五個中方格（或用對角線的方法數(shù)五個中方格），每個中方格有16個小方格，所以共計數(shù)80個小方格。計數(shù)時注意壓在左邊雙線上的紅細

40、胞計在內(nèi)，壓在右邊雙線上的紅細胞則不計數(shù)在內(nèi)；同樣，壓在上線的計入，壓在下線的不計入，此所謂“數(shù)左不數(shù)右，數(shù)上不數(shù)下”的計數(shù)法則。計算計算 1mm3血液中紅細胞個數(shù)= X/8040020010。nX:5個中方格(即80個小方格)內(nèi)的紅細胞總數(shù)。 n400:一個大方格，即1mm2面積內(nèi)共有400個小方格。n200:稀釋倍數(shù)。n10:血蓋片與計數(shù)板的實際高度是1/10mm，乘10后則為1.0mm。n上式簡化后為:1mm3紅細胞數(shù) = X10，000n充液量不可過多或過少，過多可使血蓋片浮起，過少則計數(shù)室中形成小的空氣泡，使計數(shù)結(jié)果偏低甚至無法計數(shù)。 n顯微鏡臺應(yīng)保持水平，否則計數(shù)室內(nèi)的液體流向一側(cè)

41、而計數(shù)不準。n沙利氏吸血管或試管，每次用完后，先用清水吸吹數(shù)次，然后用蒸餾水、酒精、乙醚，按次序分別吸吹數(shù)次，干后備下次使用。n血細胞計數(shù)板用蒸餾水沖洗后，用絨布輕輕擦干即可，切不可用粗布擦試，也不可用酒精、乙醚等溶液沖洗。注意事項注意事項血液檢驗血液檢驗健康動物紅細胞數(shù)（萬健康動物紅細胞數(shù)（萬/ /立方毫米）立方毫米）動物種類動物種類平均數(shù)值平均數(shù)值變動范圍變動范圍馬馬650650600700600700牛（包括水牛）牛（包括水牛）600600550700550700綿羊綿羊90090080011008001100山羊山羊130013001000160010001600豬豬600600500

42、700500700雞雞350350250500250500紅細胞增多紅細胞增多 可見于因各種原因引起的脫水，進而使血液濃縮，表現(xiàn)為可見于因各種原因引起的脫水，進而使血液濃縮，表現(xiàn)為紅細胞相對增多，如大出汗、胸膜炎和腹膜炎的滲出期等。紅細胞相對增多，如大出汗、胸膜炎和腹膜炎的滲出期等。紅細胞減少紅細胞減少 多見于各種類型貧血，如馬傳染性貧血、牛梨形蟲病、仔多見于各種類型貧血，如馬傳染性貧血、牛梨形蟲病、仔豬營養(yǎng)性貧血、新生幼畜溶血病、牛血紅蛋白尿病等。此外好，紅細胞豬營養(yǎng)性貧血、新生幼畜溶血病、牛血紅蛋白尿病等。此外好，紅細胞生成不足或破壞增多，亦可導(dǎo)致紅細胞數(shù)減少。生成不足或破壞增多，亦可導(dǎo)致

43、紅細胞數(shù)減少。臨床臨床意義意義白細胞計數(shù)white blood cell count，WBC 一定量的血液用冰醋酸溶液稀釋后，可將一定量的血液用冰醋酸溶液稀釋后，可將紅細胞破壞，然后再細胞計數(shù)板的技術(shù)室紅細胞破壞，然后再細胞計數(shù)板的技術(shù)室內(nèi)計數(shù)一定容積的白細胞數(shù)，一次推算出內(nèi)計數(shù)一定容積的白細胞數(shù)，一次推算出每立方毫米內(nèi)白細胞總數(shù)。每立方毫米內(nèi)白細胞總數(shù)。n用1ml吸管吸取白細胞稀釋液0.38ml（也可吸0.4ml）置一小試管中。用沙利氏管吸取被檢血至20mm3處，擦去管外粘附的血液，吹入小試管中，反復(fù)吸吹數(shù)次，以洗凈管內(nèi)所粘附的白細胞，充分振蕩混合。n再用毛細吸管或沙利氏吸血管吸取被稀釋的血

44、液，充入已蓋好蓋玻片的計數(shù)室內(nèi)，靜置12min，低倍鏡檢查。n將計數(shù)室四角四個大方格內(nèi)的全部白細胞依次數(shù)完，注意壓在左線和上線的計入，壓在右線和下線的不計入。 1mm3血液中白細胞數(shù)= x/42010nX：四角四個大方格內(nèi)的白細胞總數(shù)。nx/4：一個大方格（面積為1mm2）內(nèi)的白細胞數(shù)。n20：稀釋倍數(shù)n10：血蓋片與計數(shù)板的實際高度是0.1mm，乘10后則為1mm。n上式簡化后為1mm3血液中白細胞數(shù)= x50計算計算血液檢驗血液檢驗健康動物白細胞數(shù)（個健康動物白細胞數(shù)（個/立方毫米）立方毫米）動物種類動物種類平均數(shù)值平均數(shù)值變動范圍變動范圍馬馬800070009000黃牛、奶牛黃牛、奶牛7

45、50070008000水牛水牛880080009000綿羊綿羊850080009500山羊山羊10000700013000豬豬130001100016000雞雞200001800030000白細胞增多白細胞增多 可見于多數(shù)細菌性感染和炎癥，如豬丹毒、豬肺疫、結(jié)核、可見于多數(shù)細菌性感染和炎癥，如豬丹毒、豬肺疫、結(jié)核、馬鼻疽、馬腺疫、肺炎、胸膜炎、腹膜炎等。白血病時以白細胞的顯著馬鼻疽、馬腺疫、肺炎、胸膜炎、腹膜炎等。白血病時以白細胞的顯著增多為特征。增多為特征。白細胞減少白細胞減少 主要見于某些病毒性傳染病，如豬瘟、流感等；某些重度主要見于某些病毒性傳染病，如豬瘟、流感等；某些重度疾病的后期；長

46、期應(yīng)用某些藥物（如氯霉素等）；梨形蟲病等。疾病的后期；長期應(yīng)用某些藥物（如氯霉素等）；梨形蟲病等。臨床臨床意義意義白細胞分類計數(shù)differential count of white blood cell ，DC 外周血液中的白細胞主要有5中，即嗜中性白細胞、嗜酸性白細胞、嗜堿性白細胞、淋巴細胞、單核細胞，它們各有其特定的生理機能，在正常時這5種白細胞之間有一定的比例。但在病理情況下，白細胞總數(shù)的變化反映機體防御機能的一般狀態(tài)，各種白細胞之間百分比的變化，則反映機體防御機能的特殊狀態(tài)。由于白細胞總數(shù)的增減并不一定表示各類白細胞平均增多或減少，常常僅限于某一種或兩種白細胞數(shù)的變化，從而引起白細胞

47、之間百分比的相對改變。因此，白細胞計數(shù)對疾病的診斷具有一般意義，而白細胞分類計數(shù)則具有具體意義，在分析臨床意義時，必須把二者結(jié)合起來。 鏡檢技術(shù)n將被檢血液涂片，經(jīng)瑞氏染色或姬姆薩染色，水洗，干燥后鏡檢。n先用低倍鏡全面觀察血片上細胞分布情況及染色質(zhì)量，然后選擇染色良好，細胞分布均勻的部分，用油鏡進行分類。n由于比重大的細胞(粒細胞，單核細胞等)多分布在血片的邊緣和尾部，比重小的細胞(如小淋巴細胞等)則多分布在血片的頭部和中間。為減少這種細胞分布的固有誤差并避免重復(fù)計數(shù)，血片必須按一定方向曲折移動而分類計數(shù)。n計數(shù)時，為避免重復(fù)和遺漏，可用四區(qū)、三區(qū)或中央曲折計數(shù)法推移血片，記錄每一區(qū)的各種白

48、細胞數(shù)。每張血片最少計數(shù)100個細胞(如果計數(shù)200-300個白細胞，當然其百分率更為準確) ，連續(xù)觀察23張血片，求出各種白細胞的百分比。n記錄時，可用白細胞分類計數(shù)器，也可事先設(shè)計一表格，用畫“正”字的方法記錄，以便于統(tǒng)計百分數(shù)。 各類白細胞的形態(tài)特征 在鏡下辨認各種白細胞時，必須掌握其主要特征，如細胞大小，核的形狀結(jié)構(gòu)及染色性，胞漿顏色、有無顆粒及顆粒特點等。在同一張血片上對照比較，互相鑒別。1嗜中性白細胞。圓形，直徑約1015m。胞漿淡紅色，胞漿內(nèi)有多量紫紅色細小顆粒(染色不佳時則看不清楚)。核染成深紫色，其形狀多樣，核微呈腎形，染色稍淡的稱幼年核，呈帶形或S形，兩邊平行的稱桿狀核，分

49、成23葉，在葉之間有細絲相連的 稱分葉核。有時因核葉重疊看不到細絲，但核量較多，染色質(zhì)致密，也可認為是分葉核。2嗜酸性白細胞。大小，形態(tài)與嗜中性白細胞大體相似，唯胞漿內(nèi)含有粗大的鮮紅色顆粒(馬的這種嗜酸性顆粒明顯大于其它家畜)。核多數(shù)為兩葉。3嗜堿性白細胞。大小、形態(tài)與嗜中性白細胞相似，但胞漿內(nèi)含有粗大的深藍色顆粒，常遮蓋在核上。核分葉不明顯。4淋巴細胞。分大小兩種，小淋巴細胞圓形，直徑約710m，核染成深紫色，圓形或腎形。胞漿很少，常僅呈一小片月牙狀，染成藍色。大淋巴細胞直徑約1019m，核圓形或腎形。胞漿相對較多，染成天藍色，在胞漿與核之間有淡染帶。有時內(nèi)含少數(shù)紫紅色大顆粒。5單核細胞。是

50、外周血液中最大的細胞，直徑約為1224m。核染成紫色，其染色質(zhì)疏松，核形不規(guī)則，呈腎形，多角形，折疊狀等。胞漿較多，染成淺灰藍色，有時內(nèi)含少量灰塵樣淡紅色小顆粒。馬牛羊駱駝雞豬血液檢驗血液檢驗臨床臨床意義意義健康動物各類白細胞分類數(shù)值（健康動物各類白細胞分類數(shù)值（% %）動物動物種類種類嗜堿性細嗜堿性細胞胞嗜酸性嗜酸性細胞細胞嗜中性細胞嗜中性細胞淋巴淋巴細胞細胞大單核大單核細胞細胞幼稚型幼稚型桿狀核桿狀核分葉核分葉核馬馬牛牛水牛水牛豬豬羊羊0.50.50.50.50.50.50.50.50.50.54.54.54.04.010.010.02.52.55.55.50.50.51.01.04.04

51、.04.04.04.54.55.05.01.01.053.053.033.033.035.035.035.035.033.033.035.035.056.056.047.047.053.053.057.057.03.03.02.02.03.03.03.03.03.03.0白細胞增多白細胞增多嗜中性白細胞增多嗜中性白細胞增多：見于豬、牛巴氏桿菌病、馬腺：見于豬、牛巴氏桿菌病、馬腺疫、肺炎及化膿性感染等。疫、肺炎及化膿性感染等。嗜酸性白細胞增多嗜酸性白細胞增多：見于某些蠕蟲病、過敏性疾?。阂娪谀承┤湎x病、過敏性疾病及濕疹等。及濕疹等。淋巴細胞增多淋巴細胞增多：見于結(jié)核、鼻疽、布氏桿菌病、豬：見于結(jié)

52、核、鼻疽、布氏桿菌病、豬瘟及牛梨形蟲病。瘟及牛梨形蟲病。單核細胞增多單核細胞增多：見于敗血性疾病，某些梨形蟲病及：見于敗血性疾病，某些梨形蟲病及李氏桿菌等。李氏桿菌等。白細胞減少白細胞減少嗜中性白細胞減少嗜中性白細胞減少：見于病毒性傳染病、藥物中毒：見于病毒性傳染病、藥物中毒（如長期服用抗生素）、各種疾病的垂危期。（如長期服用抗生素）、各種疾病的垂危期。嗜酸性白細胞減少嗜酸性白細胞減少：見于敗血癥、某些病毒病及牛梨：見于敗血癥、某些病毒病及牛梨形蟲病等。形蟲病等。淋巴細胞減少淋巴細胞減少：多為嗜中性白細胞增多而造成的相對：多為嗜中性白細胞增多而造成的相對性變化。性變化。血液檢驗血液檢驗在分析嗜

53、中性白細胞增、減變化時，還應(yīng)注意嗜中性白在分析嗜中性白細胞增、減變化時，還應(yīng)注意嗜中性白細胞的成熟情況。若未成熟的嗜中性白細胞增多，即出細胞的成熟情況。若未成熟的嗜中性白細胞增多，即出現(xiàn)嗜中性髓樣細胞、幼稚型和桿狀核嗜中性白細胞的比現(xiàn)嗜中性髓樣細胞、幼稚型和桿狀核嗜中性白細胞的比例增多，則稱為核左移。若血液內(nèi)分葉核嗜中性白細胞例增多，則稱為核左移。若血液內(nèi)分葉核嗜中性白細胞大量增多，而且核的分葉數(shù)目也增多，則稱為核右移。大量增多，而且核的分葉數(shù)目也增多，則稱為核右移。 白細胞總數(shù)增多的同時，出現(xiàn)核左移，表示骨髓造血白細胞總數(shù)增多的同時，出現(xiàn)核左移，表示骨髓造血機能加強，機體處于積極防御階段；而

54、白細胞總數(shù)減機能加強，機體處于積極防御階段；而白細胞總數(shù)減少時見有核左移，則表示骨髓造血機能減退，機體的少時見有核左移，則表示骨髓造血機能減退，機體的抗病力降低。至于核右移，乃骨髓造血功能衰退的標抗病力降低。至于核右移，乃骨髓造血功能衰退的標志，多因機體高度衰竭而引起，常提示預(yù)后慎重。志，多因機體高度衰竭而引起，常提示預(yù)后慎重。臨床臨床意義意義n尿素能溶解紅細胞及白細胞而保存完整形態(tài)的血小板，經(jīng)稀釋后再細胞計數(shù)室內(nèi)直接計數(shù)，以求得1mm3血液內(nèi)的血小板數(shù)。稀釋液中的枸櫞酸鈉有抗凝作用，甲醛可以固定血小板的形態(tài)。血小板計數(shù)血小板計數(shù)(platelet count)n用1ml吸管吸取稀釋液0.38

55、ml置一小試管中。用沙利氏管吸取被檢血至20mm3處，擦去管外粘附的血液，吹入小試管中，吸吹數(shù)次，充分混允。靜置20min以上，使紅細胞溶解。n充分混勻后再用毛細吸管或沙利氏吸血管吸取被稀釋的血液，充入已蓋好蓋玻片的計數(shù)室內(nèi)，靜置10min，高倍鏡觀察。n任選計數(shù)室內(nèi)一個大方格，按計數(shù)法計數(shù)。n血小板在高倍鏡下，呈橢圓形、原形或不規(guī)則折光小體，注意切勿誤將塵埃等異物計入。 1mm3血液中血小板數(shù)= x2010nX：一個大方格內(nèi)的白細胞總數(shù)。n20：稀釋倍數(shù)n10：血蓋片與計數(shù)板的實際高度是0.1mm，乘10后則為1mm。n上式簡化后為1mm3血液中血小板數(shù)= x200計算計算臨床臨床意義意義血

56、小板減少：血小板增多：生成減少破壞增多消耗過多原發(fā)性增多繼發(fā)性增多急性感染、急性出血急性溶血再生障礙性貧血、急性白血病放化療等原發(fā)性血小板減少性紫癜/脾功能亢進血管內(nèi)凝血、血栓性血小板減少性紫癜/光學(xué)顯微鏡的使用1.物鏡轉(zhuǎn)換器 2.接物鏡 3.游標卡尺 4.載物臺 5.聚光器 6.彩虹光闌 7.光源 8.鏡座 9.電源開關(guān) 10.光源滑動變阻器 11.粗調(diào)螺旋 12.微調(diào)螺旋 13.鏡臂 14.鏡筒 15.目鏡 16.標本移動螺旋操作步驟操作步驟 -1.1.觀察前準備觀察前準備n顯微鏡從顯微鏡柜或鏡箱內(nèi)拿出時，要用右手緊握鏡臂，左手托住鏡座，平穩(wěn)地將顯微鏡搬運到實驗桌上。n將顯微鏡放在自己身體

57、的左前方，離桌子邊緣約10cm左右，右側(cè)可放記錄本或繪圖紙。n調(diào)節(jié)光照:不帶光源的顯微鏡，可利用燈光或自然光通過反光鏡來調(diào)節(jié)光照，光線較強的天然光源宜用平面鏡；光線較弱的天然光源或人工光源宜用凹面鏡，但不能用直射陽光，直射陽光會影響物像的清晰并刺激眼睛。將10物鏡轉(zhuǎn)入光孔，將聚光器上的虹彩光圈打開到最大位置，用左眼觀察目鏡中視野的亮度，轉(zhuǎn)動反光鏡，使視野的光照達到最明亮最均勻為止。自帶光源的顯微鏡，可通過調(diào)節(jié)電流旋鈕來調(diào)節(jié)光照強弱。凡檢查染色標本時，光線應(yīng)強；檢查未染色標本時，光線不宜太強。可通過擴大或縮小光圈、升降聚光器、旋轉(zhuǎn)反光鏡調(diào)節(jié)光線。2.低倍鏡觀察n鏡檢任何標本都要養(yǎng)成必須先用低倍鏡

58、觀察的習(xí)慣。因為低倍鏡視野較大，易于發(fā)現(xiàn)目標和確定檢查的位置。n將標本片放置在載物臺上，用標本夾夾住，移動推動器，使被觀察的標本處在物鏡正下方，轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)旋鈕，使物鏡調(diào)至接近標本處，用目鏡觀察并同時用粗調(diào)節(jié)旋鈕慢慢下降載物臺，直至物像出現(xiàn)，再用細調(diào)節(jié)旋鈕使物像清晰為止。用推動器移動標本片，找到合適的目的像并將它移到視野中央進行觀察。3.高倍鏡觀察n在低倍物鏡觀察的基礎(chǔ)上轉(zhuǎn)換高倍物鏡。較好的顯微鏡，低倍、高倍鏡頭是同焦的，在轉(zhuǎn)換物鏡時要從側(cè)面觀察，避免鏡頭與玻片相撞。然后從目鏡觀察，調(diào)節(jié)光照，使亮度適中，緩慢調(diào)節(jié)粗調(diào)節(jié)旋鈕，慢慢下降載物臺直至物像出現(xiàn)，再用細調(diào)節(jié)旋鈕調(diào)至物像清晰為止，找到需觀察的

59、部位，并移至視野中央進行觀察,并準備用油鏡觀察。4油鏡觀察n用粗調(diào)節(jié)器將鏡筒提起約2cm，將油鏡轉(zhuǎn)至正下方。n在玻片標本的鏡檢部位滴上一滴香柏油。n從側(cè)面注視，用粗調(diào)節(jié)器將鏡筒小心地降下，使油鏡浸在香柏油中，其鏡頭幾乎與標本相接，應(yīng)特別注意不能壓在標本上，更不可用力過猛，否則不僅壓碎玻片，也會損壞鏡頭。n從目鏡內(nèi)觀察，進一步調(diào)節(jié)光線，使光線明亮，再用粗調(diào)節(jié)器將鏡筒徐徐上升，直至視野出現(xiàn)物像為止，然后用細調(diào)節(jié)器校正焦距。如油鏡已離開油面而仍未見物像，必須再從側(cè)面觀察，將油鏡降下，重復(fù)操作至物像看清為止。5. 觀察完后復(fù)原n下降載物臺，將油鏡頭轉(zhuǎn)出，先用擦鏡紙擦去鏡頭上的油，再用擦鏡紙蘸少許乙醚乙

60、醇混合液擦去鏡頭上殘留油跡，最后再用擦鏡紙擦拭23下即可，（注意向一個方向擦拭）。n將各部分還原，轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器，使物鏡頭不與載物臺通光孔相對，而是成八字形位置，再將載物臺下降至最低，降下聚光器，反光鏡與聚光器垂直，最后用柔軟紗布清潔載物臺等機械部分，然后將顯微鏡放回柜內(nèi)或鏡箱中。三、血液分析儀及其在獸醫(yī)臨床上的應(yīng)用三、血液分析儀及其在獸醫(yī)臨床上的應(yīng)用 血液分析儀是目前臨床血液檢驗常用檢測儀器。 20世紀40年代后期，美國人庫爾特（W.H.Coulter）發(fā)明電子血細胞計數(shù)儀并申請專利。 其特點是檢測速度快、精確度高、操作簡便。目前，各類血液分析儀主要能完成兩大功能：細胞計數(shù)功能。細胞分類功能